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冬凌草甲素对人肺癌A549和PC-9细胞侵袭的抑制作用和机制研究 被引量:9
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作者 王健 周雯 +2 位作者 宋秀宇 徐文贵 黄纯 《天津医药》 CAS 2015年第9期965-969,共5页
目的探讨天然产物衍生物冬凌草甲素对人肺癌细胞体外侵袭的抑制作用及其机制。方法冬凌草甲素处理人肺癌细胞系A549和PC-9后,应用细胞增殖实验(MTS)法检测肿瘤细胞生长,Transwell试验检测肿瘤侵袭能力,黏附试验检测肿瘤黏附能力,流式细... 目的探讨天然产物衍生物冬凌草甲素对人肺癌细胞体外侵袭的抑制作用及其机制。方法冬凌草甲素处理人肺癌细胞系A549和PC-9后,应用细胞增殖实验(MTS)法检测肿瘤细胞生长,Transwell试验检测肿瘤侵袭能力,黏附试验检测肿瘤黏附能力,流式细胞术检测肿瘤细胞周期,Western blotting和Realtime-PCR检测细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、雷帕霉素靶蛋白(m TOR)、p53、p21、E-钙黏素(E-cadherin)、CD44、β-catenin、尿激酶型纤溶酶原激活物(u PA)、基质金属蛋白酶(MMP)-2/9、p-AKT和磷酸化酪氨酸激酶(p-Src)表达,报告基因技术考察核因子(NF)-κB转录活性。结果冬凌草甲素显著抑制A549和PC-9细胞的体外增殖、黏附和侵袭,将细胞周期阻滞在G2/M期,冬凌草甲素促进E-cadherin、p53和p21的表达,下调CDK1、m TOR、CD44、β-catenin、u PA、MMP-2/9、p-AKT和p-Src表达和NF-κB转录活性。结论冬凌草甲素可抑制人肺癌细胞系A549和PC-9的体外侵袭能力,可能与其调节酪氨酸激酶活性有关。 展开更多
关键词 冬凌草素 肺肿瘤 肿瘤侵润 A549 pc-9
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lncRNA NEAT1通过抑制DNA损伤促进肺腺癌PC-9细胞的增殖 被引量:6
2
作者 刘天旭 王梦杰 +4 位作者 田聪 刘琰 吕微 贾云泷 刘丽华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期845-849,共5页
目的:研究长链非编码RNA核富集转录体1(lncRNA NEAT1)对肺腺癌PC-9细胞增殖能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:qPCR检测人肺腺癌PC-9细胞与人胚肺二倍体2BS细胞中lncRNA NEAT1的表达水平;设计并合成lncRNA NEAT1的小干扰RNA(siRNA... 目的:研究长链非编码RNA核富集转录体1(lncRNA NEAT1)对肺腺癌PC-9细胞增殖能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:qPCR检测人肺腺癌PC-9细胞与人胚肺二倍体2BS细胞中lncRNA NEAT1的表达水平;设计并合成lncRNA NEAT1的小干扰RNA(siRNA)序列,采用脂质体法转染PC-9细胞,通过qPCR检测转染前后PC-9细胞NEAT1的表达水平。MTT法、流式细胞术分别检测lncRNA NEAT1敲低对PC-9细胞增殖及细胞周期的影响;WB检测转染前后DNA损伤相关蛋白,即共济失调毛细血管扩张突变蛋白(ATM)和双链DNA损伤标志物γ-H2AX的表达水平。结果:与2BS细胞相比,PC-9细胞中lncRNA NEAT1呈高表达(P<0.05)。成功建立NEAT1敲低的PC-9细胞,转染siRNA 12 h后siNEAT1-1及siNEAT1-2干扰组细胞增殖能力较空白对照组及空转染组明显下降(P<0.05);干扰组细胞周期被阻滞在G1期[(88.97±2.64)%(,88.15±1.48)%vs(84.5±1.72)%,P<0.05]和G2/M期[(8.35±2.02)%,(8.11±1.36)%vs(4.28±1.28)%,P<0.05];干扰组细胞中DNA损伤相关蛋白ATM和γ-H2AX表达水平显著升高(均P<0.05)。结论:lncRNA NETA1在肺腺癌PC-9细胞呈高表达,其可通过抑制DNA损伤导致细胞周期G1/M期转变促进肺腺癌细胞PC-9的增殖能力。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 核富集转录体1 DNA损伤 肺腺癌 pc-9细胞 增殖 细胞周期
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CXCR4/SDF-1轴调节人肺腺癌PC-9细胞对Bends细胞血脑屏障模型功能的影响 被引量:5
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作者 李鸿茹 涂洵崴 +2 位作者 陈正伟 陈愉生 韩莉莉 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期528-533,共6页
