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妊娠晚期感染B族链球菌孕妇早产的危险因素及其pbp2x基因突变分析 被引量:1
1
作者 文强 王秀 +2 位作者 丁小莉 胡芷晴 徐志红 《现代医药卫生》 2024年第13期2206-2210,共5页
目的 分析某院感染B族链球菌(GBS)孕妇发生早产的危险因素及观察早产孕妇感染GBS的pbp2x基因突变情况。方法 选取2022年1月至2023年5月在该院分娩且感染GBS的孕妇199例,根据早产与否分为观察组(41例)和对照组(158例)。采用二分类logisti... 目的 分析某院感染B族链球菌(GBS)孕妇发生早产的危险因素及观察早产孕妇感染GBS的pbp2x基因突变情况。方法 选取2022年1月至2023年5月在该院分娩且感染GBS的孕妇199例,根据早产与否分为观察组(41例)和对照组(158例)。采用二分类logistic回归模型和受试者操作特征(ROC)曲线分析感染GBS的孕妇发生早产的危险因素;对早产孕妇的GBS样本进行pbp2x基因一代测序分析。结果 199例感染GBS孕妇中发生早产41例,发生率为20.6%。Logistic回归分析显示,年龄[比值比(OR)=1.151,P=0.004)]和口服葡萄糖耐量试验(OGTT)异常项数(OR=2.995,P<0.001)是感染GBS孕妇发生早产的独立危险因素。两危险因素联合预测早产的曲线下面积(AUC)为0.783,最佳敏感度为75.6%,特异度为69.0%,较单项危险因素预测价值高。pbp2x基因测序发现3个错义突变(1129G>A、1148T>G、1528A>G),未发现影响GBS对青霉素敏感性的基因突变。结论 年龄和OGTT异常项数是感染GBS孕妇发生早产的危险因素,两者联合预测的效能优于单项,早产孕妇感染的GBS中尚未发现影响青霉素敏感性的pbp2x基因突变。 展开更多
关键词 B族链球菌 孕妇 早产 危险因素 pbp2x基因
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穿心莲内酯对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌关键耐药蛋白PBP2a的抑制作用
2
作者 李彩霞 刘盼盼 +2 位作者 陈晓慧 罗小凤 王桂琴 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第3期31-38,共8页
本试验旨在为探究穿心莲内酯(andrographolide, AP)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)关键耐药蛋白青霉素结合蛋白2a(penicillin binding protein 2a, PBP2a)的抑制作用。采用实时荧光定量... 本试验旨在为探究穿心莲内酯(andrographolide, AP)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)关键耐药蛋白青霉素结合蛋白2a(penicillin binding protein 2a, PBP2a)的抑制作用。采用实时荧光定量PCR检测AP对PBP2a编码基因mecA的转录影响,通过在线软件SWISS-MODEL等对蛋白质结构进行分析,经PyMOL以及AutoDock Tools软件进行分子对接来探究AP与PBP2a结合的可能机制,运用动力学模拟来验证AP与PBP2a蛋白结合的可靠性,进一步原核表达PBP2a并制备其多克隆抗体,通过蛋白质免疫印迹检测AP作用下MRSA中PBP2a蛋白含量的变化。结果显示:64μg/mL的AP即可显著下调mecA的转录水平,AP与PBP2a蛋白的GLU170、GLU239和THR238之间可以形成稳定的氢键作用力;成功表达并纯化获得38 kDa的PBP2a蛋白转肽酶区,且制备出的多克隆抗体可以与PBP2a蛋白特异性结合;随着AP浓度的升高,PBP2a的表达量逐渐降低。总之,本研究分子模拟提示AP对PBP2a蛋白存在抑制潜力,试验结果表明AP可以通过抑制mecA的转录进而抑制PBP2a表达,从而揭示了AP使MRSA对β-内酰胺类抗生素增敏的可能机制。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 pbp2A 穿心莲内酯 分子模拟
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MRSA表面标志物PBP2a的检出与苯唑西林MIC的相关性分析
3
作者 艾辉 徐小平 《中国现代医药杂志》 2005年第3期48-49,共2页
