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儿童伯基特淋巴瘤的临床病理学特征及PCBP1表达意义
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作者 吴艳 黄慧 +4 位作者 樊金星 徐红艳 熊枫 曾松涛 杨文萍 《实用癌症杂志》 2024年第7期1210-1213,共4页
目的 探讨儿童伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma, BL)的临床病理学特征及PCBP1表达意义。方法 收集47例儿童BL的临床资料,免疫组化检测PCBP1、MUM1、CD38、c-myc和LMO2,原位杂交检测EBER,荧光原位杂交检测c-myc、11q23.3/11q24.3基因。统... 目的 探讨儿童伯基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma, BL)的临床病理学特征及PCBP1表达意义。方法 收集47例儿童BL的临床资料,免疫组化检测PCBP1、MUM1、CD38、c-myc和LMO2,原位杂交检测EBER,荧光原位杂交检测c-myc、11q23.3/11q24.3基因。统计学分析PCBP1与临床参数及MUM1的表达关系。结果 47例患者中男性36例、女性11例,平均就诊年龄6岁2月(2岁1月~13岁),发病部位腹腔35例、头颈部11例、鼻腔1例;临床分期为Ⅱ期10例、Ⅲ~Ⅳ期37例。免疫表型PCBP1、MUM1、CD38、c-myc和LMO2的阳性表达率分别为100%(47/47)、63.8%(30/47)、100%(47/47)、97.9%(46/47)、0%(0/47);EBER阳性率为27.7%(13/47),c-myc基因重排率为100%(47/47),无11q23.3/11q24.3基因异常(0/15)。47例BL中PCBP1细胞核和细胞质同时阳性表达38例,9例仅为细胞质阳性表达。PCBP1阳性表达模式与性别、发病年龄、发病部位、临床分期、MUM1和EBER表达均无关(P>0.05)。结论 儿童伯基特淋巴瘤主要与伴11q异常的高级别B细胞淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤进行鉴别,联合检测CD38、c-myc、LMO2和EBER具有诊断和鉴别诊断价值。PCBP1在儿童伯基特淋巴瘤中高表达,其表达模式的具体意义和机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 伯基特淋巴瘤 病理学 pcbp1 免疫组织化学
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肺鳞状细胞癌组织PCBP1、GPSM2表达与EMT、临床病理特征和预后的关系
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作者 章方莉 赵欢 刘珊 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第7期1229-1233,共5页
目的 探究肺鳞状细胞癌组织聚(rC)结合蛋白1(PCBP1)、G蛋白信号调控因子2(GPSM2)表达与上皮-间质转化(EMT)、临床病理特征和预后的关系。方法 收集2019年1月至2023年1月联勤保障部队第九八四医院、火箭军特色医学中心及池州市人民医院... 目的 探究肺鳞状细胞癌组织聚(rC)结合蛋白1(PCBP1)、G蛋白信号调控因子2(GPSM2)表达与上皮-间质转化(EMT)、临床病理特征和预后的关系。方法 收集2019年1月至2023年1月联勤保障部队第九八四医院、火箭军特色医学中心及池州市人民医院收治的92例肺鳞状细胞癌患者活检或手术标本。采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测并比较肺鳞状细胞癌组织、癌旁组织PCBP1、GPSM2 mRNA表达,分析肺鳞状细胞癌组织中PCBP1、GPSM2表达与EMT相关蛋白(β-catenin)、临床病理特征关系。随访1年后将患者分为预后良好组和预后不良组,比较两组肺鳞状细胞癌组织中PCBP1、GPSM2 mRNA表达,绘制ROC曲线评估PCBP1、GPSM2表达对肺鳞状细胞癌患者预后不良的预测价值。结果 肺鳞状细胞癌组织中PCBP1表达显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(t=6.502, P<0.05);GPSM2表达显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(t=8.401,P<0.05)。β-catenin胞膜阳性见于肺鳞状细胞癌及癌旁组织,核阳性仅见于癌组织,且为灶状阳性表达。(P<0.05)。spearman相关性分析,肺鳞状细胞癌组织中PCBP1与β-catenin表达呈负相关,GPSM2与β-catenin表达呈正相关(r=-0.3286、0.445,P<0.05)。肺鳞状细胞癌组织中PCBP1低表达、GPSM2高表达与分化程度、N分期、M分期、肺内转移相关(P<0.05)。预后不良组PCBP1mRNA水平低于预后良好组,而GPSM2 mRNA水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(t=6.639、4.768,P<0.05)。ROC曲线显示,PCBP1联合GPSM2预测肺鳞状细胞癌患者预后不良的曲线下面积(AUC)最大,为0.924。结论 肺鳞状细胞癌组织中PCBP1低表达、GPSM2高表达与EMT相关蛋白、肿瘤分化程度、N分期、M分期、肺内转移及预后相关。 展开更多
