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呼吸道合胞病毒M_(2-1)基因表达对人肺腺癌PAa细胞生长的影响 被引量:2
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作者 陈杭薇 杜玉国 +1 位作者 辛庆红 李继成 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期585-587,共3页
探讨呼吸道合胞病毒(RSV)M2 -1基因在人肺腺癌PAa细胞的表达及对其生长的影响。重组真核质粒PXJ 4 1/M2 -1转染肺腺癌PAa细胞 ,应用RT PCR、Westernblot方法检测表达。通过MTT生长曲线、流式细胞光度术、细胞贴壁能力、集落形成、接种... 探讨呼吸道合胞病毒(RSV)M2 -1基因在人肺腺癌PAa细胞的表达及对其生长的影响。重组真核质粒PXJ 4 1/M2 -1转染肺腺癌PAa细胞 ,应用RT PCR、Westernblot方法检测表达。通过MTT生长曲线、流式细胞光度术、细胞贴壁能力、集落形成、接种裸鼠等 ,观察PAa细胞体内外生长变化。结果显示 :①转染阳性重组子经双酶切及RT PCR扩增均可见目的区带 ;②Westernblot检测可见特异性条带 ;③PAa/M2 -1细胞S期下降 ,G2 /M期增加 ;贴壁能力下降 ,集落形成率增高 ,集落细胞数增多 ;④PAa/M2 -1细胞成瘤时间晚 ,但生长速度快 ,瘤组织由腺癌向鳞癌分化。提示M2 -1基因可能促进PAa细胞生长 。 展开更多
关键词 肺腺癌 呼吸道合胞病毒 M2-1基因 肺肿瘤 paa细胞
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大黄虫丸含药血清对体外人肺腺癌PAa细胞株的影响 被引量:1
2
作者 齐元富 李秀荣 李慧杰 《辽宁中医杂志》 CAS 2012年第4期579-582,共4页
目的:实验通过大黄虫丸含药血清干预体外人肺腺癌PAa细胞株研究其抗肿瘤机制,进而探讨活血化瘀法在肿瘤治疗中的疗效和价值。方法:采用血清药理学方法以不同浓度的大黄虫丸含药血清与人肺腺癌PAa细胞株共同孵育,于不同时间观察,并... 目的:实验通过大黄虫丸含药血清干预体外人肺腺癌PAa细胞株研究其抗肿瘤机制,进而探讨活血化瘀法在肿瘤治疗中的疗效和价值。方法:采用血清药理学方法以不同浓度的大黄虫丸含药血清与人肺腺癌PAa细胞株共同孵育,于不同时间观察,并与空白血清作对照。研究大黄虫丸含药血清对体外人肺腺癌PAa细胞株的细胞毒作用、生长抑制作用及对细胞周期的影响。结果:5%~20%各组含药血清OD值与相同作用时间10%牛血清、相同浓度的正常鼠血清OD值比较有明显差异(P<0.05~0.01),并随着血药浓度的提高OD值逐渐减低;药血清对人肺腺癌PAa细胞株增殖有明显抑制作用,并随药血清浓度提高、作用时间延长抑制作用增强;其诱导凋亡作用随药血清浓度的增加及作用时间的延长而增强。结论:大黄虫丸含药血清对体外人肺腺癌PAa细胞株有明显抑制作用,为大黄虫丸抗肿瘤提供了科学依据。 展开更多
关键词 大黄虫丸 人肺腺癌paa细胞 活血化瘀
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呼吸道合胞病毒M_(2-1)基因在人肺腺癌PAa细胞的转染及表达
3
作者 杜玉国 陈杭薇 +2 位作者 辛庆红 李继成 于忠和 《山西医科大学学报》 CAS 2002年第3期215-217,共3页
目的 拟将呼吸道合胞病毒M2 -1基因转染人肺腺癌PAa细胞并获得表达。方法 应用基因重组和基因转染技术 ,将在呼吸道合胞病毒转录及复制过程中起调控作用的M2 -1基因cDNA片段插入质粒 pXJ41,再转染人肺腺癌PAa细胞 ,并通过RT -PCR和免... 目的 拟将呼吸道合胞病毒M2 -1基因转染人肺腺癌PAa细胞并获得表达。方法 应用基因重组和基因转染技术 ,将在呼吸道合胞病毒转录及复制过程中起调控作用的M2 -1基因cDNA片段插入质粒 pXJ41,再转染人肺腺癌PAa细胞 ,并通过RT -PCR和免疫荧光及Westernblot等技术鉴定M2 -1基因表达。结果 ①阳性重组子 pXJ41/M2 -1经双酶切 ,产生 6 2 0bp大小片段 ;②RT -PCR扩增M2 -1基因可见 6 2 0bp清晰的条带 ;③免疫荧光染色见转染M2 -1基因的PAa细胞胞浆内可见特异性绿色荧光 ;④Westernblot检测转染M2 -1基因的PAa细胞 ,于 2 2 0 0 0处可见特异性条带。结论 呼吸道合胞病毒M2 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 M2-1基因 肺腺癌 paa细胞 基因表达 转染