目的:通过建立体外血脑屏障(blood brain barrier,BBB)模型,探讨人肺腺癌PC-9细胞在CXCR4/SDF-1轴作用下对BBB紧密连接蛋白的影响。方法:利用永生化的小鼠脑微血管内皮细胞Bends进行单层培养,建立体外BBB模型;通过跨内皮细胞电阻(transe... 目的:通过建立体外血脑屏障(blood brain barrier,BBB)模型,探讨人肺腺癌PC-9细胞在CXCR4/SDF-1轴作用下对BBB紧密连接蛋白的影响。方法:利用永生化的小鼠脑微血管内皮细胞Bends进行单层培养,建立体外BBB模型;通过跨内皮细胞电阻(transendothelial electrical resistance,TEER)测定及荧光素钠通透性实验判定体外BBB模型的功能状态以及观察PC-9细胞对体外BBB模型功能的影响。Western blotting检测PC-9细胞在CXCR4抑制剂AMD3100、SDF-1单独或联合(1μg/ml AMD3100,100 ng/ml SDF-1,AMD3100+SDF-1)作用下对BBB模型功能和内皮细胞紧密连接蛋白表达的影响,Transwell迁移实验检测CXCR4/SDF-1轴对PC-9细胞跨BBB模型细胞层迁移能力的影响。结果:Bends细胞单层培养可形成紧密连接的"屏障"并产生较高的TEER,第96 h达到(182.13±5.19)Ω·cm^2;同时行荧光色钠通透性实验结果显示,BBB具有良好屏障性能,其通透率低于空白对照组(P<0.05)。PC-9细胞作用后,BBB模型TEER逐渐降低,第24 h降至(46.7±4.35)Ω·cm^2;同时BBB通透率较作用前显著提高(P<0.05)。PC-9细胞在AMD3100作用下能够上调内皮细胞紧密连接蛋白的表达(P<0.05);AMD3100处理组的PC-9细胞穿过BBB的细胞数较空白组明显减少[(43±2)vs(81±2)个,P<0.05]。结论:AMD3100能够减弱PC-9细胞对Bends细胞建立的体外BBB模型紧密连接的破坏能力。 展开更多
关键词 肺腺癌 pc-9细胞 血脑屏障 Bends细胞 紧密连接 跨内皮细胞电阻 迁移 CXCR4/SDF-1轴
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Delicaflavone通过PI3K/AKT/mTOR通路调控上皮-间质转化抑制吉非替尼耐药肺癌PC-9/GR细胞迁移和侵袭 被引量:3
4
作者 眭玉霞 庄捷 +1 位作者 庄敏 黄桂 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2022年第6期614-621,共8页
目的:研究Delicaflavone对人吉非替尼耐药肺癌PC-9/GR细胞迁移与侵袭作用及机制。方法:采用MTT法检测Delicaflavone对PC-9/GR细胞存活率的影响;采用细胞划痕实验和Transwell实验测定Delicaflavone对PC-9/GR细胞迁移和侵袭能力的影响;采... 目的:研究Delicaflavone对人吉非替尼耐药肺癌PC-9/GR细胞迁移与侵袭作用及机制。方法:采用MTT法检测Delicaflavone对PC-9/GR细胞存活率的影响;采用细胞划痕实验和Transwell实验测定Delicaflavone对PC-9/GR细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western blotting法检测Delicaflavone对PC-9/GR细胞基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases 9,MMP-9)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases 2,MMP-2)、钙黏连蛋白(E-cadherin,N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果:与对照组比较,20 mg/L Delicaflavone作用24 h能显著抑制PC-9/GR细胞的细胞活性(P<0.05),而浓度在10 mg/L以下时则对细胞活性无明显影响。Delicaflavone能够浓度依赖性地抑制PC-9/GR细胞的迁移率、侵袭细胞数量(P<0.05和P<0.01),并能浓度依赖性地减少PC-9/GR细胞迁移标记蛋白(MMP-9和MMP-2)的表达(P<0.01),上调E-cadherin、下调N-cadherin和Vimentin的表达(P<0.01)。此外,Delicaflavone还浓度依赖性地减少p-PI3K、p-Akt和p-mTOR表达(P<0.01)。结论:Delicaflavone具有抑制PC-9/GR细胞迁移及侵袭能力的作用,该作用与Delicaflavone通过PI3K/Akt/mTOR通路调控上皮-间质转化有关。 展开更多
关键词 Delicaflavone pc-9/GR细胞 侵袭 迁移 PI3K/Akt/mTOR通路
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新规格柴油机油PC-9 被引量:8
5
作者 刘文俊 牛成继 《润滑油》 CAS 2001年第5期52-57,共6页