关键词 肺癌 pcbp1 GPSM2 上皮-间质转化
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PCBP2在压力负荷诱导的小鼠心肌肥厚发生中的作用 被引量:1
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作者 张韫佼 姜兆磊 +2 位作者 司逸 马南 梅举 《中国心血管病研究》 CAS 2016年第10期944-947,共4页
目的 探讨PCBP2在压力负荷诱导的小鼠心肌肥厚发生过程中的作用.方法 选取8~10周龄的雄性C57BL/6小鼠20只,体重23~28 g,随机分为2组,每组各10只,分别施以主动脉缩窄术(TAC组)和假手术(Sham组).术后4周应用超声心动图评价小鼠的心... 目的 探讨PCBP2在压力负荷诱导的小鼠心肌肥厚发生过程中的作用.方法 选取8~10周龄的雄性C57BL/6小鼠20只,体重23~28 g,随机分为2组,每组各10只,分别施以主动脉缩窄术(TAC组)和假手术(Sham组).术后4周应用超声心动图评价小鼠的心脏功能,应用心脏重量与体重之比(HW/BW)定量评价心肌肥厚程度.Real-time PCR检测心肌肥厚标志物Nppa、β-MHC (Myh7)的mRNA水平,同时检测PCBP2 mRNA水平.Western blot方法检测Nppa、β-MHC及PCBP2的蛋白水平.比较分析两组之间的差异.结果 与Sham组相比,TAC组小鼠的心肌肥厚程度明显增加[TAC组(8.23±1.88)mg/g比Sham组(4.89±0.68)mg/g],左心室射血分数[TAC组(41.38±2.22)%比Sham组(59.15±3.58)%]及短轴收缩率[TAC组(33.61±0.92)%比Sham组(43.87±1.37)%]明显降低(P<0.05).TAC组的心肌肥厚标志物Nppa、β-MHC的mRNA水平及蛋白水平均明显高于Sham组(P<0.05).然而,TAC组PCBP2mRNA水平及蛋白水平却明显低于Sham组(P<0.05),与心肌标志物Nppa、β-MHC的变化趋势相反.结论 PCBP2在压力负荷诱导的小鼠心肌肥厚发生过程中起着负性调节作用,上调PCBP2表达可能会抑制心肌肥厚的发展. 展开更多
关键词 pcbp2 心肌肥厚 Nppa β—MHC
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调节PCBP2表达水平对心肌细胞肥大的影响 被引量:1
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作者 张韫佼 梅举 +2 位作者 刘浩 董莉亚 马南 《中国心血管病研究》 CAS 2018年第5期472-476,共5页
目的 研究调节PCBP2表达水平对心肌细胞肥大的影响.方法 分离、培养原代乳鼠心肌细胞;在体外应用儿茶酚胺类物质(血管紧张素Ⅱ、异丙肾上腺素、苯肾上腺素)来诱导心肌细胞.诱导心肌细胞肥大,通过对心肌细胞表面积和心肌肥大标志物的检... 目的 研究调节PCBP2表达水平对心肌细胞肥大的影响.方法 分离、培养原代乳鼠心肌细胞;在体外应用儿茶酚胺类物质(血管紧张素Ⅱ、异丙肾上腺素、苯肾上腺素)来诱导心肌细胞.诱导心肌细胞肥大,通过对心肌细胞表面积和心肌肥大标志物的检测,观察敲低和过表达PCBP2对血管紧张素Ⅱ诱导 的心肌细胞肥大的影响.结果 血管紧张素Ⅱ、异丙肾上腺素、苯肾上腺素均可诱导心肌细胞肥大,使心肌细胞表面积增加.敲低心肌细胞PCBP2后,血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大的程度更大,使心肌细胞表面积显著增大;而过表达心肌细胞PCBP2后,可有效抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大,使心肌细胞表面积显著缩小.结论 PCBP2参与调节心肌细胞肥大,是抑制病理条件下心肌细胞肥大的负性调节因子. 展开更多
关键词 pcbp2 细胞肥大 血管紧张素Ⅱ
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感染MDV鸡羽髓组织中CyP、LASP1和PCBP1蛋白的表达分析
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作者 谭成章 张艳萍 +3 位作者 李志杰 郑永胜 郑惠文 刘长军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期603-606,共4页