目的研究MRSA表面标志物PBP2a与苯唑西林MIC的相关性。方法收集62株金黄色葡萄球菌临床分离株,通过乳胶凝集试验和全自动细菌分析仪分别检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)和苯唑西林MIC值。结果62株金葡中32株PBP2a检测阳性,30株PBP2a检测阴... 目的研究MRSA表面标志物PBP2a与苯唑西林MIC的相关性。方法收集62株金黄色葡萄球菌临床分离株,通过乳胶凝集试验和全自动细菌分析仪分别检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)和苯唑西林MIC值。结果62株金葡中32株PBP2a检测阳性,30株PBP2a检测阴性。苯唑西林MIC≥4μg/ml31株,苯唑西林MIC≤2μg/ml31株。在苯唑西林MIC≥4μg/ml的31株MRSA中30株PBP2a检测均为阳性。结论金黄色葡萄球菌耐苯唑西林的耐药水平与PBA2a的检出有较好的相关性。 展开更多
关键词 青霉素结合蛋白2a(pbp2a) 金黄色葡萄球菌 苯唑西林 耐苯唑西林 pbp2A MIC值 表面标志物 MRSA 相关性分析 检出
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MRSA-PBP2a蛋白的体外诱导、抗体制备及鉴定 被引量:3
4
作者 苏明权 杨柳 +2 位作者 岳乔红 樊新 郝晓柯 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第9期802-804,共3页
目的:探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistantstaphylococcusaureus,MRSA)蛋白的体外诱导;抗MRSA PBP2a(pencillinbindingprotein2a,PBP2a)蛋白抗体的制备及效价鉴定.方法:采用NCCLS推荐的琼脂板稀释法和PCR法筛选MRSA,以... 目的:探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistantstaphylococcusaureus,MRSA)蛋白的体外诱导;抗MRSA PBP2a(pencillinbindingprotein2a,PBP2a)蛋白抗体的制备及效价鉴定.方法:采用NCCLS推荐的琼脂板稀释法和PCR法筛选MRSA,以β内酰胺抗生素作为诱导剂,进行体外诱导产生PBP2a蛋白.免疫家兔后产生抗MRSA PBP2a蛋白抗体,采全血分离血清,用改良双向免疫扩散法进行抗体滴度测定.结果:11株临床分离的金葡菌采用二种方法均检测出2株MRSA,SDS PAGE和Westernblot结果均显示从MRSA菌株中均能诱导出了PBP2a蛋白;免疫后均能产生较高的效价抗体,分别为1∶32和1∶64.结论:成功诱导出产生耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白菌株,并制备获得PBP2a蛋白,以及制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白抗体,为研究MRSA PBP2a蛋白活性、MRSA的免疫治疗和MRSA快速鉴定方法学的建立奠定基础. 展开更多
关键词 MRSA pbp2a蛋白 体外诱导 动物免疫
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MRSA-PBP2a单克隆抗体乳胶凝集检测法的建立 被引量:3
5
作者 徐霞 陈思聪 唐晓华 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期611-614,628,共5页
【目的】应用抗PBP2a单克隆抗体,以化学交联法致敏羧化聚苯乙烯乳胶,建立快速检测MRSA-PBP2a的乳胶凝集法。【方法】以辛酸-硫酸铵法纯化PBP2a单克隆抗体,将纯化后单克隆抗体和羧化乳胶经碳化二亚胺(EDC)共价偶联,并对偶联条件(偶联抗... 【目的】应用抗PBP2a单克隆抗体,以化学交联法致敏羧化聚苯乙烯乳胶,建立快速检测MRSA-PBP2a的乳胶凝集法。【方法】以辛酸-硫酸铵法纯化PBP2a单克隆抗体,将纯化后单克隆抗体和羧化乳胶经碳化二亚胺(EDC)共价偶联,并对偶联条件(偶联抗体浓度、乳胶浓度、偶联时间和偶联缓冲液)进行探索和优化,建立检测PBP2a的乳胶凝集法。【结果】140mg/L的抗体浓度与15g/L的羧化聚苯乙烯乳胶,在pH 5.8缓冲液中偶联8h后有较好的凝集效果和偶联效率,所建立的乳胶凝集法敏感性和特异性良好。【结论】初步建立了检测PBP2a的胶乳凝集法,为研制MRSA快速鉴定试剂盒奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 乳胶凝集法 单克隆抗体 检测法 pbp2A 辛酸-硫酸铵法 共价偶联 抗体浓度 聚苯乙烯
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50株肺炎链球菌pbp2B基因突变与苯唑西林药敏相关性分析 被引量:2
6
作者 丁云芳 糜祖煌 +2 位作者 张建华 陶云珍 秦玲 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 2004年第10期1087-1090,共4页