将在 2 0 0 2年颁布的最新重负荷柴油机油标准PC 9的焦点问题主要集中在 3个新台架 :CumminsM 11EGR ,MackT 10和Caterpillar 1QEGR ,该标准同时也包括了一些模拟评定方法。这些新试验能确保提高发动机在高温和高烟炱工况下的耐久性。... 将在 2 0 0 2年颁布的最新重负荷柴油机油标准PC 9的焦点问题主要集中在 3个新台架 :CumminsM 11EGR ,MackT 10和Caterpillar 1QEGR ,该标准同时也包括了一些模拟评定方法。这些新试验能确保提高发动机在高温和高烟炱工况下的耐久性。新设计的柴油机为了满足日益严格的排放法规而采用了延迟喷油 (喷油提前角减小 )以降低废气中的NOX 含量 ,“紧”的环岸设计以减少燃烧废气中的颗粒 ,这些措施都促进了发动机内烟炱的产生。针对这种情况推出的PC 9重负荷柴油机油是目前发展最完善的柴油机油标准 ,采用了低硫和正常含硫两种燃料进行试验。 展开更多
关键词 pc-9 规格 重员荷柴油机油
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吉非替尼耐药人肺腺癌PC-9/GR细胞株的建立及其生物学特性 被引量:4
6
作者 何臣 徐军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2017-2017,共1页
关键词 吉非替尼 pc-9/GR细胞 人肺腺癌 生物学特性 耐药指数 耐药细胞模型 逆转耐药 信号转导 性抑制 体外诱导
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沉默FGL1增强人肺腺癌PC-9细胞对多西他赛敏感性的研究 被引量:1
7
作者 郝吉庆 程浩 +1 位作者 高薇薇 孙翠兰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期687-691,共5页
目的探讨沉默纤维蛋白原样蛋白1(fibrinogen-like protein 1,FGL1)对人肺腺癌PC-9细胞多西他赛敏感性的影响。方法Western blot法检测人正常支气管上皮细胞株BEAS-2B及人肺腺癌细胞株PC-9中的FGL1蛋白表达情况。以siRNA沉默PC-9细胞株中... 目的探讨沉默纤维蛋白原样蛋白1(fibrinogen-like protein 1,FGL1)对人肺腺癌PC-9细胞多西他赛敏感性的影响。方法Western blot法检测人正常支气管上皮细胞株BEAS-2B及人肺腺癌细胞株PC-9中的FGL1蛋白表达情况。以siRNA沉默PC-9细胞株中FGL1基因,CCK-8法检测沉默FGL1对PC-9细胞增殖的抑制作用及对多西他赛敏感性的影响。结果与BEAS-2B细胞株比较,FGL1在PC9细胞株中呈高表达,其蛋白相对表达量是BEAS-2B细胞株的6.5倍,差异具有显著性(P<0.01)。通过转染FGL1siRNA沉默FGL1可增强多西他赛对PC-9细胞增殖的抑制作用。与FGL1siNC组细胞相比,FGL1siRNA组PC-9细胞的IC50值明显降低,差异具有显著性(P<0.01)。结论特异性沉默FGL1基因可抑制人肺腺癌细胞PC-9中FGL1的表达,抑制PC-9细胞的增殖,提高对多西他赛的敏感性。 展开更多
关键词 肺腺癌 纤维蛋白原样蛋白1 多西他赛 化疗 pc-9细胞 增殖
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CIK细胞对吉非替尼耐药肺腺癌PC-9/GR细胞的杀伤效应
8
作者 何臣 徐军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2017-2017,共1页
关键词 CIK细胞 吉非替尼 pc-9/GR细胞 肺腺癌 杀伤效应 移植瘤 获得性耐药 杀伤活性 肿瘤生长速度 逆转耐药
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马钱子碱通过阻滞细胞周期抑制人肺癌细胞株PC-9增殖 被引量:11
9
作者 李苗 李平 +2 位作者 张梅 马峰 苏丽 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期444-450,共7页
背景与目的已有的研究表明:Cyclin D1和Cyclin E是细胞周期中重要的正性调控因子,其高表达与肿瘤的增殖密切相关。本研究旨在探讨马钱子碱(Brucine)对人肺癌细胞株PC-9增殖的影响,及其与Cyclin D1和Cyclin E表达的影响。方法将PC-9细胞... 背景与目的已有的研究表明:Cyclin D1和Cyclin E是细胞周期中重要的正性调控因子,其高表达与肿瘤的增殖密切相关。本研究旨在探讨马钱子碱(Brucine)对人肺癌细胞株PC-9增殖的影响,及其与Cyclin D1和Cyclin E表达的影响。方法将PC-9细胞分为4组:空白对照组、DMSO对照组(2‰)、150μM Brucine组、300μM Brucine组。CellTiter-Glo发光法、平板克隆形成实验观察该药对PC-9细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期,qRT-PCR检测细胞周期相关基因Cyclin D1、Cyclin E mRNA的表达,Western blot检测细胞周期相关基因Cyclin D1、Cyclin E蛋白的表达。结果与对照组比较,CellTiter-Glo发光法、平板克隆形成实验结果显示:Brucine可以抑制人肺癌细胞株PC-9的增殖,并呈时间-剂量依赖性(P<0.01);流式结果显示对细胞周期的影响主要是阻滞PC-9细胞于G0/G1期;qRT-PCR结果显示Cyclin D1、Cyclin E mRNA的表达下调;Western blot结果显示Brucine使Cyclin D1、Cyclin E的表达降低。结论 Brucine能明显抑制人肺癌细胞株PC-9的增殖,机制主要与其通过下调Cyclin D1、Cyclin E表达,进而阻滞细胞周期有关。 展开更多