本实验室前期的蛋白质组学研究显示,鸡羽髓组织中亲环素蛋白(CyP)、LIM和SH3蛋白1(LASP1)和多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)3种蛋白为马立克氏病病毒(MDV)感染过程中差异表达蛋白。为进一步检测这3种蛋白在病毒感染过程中的表达水平,本研究... 本实验室前期的蛋白质组学研究显示,鸡羽髓组织中亲环素蛋白(CyP)、LIM和SH3蛋白1(LASP1)和多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)3种蛋白为马立克氏病病毒(MDV)感染过程中差异表达蛋白。为进一步检测这3种蛋白在病毒感染过程中的表达水平,本研究以MDV GA强毒株感染SPF鸡,应用荧光定量PCR和westernblot检测病毒感染14 d和21 d后这3种蛋白在羽髓组织中的表达水平。检测结果表明,病毒感染14 d后,羽髓组织中这3种蛋白的mRNA和蛋白表达水平均有不同程度的下调,其中LASP1 mRNA和PCBP1蛋白分别下调62%和48%(p<0.05);在21 d,除CyP蛋白表达基本不变外,其他mRNA和蛋白均不同程度下调,其中LASP1蛋白下调达到46%(p<0.05)。结果表明在两个不同的MDV感染时期,MDV均可以不同程度的抑制羽髓组织中这3种蛋白的表达,本研究为进一步阐释MDV与羽髓组织的相互作用机理提供有价值的参考。 展开更多
关键词 羽髓 马立克氏病病毒 LASP1 CYP pcbp1
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PCBP1基因RNAi序列的鉴定及其干扰效应的初步研究
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作者 马香 曹雪 +1 位作者 杨晓红 何大澄 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期172-177,共6页
以能与PCBP1mRNA特异结合的核苷酸片段(21个碱基对)构建shRNA真核表达载体并稳定转染Hela细胞,通过半定量RT-PCR、免疫印迹和间接免疫荧光实验证实转染细胞中PCBP1的mRNA水平和蛋白质表达水平均被显著抑制.接着,本研究通过测定稳定转染H... 以能与PCBP1mRNA特异结合的核苷酸片段(21个碱基对)构建shRNA真核表达载体并稳定转染Hela细胞,通过半定量RT-PCR、免疫印迹和间接免疫荧光实验证实转染细胞中PCBP1的mRNA水平和蛋白质表达水平均被显著抑制.接着,本研究通过测定稳定转染Hela细胞的生长曲线、血清依赖性生长曲线和软琼脂集落形成率,证明PCBP1的沉默能够显著抑制细胞的生长增殖能力以及克隆形成潜能,揭示PCBP1可能直接或间接参与细胞周期的调控.本研究成功鉴定了沉默PCBP1基因表达的有效干扰片段,为下一步利用该有效干扰片段进行体内研究奠定了基础.同时,本研究的结果将有助于深入认识PCBP1蛋白在细胞周期调控和细胞癌变中的作用机制. 展开更多
关键词 pcbp1 干扰 沉默 RNAI 细胞周期调控
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流感病毒PA蛋白与宿主蛋白PCBP1的相互作用 被引量:3
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作者 赵青青 李俊平 +8 位作者 梁立滨 黄山雨 周陈陈 赵玉辉 王倩 周圆 姜丽 陈化兰 李呈军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第17期3389-3396,共8页
【背景】PA蛋白是流感病毒RNA聚合酶复合体的重要组成部分,在流感病毒基因组的转录和复制过程中发挥重要作用。前期利用酵母双杂交技术(Y2H)筛选与流感病毒PA蛋白相互作用的宿主蛋白,获得多聚胞嘧啶结合蛋白1(poly(r C)-binding protein... 【背景】PA蛋白是流感病毒RNA聚合酶复合体的重要组成部分,在流感病毒基因组的转录和复制过程中发挥重要作用。前期利用酵母双杂交技术(Y2H)筛选与流感病毒PA蛋白相互作用的宿主蛋白,获得多聚胞嘧啶结合蛋白1(poly(r C)-binding protein 1,PCBP1)。【目的】探索PCBP1蛋白与流感病毒PA蛋白的互作关系及其对流感病毒复制的影响,为深入理解流感病毒在宿主体内的复制调控机制提供数据。【方法】将诱饵质粒pGBKT7-PA与筛选到的重组质粒p GADT7-PCBP1以及阴性对照组和阳性对照组按照醋酸锂法分别共转化酵母感受态细胞,并涂布在3种营养缺陷型培养基上,30℃倒置培养5—7 d,观察酵母菌落生长情况和菌落颜色,回交验证PA蛋白与PCBP1蛋白在酵母系统中的相互作用。参照GenBank中录入的PA蛋白和人源PCBP1蛋白的序列,分别设计特异性扩增引物,构建真核重组表达质粒pCAGGS-Flag-PA和pCAGGS-Myc-PCBP1,将这两种真核表达质粒分别单独转染或共同转染HEK293T细胞,于转染48 h后裂解细胞,收获上清,留取少部分作对照,余下的样品逐步加入FLAG单抗和Protein G琼脂糖珠子进行免疫共沉淀(Co-IP),经SDS-PAGE和Western blot检测PA蛋白与PCBP1蛋白在哺乳动物细胞中的相互作用。利用慢病毒包装系统pLVX-IRES-Zs Green1在HEK293T细胞中包装假病毒,将假病毒侵染A549细胞后经超速流式分选构建PCBP1蛋白过表达细胞系,Western blot检测PCBP1过表达情况,然后用流感病毒WSN以0.01 MOI感染该过表达细胞系,于感染后24和48 h收获上清,对上清中的流感病毒进行蚀斑计数。