环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡作用及对PCA3基因表达的影响

目的:探讨环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的作用及对PCA3基因表达的影响。方法:不同浓度环巴胺(1、5、10、15μmol/L)干预LNCaP细胞,以只加入RPMI 1640培养液为空白对照组,分别在不同作用时间(24、48、72h),用MTT法检测其对细胞增殖的抑制、流式细胞术观察细胞凋亡率变化、Hoechst染色观察凋亡细胞形态变化、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)观察对PCA3基因表达的影响。结果:5、10、15μmol/L环巴胺对LNCaP细胞增殖均有显著抑制作用,与空白对照组相比差异有显著性(P<0.01),10μmol/L组于48h达到半数抑制量(IC50);10、15μmol/L组24、48、72hLNCaP细胞的凋亡率分别为37.21%、57.38%、57.98%和21.16%、71.31%、72.90%,与空白对照组相比差异均有显著性(P<0.01)。随着环巴胺浓度增大和作用时间的延长,LNCaP细胞凋亡显著增加。PCA3基因的表达随着环巴胺浓度的上升呈现明显的递减趋势,较空白对照组显著降低(P<0.01)。浓度为10μmol/L时,不同作用时间PCA3基因的表达均极低。结论:环巴胺浓度为10、15μmol/L作用48、72h时能够明显抑制LNCaP细胞的增殖,诱导细胞凋亡,并显著下调LNCaP细胞PCA3基因的表达。

尿液中PCA3 mRNA和融合基因TMPRSS2:ERG mRNA的检测在前列腺癌早期临床诊断中的应用

目的研究前列腺按摩后尿液中PCA3 mRNA联合融合基因TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA的定量检测在早期前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法收集前列腺癌(PCa)患者53例和前列腺增生(BPH)患者37例,收集前列腺按摩后尿液,离心取细胞沉淀物,提取总RNA,用实时荧光定量RT-PCR的方法检测PSA mRNA、PCA3 mRNA和T1E4 mRNA的含量,以PSA mRNA来校正尿液中的前列腺癌细胞。以PCA3 mRNA/PSA mRNA表示PCA3 mRNA的含量,以T1E4 mRNA/PSA mRNA表示融合基因T1E4 mRNA的含量。用ROC曲线对T1E4 mRNA及PCA3 mRNA诊断PCa的性能进行分析。结果尿T1E4 mR-NA/PSA mRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.802(95%CI:0.709～0.895),以0.007为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度分别为56.6%和94.6%。尿PCA3 mRNA/PSA mRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.646(95%CI:0.533～0.758),以0.001为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度为47.2%和73.0%。PCa组PCA3 mRNA(P=0.009)及T1E4 mRNA(P=0.000)的含量均高于BPH组,T1E4 mRNA联合PCA3 mRNA定量检测的敏感度为81.1%,比单独应用PCA3 mRNA和T1E4 mRNA检测的敏感度分别提高了33.9%和24.5%。结论前列腺癌按摩后尿沉渣中可以检测到TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA,联合PCA3 mRNA和T1E4 mRNA两个指标定量检测,可以显著提高检出前列腺癌的敏感度。此联合检测方法可以用于早期的前列腺癌诊断。

尿液PCA3基因检测在前列腺癌诊断中的临床意义

[目的]检测尿液前列腺癌基因3（PCA3）在前列腺癌中的表达水平,探究其在前列腺癌诊断中的临床意义。[方法]纳入2013年5月至2016年5月因血清前列腺特异性抗原（PSA）升高或直肠指诊异常而于我院治疗的138例患者,采集患者前列腺按摩后所得初始尿液并行病理诊断,其中前列腺癌43例、前列腺增生71例,其余泌尿结石24例作为对照组,采用RTC-PCR半定量法测定尿液PCA3表达情况,并据此计算PCA3评分,分析不同PCA3评分截断值对前列腺癌的诊断效能。[结果]三组间尿液PCA3 m RNA水平、尿液PCA3评分差异具有统计学意义（P〈0.05）。前列腺癌尿液PCA3 m RNA水平、尿液PCA3评分显著性高于良性前列腺增生和对照组（P〈0.05）;而良性前列腺增生和对照组间差异无统计学意义（P〉0.05）。PCA3评分截断值35时最佳,其敏感度、特异性分别为86.3%、69.8%。[结论]尿液PCA3基因检测结合合理的尿PCA3评分截断值,能够有效诊断前列腺癌,并减少术前不必要的穿刺活检。

PCA3基因作为前列腺癌特异性标记物的研究进展

随着人口的老龄化和诊断水平的提高，前列腺癌的发病率和检出率越来越高，迫切需要一种对前列腺癌特异性和敏感性较高的标记物提高其早期检出率，PCA3的发现为前列腺癌的早期诊断带来了新的希望。

uPCA3mRNA及PCA3mRNA/D定量检测对PSA灰区前列腺癌诊断的临床研究

目的：研究前列腺按摩后尿液中PCA3mRNA及PCA3mRNA密度的定量检测在前列腺特异性抗原（PSA）灰区前列腺癌（PCa）临床诊断中的应用价值。方法：选择sPSA在4～10ng／ml的BPH或PCa患者200例，收集其前列腺按摩后尿液，离心取细胞沉淀物，提取总RNA，用实时荧光定譬RT—PCR方法检测PSAmRNA、PCA3mRNA的含量，以PSAmRNA来校正尿液中的前列腺癌细胞。以PCA3mRNA／PSAmRNA表示PCA3mRNA的含量，经直肠B超测定前列腺体积，计算PSAD和PCA3mRNA密度（PCA3mRNA／I））。以穿刺活检或术后病理检查结果为金标准，用ROC曲线对PCA3mRNA及PCA3mRNA／D诊断PSA灰区PCa的性能进行评价。结果：PCa组的tPSA、PSAD均较BPH组升高fP〈O．05或0．01）。PCa组PCA3mRNA（P=0．009）含量及PCA3mRNA／D比值（P=0．005）均高于BPH组；以2．01为截断值时．尿PCA3mRNA／D比值诊断PCa的ROC曲线下面积（AUC）为0．903（95％CI：0．790～0．869），其诊断PCa的敏感度和特异度分别为93．3％和66．7％。尿PCA3mRNA／psAmRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积（AUC）为0．841（95％CI：0．666～0．997），以0．27为截断值时，其诊断PCa的敏感度和特异度为86．5％和77．5％。结论：PCA3mRNA含量和PCA3mRNA／D两个指标定量检测，可以显著提高检出PSA灰区PCa的敏感度，可用于早期PCa的诊断。其中PCA3mRNA／D具有更好的诊断效能。