PAT家族蛋白与肿瘤关系的研究进展

PAT家族蛋白是介导脂质代谢的一类小分子蛋白,包括PLIN1、ADRP、TIP47、S3-12和PLIN5。PAT家族蛋白位于细胞质脂滴表面,通过与其他分子相互作用调控脂质代谢,参与肿瘤的发生发展。本文将对PAT家族蛋白成员与肿瘤关系的研究进展进行综述。

bar基因、PAT蛋白和草丁膦的特性与安全性

在转基因技术得到认同并且给全球带来了巨大的经济和社会价值的同时,也引起了人们对其安全性的关注。目前在转基因作物中抗除草剂作物种植面积最大。本文对除草剂草丁膦及其抗性基因之一——bar基因及其产物PAT蛋白的一些特性和安全性作了阐述。bar基因及筛选剂草丁膦在植物基因工程中发挥着重要作用。bar基因无多效性,与食物中的DNA一样安全。PAT蛋白对小鼠无直接毒性,与已知毒素和过敏原无同源性、无糖基化位点,其热稳定性和消化稳定性无食物过敏原和毒素的特性,对人体和动物安全无毒性。草丁膦是一种生物除草剂,在土壤中易被快速分解,作物收获时未检出残留,对哺乳动物无毒性作用。

PAT家族蛋白在细胞内脂滴代谢过程中的作用

哺乳动物细胞内的甘油三酯是以脂滴的形式贮存的,现在有很多证据表明,脂滴参与多种代谢过程,因而被看作胞内有功能的细胞器。脂滴含有甘油三酯构成的脂质核心,脂核表面覆盖有单层磷脂,在单层磷脂内镶嵌着在结构上具有相关性的PAT家族蛋白,包括perilipin、ADRP、TIP47和S3-12。本文就这些蛋白在甘油三酯水解和脂滴合成中的调节作用加以综述。

RNA干扰技术在PAT家族蛋白研究中的应用

PAT家族蛋白包括perilipin、adipophilin、TIP47、S3-12和OXPAT 5种蛋白。研究发现这些蛋白定位于脂滴表面,介导脂质代谢,并与肥胖症、糖尿病等脂代谢疾病相关。RNA干扰是一种基因沉默技术,现已广泛应用到生物医药领域,若能通过此技术制备相关生物制剂调节脂质代谢,将为缓解甚至治疗脂代谢疾病提供新思路。本文旨在对RNA干扰技术在PAT家族蛋白研究中的应用作一综述。

热处理对转基因秸秆中重组蛋白和重组DNA的降解作用

随着转基因作物种植面积的不断扩大,如何高效处理转基因秸秆成为了一个重要的科学问题。未经处理的转基因秸秆中的重组蛋白和重组DNA可以在土壤中存在很长时间,并对土壤生物多样性产生潜在负面影响。因此寻找一个既节约成本又对环境无害的秸秆处理方法非常重要。高温处理是降解转基因秸秆重组蛋白和重组DNA的有效手段,但目前对处理温度和处理时间的选择还缺乏系统的研究。本研究通过试纸条、聚合酶链反应(PCR)等方法检测不同温度和时间处理的转基因作物秸秆中重组蛋白和重组DNA的水平。结果表明,转基因大豆、棉花、玉米、水稻的秸秆在50℃处理3 h后,其体内的抗除草剂蛋白草胺膦乙酰转移酶(phosphinothricin acetyltransferase, PAT)等重组蛋白基本降解;但相同温度下,重组DNA的降解则需要4 d时间;提高处理温度可以在一定程度上缩短重组蛋白和重组DNA降解所需的时间。50℃处理4 d的条件在实际生产中通过堆肥就能实现。本研究从分子生物学的角度为转基因秸秆处理提供了依据。