合成PCBP1蛋白的si RNA,转染A549细胞下调PCBP1蛋白的表达,干扰后48 h通过Western blot检测PCBP1蛋白表达下调情况,并以MOI=0.01感染流感病毒WSN,收获感染后24和48 h的上清,进行蚀斑滴定计数。【结果】通过酵母回交验证发现诱饵质粒pGBKT7-PA与重组阳性质粒p GADT7-PCBP1的共转酵母菌落可以在SD/-2、SD/-4、SD/-4/X/A等3种营养缺陷型平板上正常生长,并且能分解底物X-α-Gal,使菌落呈现蓝色,与阳性对照组一致,表明PA蛋白与PCBP1蛋白在酵母系统中存在相互作用。免疫共沉淀试验发现PA蛋白可以将PCBP1蛋白沉淀下来,说明PA蛋白与PCBP1蛋白在哺乳动物细胞中存在相互作用。在PCBP1过表达细胞系中,PCBP1蛋白表达水平显著提高,流感病毒的复制滴度下降;而通过si RNA干扰后,PCBP1表达水平显著下降,流感病毒的复制滴度升高,表明PCBP1对流感病毒复制具有负调控作用。【结论】通过研究发现流感病毒PA蛋白与宿主蛋白PCBP1在酵母细胞和哺乳动物细胞中均存在相互作用,且宿主蛋白PCBP1对流感病毒的复制具有负调控作用。 展开更多
关键词 酵母双杂交 流感病毒 PA蛋白 pcbp1蛋白 蛋白互作
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口蹄疫病毒3C蛋白酶切割宿主蛋白PCBP2 被引量:3
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作者 杨春梅 黄丽 +6 位作者 王海伟 于会彬 李一经 蔡雪辉 于力 唐丽杰 翁长江 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期419-422,共4页
口蹄疫病毒(FMDV)3C蛋白酶(3Cpro)能够通过切割翻译起始因子4G(eIF4G)抑制宿主蛋白合成,而宿主多聚胞嘧啶结合蛋白2(PCBP2)的主要功能之一是参与蛋白质合成。本研究通过western blot检测显示,在FMDV感染BHK-21细胞中PCBP2蛋白水平显著... 口蹄疫病毒(FMDV)3C蛋白酶(3Cpro)能够通过切割翻译起始因子4G(eIF4G)抑制宿主蛋白合成,而宿主多聚胞嘧啶结合蛋白2(PCBP2)的主要功能之一是参与蛋白质合成。本研究通过western blot检测显示,在FMDV感染BHK-21细胞中PCBP2蛋白水平显著降低。为鉴定FMDV 3Cpro是否具有切割PCBP2蛋白的功能,本研究采用免疫共沉淀试验和激光共聚焦检测显示,FMDV 3Cpro和PCBP2在细胞内存在相互作用,并且共定位于细胞质中。进一步研究显示,FMDV 3Cpro能够切割PCBP2,而且具有剂量依赖性。此外,FMDV 3Cpro活性位点突变(H46Y)试验结果表明,FMDV 3Cpro的蛋白酶活性是切割蛋白PCBP2所必需的。FMDV 3Cpro切割PCBP2靶位点序列的鉴定及FMDV 3Cpro切割PCBP2的生物学意义有待深入研究。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 3C蛋白酶 pcbp2 切割
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PCBP1在肿瘤中的作用及研究进展 被引量:1
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作者 张雪甜 狄翠霞 +4 位作者 陈玉红 黄国敏 张莎莎 杨红英 张红 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第21期3811-3816,共6页
多聚结合蛋白1[poly(rC)-binding protein 1,PCBP1]是RNA结合蛋白家族的成员之一,它广泛表达于各种人体正常组织中,并在多种生物学过程中发挥重要的作用,比如从不同水平调控基因表达、病毒的复制、铁离子转运等。同时,PCBP1作为一种潜... 多聚结合蛋白1[poly(rC)-binding protein 1,PCBP1]是RNA结合蛋白家族的成员之一,它广泛表达于各种人体正常组织中,并在多种生物学过程中发挥重要的作用,比如从不同水平调控基因表达、病毒的复制、铁离子转运等。同时,PCBP1作为一种潜在的肿瘤抑制因子,参与多种肿瘤的发生、发展、转移等过程,这为理解肿瘤发生的机制提供了新思路。在本篇综述中,我们简单介绍了PCBP1的结构和功能,并从肿瘤发生发展、侵袭或转移、肿瘤干细胞及肿瘤化疗等方面着重讨论了它在多种肿瘤疾病中可能的作用机制,旨在为临床治疗肿瘤提供一种可靠的靶标基因。 展开更多
关键词 pcbp1 肿瘤 作用机制
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PCBP1 RNAi重组慢病毒包装及筛选其稳定感染的神经细胞系 被引量:1
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作者 王兰英 霍丽蓉 《医学研究杂志》 2012年第2期42-45,共4页
