DAS-ELISA和PAS-ELISA检测GFLV的技术研究

以中国农科院郑州果树研究所国家葡萄资源圃的葡萄品种为试材 ,对葡萄扇叶病毒(GFLV)进行了酶联免疫吸附测定 (ELISA)的检测技术研究。从操作步骤、灵敏度、检测时期以及检测部位等对双抗体夹心酶联免疫吸附测定法 (DAS -ELISA)和A蛋白夹心酶联免疫吸附测定法 (PAS -ELISA) 2种不同的检测方法进行了比较试验。发现 ,虽然DAS -ELISA在操作上较PAS -ELISA更为简便 ,但就结果而言 ,PAS -ELISA比DAS -ELISA的OD值高 ,更易进行结果的判断 ;且在病毒含量相对较低的情况下 ,PAS -ELISA显示出了较高的灵敏度。

PAS-ELISA检测GFLV和GLRaV-3技术的研究

以中国农业科学院郑州果树研究所国家葡萄资源圃的葡萄品种为试材,对葡萄扇叶病毒(GFLV)和葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了A蛋白酶联免疫吸附测定(PAS-ELISA)的检测技术的研究。从阴、阳性对照及抗血清或抗体浓度的选择,到不同时期、检测部位对结果的影响,建立了一套完整的ELISA检测GFLV和GLRaV-3程序;通过试验分析,该方法快速,简便,经济且灵敏度高,不失为葡萄病毒检测的一种新方法。通过检测,还了解到GFLV的发病高峰在春季,主要发病部位在上部叶片,而GLRaV-3的发病高峰在秋季,重要发病部位在下部叶片。

检测香蕉花叶心腐病病原CMV的PAS-ELISA方法的改进

作为一种快速、敏感的免疫学方法,ELISA已被广泛地用于植物病毒的研究与应用性检测方面。在实验室中用PAS-ELISA检测香蕉花叶心腐病病原CMV已被证明是一种获得无CMV组培苗的有效手段。在香蕉无病毒组培苗工厂化大批量生产中,我们应用此法作为质量控制的手段之一,剔除病苗,保证产品不带CMV,获得一定成效。但同时我们也发现。

A蛋白酶联免疫吸附法检测葡萄卷叶病毒的研究用离体微嫁接法快速检测苹果潜隐病毒

研究了用A蛋白酶联免疫吸附检测法 (PAS -ELISA)检测葡萄卷叶病毒的程序 ,提出了A蛋白、酶标A蛋白、抗体的适宜工作浓度及样品粗提液稀释倍数。通过对感病植株的幼叶、幼茎、老叶、老茎的检测研究 ,规范了PAS -ELISA检测技术。应用该技术 ,对国家果树种质资源圃郑州葡萄圃的 39份种质及郑州地区栽培的品种进行了检测 ,保存品种的带毒率 76 .9% ,抗逆性较强的东亚种群带毒率 55.6 % ,郑州地区栽培品种葡萄带毒率为 4 5.0 %。

葡萄斑点病毒检测技术研究

分别采用PAS -ELISA和免疫组织印迹法对湖北省农业科学院果茶研究所葡萄园内 5个主栽品种的葡萄斑点病毒 (GFkV)的带毒情况进行检测 ,结果表明 ,在检测的 5个品种中 ,仅胜宝遭受GFkV侵染 ,而且两种方法检测的结果高度一致。当选用枝条作为PAS -ELISA检测材料时 ,在GFkV抗体的最适工作浓度 ( 1∶10 0 0 )下 ,其病毒粗提物稀释 10 0 0倍后 ,仍能得到准确可靠的阳性结果 ,其灵敏度较高 ;当分别选取经PAS -ELISA检测呈阳性结果的叶柄和叶片作为免疫组织印迹检测的材料时 ,并采用两种工作浓度 ( 1∶70 0 0和 1∶14 0 0 0 )的碱性磷酸酯酶标记的羊抗免IgG进行检测 ,均得到准确、可靠、灵敏。

转非病原病毒基因烟草对同源病毒的抗性研究

采用 PAS- EL ISA法就转非病原病毒 (樱桃卷叶病毒 )基因烟草对同源病毒的抗性进行了研究。试验结果表明 ,染病烟叶冰冻后对 PAS- EL ISA检测结果无影响。人工接种试验结果显示 ,转基因烟草发病率较未转基因烟草低。 PAS- EL