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呼吸道合胞病毒M_(2-1)基因表达对人肺腺癌PAa细胞生物学特性的影响
4
作者 夏永宏 陈杭薇 +1 位作者 邬光惠 尤兰华 《山西医科大学学报》 CAS 2005年第2期143-146,共4页
目的观察呼吸道合胞病毒(RSV)M2-1基因的表达对人肺腺癌PAa细胞生物学特性的影响。方法①采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长曲线和不同浓度丝裂霉素(MMC)作用下细胞的存活率;②采用流式细胞仪(FCM)、DNA凝胶电泳、透射电镜技术观... 目的观察呼吸道合胞病毒(RSV)M2-1基因的表达对人肺腺癌PAa细胞生物学特性的影响。方法①采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长曲线和不同浓度丝裂霉素(MMC)作用下细胞的存活率;②采用流式细胞仪(FCM)、DNA凝胶电泳、透射电镜技术观察细胞凋亡。结果PAa/M2-1、PAa细胞的倍增时间分别为2.79和3.24d,PAa/M2-1细胞较PAa细胞生长速度快。不同浓度MMC作用下,转染后PAa/M2-1细胞的存活率均明显低于PAa细胞;PAa细胞和PAa/M2-1细胞的凋亡发生率分别为0.58%和5.6%;DNA凝胶电泳PAa/M2-1细胞可见清晰的DNA梯状条带;透射电镜观察到PAa/M2-1有凋亡细胞。结论M2-1基因的表达可促进PAa细胞生长,对不同浓度丝裂霉素表现为敏感性增加,并有自发性凋亡发生,以上结果为进一步研究RSV与肺癌的关系提供了有力证据。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 M2-1基因 肺肿瘤 paa细胞 凋亡
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TRIM28siRNA通过活化E2F转录因子1增加非小细胞肺癌PAa细胞对依托泊苷的敏感性 被引量:4
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作者 刘镭 高亚贤 +4 位作者 王建平 赵学荣 许倩 胡旺 刘美奇 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期455-460,共6页
目的探讨siRNA沉默TRIM28(tripartite motif containing 28)增强非小细胞肺癌(NSCLC)PAa细胞对依托泊苷的敏感性和可能的机制。方法应用RNA干扰技术沉默TRIM28基因在PAa细胞中的表达;TRIM28siRNA单独或联合依托泊苷处理PAa细胞后,应用MT... 目的探讨siRNA沉默TRIM28(tripartite motif containing 28)增强非小细胞肺癌(NSCLC)PAa细胞对依托泊苷的敏感性和可能的机制。方法应用RNA干扰技术沉默TRIM28基因在PAa细胞中的表达;TRIM28siRNA单独或联合依托泊苷处理PAa细胞后,应用MTT法和集落形成实验检测各组细胞的增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting方法检测各组细胞中E2F转录因子1(E2F1)的表达水平。结果在PAa中沉默了TRIM28的表达;TRIM28siRNA联合依托泊苷显著抑制PAa细胞的增殖和集落形成,明显诱导细胞凋亡;联合处理的PAa细胞中E2F1mRNA和蛋白水平的表达明显增加,同时抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少。结论 TRIM28siRNA联合化疗药物依托泊苷对抑制NSCLC细胞生长有明显效果。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 paa细胞 TRIM28 RNA干扰 依托泊苷 免疫印迹法