目的 PCBP1是真核细胞内的一种桥梁蛋白,具有多种生物学功能。本研究以慢病毒质粒构建PCBP1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)表达载体,并筛选其稳定感染的神经细胞系,为进一步通过该载体系统探讨PCBP1的具体功能提供有力手... 目的 PCBP1是真核细胞内的一种桥梁蛋白,具有多种生物学功能。本研究以慢病毒质粒构建PCBP1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)表达载体,并筛选其稳定感染的神经细胞系,为进一步通过该载体系统探讨PCBP1的具体功能提供有力手段。方法设计合成针对人及小鼠的PCBP1基因的siRNA茎环结构的正反义序列,退火形成双链,与pLenti-Lox3.7载体的双酶切产物连接,以质粒PCR、酶切和DNA测序等方法,对重组克隆进行鉴定以确认目的片段的插入。之后,采用脂质体转染,将慢病毒载体系统的核心载体pLentiLox3.7和包装质粒共转染293T细胞,收获病毒颗粒,分别感染SH-SY5Y细胞,再通过流式分选获得感染不同病毒颗粒的细胞,提取RNA检测PCBP1 mRNA水平。结果检测结果显示PCBP1 siRNA茎环结构序列正确插入pLentiLox3.7载体,并且成功构建PCBP1基因敲低的神经细胞系。结论 PCBP1基因siRNA表达载体及其基因敲低稳定细胞系的成功构建,为进一步研究该基因在相应细胞中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 pcbp1 RNA干扰 慢病毒载体 神经细胞
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PCBP2在肠癌中的表达及功能意义 被引量:1
11
作者 朱忠诚 余昌俊 +2 位作者 陈昌裕 郑强 康伟彪 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第5期786-789,共4页
目的探讨RNA结合蛋白PCBP2在肠癌组织中的表达及其对肠癌细胞增殖和克隆形成的调节作用。方法采用免疫组化法检测50对肠癌中PCBP2的表达水平及其与临床各病理资料的关系,随访4年观察PCBP2的表达对生存时间的影响。将靶向PCBP2的特异性... 目的探讨RNA结合蛋白PCBP2在肠癌组织中的表达及其对肠癌细胞增殖和克隆形成的调节作用。方法采用免疫组化法检测50对肠癌中PCBP2的表达水平及其与临床各病理资料的关系,随访4年观察PCBP2的表达对生存时间的影响。将靶向PCBP2的特异性小干扰RNA运用脂质体介导转染法转染至肠癌细胞HCT116中,用CCK-8增殖实验和克隆形成实验检测PCBP2对肠癌细胞增殖和克隆形成的影响。结果相较于癌旁正常黏膜,肠癌中PCBP2表达量明显增高(P=0.001),且与淋巴结转移(P=0.031)和肿瘤的分期有关(P=0.045),与患者性别、肿瘤的大小和分化无关(P>0.05);高表达PCBP2的肿瘤患者无论是无复发生存(P=0.039)还是总生存时间(P=0.037)均小于PBCP2低表达的患者。抑制PCBP2的表达后,肠癌细胞的增殖(P<0.05)和克隆形成能力(P<0.05)明显减弱。结论PCBP2在肠癌组织中高表达,PCBP2的高表达与临床分级密切相关,下调PCBP2的表达可以抑制肠癌细胞的增殖和克隆形成,为肠癌预后评估和有效治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 肠癌 RNA结合蛋白 pcbp2 增殖 克隆形成
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PCBP1相关生物功能的研究进展 被引量:1
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作者 贾冰冰 叶梦 霍丽蓉 《医学研究杂志》 2018年第9期176-179,135,共5页
Poly(rC)-结合蛋白[poly(C)-binding proteins,PCBPs]具有高度亲和力,以及与多聚胞嘧啶结合的特殊序列。PCBPs在哺乳动物细胞中广泛表达,其包含4种亚型:PCBP1-4。在真核细胞中,PCBP1通过与基因启动子的特殊位点结合来发挥信号依赖与协... Poly(rC)-结合蛋白[poly(C)-binding proteins,PCBPs]具有高度亲和力,以及与多聚胞嘧啶结合的特殊序列。PCBPs在哺乳动物细胞中广泛表达,其包含4种亚型:PCBP1-4。在真核细胞中,PCBP1通过与基因启动子的特殊位点结合来发挥信号依赖与协调转录调控作用。PCBPs功能多样,通过酵母双杂交研究发现PCBP1在蛋白-RNA,蛋白-蛋白相互作用的层面更是参与多个功能环路,发挥了多种胞内作用。目前PCBP1在各个系统肿瘤,病毒感染,铁离子的转运等方面成为研究热点。本文就PCBP1的重要生物学功能进行相关综述。 展开更多
关键词 pcbp1 KH同源域 DNA MRNA
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LncRNA PCBP1-AS1对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响 被引量:4
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作者 于宇 李晓宁 《蚌埠医学院学报》 CAS 2021年第2期154-158,共5页