目的 探讨我国耐青霉素肺炎链球菌 (Streptococcuspneumoniae,SPN)pbp2B基因的突变与苯唑西林药敏表型相关性。方法 对呼吸道感染患儿痰标本中分离到的 5 0株肺炎链球菌 ,用K B法进行苯唑西林药物敏感试验 ,用套式聚合酶链反应 (nPCR... 目的 探讨我国耐青霉素肺炎链球菌 (Streptococcuspneumoniae,SPN)pbp2B基因的突变与苯唑西林药敏表型相关性。方法 对呼吸道感染患儿痰标本中分离到的 5 0株肺炎链球菌 ,用K B法进行苯唑西林药物敏感试验 ,用套式聚合酶链反应 (nPCR)扩增pbp2B基因 ,对PCR产物直接进行DNA测序 ,测得序列与SPNR6株 (青霉素敏感株 )序列 [GenBank登录号 :NC 0 0 30 98]相比较。结果  2 9株无突变 ,2 1株有突变 ;突变的 2 1株中 2 0株为点突变 ,可分A、B、C、D 4个类型 ,分别占 71 4 %、14 3%、4 8%、4 8% ;另 1株为E型 ,除有点突变外 ,并有CCT碱基插入 ;无突变的 2 9株SPN菌中苯唑西林敏感率为 86 2 % ;有突变的 2 1株中苯唑西林敏感率为 9 5 % ,二者相比较差异有显著性 (P <0 0 0 1) ;5种突变类型均存在SPN菌对苯唑西林耐药。结论 SPN分离株pbp2B基因突变与其苯唑西林耐药性相关 。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 pbp2B基因突变 苯唑西林耐药
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肺炎克雷伯菌多重耐药性与基因PBP2、PBP3的相关性研究 被引量:4
7
作者 闫晓煜 肖创清 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第14期1873-1875,1878,共4页
目的探讨PBP2、PBP3基因在肺炎克雷伯菌对不同药物耐药中的作用与机制。方法收集该院2014年4月至2015年4月各科室临床标本中分离的非重复肺炎克雷伯菌203株,采用全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏检测,提取细菌基因组DNA,用PCR... 目的探讨PBP2、PBP3基因在肺炎克雷伯菌对不同药物耐药中的作用与机制。方法收集该院2014年4月至2015年4月各科室临床标本中分离的非重复肺炎克雷伯菌203株,采用全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏检测,提取细菌基因组DNA,用PCR扩增PBP2、PBP3产物并进行电泳,RT-PCR检测PBP2、PBP3的表达。结果 203株肺炎克雷伯菌中β-内酰胺类药物耐药105株(51.7%),敏感88株,对亚胺培南、美罗培南耐药率分别为5.4%、3.9%;PCR扩增产物的电泳条带中PBP2与PBP3基因阴性18株,阳性185株,但不平行,分别有各自的阴、阳性菌株;PBP2、PBP3与KP多重耐药性无显著相关(P=0.295、0.628)。PBP2与碳青烯酶类药物无显著相关(P=0.637);PBP3与碳青烯酶类药物存在显著相关,但相关系数不高(P=0.041,r=0.148);耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的PBP2、PBP3逆转录后扩增产物电泳条带与16SrRNA扩增产物电泳条带的灰度比值进行统计学检验,其差异均无统计学意义(PBP2:P=0.331,PBP3:P=0.383)。结论基因PBP2、PBP3与肺炎克雷伯菌多重耐药性之间可能无显著相关。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 多重耐药性 pbp2 PBP3
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以PBP2a为靶点应用生物传感器技术筛选拮抗MRSA中药 被引量:2
8
作者 和生琦 李军 +5 位作者 吴翀 郑江 龙宇鹏 罗平 张蓉 周红 《解放军药学学报》 CAS 2007年第5期353-356,共4页
目的应用生物传感器技术从传统抗炎中药中筛选具有拮抗细菌PBP2a活性的中药并进行活性物质含量的排序。方法将可溶性PBP2 a包被于生物传感器的生物素化样品池以建立靶点,测定115种中药水煎液去鞣质后与PBP2a的亲和力;选择亲和力较高的2... 目的应用生物传感器技术从传统抗炎中药中筛选具有拮抗细菌PBP2a活性的中药并进行活性物质含量的排序。方法将可溶性PBP2 a包被于生物传感器的生物素化样品池以建立靶点,测定115种中药水煎液去鞣质后与PBP2a的亲和力;选择亲和力较高的25种药物水提液和醇提液与定量PBP2a(50ng.ml-1)37℃混合孵育30min,再测定其与PBP2a的亲和力,以评价中药里活性物质的含量。结果115种中药中,毛冬青、金荞麦、雷公藤等25种中药与PBP2a具有较高亲和力(大于100RU);黄药子、五倍子、半枝莲、山豆根、黄连、草果、核桃根等7种中药中与PBP2 a特异性结合的活性物质含量较高。结论应用生物传感器跟踪技术筛选具有结合PBP2a作用的中药具有可行性,筛选出的7种中药均含有非鞣质类能与PBP2 a发生特异性结合作用的活性物质,该7种中药能不同程度抑制MRSA的生长。 展开更多
