PAX9基因与非综合征型多数牙先天缺失的关系及研究进展

先天性缺牙是人类牙列中最常见的发育异常,包括个别牙先天缺失,多数牙先天缺失和先天无牙症。多数牙先天缺失按照其表现型不同通常可分为综合征型和非综合征型,表现为常染色体的显性或隐性遗传、X-连锁遗传特性,有的具有家族遗传史,有的则是无家族史的散发病例。本文就近年来非综合征型牙齿发育不全研究中的热点基因PAX9的研究进展作一综述。

PAX9在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨配对盒基因9(paired box gene 9,PAX9)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者组织中的表达情况及其临床意义。方法采用RT-PCR和免疫组织化学技术(SP法)检测75例NSCLC患者肺癌组织及对应癌旁组织中PAX9的表达情况,并分析PAX9蛋白表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果 (1)与癌旁组织相比(1.03±0.32),PAX9 mRNA在NSCLC组织中表达明显上调(1.74±0.48)(P<0.0001)。(2)PAX9在NSCLC组织中表达的阳性率为62.7%(47/75),显著高于对应癌旁组织的37.3%(28/75)(P=0.002)。(3)PAX9的表达与肿瘤病理分型及临床分期显著相关(P<0.05),而与患者性别、年龄、淋巴转移及肿瘤大小无相关性(P>0.05)。(4)Kaplan-Meier生存分析显示:PAX9表达阳性患者的生存时间短于PAX9表达阴性的患者(P=0.013)。COX回归分析结果显示:PAX9的表达水平(P=0.028)及临床分期(P=0.021)为影响NSCLC患者预后的独立危险因素。结论 PAX9在NSCLC中高表达,且其表达水平与肿瘤病理分型及临床分期相关,PAX9的过高表达有可能作为评估NSCLC预后的指标。

PAX9基因大片段外显子-5与一蒙古族先天缺失牙家系患者相关性研究

目的:探讨转录调控因子成对盒基因PAX9(Paired box 9)大片段外显子-5与一蒙古族先天缺失牙家系患者发病的相关性.方法:分别使用普通PCR和降落PCR技术扩增PAX9大片段外显子-5,对比扩增结果,并将扩增得到的产物进行测序.结果:降落PCR技术能够扩增出与预期大小完全一致的目的片段,且扩增的特异性较普通PCR高.测序结果表明该外显子-5与GenBank中登录的正常人序列相同,未发现突变位点.结论:此患者先天缺失牙并非由外显子-5突变造成.降落PCR技术能有效地降低或避免非特异性扩增,快速得到目的片段.

PAX9基因在2个新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙家系中的表达

目的通过对新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙患者PAX9基因突变的检测,为维吾尔族该病发病的分子机制提供依据。方法采集2个新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙家系颊黏膜拭子,提取DNA,采用聚合酶链反应技术结合DNA双向测序技术对患者DNA进行检测。结果 PAX9基因外显子3的85、86位点检测出两个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点。结论 PAX9基因外显子3的85、86位点的改变可能与新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙的发生有关。

先天性牙发育不全WNT6基因突变的新位点

目的探讨先天性牙发育不全病例与相关基因突变可能存在的联系,为疾病的早期诊断提供参考。方法通过收集1例罕见先天性牙发育不全病例的临床和影像学资料,评估牙齿的形态、数量以及全身健康状况;采集患者静脉外周血,对与牙齿发育紧密关联的PAX9和MSX1基因双向测序;进行全外显子测序,筛查与牙发育异常相关的其他突变位点,对先证者儿子进行新发现突变位点的Sanger测序;通过模拟测算工具和体外细胞转染实验评估突变对基因表达的影响。结果患者的临床特征是先天性右下颌单侧第一磨牙缺失,第二磨牙为单根,且伴有右下第二前磨牙多生。在PAX9和MSX1基因测序中发现,PAX9基因中c.717C>C/T为同义突变,MSX1基因中c.119C>G为错义突变,Polyphen预测为“良性”。全外显子测序发现WNT6基因的1个全新突变位点,内含子3中的c.637-7 C>A突变,经MAXENT预测,可能影响mRNA的剪切,且先证者及其儿子均携带该突变;细胞转染实验发现,该突变对WNT6基因的mRNA剪切没有影响。结论单核苷酸多态性之间的相互作用可能与先天性牙发育异常相关。

单纯性多数牙缺失家系的临床检查及基因突变分析

目的:探讨单纯性多数牙先天缺失家系MSX1和PAX9的基因突变特点,为寻找该病发病的易感因素提供依据。方法:对该家系中2例多数牙先天缺失的患者进行临床、实验室检查,诊断为单纯性多数牙缺失;提取基因组DNA,PCR扩增MSX1和PAX9基因的外显子并测序,采用软件分析基因突变类型及氨基酸变化。结果:经DNA序列分析,在MSX1的1号外显子以及附近内含子区发现2例患者均存在2个相同类型的突变方式:c.469+35-c.469+45del(纯合型);c.348C>T(P.Gly116=,rs34165410,杂合型),对照组中有2例出现该类型的剪切突变(杂合型),经生物信息学分析认为是多态性位点。而PAX9均未检测到外显子编码区的致病性突变。结论:MSX1基因突变的多态性位点可能与该家系单纯性多数牙缺失的病因密切相关。

先天性多数牙齿缺失家系PAX9基因两个新突变功能的初步研究

目的对成对盒基因(pairedboxgene,PAX)PAX9两个新突变109(InsG)及139(C→T)分子生物学功能及与先天性多数牙齿缺失的发病机理进行初步探讨。方法分别以先天性多数牙齿缺失家系A[109(InsG)]、家系B[139(C→T)]中患者及健康成员基因组DNA为模板,PCR扩增PAX9基因DNA结合域序列(paireddomain,PD),构建原核表达质粒GST,进一步在大肠杆菌中诱导表达,纯化表达产物,分离制备PAX9PD蛋白。凝胶迁移试验检测PAX9PD蛋白与靶DNA(CD192和Pax6CON)结合活性。结果野生型PAX9PD蛋白与靶DNA结合,109(InsG)及139(C→T)突变的PAX9PD蛋白皆失去与靶DNA结合能力。结论109(InsG)及139(C→T)突变造成PAX9基因DNA结合域功能丧失,可能是导致多数牙齿先天性缺失的原因。