关键词 马钱子碱 细胞周期 人肺癌细胞株pc-9 增殖
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JNK/FOXO3信号通路介导黄连素促人肺腺癌PC-9细胞凋亡的研究 被引量:5
10
作者 刘红岗 赖远阳 +7 位作者 朱以芳 同李平 董小平 许娟 张勇 郭海华 李小飞 闫小龙 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第17期846-850,共5页
目的:探讨黄连素(berberine,Ber)诱导肺腺癌PC-9细胞凋亡及c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)/转录因子叉头蛋白3(forkhead box protein O3,FOXO3)信号通路的作用机制。方法:实验采用完全随机化的分组方法,分为对照组、Be... 目的:探讨黄连素(berberine,Ber)诱导肺腺癌PC-9细胞凋亡及c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)/转录因子叉头蛋白3(forkhead box protein O3,FOXO3)信号通路的作用机制。方法:实验采用完全随机化的分组方法,分为对照组、Ber组(30、60μM),分别检测各组PC-9细胞活力值、凋亡率、ROS含量、caspase 3活性、线粒体膜电位,以及JNK/FOXO3通路和凋亡相关蛋白含量的变化。SP600125特异性抑制JNK(磷酸化)激活后,Ber(0、60μM)处理细胞24 h,重复上述检测。结果:Ber有效抑制PC-9细胞活力,促进细胞凋亡(P<0.05),显著降低PC-9细胞线粒体膜电位,增加ROS含量和caspase 3活性(P<0.05),并呈浓度依赖效应;Western blot检测结果显示Ber上调p-JNK、FOXO3和Bax的含量(P<0.05),下调p-FOXO3和Bcl-2的含量(P<0.05);SP600125特异性抑制JNK激活后,拮抗Ber下调p-FOXO3含量及其促PC-9细胞凋亡作用(P<0.05)。结论:Ber可有效抑制肺腺癌PC-9细胞活力、促进细胞凋亡和氧化应激损伤,作用机制可能与上调p-JNK、FOXO3含量和抑制FOXO3磷酸化有关。 展开更多
关键词 黄连素 肺腺癌 pc-9 JNK FOXO3 凋亡
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Can PC-9 Zhong chong replace K-1 Yong quan for the acupunctural resuscitation of a bilateral double-amputee? Stating the “random criterion problem” in its statistical analysis 被引量:3
11
作者 Adrián ángel Inchauspe 《World Journal of Critical Care Medicine》 2016年第2期143-149,共7页
AIM: To present an inclusion criterion for patients who have suffered bilateral amputation in order to be treated with the supplementary resuscitation treatment which is hereby proposed by the author.METHODS: This wor... AIM: To present an inclusion criterion for patients who have suffered bilateral amputation in order to be treated with the supplementary resuscitation treatment which is hereby proposed by the author.METHODS: This work is based on a Retrospective Cohort model so that a certainly lethal risk to the control group is avoided.RESULTS: This paper presents a hypothesis on acupunctural PC-9 Zhong chong point, further supported by previous statistical work recorded for the K-1 Yong quan resuscitation point.CONCLUSION: Thanks to the application of the resuscitation maneuver herein proposed on the previously mentioned point, patients with bilateral amputation would have another alternative treatment available in case basic and advanced CPR should fail. 展开更多