长白山野生平盖灵芝蛋白质营养价值分析

本研究旨在分析长白山野生平盖灵芝蛋白质营养价值。以长白山野生平盖灵芝为原料,测定其蛋白质以及氨基酸含量。采用蛋白质氨基酸评分(amino acid score,AAS)、化学评分(chemical score,CS)、氨基酸比值系数(ratio coefficient of amino acid,RC)、比值系数分(score of RC,SRC)、必需氨基酸指数(essential amino acid index,EAAI)、营养指数(nutritional indexes,NI)以及生物价(biological value,BV)对其蛋白质营养价值进行综合评价。结果表明:长白山野生平盖灵芝子实体中蛋白质、总氨基酸(total amino acids,TAA)、支链氨基酸(branched chain amino acids,BCAA)、风味氨基酸、必需氨基酸(essential amino acids,EAA)和非必需氨基酸(non-essential amino acids,NEAA)含量分别为12.14%、10.43%、2.16%、5.66%、4.01%和6.43%;EAA/NEAA和EAA/TAA分别为62.33%和38.39%;依据AAS和CS,第一、二限制性氨基酸(limiting amino acid,LAA)分别是甲硫氨酸+胱氨酸、赖氨酸。综上,长白山野生平盖灵重金属含量达到国家标准,蛋白质中氨基酸相对平衡,但在实际生产中应注意添加甲硫氨酸+胱氨酸和赖氨酸。

基于p38MAPK信号通路探讨八月札提取物对肝郁脾虚证大鼠结肠免疫功能的影响

目的探讨八月札提取物对肝郁脾虚证大鼠结肠组织免疫功能及对p38MAPK信号通路的影响,阐明民族药八月札改善肝郁脾虚证候的药理作用机制。方法将60只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、肝郁脾虚证模型组(以下简称模型组)、八月札高、中、低剂量组、盐酸舍曲林组,每组10只。除正常组外的五组均以慢性束缚、过度疲劳、苦寒破气加饥饱失常法复制肝郁脾虚模型,造模时间为21 d。造模完成后,各治疗组每天按相应剂量药物灌胃治疗,共计14 d。治疗期满后观察比较各组大鼠脾及胸腺指数,检测结肠组织IL-6、INF-γ、IL-2、IL-13含量,结肠组织细胞中P38蛋白激酶(p38MAPK),有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1(MSK1)蛋白和基因表达。结果模型大鼠造模结束时,与模型组比较,八月札高、中、低剂量组及盐酸舍曲林组胸腺指数升高,脾指数明显下降,结肠组织IL-6、INF-γ含量降低,IL-2、IL-13含量明显升高;结肠细胞中p38MAPK,MSK1蛋白及基因表达水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论八月札提取物可通过调节结肠组织细胞免疫相关因子的表达及对p38MAPK相关信号通路进行干预,修复肝郁脾虚证大鼠受损的结肠组织结构。

激光诱变选育的菜用大青豆的选育报告

ＡＧ０菜用大青豆（简称ＡＧ０）采用有性杂交和激光红宝石辐照交替进行，选育出的蛋白质、脂肪含量高的菜用大青豆新品种。具早熟、适应性广、抗逆性强、耐迟播、产量高和效益好等特性。全生育期１１０ｄ，８０～８５ｄ采摘青毛豆荚，单产鲜毛豆荚１．０５万ｋｇ／ｈｍ２以上，老豆单产２３１７ｋｇ／ｈｍ２左右。经测试蛋白质含量４８．３２％、脂肪含量２１．３６％。

法国海岸松树皮提取物碧萝芷对长链游离脂肪酸诱导的巨噬细胞perilipin2基因表达的影响

目的研究碧萝芷(PYC)对油酸诱导的巨噬细胞perilipin2表达的影响及其相关分子机制。方法应用Real-time PCR和Western blot测定油酸及PYC对perilipin2mRNA和蛋白水平表达影响。应用荧光素酶活性分析方法检测油酸及PYC对perilipin2启动子活性的影响。结果油酸以剂量和浓度依赖方式上调perilipin2mRNA和蛋白水平表达,并促进perilipin2启动子活性。PYC以剂量依赖方式抑制了油酸诱导的perilipin2表达及启动子活性。结论 PYC抑制了巨噬细胞中油酸诱导的perilipin2的表达。PYC通过抑制perilipin2启动子活性,从而直接抑制perilipin2的表达。