目的:探讨长链非编码RNA PCBP1-AS1(LncRNA PCBP1-AS1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、侵袭及凋亡的影响及其可能机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应检测OSCC细胞中PCBP1-AS1的表达水平;采用Lipofectamine 2000将pcDNA-PCBP1-AS... 目的:探讨长链非编码RNA PCBP1-AS1(LncRNA PCBP1-AS1)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、侵袭及凋亡的影响及其可能机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应检测OSCC细胞中PCBP1-AS1的表达水平;采用Lipofectamine 2000将pcDNA-PCBP1-AS1及pcDNA-control转染入口腔鳞癌CAL-27细胞;甲基噻唑基四唑实验检测CAL-27细胞的增殖能力;Transwell实验检测细胞的侵袭能力;流式细胞术检测细胞的凋亡率;蛋白免疫印迹法检测细胞周期依赖蛋白激酶1(CDK1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、Janus激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)信号通路相关蛋白表达。结果:与正常口腔上皮细胞比较,OSCC细胞CAL-27、Tca8113、KB中PCBP1-AS1的表达水平显著降低(P<0.01);PCBP1-AS1过表达可显著抑制CAL-27细胞的增殖、侵袭(P<0.01),促进细胞凋亡(P<0.01);PCBP1-AS1过表达可显著抑制CDK1、MMP-2、Bcl2、p-JAK2、p-STAT3的蛋白表达(P<0.01),而促进Bax的蛋白表达(P<0.01)。结论:PCBP1-AS1过表达可抑制OSCC细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡,其作用可能与抑制JAK2/STAT3信号通路激活有关。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 LncRNA pcbp1-AS1 增殖 侵袭 凋亡 JAK2/STAT3信号通路
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PCBP1对神经毒素6-OHDA诱导的小胶质细胞凋亡的影响
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作者 贾冰冰 叶梦 霍丽蓉 《医学研究杂志》 2019年第6期31-35,共5页
目的观察PCBP1对于神经毒素6-OHDA所介导小胶质细胞BV-2的细胞凋亡的影响.方法将空载质粒pEGFP-N1与PCBP1构建重组质粒,经酶切、纯化、测序鉴定,采用脂质体转染法将PCBP1基因转入小胶质细胞BV-2细胞系24h时,用不同浓度6-OHDA于不同时间... 目的观察PCBP1对于神经毒素6-OHDA所介导小胶质细胞BV-2的细胞凋亡的影响.方法将空载质粒pEGFP-N1与PCBP1构建重组质粒,经酶切、纯化、测序鉴定,采用脂质体转染法将PCBP1基因转入小胶质细胞BV-2细胞系24h时,用不同浓度6-OHDA于不同时间分别刺激BV-2细胞,采用流式细胞仪对细胞周期进行检测.结果经测序鉴定显示成功构建PCBP1的真核表达载体.流式细胞仪检测:同等剂量6-OHDA对转染pEGFP-N1-PCBP1(实验组)和pEGFP-N1(对照组)的BV-2细胞作用不同时间后,实验组细胞的早期凋亡率较对照组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),而两组晚期凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同剂量的6-OHDA对两组细胞作用24h后,实验组较对照组的细胞早期凋亡率明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),而两组晚期凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 PCBP1对6-OHDA所介导的细胞早期凋亡率有一定的影响,有利于PCBP1在帕金森病中进一步研究. 展开更多
关键词 BV-2 pcbp1 细胞凋亡 6-OHDA 转染
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PCBP1对6-OHDA作用的SH-SY5Y细胞凋亡影响的研究
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作者 贾冰冰 霍丽蓉 《医学研究杂志》 2019年第4期24-28,共5页