关键词 pc-9 Zhong CHONG Alternative emergency point Cardiac ARREST DOUBLE AMPUTEE patients
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微小RNA-338-3p调控信号转导和转录激活因子1对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂耐药肺癌细胞株PC-9/GR中程序性死亡配体1表达和细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 朱洪宇 史志敏 《实用临床医药杂志》 CAS 2022年第4期100-105,共6页
目的 探讨微小RNA-338-3p(miR-338-3p)对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)耐药肺癌细胞株PC-9/GR中程序性死亡配体1(PD-L1)表达和细胞凋亡的影响及相关机制。方法 体外培养PC-9细胞、PC-9/GR细胞,采用0、0.25、0.50、1.00、2... 目的 探讨微小RNA-338-3p(miR-338-3p)对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)耐药肺癌细胞株PC-9/GR中程序性死亡配体1(PD-L1)表达和细胞凋亡的影响及相关机制。方法 体外培养PC-9细胞、PC-9/GR细胞,采用0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00、8.00μmol/L吉非替尼处理确定用药浓度;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中miR-338-3p表达。将PC-9/GR细胞分为对照组、miR-338-3p NC组(转染miR-338-3p NC)、miR-338-3p组(转染miR-338-3p模拟物)和信号转导和转录激活因子1(STAT1)抑制剂组(转染miR-338-3p模拟物+100μmol/L氟达拉滨)。4组均添加1.00μmol/L吉非替尼,转染后qRT-PCR检测细胞中miR-338-3p表达;MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白印迹(WB)法STAT1、p-STAT1、PD-L1、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 当吉非替尼浓度升高至1.00μmol/L时,PC-9细胞与PC-9/GR细胞增殖率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与PC-9细胞相比,PC-9/GR细胞中miR-338-3p表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。转染后,qRT-PCR结果显示,miR-338-3p组、STAT1抑制剂组的miR-338-3p表达水平均高于miR-338-3p NC组、对照组,差异有统计学意义(P>0.05)。与miR-338-3p NC组相比,miR-338-3p组PC-9/GR细胞增殖率及细胞中PD-L1、Bcl-2蛋白表达水平降低,凋亡率及细胞中p-STAT1/STAT1、Bax蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与miR-338-3p组相比,STAT1抑制剂组PC-9/GR细胞增殖率及细胞中PD-L1、Bcl-2蛋白表达水平升高,凋亡率及细胞中p-STAT1/STAT1、Bax蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-338-3p可抑制EGFR-TKI耐药肺癌细胞株PC-9/GR细胞中PD-L1表达,并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与激活STAT1有关。 展开更多
关键词 微小RNA-338-3p 信号转导和转录激活因子1 表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂 耐药 肺癌细胞pc-9 程序性死亡配体1 凋亡
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苯扎贝特和非诺贝特对肺腺癌PC-9细胞增殖和c-myc表达的影响 被引量:1
13
作者 王桂平 梁杰聪 +1 位作者 李智斌 张彦焘 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第21期2931-2936,共6页