Perilipin对脂肪细胞内三酰甘油的代谢调控作用

三酰甘油贮存在哺乳动物细胞内脂滴中,脂滴表面镶嵌着多种蛋白,对脂滴功能具有重要调节作用,因此脂滴也越来越多地被认为是一种代谢活跃的细胞器。新近的研究表明脂滴表面PAT家族蛋白perilipin对脂肪细胞内三酰甘油的代谢起全局性调控作用,本文就脂肪细胞内perilipin的功能予以综述。

酶解方式对核桃蛋白肽及其抗氧化活性的影响

分别采用7种蛋白酶对核桃蛋白进行单酶水解,并与双酶复合酶解进行比较,考察不同酶解方式对酶解产物水解度、短肽得率和抗氧化活性的影响。结果表明,碱性蛋白酶单酶酶解核桃蛋白,产物的水解度和短肽得率显著高于其它单酶处理,分别达到18.94%和76.37%,对DPPH自由基清除能力的IC50值仅为3.23mg/mL,抗氧化活性显著高于其它处理;将碱性蛋白酶分别与其它蛋白酶组合酶解,核桃蛋白酶解产物的水解度和短肽得率均有所提高,其中与木瓜蛋白酶组合处理的水解度可达28.36%,短肽得率可提高至85.62%。双酶酶解产物对提高清除DPPH自由基和羟自由基的活性不显著,碱性蛋白酶分别与中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的组合可以显著提高酶解产物清除超氧阴离子自由基的活性。

脂肪分化相关蛋白的研究进展

细胞内脂滴是一种代谢活跃的细胞器,脂滴表面蛋白在脂滴的代谢调节中起到了重要作用。ADRP是一种重要的脂滴表面蛋白,在机体组织和细胞内广泛表达。脂肪肝、动脉粥样硬化、糖尿病等均伴随脂质的异常蓄积,近年来的研究表明ADRP参与这些疾病的发生发展。本文就ADRP在各组织和器官正常的生理功能以及对疾病状态的调控加以综述。

BMP-4在青春期大鼠肠管中的表达

目的观察骨形成蛋白BMP-4在青春期(sprague,dawley,SD)大鼠胚胎肠管中的定位及表达规律,探讨其在肠神经系统发育过程中的作用。方法通过免疫组化方法观察骨形成蛋白BMP-4在不同年龄青春期大鼠结肠肠管内的表达情况。结果BMP-4在胚胎肠发育早期即有表达,于出生前后达到峰值,此后略有下降,在孕16 d组、孕20 d组和出生后7 d组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05),但与出生后4个月组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BMP-4在大鼠结肠上的表达与肠神经系统发生发育的时间一致,提示可能参与了SD大鼠肠神经系统生长发育的调节。

蛋白质棕榈酰化对离子型谷氨酸受体运输的调节作用

棕榈酰化是一种可逆的翻译后修饰,其对蛋白质的定位和功能具有重要的调节意义.离子型谷氨酸受体有N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体、α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体和人海藻酸受体.近期研究发现,它们的棕榈酰化修饰对其膜表面分布和内化均具有重要的意义.其中NMDA受体在其C末端有2个不同的棕榈酰化位点.1个位于C末端近膜区(CysclusterⅠ),它的棕榈酰化可以增高酪氨酸的磷酸化水平,增加受体膜表面分布,影响神经元中NMDA受体的组构性内化;另1个位于C末端中部(CysclusterⅡ),它受到蛋白质酰基转移酶GODZ的调节,使得受体在高尔基体大量积聚,从而影响受体的膜表面分布.与NMDA受体相似,AMPA受体也存在2个棕榈酰化位点.1个位于在第2跨膜域,受蛋白质酰基转移酶GODZ的调节,能导致AMPA受体在高尔基体的积聚.另1个位点在受体C末端近膜区,它的棕榈酰化能降低AMPA受体和4.1N蛋白的相互作用,并调节受体的内化.这两种离子型谷氨酸受体在棕榈酰化机制上虽然存在差异,但均对受体的运输、膜表面分布和内化具有十分重要的作用.