研究核不均一核糖核蛋白(PCBP1)对6-OHDA作用的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:构建含PCBP1的真核表达载体pEGFP/N1-PCBP1,转染SH-SY5Y细胞,用不同浓度6-OHDA对转染后SH-SY5Y细胞刺激不同时间后,流式细胞仪检测分析细... 研究核不均一核糖核蛋白(PCBP1)对6-OHDA作用的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:构建含PCBP1的真核表达载体pEGFP/N1-PCBP1,转染SH-SY5Y细胞,用不同浓度6-OHDA对转染后SH-SY5Y细胞刺激不同时间后,流式细胞仪检测分析细胞凋亡率。结果:不同浓度的6-OHDA对转染PCBP1重组质粒的实验组和转染空质粒的对照组细胞作用24h后,实验组细胞早期凋亡率低于对照组细胞,差异有统计学意义(P<0.05);但实验组和对照组细胞晚期凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。另外,25μmol/L6-OHDA分别对实验组和对照组细胞作用不同时间后,同样,实验组细胞早期凋亡率低于对照组细胞,差异有统计学意义(P<0.05);该浓度6-OHDA作用不同时间后,实验组和对照组细胞晚期凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:过表达PCBP1基因可抵抗6-OHDA对SH-SY5Y细胞的早期凋亡作用,降低细胞凋亡率。 展开更多
关键词 pcbp1 SY5Y 6-OHDA 细胞凋亡
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PCBP1对6-OHDA作用的HA细胞生长状况的影响
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作者 贾冰冰 叶梦 霍丽蓉 《医学研究杂志》 2019年第5期42-45,共4页
目的探讨核不均一核糖核蛋白(PCBP1)基因对6-OHDA作用的人星形胶质细胞系HA细胞生长状态的影响。方法利用亚克隆方法构建pEGFP/N1-PCBP1重组质粒,经酶切以及DNA测序鉴定,脂质体转染HA细胞24h后,采用不同浓度6-OHDA刺激HA细胞72h。细胞... 目的探讨核不均一核糖核蛋白(PCBP1)基因对6-OHDA作用的人星形胶质细胞系HA细胞生长状态的影响。方法利用亚克隆方法构建pEGFP/N1-PCBP1重组质粒,经酶切以及DNA测序鉴定,脂质体转染HA细胞24h后,采用不同浓度6-OHDA刺激HA细胞72h。细胞计数及CCK8法绘制细胞生长曲线了解细胞增殖情况,倒置显微镜下观察细胞生长状态。结果5、10μmol/L 6-OHDA作用下,转染PCBP1的HA细胞(实验组)较转染对照质粒的HA细胞(对照组)增殖加速(P<0.05);20、30μmol/L 6-OHDA作用下,实验组和对照组的细胞增殖情况比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论体外实验初步证明PCBP1对低浓度6-OHDA作用的HA细胞的生长有一定促进,对神经毒素有明显的抵抗作用。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 基因转染 pcbp1 细胞生长
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Inhibition of apoptosis-regulatory protein Siva-1 reverses multidrug resistance in gastric cancer by targeting PCBP1
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作者 FANBIAO KONG KUN WU +12 位作者 LIMING PANG YULIANG HUANG LEI LI JING XU FEITONG LI YAN QING ZHONGYU WANG XIURONG HUANG SHENG XU XIAOGANG ZHONG ZHOU ZHU XIAOTONG WANG JIANRONG YANG 《Oncology Research》 SCIE 2022年第6期277-288,共12页
Introduction:Siva-1,as a pro-apoptotic protein,has been shown to induce extensive apoptosis in a number of different cell lines.In our previous study,we showed that overexpressed Siva-1 decreased the apoptosis of gast... Introduction:Siva-1,as a pro-apoptotic protein,has been shown to induce extensive apoptosis in a number of different cell lines.In our previous study,we showed that overexpressed Siva-1 decreased the apoptosis of gastric cancer cells.So,we believe that it can also work as an anti-apoptotic protein.The present study