关键词 pbp2A MRSA 生物传感器 中药 亲和力
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MRSA-PBP2a转肽酶区的原核表达及鉴定 被引量:1
9
作者 刘长浩 任慧英 +2 位作者 刘文华 邹玲 温建新 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第13期10-13,共4页
为了对编码耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)的转肽酶区(TPase)原核表达并进行Western blot鉴定。通过PCR方法由MRSA基因组中扩增转肽酶区基因片段,并构建pGEX-6p-1-TPase重组质粒,经酶切鉴定、测序正确后,转化BL... 为了对编码耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)青霉素结合蛋白2a(PBP2a)的转肽酶区(TPase)原核表达并进行Western blot鉴定。通过PCR方法由MRSA基因组中扩增转肽酶区基因片段,并构建pGEX-6p-1-TPase重组质粒,经酶切鉴定、测序正确后,转化BL-21,用IPTG进行诱导表达,并对表达的蛋白进行Western blot鉴定。结果表明,构建的pGEX-6p-1-TPase原核表达载体可表达PBP2a的转肽酶区蛋白,为其进一步的研究和应用奠定了基础。 展开更多
关键词 pbp2A 转肽酶区 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 原核表达
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PBP2a的分子生物学特性及其与MRSA固有耐药的相关研究 被引量:1
10
作者 吴本权 《医学综述》 1999年第1期14-16,共3页
甲氧西林耐药金葡菌(Methicillin Resistant Staphyloloccus Aureus,MRSA)是院内感染的重要致病菌之一,其致病性与甲氧西林敏感金葡菌(MetLicillinSensitiveS taphylococcus Aureus,MSSA)相似。主要引起化脓性感染,但几乎对包括甲氧西... 甲氧西林耐药金葡菌(Methicillin Resistant Staphyloloccus Aureus,MRSA)是院内感染的重要致病菌之一,其致病性与甲氧西林敏感金葡菌(MetLicillinSensitiveS taphylococcus Aureus,MSSA)相似。主要引起化脓性感染,但几乎对包括甲氧西林在内的所有抗生素耐药,目前只有万古霉素和利福平敏感。自60年代Jevons首次报道MRSA以来,至80年代MRSA感染遍及全球,最高占金葡菌感染的53%。国内开展的研究较晚,主要集中在MRSA的药敏试验、分型、分布方面的研究。因此进一步研究其耐药机制,为合理使用抗生素或开发新的抗生素提供理论依据。 展开更多
关键词 pbp2A 分子生物学 金葡菌 MRSA 甲氧西林 耐药性
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以可溶性PBP2a为靶点筛选拮抗MRSA中药的实验研究
11
作者 董燕 李斌 +4 位作者 罗平 龙宇鹏 李军 王仙园 周红 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期451-453,共3页
目的以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床分离株青霉素结合蛋白2a(PBP2a)的可溶性片段为靶点,利用生物传感器筛选能够拮抗MRSA的中药。方法从临床上分离鉴定出MRSA,利用基因重组技术体外诱导表达PBP2a25~668位氨基酸,并对表达的可溶... 目的以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)临床分离株青霉素结合蛋白2a(PBP2a)的可溶性片段为靶点,利用生物传感器筛选能够拮抗MRSA的中药。方法从临床上分离鉴定出MRSA,利用基因重组技术体外诱导表达PBP2a25~668位氨基酸,并对表达的可溶性蛋白进行鉴定及生物学功能分析;然后将PBP2a包被于羧甲基葡聚糖样品池上,利用生物传感器筛选能够拮抗MRSA的中药。结果成功诱导表达出可溶性目的蛋白PBP2a,相对分子质量为74×103,且具有一定的转肽酶及β-内酰胺酶活性;利用生物传感器筛选出10种能够拮抗MRSA的中药,其中黄芩、黄连、夏枯草3种中药抗MRSA作用较强。结论以MRSA临床分离株中可溶性PBP2a为靶点,利用生物传感器成功筛选出了能够拮抗MRSA的中药。 展开更多
关键词 MRSA pbp2A 基因表达 生物传感器 中药