目的:研究贝特类药物苯扎贝特和非诺贝特对肺腺癌PC-9细胞增殖和c-myc表达的影响。方法:采用CCK8法检测苯扎贝特和非诺贝特(12.5、25、50、100、20μmol/L)作用48 h对PC-9细胞存活率的影响。另将PC-9细胞分为给药组和对照组,给药组分别... 目的:研究贝特类药物苯扎贝特和非诺贝特对肺腺癌PC-9细胞增殖和c-myc表达的影响。方法:采用CCK8法检测苯扎贝特和非诺贝特(12.5、25、50、100、20μmol/L)作用48 h对PC-9细胞存活率的影响。另将PC-9细胞分为给药组和对照组,给药组分别加入低、中、高浓度(25、50、100μmol/L)的苯扎贝特和非诺贝特,对照组加入二甲基亚砜,作用48 h后,采用流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡情况;荧光定量聚合酶链法(qRT-PCR)检测细胞中c-myc mRNA相对表达量;Western blot法检测细胞中c-myc蛋白相对表达量。结果:上述浓度苯扎贝特作用下PC-9细胞存活率分别为(80.76±3.2)%、(74.35±5.06)%、(62.8±1.23)%、(59.03±1.55)%、(39.8±1.01)%;而非诺贝特作用下PC-9细胞存活率分别为(74.46±1.30)%、(61.91±4.77)%、(48.95±2.8)%、(37.05±1.55)%、(32.49±1.36)%。与对照组比较,苯扎贝特和非诺贝特的中、高浓度组G1期细胞比率均明显增加,苯扎贝特和非诺贝特的低、中、高浓度组的细胞凋亡率均明显增加,c-myc mRNA和蛋白相对表达量均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:苯扎贝特和非诺贝特可抑制PC-9细胞增殖,并下调c-myc表达。 展开更多
关键词 苯扎贝特 非诺贝特 肺腺癌pc-9细胞 半数抑制浓度 c-myc 抑制作用
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探讨嵌合内含子对非小细胞肺癌细胞系PC-9上皮间质转化的影响 被引量:1
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作者 廖亮 杨国辉 《海南医学院学报》 CAS 2021年第2期81-87,共7页
目的:探讨嵌合内含子(chimeric intron)对人非小细胞肺癌PC-9细胞株上皮间质转化(EMT)的影响和作用。方法:以psiCHECK-2质粒为基本框架,插入嵌合内含子构建出psiCHECK-2-Intron双荧光素酶报告基因重组质粒载体,再将psiCHECK-2-Intron和p... 目的:探讨嵌合内含子(chimeric intron)对人非小细胞肺癌PC-9细胞株上皮间质转化(EMT)的影响和作用。方法:以psiCHECK-2质粒为基本框架,插入嵌合内含子构建出psiCHECK-2-Intron双荧光素酶报告基因重组质粒载体,再将psiCHECK-2-Intron和psiCHECK-2分别转染至PC-9细胞中,通过双荧光素酶活性快速检测该重组质粒载体在真核细胞中的表达情况,然后分别应用细胞划痕实验和Matrigel侵袭实验观察PC-9细胞迁移和侵袭能力的变化,再通过qRT-PCR以及Western-Blotting检测EMT相关分子标志物:N-钙黏蛋白(N-cadherin)、β-连环蛋白(β-catenin)以及转录因子Snail表达水平的改变。结果:与对照组相比,Intron组PC-9细胞的侵袭能力明显降低(P<0.001),N-cadherin、β-catenin和Snail等相关分子标志物的表达量明显下调(P<0.001)。结论:嵌合内含子能够抑制非小细胞肺癌PC-9细胞株的EMT转化,其作用机制可能与N-cadherin、β-catenin和Snail表达量下调有关。 展开更多
关键词 psiCHECK-2 嵌合内含子 pc-9 双荧光素酶报告基因 非小细胞肺癌(NSCLC) 上皮间质转化(EMT)
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Effects of chimeric intron on the epithelial-mesenchymal transformation of non-small cell lung cancer PC-9
15
作者 Liang Liao Guo-Hui Yang 《Journal of Hainan Medical University》 2021年第2期1-5,共5页
Objective:To investigate the effects of Intron on the EMT capability of non-small cell lung cancer cell line PC-9.Methods:Firstly,using the psiCHECK-2 plasmid as a basic framework to construct the recombinant plasmid ... Objective:To investigate the effects of Intron on the EMT capability of non-small cell lung cancer cell line PC-9.Methods:Firstly,using the psiCHECK-2 plasmid as a basic framework to construct the recombinant plasmid of psiCHECK-2-Intron dual-luciferase reporter gene;secondly,the psiCHECK-2-Intron and psiCHECK-2 were transfected into PC-9 cells respectively.The migration and invasion abilities of PC-9 cells were analyzed by Matrigel assay.The expression changes of EMT related hallmarks,including N-cadherin,β-catenin and snail,were detected by qRT-PCR and Western Blotting.Results:Compared with the control group,the migration and invasion abilities of PC-9 cells in Intron group significantly decreased(p<0.001).The expression of N-cadherin,β-catenin and snail also down-regulated(p<0.001).Conclusion:The introns could inhibit the EMT of PC-9 cells. 展开更多