蛋白质棕榈酰化修饰及其研究方法

蛋白质棕榈酰化是蛋白质翻译后脂质共价修饰的一种重要形式,对象主要是胞质蛋白质,对蛋白质功能产生多重影响。近年来由于相关新技术引入,对蛋白质棕榈酰化主要修饰酶及其对靶蛋白功能调节方面的研究已渐成为新热点。本文主要对近几年来蛋白质棕榈酰化修饰及其研究方法作了综述。

鹅掌楸DHHC型锌指蛋白家族基因的克隆及表达分析

棕榈酰化修饰是一种最普遍且唯一可逆的翻译后脂质修饰方式,赋予蛋白质多样化的生理功能。DHHC(Asp-His-His-Cys)蛋白家族是一类与棕榈酰化修饰相关的蛋白,多数DHHC蛋白家族成员具有蛋白质酰基转移酶(protein S-acyltransferase,PAT)活性。该研究以鹅掌楸叶芽为材料,采用RT-PCR和RACE技术,克隆获得了3个鹅掌楸DHHC蛋白家族基因c DNA全长,命名为Lc PAT7、Lc PAT22、Lc PAT23。序列分析结果表明:Lc PAT7、Lc PAT22、Lc PAT23基因全长分别为1 933、2 592、2 217 bp,各包含1 332、1 839、1 662 bp的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF),编码433、612、533个氨基酸,预测蛋白分子量分别为40.04、67.3、60.57 k Da,理论等电点为9.15、9.03、7.29。3个基因编码的蛋白均有4个跨膜区,并且都在跨膜域(transmembrane domain,TM)TM2和TM3之间存在一个DHHC蛋白家族典型的DHHC-CRD结构域。同源性分析表明:鹅掌楸Lc PAT7、Lc PAT22、Lc PAT23编码的氨基酸序列与其他植物中预测的PAT具有较高的相似性。利用荧光定量PCR技术检测3个基因在鹅掌楸不同组织中的表达特性,发现3个基因在不同组织中均有表达,但表达量具有明显区别。同一家族基因表达模式的变化表明其功能非冗余。该研究结果将为鹅掌楸生长发育与形态建成,以及逆境响应信号传导等相关基因的调控研究提供了参考。

人类肾脏组织特异性蛋白网络构建及分析

生命体内组织特异性基因往往在对应的组织中表现出高的共表达性,在组织特异性基因的调控中,非组织特异性的转录因子往往起很大作用,并且这些转录因子往往与特定的转录因子一起影响组织的特异性,因此研究组织特异性基因编码蛋白相互作用网络必须考虑非组织特异性蛋白的影响。本文提出了一种利用最短路径算法来计算组织特异性基因编码蛋白的关联蛋白,从而构建最大连接强度的组织特异性蛋白相互作用网络,并对其拓扑结构进行基因本体(GO)、KEGG Pathway和疾病本体(DO)的富集度分析。通过对肾脏组织中的1 486个蛋白质及其相应的4 011条蛋白质相互作用分析,发现绝大部分结构的功能与肾脏组织的功相吻合,同时也发现了几种比较有趣的表面上与肾脏组织无关的功能及疾病。

脂代谢指标、血清hs—CRP水平在2型糖尿病亚临床甲状腺功能减退患者中的表达及其意义

【目的】探讨脂代谢指标、血清超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平在2型糖尿病（T2DM）亚临床甲状腺功能减退患者中的表达及其意义。【方法】选取2015年1月至2017年5月在本院就诊的T2DM患者427例，其中亚临床甲状腺功能减退患者130例为观察组，甲状腺功能正常患者297例为对照组，比较两组患者血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、载脂蛋白A（ApoA）、载脂蛋白B（ApoB）、hs-CRP水平及血管并发症发生率。另将观察组按照不同促甲状腺激素（TSH）水平分为4．5～10.0μU/mL组（A1）、〉10.0μU/mL组（A2），比较组临床指标的差异，采用多元逐步回归分析法分析·TSH水平的影响因素，采用Pearson相关分析法分析血清TSH、hs-CRP水平与脂代谢指标的相关性。【结果】观察组患者血清TC、TG、LDL-C、ApoA、ApoB、hs-CRP水平及心血管疾病发生率均明显高于对照组，HDL-C水平明显低于对照组，其差异均有统计学意义（P〈O．05）；其中观察组中不同TSH水平组间TC、TG、LDL-C、HDL-C、ApoB、hs-CRP水平比较，差异有统计学意义（P〈0.05）。多元逐步回归分析结果显示，TC、TG、LDL-C、hs-CRP是影响T2DM患者TSH水平的独立因素；Pearson相关分析显示，TsH与Tc、TG、LDL-C、ApoB呈正相关（r=0.823、0.675、0.702、0.363，P〈0.05）；hs-CRP与TC、TG、LDL-C呈正相关（r=0.385、0.372、0.456，P〈0.05），与HDL-C呈负相关（r=0.383，P〈0．05）。【结论】T2DM患者亚临床甲状腺功能减退与血脂代谢及炎症刺激密切相关，且其会增加患者心血管疾病发生风险。