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PBP2a的分子生物学特性及其临床应用研究进展 被引量:3
12
作者 谢闺娥 徐霞 《国外医学(临床生物化学与检验学分册)》 2005年第5期293-295,共3页
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是医院感染的重要病原菌之一,对常用的包括甲氧西林在内的多种抗生素广泛耐药,其主要耐药机制是mecA基因编码低亲和力的青霉素结合蛋白2a(PBP2a)蛋白所致。现就PBP2a的分子生物学特性及其在临床诊断和防治等临... 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌是医院感染的重要病原菌之一,对常用的包括甲氧西林在内的多种抗生素广泛耐药,其主要耐药机制是mecA基因编码低亲和力的青霉素结合蛋白2a(PBP2a)蛋白所致。现就PBP2a的分子生物学特性及其在临床诊断和防治等临床应用方面的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 pbp2A 分子生物学特性 临床应用 研究进展 医院感染 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MECA基因
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基于PBP2a特异性识别的电化学免疫传感器检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
13
作者 曹宇 段浩 +4 位作者 张珊珊 李郭成 李海波 刘明 高英英 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期270-276,共7页
目的构建一种高性能的电化学免疫传感器用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测。方法制备MWCNT-PDA-AuNPs纳米复合物修饰至金电极表面,将MRSA标志蛋白PBP2a的抗体连接于纳米复合物表面,用牛血清白蛋白(BSA)封闭非特异性位点,得到一种... 目的构建一种高性能的电化学免疫传感器用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测。方法制备MWCNT-PDA-AuNPs纳米复合物修饰至金电极表面,将MRSA标志蛋白PBP2a的抗体连接于纳米复合物表面,用牛血清白蛋白(BSA)封闭非特异性位点,得到一种检测MRSA的电化学免疫传感器。通过对传感器构建过程关键因素的考察确定最优条件,考察其线性范围及检出限,最后对传感器性能进行评价。结果通过CV、EIS表征分析确定传感器的成功构建;明确最优构建条件为:MWCNT-PDA∶AuNPs混合比例为1∶2,材料干燥温度为37℃,抗体孵育时间为1 h,样本孵育时间为30 min;MRSA在20 CFU/ml~2.0×10^(7)CFU/ml范围内浓度对数值与DPV峰电流值呈良好的线性关系,回归方程为I(μA)=-6.72lgC+84.26(R^(2)=0.9878),检出限为1 CFU/ml;传感器不易被杂质蛋白干扰,其对低、中、高浓度MRSA重复测定结果RSD分别为4.18%、3.59%、4.38%(n=8),保存20 d内,传感器电信号不低于初始的92%;传感器对低、中、高浓度MRSA样本检测回收率与平板计数法基本一致。结论该电化学免疫传感器构建简便,检测迅速、准确,灵敏度高,具有良好的特异性、重复性和稳定性,可以作为MRSA临床检测的备选方法。 展开更多
关键词 电化学免疫传感器 MRSA pbp2A MWCNT-PDA-AuNPs
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a相互作用蛋白的筛选 被引量:6
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作者 原薇薇 杨杰 +7 位作者 王冬梅 胡珍 朱军民 陈志瑾 张俊磊 王嘉丽 刘佳 饶贤才 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期749-753,共5页