关键词 Chimeric intron pc-9 cell line Dual-fluorescent protein reporter gene Non-small cell lung cancer(NSCLC) Epithelial-mesenchymal transformation(EMT)
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广藿香酮对肺癌PC-9细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
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作者 孙满 冯协和 +5 位作者 刘佳玲 刘经健 柯昌虎 李鹏 冯宝栋 李志浩 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2023年第21期2399-2404,共6页
目的:探讨广藿香酮对肺癌PC-9细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移和凋亡的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法:配制不同浓度的广藿香酮(50,100,150,200,250,300,350,400μmol·L^(-1))处理人肺癌PC-9、A549和95D细胞24,48 h,采用CC... 目的:探讨广藿香酮对肺癌PC-9细胞增殖、克隆形成、侵袭、迁移和凋亡的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法:配制不同浓度的广藿香酮(50,100,150,200,250,300,350,400μmol·L^(-1))处理人肺癌PC-9、A549和95D细胞24,48 h,采用CCK-8法检测细胞增殖活力,筛选出其中对广藿香酮最敏感的细胞株并确定低、中、高浓度用于后续实验;将PC-9细胞分为对照组和广藿香酮低、中、高浓度组,采用平板克隆实验、Transwell小室实验、划痕愈合实验和流式细胞术分别检测细胞克隆形成、侵袭、迁移能力和细胞凋亡;采用Western blot检测PC-9细胞中PCNA、Vimentin、MMP-2、MMP-9、Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cleaved-caspase-3蛋白的表达。结果:广藿香酮可有效抑制PC-9、A549和95D细胞增殖能力,且呈剂量和时间依赖性,其中PC-9细胞对广藿香酮最敏感;广藿香酮浓度分别为100,150,200μmol·L^(-1)处理PC-9细胞48 h,与对照组比较,广藿香酮低、中、高浓度组中细胞克隆形成、侵袭和迁移能力显著下降,细胞凋亡率显著上升;Western blot结果显示,与对照组比较,广藿香酮低、中、高浓度组PC-9细胞中PCNA、Vimentin、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白的表达显著减少,Bax、Cleaved-caspase-3蛋白的表达显著增加。结论:广藿香酮能显著抑制肺癌PC-9细胞的增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力,并诱导细胞凋亡,分子机制可能与下调细胞中PCNA、Vimentin、MMP-2、MMP-9和Bcl-2蛋白的表达,上调Bax、Cleaved-caspase-3蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 广藿香酮 肺癌 pc-9细胞 增殖 凋亡
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ZD1839对NK和LAK细胞杀伤人肺腺癌PC-9细胞作用的影响
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作者 温华 孔珺 +1 位作者 康健 于润江 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期531-533,共3页
关键词 ZD1839 NK细胞 LAK细胞 杀伤作用 肺腺癌 pc-9细胞 恶性肿瘤 杀伤细胞
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颈内动脉注射法建立人非小细胞肺癌PC-9细胞脑转移动物模型 被引量:1