基于转录组的油茶DHHC型锌指蛋白基因家族的鉴定及分析

DHHC型锌指蛋白参与细胞内蛋白质的棕榈酰化修饰,对植物的生长发育、器官形成、生殖发育及胁迫响应等生命活动具有重要的调控作用。基于油茶叶片转录组数据,筛选出23个DHHC型锌指蛋白基因,应用生物信息学方法对其蛋白理化性质、结构域、系统进化等进行了分析。结果表明,23个DHHC型锌指蛋白的序列大小为195~725 aa,均包含一个保守的DHHC-CRD结构域,大部分DHHC型锌指蛋白具有4个跨膜区,主要定位于细胞核和细胞膜中。系统进化分析将其分为4类,与拟南芥和水稻均有不同程度的同源关系,DHHC型锌指蛋白在不同物种间具有遗传保守性。23个DHHC型锌指蛋白基因在结实量大和结实量小的单株的不同发育时期叶片中均有不同程度的表达。CoDHHC9、CoDHHC13、CoDHHC22在油茶抽梢生长期的叶片中表达上调;CoDHHC6、CoDHHC12、CoDHHC18、CoDHHC23在花芽分化时期和果实成熟时期的叶片中表达量较高,且在结实量较小而开花较多的单株中表达上调更为明显,这些基因可能参与油茶花芽分化及花朵发育过程;CoDHHC5、CoDHHC11、CoDHHC15在不同时期的叶片中表达量均较低。研究结果为进一步对油茶DHHC型锌指蛋白家族基因的克隆和功能分析提供依据,有助于进一步研究该基因家族在油茶生殖发育中的调控功能。

转基因玉米表达的Cry1Ab、PAT和EPSPS蛋白对日本通草蛉幼虫的安全风险评估

为评价我国自主研发的转基因玉米表达的Cry1Ab、PAT和EPSPS蛋白对日本通草蛉Chrysoperla nipponensis幼虫生长发育的安全风险,通过将外源蛋白混入日本通草蛉人工饲料中的方法,以加入砷酸二氢钾(KH_2AsO_4)的饲料为阳性对照,研究了日本通草蛉幼虫取食后的生长发育状况。结果表明:日本通草蛉取食含Cry1Ab和EPSPS蛋白饲料的幼虫发育历期、茧期、结茧率、羽化率及成虫体重等生物学参数与取食正常饲料处理相比均没有显著差异;而取食含PAT蛋白饲料的幼虫发育历期和结茧率分别为10.7 d和96.6%,与取食正常饲料的对照11.1 d和89.9%差异显著,即饲料中添加PAT蛋白显著提高了幼虫的存活率和发育速率;取食含KH_2AsO_4饲料的日本通草蛉幼虫不能存活到茧期,说明KH_2AsO_4具有显著的杀虫活性。ELISA检测结果表明,取食了分别添加有3种外源蛋白饲料的日本通草蛉幼虫体内可以检测到相应的Cry1Ab、EPSPS和PAT蛋白,含量分别为2 758.8~5 210.7、35 018.0~54 426.6、16.8~149.8 ng/g。表明转基因玉米所表达的Cry1Ab、EPSPS和PAT蛋白对日本通草蛉幼虫没有显著的不利影响。