目的通过建立细菌双杂交技术,筛选MRSA中与PBP2a相互作用的蛋白。方法利用PCR扩增,获得PBP2a蛋白转肽酶活性区(TPase)的编码基因,插入pRBR构建成诱饵质粒pBR-PBP2a。提取MRSA N315株基因组DNA,经Sau3AⅠ部分酶切后连接到pRAC质粒的BamH... 目的通过建立细菌双杂交技术,筛选MRSA中与PBP2a相互作用的蛋白。方法利用PCR扩增,获得PBP2a蛋白转肽酶活性区(TPase)的编码基因,插入pRBR构建成诱饵质粒pBR-PBP2a。提取MRSA N315株基因组DNA,经Sau3AⅠ部分酶切后连接到pRAC质粒的BamHⅠ位点,获得基因组DNA表达文库;将文库质粒转化入含诱饵质粒pBR-PBP2a的报告菌株KS1,利用细菌双杂交技术进行筛选,获得与诱饵质粒编码的融合蛋白相互作用的猎物,对猎物中编码序列进行DNA测序和生物信息学分析,确定与PBP2a发生相互作用的蛋白质或多肽。结果成功构建了pBR-PBP2a诱饵质粒,可表达PBP2a TPase与大肠埃希菌RNA聚合酶α亚单位N端序列的融合蛋白。所构建的MRSA N315株基因组文库覆盖率达9倍,满足文库筛选的需要。将文库转化含诱饵质粒和报告基因的KS1宿主菌,利用细菌双杂交技术经3次筛选,共获得9个猎物克隆,其报告基因的活性均升高2倍以上,对9个猎物质粒进行了测序,信息学分析表明它们均来自于MRSA N315株基因组,插入片段最长者648 bp,最短者334 bp,9个插入片段中含14个编码基因,其中10个功能未知,1个编码二氢吡啶二羧酸合酶、1个编码二氢吡啶二羧酸还原酶,2个编码染色体解离稳定(SMC)蛋白。9个克隆中介导与PBP2a相互作用的多肽由14~46个氨基酸组成。结论利用细菌双杂交技术从MRSA基因组文库中成功筛选到与PBP2a相互作用的多肽。 展开更多
关键词 基因组DNA文库 pbp2a蛋白 细菌双杂交系统 蛋白质间相互作用
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肺炎链球菌PBP1a、PBP2b基因突变分析 被引量:3
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作者 陈军 丁云芳 陶云珍 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期856-857,F0002,共3页
目的了解肺炎链球菌(SP)青霉素结合蛋白编码基因(PBPs基因)的突变状况。方法对1株青霉素低耐药株(MIC 1.5μg/ml),苯唑青霉素耐药株(K-B法,D=6 mm),TEM、SHV基因为阴性的SP(SR019),经PCR检测PBP1a、PBP2b,扩增产物全自动DNA测序,并与SPR... 目的了解肺炎链球菌(SP)青霉素结合蛋白编码基因(PBPs基因)的突变状况。方法对1株青霉素低耐药株(MIC 1.5μg/ml),苯唑青霉素耐药株(K-B法,D=6 mm),TEM、SHV基因为阴性的SP(SR019),经PCR检测PBP1a、PBP2b,扩增产物全自动DNA测序,并与SPR6株(青霉素敏感株)DNA序列相比较。结果SR019的PBP1a、PBP2b基因均存在突变,基因突变率分别为21%和13.6%。结论耐青霉素SP存在PBP1a、PBP2b基因突变。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 PBP1a基因 pbp2b基因 基因突变 青霉素 耐药性
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新生儿肺炎链球菌苯唑西林耐药与pbp2B基因突变分析 被引量:1
16
作者 承晓京 韩晓雅 +1 位作者 宋海英 周惠娜 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第21期3223-3225,3228,共4页
目的了解新生儿肺炎链球菌(streptococcuspneumoniae,SP)青霉素耐药基因突变及体外苯唑西林耐药状况。方法对分离自新生儿呼吸道的20株肺炎链球菌用纸片扩散法(K-B法)进行青霉素耐药性试验,用套式聚合酶链反应(nPCR)扩增PbP2B基因,对PC... 目的了解新生儿肺炎链球菌(streptococcuspneumoniae,SP)青霉素耐药基因突变及体外苯唑西林耐药状况。方法对分离自新生儿呼吸道的20株肺炎链球菌用纸片扩散法(K-B法)进行青霉素耐药性试验,用套式聚合酶链反应(nPCR)扩增PbP2B基因,对PCR产物进行DNA测序。结果20株肺炎链球菌体外苯唑西林耐药,耐青霉素PbP2B基因突变为点突变,分A、B两类各占95%和5%。结论新生儿肺炎链球菌耐青霉素株pbp2B基因突变类型与DUPLESSIS等报道的不完全相同应引起高度重视。 展开更多
关键词 新生儿 肺炎链球菌 pbp2B基因 苯唑西林
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Evaluating the performance of the Alere PBP2a SA Culture Colony Test with the Vitek 2 Antimicrobial Susceptibility Test Card System as reference standard in coagulase-negative Staphylococcus species
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作者 Tze Shien Lo Michihiko Goto Kimberly D.P.Hammer 《Infectious Medicine》 2024年第3期69-72,共4页