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PXJ-41/M2-1转染人肺腺癌PAa细胞及其稳定表达
6
作者 夏永宏 陈杭薇 《华北国防医药》 2003年第1期2-4,F003,共4页
目的 探讨外源性呼吸道合胞病毒 (RSV)M 2 1基因在人肺腺癌PAa细胞中获得稳定表达的可行性。 方法 将携有RSVM 2 1基因的真核表达载体PXJ 41/M 2 1,在脂质体介导下 ,导入人肺腺癌PAa细胞株。通过G418筛选获得阳性克隆 ,并继续培... 目的 探讨外源性呼吸道合胞病毒 (RSV)M 2 1基因在人肺腺癌PAa细胞中获得稳定表达的可行性。 方法 将携有RSVM 2 1基因的真核表达载体PXJ 41/M 2 1,在脂质体介导下 ,导入人肺腺癌PAa细胞株。通过G418筛选获得阳性克隆 ,并继续培养 ,用RT PCR及免疫组织化学方法检测M 2 1在人肺腺癌PAa细胞内的稳定表达情况。 结果 经RT PCR方法扩增到M 2 162 0bp特异性条带。免疫组织化学证实 ,转染PXJ 41/M 2 1后的PAa细胞内有M 2 1蛋白的表达。 结论 在脂质体介导下 ,M 2 1可导入PAa细胞内并获得稳定表达。 展开更多
关键词 PXJ-41/M2—1转染 肺腺癌 paa细胞 稳定表达 基因表达 基因转染
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呼吸道合胞病毒对人肺腺癌细胞系PAa的影响
7
作者 陈杭薇 钱桂生 +1 位作者 邬光惠 李继成 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期213-215,共3页
目的 :探讨呼吸道合胞病毒 (RSV)感染对体外培养人肺腺癌细胞系PAa的影响。方法 :应用RSV体外感染PAa细胞 ,观察PAa细胞的变化 ;聚合酶链反应 (PCR)结合单链构象多态性分析 (SSCP)检测PAa细胞 p5 3基因突变情况。 结果 :RSV感染PAa细胞 ... 目的 :探讨呼吸道合胞病毒 (RSV)感染对体外培养人肺腺癌细胞系PAa的影响。方法 :应用RSV体外感染PAa细胞 ,观察PAa细胞的变化 ;聚合酶链反应 (PCR)结合单链构象多态性分析 (SSCP)检测PAa细胞 p5 3基因突变情况。 结果 :RSV感染PAa细胞 2 4h后 ,细胞出现融合病变 ,形成巨融合细胞 ;病变细胞p5 3第 5、6、7、8、9外显子突变热点区域未见单链多态性变化。结论 :RSV对PAa细胞形态影响明显 ,对PAa细胞基因水平的改变有待深入研究。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 肺腺癌 paa细胞 SSCP
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中药金安粉针剂对人高、低转移性肺癌细胞系作用的异质性研究
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作者 周彩虹 王谦 +1 位作者 林洪生 黄启福 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1644-1645,共2页
目的:研究中药金安粉针剂对体外培养人肺高转移性巨细胞癌系(PG)和人低转移性肺腺癌细胞系(PAa)作用的异质性及其机制. 方法:体外培养PG、PAa细胞,分为三组:对照组(C)、顺铂组(DDP)和金安组(JA).采用四唑盐(MTT)法测定金安对PG、PAa的... 目的:研究中药金安粉针剂对体外培养人肺高转移性巨细胞癌系(PG)和人低转移性肺腺癌细胞系(PAa)作用的异质性及其机制. 方法:体外培养PG、PAa细胞,分为三组:对照组(C)、顺铂组(DDP)和金安组(JA).采用四唑盐(MTT)法测定金安对PG、PAa的杀伤作用;提取了肿瘤细胞的DNA,电泳检测是否有DNA Ladder出现,以及用活细胞双荧光法观察肿瘤细胞的核形变化和应用TUNEL法检测了两种细胞的凋亡指数,此外用流式细胞仪检测了金安对PG、PAa细胞周期的影响以及应用Annexin V染色检测了两种细胞的早、晚期凋亡率. 展开更多
