烯醇化酶1过表达促进肺癌PC14细胞的增殖和迁移

目的:探讨烯醇化酶1(enolase 1, ENO1)表达水平对肺癌PC14细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法:构建ENO1过表达载体-pcDNA3.1/ENO1,利用脂质体LipofectamineTM2000转染对数生长期肺癌细胞PC14,G418筛选ENO1稳转细胞株。用CCK-8法、划痕愈合实验和流式细胞术分别检测过表达ENO1对PC14细胞增殖、迁移和凋亡的影响。结果:成功构建了ENO1过表达细胞模型,与PC14-vehicle和野生型PC14细胞相比,PC14-ENO1细胞中ENO1 m RNA及蛋白表达水平均显著升高(均P<0.05)。PC14-ENO1细胞增殖能力显著高于PC14-vehicle和PC14细胞,差异均有统计学意义(均P<0.05);PC14-ENO1细胞的相对迁移率明显高于pcDNA3.1-vehicle细胞的相对迁移率[(13.26±1.13)%vs(8.46±1.11)%、(7.86±1.00)%,均P<0.05],PC14-ENO1、PC14-vehicle和PC14细胞的凋亡率差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:ENO1过表达促进肺癌PC14细胞的增殖和迁移能力。

染料木黄酮通过ERK及JNK通路抑制人非小细胞肺癌PC14细胞增殖

目的观察染料木黄酮对人非小细胞肺癌PC14细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法 MTT法及集落形成实验检测细胞增殖;蛋白质免疫印迹检测蛋白表达水平。结果染料木黄酮能显著抑制PC14细胞的增殖,其抗增殖活性具有浓度和时间依赖性;MAPK家族特异性抑制剂PD98059、SB203580及SP600125均可显著抑制PC14细胞增殖;染料木黄酮可剂量依赖性地抑制ERK及JNK的磷酸化。结论染料木黄酮可抑制人非小细胞肺癌PC14细胞的增殖,其机制可能与其抑制ERK及JNK的活化有关。

参一胶囊抑制人非小细胞肺癌PC14细胞增殖的信号通路作用机制研究

目的:分析参一胶囊抑制人非小细胞肺癌PC14细胞增殖的信号通路作用机制。方法:采用浓度分别为0 mmol/L、4 mmol/L、8 mmol/L、16 mmol/L的参一胶囊对PC14细胞进行24 h、48 h和72 h的处理,采用流式细胞术和MTT法检测细胞的增殖和凋亡情况。采用5μmol/L的SP600125(JNK抑制剂)与SB203580(ERK抑制剂)对PC14细胞进行30 min处理,并加入不同浓度的参一胶囊继续培养24 h、48 h和72 h培养,观察细胞增殖情况,并检测参一胶囊对JNK和ERK活化的影响。结果:与0 mmol/L浓度组(对照组)比较,PC14细胞采用不同浓度的参一胶囊处理24 h、48 h和72 h后,4 mmol/L组、8 mmol/L组、16 mmol/L组的细胞活力均降低,且随着参一胶囊浓度的增大,细胞活力逐渐降低。浓度为16 mmol/L时,细胞活力最低(P<0.05)。与0 mmol/L浓度组比较,4 mmol/L组、8 mmol/L组、16 mmol/L组的细胞总凋亡率分别为(2.99±1.25)%、(15.37±4.95)%、(19.63±6.00)%,且随着参一胶囊浓度的增大,细胞凋亡率逐渐升高。浓度为16 mmol/L时,细胞凋亡率最高(P<0.05)。与0 mmol/L浓度组比较,处理48 h后,4 mmol/L组、8 mmol/L组、16 mmol/L组PC14细胞处于各期的比例无明显差异(P>0.05)。SP600125与SB203580均能有效抑制参一胶囊诱导的细胞凋亡,单纯加入参一胶囊与加入SP600125或SB203580的组别进行比较,细胞活力均较低(P<0.05)。PC14细胞经过不同浓度的参一胶囊处理后,p-p38MAPK蛋白的表达并未受到药物的影响,但随着药物浓度的增加p-JNK和p-ERK水平呈现降低趋势。结论:参一胶囊通过诱导JNK和ERK表达能够促进其磷酸化,且随着浓度的增大,可导致细胞活力明显降低,细胞凋亡率逐渐升高,p-JNK和p-ERK水平逐渐降低,对非小细胞肺癌PC14细胞增殖有明显的抑制作用。

低浓度阿司匹林通过活化ERK促进肺癌PC14细胞增殖

目的观察阿司匹林对人肺癌细胞PC14增殖的影响并探讨其作用机制。方法以0、1、2、4、8、16 mmol/L阿司匹林处理肺癌PC14和A549细胞,48 h后以MTT法及集落形成实验检测细胞增殖。为检测低浓度阿司匹林对肺癌PC14细胞增殖的影响与ERK活化间的关系,先以10μmol/L PD98059(ERK抑制剂)预处理PC14细胞30 min,随后加入不同浓度阿司匹林继续培养48 h或7 d,以MTT法及集落形成实验检测细胞增殖情况,并以蛋白质免疫印迹法检测低浓度阿司匹林对ERK活化的影响。结果低浓度的阿司匹林可以促进肺癌PC14细胞和A549细胞的增殖并明显增强PC14细胞ERK的活化;而PD98059预处理组能明显地抑制阿司匹林诱导的PC14细胞的增殖和存活。结论低浓度阿司匹林可促进人肺癌PC14细胞增殖,其机制可能与其增强ERK活化有关。