Background The Alere PBP2a SA Culture Colony Test is an FDA-cleared in vitro immunochromatographic assay for rapid detection of penicillin-binding protein2a(PBP2a)in Staphylococcus aureus.Methods We investigated the p... Background The Alere PBP2a SA Culture Colony Test is an FDA-cleared in vitro immunochromatographic assay for rapid detection of penicillin-binding protein2a(PBP2a)in Staphylococcus aureus.Methods We investigated the performance of the PBP2a SA Culture Colony Test with 78 coagulase-negative Staphylococcus(CoNS)isolates from different body sites,with the Vitek 2 Antimicrobial Susceptibility Test(AST)as a reference standard.Results The CoNS species were 62 S.epidermidis;6 S.lugdenensis;3 S.hominis;2 S.capitis;2 S.haemolyticus;and 1 each of S.simulans,S.auricularis,and S.warneri.Of the 78 CoNS isolates,68 showed concordance in the PBP2a IC assay and Vitek 2 AST.Discordance was seen for 10 S.epidermidis isolates,which showed negative in the PBP2a assay,despite oxacillin-resistance detection using the Vitek 2 AST(66.7%sensitivity and 100%specificity).All non-S.epidermidis CoNS were identified with 100%concordance using the PBP2a IC assay and Vitek 2 AST.Conclusion We demonstrated that,while the PBP2a IC assay has low sensitivity in determining the susceptibility of S.epidermidis to oxacillin,it highly accurately predicted the susceptibility of non-S.epidermidis CoNS to oxacillin.The diagnostic accuracy for non-S.epidermidis CoNS needs further assessment with more isolates to confirm our findings. 展开更多
关键词 pbp2a IC assay Staphylococcus epidermidis Non-epidermidis coagulase-negative STAPHYLOCOCCUS
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肺炎链球菌的耐药性和pbp2b基因扩增产物图谱的相关性 被引量:15
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作者 俞桑洁 胡翼云 +1 位作者 高薇 杨永弘 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期311-313,共3页
目的 了解肺炎链球菌对青霉素和其它抗生素的耐药情况 ;对 40株青霉素敏感菌株和 30株青霉素不敏感菌株进行pbp2b基因扩增产物RFLP图谱相关性研究。方法 采用肉汤稀释法、E 试验和K B纸片法进行抗生素药物敏感试验 ;通过用特异性引物p... 目的 了解肺炎链球菌对青霉素和其它抗生素的耐药情况 ;对 40株青霉素敏感菌株和 30株青霉素不敏感菌株进行pbp2b基因扩增产物RFLP图谱相关性研究。方法 采用肉汤稀释法、E 试验和K B纸片法进行抗生素药物敏感试验 ;通过用特异性引物pF和pR对肺炎链球菌进行PCR扩增 ,并对扩增产物进行限制性内切酶HaeⅢ消化反应。结果 肺炎链球菌对青霉素的不敏感率为9.9%~ 14.6 %;40株青霉素敏感菌株 (MICs≤ 0 .0 94μg ml)中的 39株 ( 97.5 %)为s1、s2和s3三种之一 ,1株为r1;30株青霉素不敏感菌株 (MICs≥ 0 .12 μg ml)中的 2 6株 ( 86 .7%)为r1~r6六种之一 ,其余 4株为s1。结论 青霉素和 β 内酰胺酶类抗生素对北京地区的肺炎链球菌具有活性 ;肺炎链球菌的耐药性和pbp2b基因扩增产物图谱之间有相关性。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 耐药性 pbp2b基因扩增产物图谱 相关性