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作者 魏水剑 许昌声 +1 位作者 许雄伟 翁秀华 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第23期2909-2912,共4页
目的通过裸鼠颈内动脉注射人非小细胞肺癌PC-9细胞建立肺癌脑转移的实验动物模型。方法7只裸鼠通过手术暴露颈内动脉,注射处于对数生长期的人非小细胞肺癌PC-9(2.0×10^5·mL^-1)细胞100μL。接种后观察裸鼠生活状态并记录其体... 目的通过裸鼠颈内动脉注射人非小细胞肺癌PC-9细胞建立肺癌脑转移的实验动物模型。方法7只裸鼠通过手术暴露颈内动脉,注射处于对数生长期的人非小细胞肺癌PC-9(2.0×10^5·mL^-1)细胞100μL。接种后观察裸鼠生活状态并记录其体质量。建模第24天采用小动物核磁共振(MRI)成像仪活体成像后,取出脑组织、HE染色,评价脑内成瘤情况。结果裸鼠颈内动脉注射PC-9细胞后,14 d左右开始出现体质量下降、行动迟缓、嗜睡、弓背等恶液质现象。通过小动物MRI成像仪检测,7只接种裸鼠中有5只扫描到了脑部异常信号,并通过病理切片进一步证实了肿瘤病灶在脑组织中存在,建模成功率为71%。结论颈内动脉注射法技术简单、实验周期短、成功率高,可用于人非小细胞肺癌PC-9细胞脑转移实验动物模型的建立。小动物MRI成像仪可应用于裸鼠脑内肿瘤活体检测,但其准确度和清晰度仍需进一步提高。 展开更多
关键词 肺癌脑转移 劲内动脉注射 pc-9 小动物核磁共振成像仪
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盐酸埃克替尼对人肺腺癌细胞系PC-9作用的比较蛋白质组学研究 被引量:1
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作者 刘晓丽 李维 +7 位作者 孟夏 张玉萍 明宗娟 史红阳 石婕 钟玉洁 王薇 杨拴盈 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 CAS 2015年第6期10-17,共8页
目的应用比较蛋白质组学方法分析盐酸埃克替尼作用前后人肺腺癌细胞系PC-9细胞相关蛋白的变化,从蛋白质水平探讨埃克替尼的作用机制。方法应用人类EGFR基因突变检测试剂盒和实时定量PCR仪检测PC-9细胞EGFR突变;应用MTT法检测埃克替尼对P... 目的应用比较蛋白质组学方法分析盐酸埃克替尼作用前后人肺腺癌细胞系PC-9细胞相关蛋白的变化,从蛋白质水平探讨埃克替尼的作用机制。方法应用人类EGFR基因突变检测试剂盒和实时定量PCR仪检测PC-9细胞EGFR突变;应用MTT法检测埃克替尼对PC-9细胞增殖的影响;应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分别对未经干预的PC-9细胞总蛋白和经埃克替尼作用的PC-9细胞总蛋白进行分离,获得蛋白质表达谱;应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)结合生物信息学进行蛋白质鉴定。结果 PC-9细胞的EGFR基因存在第19外显子缺失突变;在10-4-10-9M浓度范围内,埃克替尼明显抑制PC-9细胞的生长,且呈浓度依赖;埃克替尼诱导前后表达水平≥1.5倍的蛋白点共有56个。选取差异≥1.7倍的29个蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析,最终鉴定出16种蛋白质。根据功能,这些蛋白可分为代谢酶类、细胞骨架类、分子伴侣、信号传导分子、转录及翻译相关蛋白。结论应用比较蛋白质组学方法初步鉴定了16种蛋白质,这些蛋白质与埃克替尼作用机制密切相关,部分可能成为新的分子治疗靶点。 展开更多
关键词 pc-9细胞 埃克替尼 比较蛋白质组学 生物信息学
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多西他赛和吉非替尼不同时序用药对人肺腺癌细胞株PC-9的作用机制研究 被引量:2
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作者 汤乃望 陈智伟 《现代医学》 2014年第4期347-352,共6页
目的:观察吉非替尼与化疗药物多西他赛按不同时序用药对表皮生长因子受体(EGFR)突变的肺腺癌细胞株的作用,探索最佳时序用药模式。方法:人肺腺癌EGFR基因19号外显子天然缺失的PC-9细胞株,分别经吉非替尼和多西他赛单独或不同时序联合处... 目的:观察吉非替尼与化疗药物多西他赛按不同时序用药对表皮生长因子受体(EGFR)突变的肺腺癌细胞株的作用,探索最佳时序用药模式。方法:人肺腺癌EGFR基因19号外显子天然缺失的PC-9细胞株,分别经吉非替尼和多西他赛单独或不同时序联合处理,采用CCK-8法测定各组细胞增殖抑制,FCM法检测细胞凋亡,免疫印迹法检测EGFR下游信号通路蛋白磷酸化EGFR(pEGFR)、磷酸化氨酸/苏氨酸激酶(pAkt)表达。结果:多西他赛作用24 h序贯吉非替尼作用48 h组的肿瘤细胞凋亡明显,Sub-G1期DNA达到34%±2%,同其他各组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:该序贯用药模式存在增效作用,促细胞凋亡的同时对信号通路中的pEGFR、pAkt有抑制作用。 展开更多
关键词 多西他赛 吉非替尼 pc-9细胞株 信号蛋白 细胞周期 细胞凋亡
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