μPC14XX系列解码电路简析与检修总览

μPCI4XX系列解码电路(类似电路包括：μPCI403CD／1420CA／1421CA／1423CA／IX0304CEZZ)是日本NEC公司生产的多制式解码集成电路，它集视频信号处理、彩色信号处理和行／场小信号处理电路于一体。

厄洛替尼对非小细胞肺癌脑转移细胞PC14/B侵袭转移能力的抑制作用

目的研究厄洛替尼对非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移细胞PC14/B侵袭转移能力的抑制作用。方法 PC14/B细胞随机分为对照组及3个浓度实验组(厄洛替尼,1,5,25μmol·L^(-1)),噻唑蓝法和迁移小室法分别检测细胞活力及侵袭能力,免疫印迹法检测基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9、上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏附素、波形蛋白的表达及蛋白激酶B(AKT)磷酸化水平。结果与对照组(0.75±0.09)比较,小中大3个浓度实验组均能显著抑制PC14/B细胞活力,比值分别为(0.63±0.06),(0.52±0.04),(0.38±0.03)。与对照组比较,3个浓度实验组均能显著降低侵袭力,上调E-钙黏附素表达,下调MMP2、MMP9及波形蛋白表达,并降低AKT磷酸化水平。结论厄洛替尼能显著的抑制PC14/B细胞侵袭转移能力,与下调MMPs表达、抑制EMT生成及降低AKT磷酸化水平有关。

阿司匹林通过诱导JNK表达促进其磷酸化抑制肺癌PC14细胞增殖

目的:观察阿司匹林对肺癌PC14细胞的作用及其可能机制。方法:用0,4,8,16 mmol·L^-1阿司匹林处理PC14细胞24,48,72 h,用MTT法和流式细胞术检测细胞增殖及凋亡。为研究其与c-Jun氨基末端激酶(JNK)活化间的关系,先以5μmol·L^-1 SP600125(JNK抑制剂)预处理PC14细胞30 min,加入上述浓度药物继续培养24,48,72 h,检测细胞增殖情况;Western blot检测阿司匹林对JNK活化的影响。结果:MTT结果显示阿司匹林抑制肺癌PC14细胞增殖,同时阿司匹林可引起细胞G0~G1阻滞;阿司匹林通过活化JNK诱导其表达抑制PC14增殖。结论:阿司匹林可抑制PC14细胞增殖,其机制可能与其增强JNK活化及表达有关,这为阿司匹林在肺癌治疗中的进一步应用提供了理论依据。

MSP影响非小细胞肺癌PC14细胞周期和上皮间质转化的研究

目的研究巨噬细胞刺激蛋白(MSP)在无巨噬细胞刺激蛋白受体(RON)的情况下对非小细胞肺癌PC14细胞周期的影响,并分析其对PC14上皮间质转化(EMT)的影响。方法取MSP阴性、RON阴性的PC14细胞系,稳定表达MSP的细胞系PC14-Mst1-pEGFP-N1和稳定表达荧光蛋白的空载质粒细胞系PC14-pEGFPN1,流式细胞术检测各细胞系细胞周期的影响;透射电镜观察在细胞增殖期间细胞之间的连接间隙;逆转录(RT)-PCR和Western blot分别检测E-钙粘蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)mRNA、蛋白表达水平。结果流式细胞术结果显示与PC14、PC14-pEGFP-N1相比,PC14-Mst1-pEGFP-N1细胞G_1/G_0期数量增多,S期与G_2/M期减少;透射电镜发现PC14-Mst1-pEGFP-N1细胞之间的细胞连接较紧密,细胞之间空隙距离缩小;RT-PCR和Western blot检测结果显示,与PC14细胞相比,PC14-Mst1-pEGFP-N1细胞E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平升高,而Vimentin的mRNA、蛋白表达水平降低。结论 MSP在RON阳性的情况下,可使G_1期肺癌细胞增多、分裂相减少,抑制EMT。

PC104串口通信在工程中的应用

本文结合光电计时仪实例,介绍了PC104串口通信原理及其在工程中的实践应用。本文同时提出了一种简单、有效的串口通信方式,并简要说明了相关的通信软件的设计。

CuCl_(14)Pc/Y纳米复合材料的制备、表征及其催化性能的研究

用沸石合成法制备了ＣｕＣｌ１４Ｐｃ/Ｙ分子筛纳米复合材料(简称为ＣｕＣｌ１４Ｐｃ/ｎａｎｏ－Ｙ),考察了合成条件对纳米复合材料的粒度影响．用ＸＲＤ、ＩＣＰ、ＴＧ－ＤＴＡ、ＴＥＭ、ＦＴＩＲ、ＵＶ－ｖｉｓ及催化反应等对其性能作了表征．结果表明:铜酞菁(ＣｕＣｌ１４Ｐｃ)经过水热晶化后,部分被分装在纳米Ｙ型分子筛的空腔中,其催化氧化性能较普通ＣｕＣｌ１４Ｐｃ/Ｙ分子筛复合材料有很大提高．