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肺炎链球菌pbp2b和pbp1a基因突变与青霉素耐药的相关性研究 被引量:8
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作者 周侠 杨致邦 +3 位作者 栗俊杰 苏善平 熊玉霞 于拽拽 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2010年第8期726-729,共4页
目的探讨耐青霉素肺炎链球菌pbp2b和pbp1 a基因的突变与青霉素耐药的关系,为明了肺炎链球菌的耐药性变异机制,防治其感染提供实验依据。方法从呼吸道感染患儿痰标本中分离肺炎链球菌163株,液体培养基连续稀释法测定其对青霉素的最小抑... 目的探讨耐青霉素肺炎链球菌pbp2b和pbp1 a基因的突变与青霉素耐药的关系,为明了肺炎链球菌的耐药性变异机制,防治其感染提供实验依据。方法从呼吸道感染患儿痰标本中分离肺炎链球菌163株,液体培养基连续稀释法测定其对青霉素的最小抑菌浓度(M IC),套式聚合酶链反应(nPCR)扩增pbp2b和pbp1 a基因,扩增产物直接DNA测序,所测序列与青霉素敏感株(SPN R6)的基因序列进行比较,并分析其氨基酸结构的改变。结果 163株肺炎链球菌中检出青霉素敏感菌75株,中度敏感17株,青霉素耐药菌71株(44%)。耐药菌中58株存在pbp2b突变(81.7%),其中,56株为点突变,2株为CCT插入突变;在27株有pbp2b基因突变的B型和C型耐药菌中,21株出现了不同程度的pbp1 a基因突变。PBP2B氨基酸结构改变以苏氨酸变为丙氨酸、精氨酸变为赖氨酸为主,PBP1A以丙氨酸变为苏氨酸、谷氨酸变为天门冬氨酸为主。结论肺炎链球菌的pbp2b和pbp1 a基因突变与对青霉素的耐药性密切相关,PBP2b突变导致低水平耐药;PBP2b和PBP1A突变导致高水平耐药。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 pbp1a基因 pbp2b基因 突变 青霉素耐药性
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肺炎链球菌pbp2B基因突变与β-内酰胺类抗生素耐药相关性的研究 被引量:2
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作者 张范华 林军立 +1 位作者 鲍惠妙 孙爱华 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第6期1423-1425,1435,共4页
目的:探讨肺炎链球菌临床菌株pbp2B基因突变与β-内酰胺类抗生素耐药的相关性。方法:采用二倍微量稀释法检测23株肺炎链球菌临床菌株对5种β-内酰胺类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)。采用PCR扩增pbp2B基因片段,T-A克隆后测序。根据药敏试... 目的:探讨肺炎链球菌临床菌株pbp2B基因突变与β-内酰胺类抗生素耐药的相关性。方法:采用二倍微量稀释法检测23株肺炎链球菌临床菌株对5种β-内酰胺类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)。采用PCR扩增pbp2B基因片段,T-A克隆后测序。根据药敏试验及测序结果,分析pbp2B基因片段突变与β-内酰胺类抗生素耐药的相关性。结果:43.5%(10/23)肺炎链球菌临床菌株对5种β-内酰胺类抗生素敏感,其余56.5%(13/23)菌株耐药,其中有两株高度耐药。β-内酰胺类抗生素敏感菌株pbp2B基因片段仅有2个氨基酸发生变异,且不位于162~206和215~265区域。对β-内酰胺类抗生素低、中水平耐药菌株仅在pbp2B基因片段162~206区域出现氨基酸突变,162~206和215~265区域均有氨基酸突变的菌株对β-内酰胺类抗生素高度耐药。结论:本地区肺炎链球菌临床菌株对β-内酰胺类抗生素有很高的耐药率。肺炎链球菌pbp2B基因片段162~206区域突变仅引起低、中水平β-内酰胺类抗生素耐药性,高度耐药性则与215~265区域突变密切相关。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 pbp2B基因 Β-内酰胺类抗生素 耐药
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