关键词 金安粉针剂 异质性研究 转移性 肺癌细胞 中药 paa细胞 流式细胞仪检测 ANNEXIN 肺腺癌细胞
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间充质干细胞条件培养液促进肺癌细胞上皮间质转化 被引量:1
9
作者 吴佳斌 王涛 +4 位作者 杨伟林 王均洁 肖婕婓 王儒琛 陈振光 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第7期993-999,共7页
背景:骨髓间充质干细胞与肿瘤关系的复杂性严重限制了间充质干细胞的应用,因此明确间充质干细胞在肿瘤生长与转移中的作用已成为迫切需要解决的问题。目的:探讨人骨髓来源间充质干细胞对人非小细胞肺癌A549、PAa细胞上皮间质转化的影响... 背景:骨髓间充质干细胞与肿瘤关系的复杂性严重限制了间充质干细胞的应用,因此明确间充质干细胞在肿瘤生长与转移中的作用已成为迫切需要解决的问题。目的:探讨人骨髓来源间充质干细胞对人非小细胞肺癌A549、PAa细胞上皮间质转化的影响。方法:收集间充质干细胞上清液作为间充质干细胞条件培养液培养肺癌细胞A549和PAa,观察肺癌细胞形态、上皮间质转化标志物E-钙黏素、N-钙黏素、波形蛋白以及其转录因子Slug、Snail、Twist等的表达以及肺癌细胞运动迁移能力的变化。结果与结论:(1)与对照组对比:加入条件培养液的肺癌细胞形态发生了间质样变化,且E-钙黏素表达降低,N-钙黏素、波形蛋白mR NA与蛋白表达水平上升,转录因子Slug、Snail、Twist m RNA表达水平也明显增加,同时细胞运动迁移能力增强。(2)结果表明人骨髓来源间充质干细胞可以促进非小细胞肺癌A549、PAa细胞上皮间质转化过程,增强肺癌细胞运动迁移能力。 展开更多
关键词 细胞转化 肿瘤 细胞运动 肿瘤 组织工程 组织构建 间充质干细胞 肺癌 上皮间质转化 转移 A549细胞 paa细胞 条件培养 国家自然科学基金
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肺金生方通过调控MMP-2/TIMP-2平衡抗肺癌侵袭转移研究 被引量:7
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作者 陈滨海 庞德湘 +4 位作者 张雅丽 姚成 郑健 陈冬 周少玲 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第12期2828-2830,I0017,共4页
目的:探讨肺金生方对多种肺癌细胞株的体外抗肿瘤转移作用。方法:以肺金生方含药血清作用于肺癌A549、PG和PAa细胞,普通倒置显微镜观察各组细胞的生长特点及形态,MTT法检测细胞增殖情况,Boyden小室法观察细胞迁移,ELISA法检测25%肺金生... 目的:探讨肺金生方对多种肺癌细胞株的体外抗肿瘤转移作用。方法:以肺金生方含药血清作用于肺癌A549、PG和PAa细胞,普通倒置显微镜观察各组细胞的生长特点及形态,MTT法检测细胞增殖情况,Boyden小室法观察细胞迁移,ELISA法检测25%肺金生方含药血清对MMP-2、TIMP-2表达的影响。结果:肺金生方含药血清作用于各细胞后,与正常细胞相比形态发生明显改变,明显梭形化,细胞数量减少;各浓度肺金生方组抑制率与空白组相比有差异,其中25%含药血清与空白组相比有显著性差异(P<0.01),25%肺金生方含药血清组能减弱A549、PG和PAa细胞迁移,同时,各细胞肺金生方组MMP-2、TIMP-2的表达与空白血清组相比有差异(P<0.05)。结论:肺金生方可以通过调控MMP-2/TIMP-2平衡达到抗肺癌转移作用。 展开更多
关键词 肺金生方 A549细胞 PG细胞 paa细胞 MMP-2 TIMP-2
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