aimed to determine the specific role of Siva-1 in anticancer drug resistance in gastric cancer in vivo and in vitro and preliminarily reveal the mechanism.Materials and Methods:A vincristine-resistant MKN-28/VCR gastric cancer cell line with stably downregulated Siva-1 was established.The effect of Siva-1 downregulation on chemotherapeutic drug resistance was assessed by measuring the IC50 and pump rate of doxorubicin.Proliferation,apoptosis of cells,and cell cycle were detected via colony formation assay andflow cytometry,respectively.Additionally,migration and invasion of cells was detected via wound healing and transwell assays.Moreover,we determined in vivo effects of LV-Siva-1-RNAi on tumor size,and apoptotic cells in tumor tissues were detected using TUNEL and hematoxylin and eosin staining.Results:Siva-1 downregulation reduced the pump rate of doxorubicin and enhanced the response to drug treatment.Siva-1 negatively regulated proliferation and promoted apoptosis of cells by potentiality G2-M phase arresting.Inhibition of Siva-1 expression in MKN-28/VCR cells significantly weakened wound healing ability and decreased invasion ability.Poly(C)-binding protein 1(PCBP1)was identified as a Siva-1-interacting protein in yeast two-hybrid screening.Semiquantitative RT-PCR and western blotting revealed that Siva-1 downregulation could inhibit expression of PCBP1,Akt,and NF-κB and eventually decrease the expression of MDR1 and MRP1.Conclusion:The current study demonstrated that the downregulation of Siva-1,which functions as a regulator of MDR1 and MRP1 gene expression in gastric cancer cells by inhibiting PCBP1/Akt/NF-κB signaling pathway expression,enhanced the sensitivity of gastric cancer cells to certain chemotherapies. 展开更多
关键词 Multidrug resistance Gastric cancer Siva-1 pcbp1
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PCBP1在胰腺癌中的临床价值及其对胰腺癌细胞生物学功能的影响 被引量:1
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作者 李仁锋 张旭东 +6 位作者 罗凯 刘中原 郭玉祥 王茂森 黄帅 王向坤 薛建锋 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期1339-1342,共4页
目的探索聚(rC)结合蛋白1(PCBP1)在胰腺导管腺癌(PDAC)中的临床价值及对胰腺癌细胞功能的影响。方法通过GEPIA2、K-MPlotter、GENEMANIA、STRING、LinkedOmics数据库进行差异表达、预后分析、分子网络构建及潜在机制探索,使用胰腺癌细胞... 目的探索聚(rC)结合蛋白1(PCBP1)在胰腺导管腺癌(PDAC)中的临床价值及对胰腺癌细胞功能的影响。方法通过GEPIA2、K-MPlotter、GENEMANIA、STRING、LinkedOmics数据库进行差异表达、预后分析、分子网络构建及潜在机制探索,使用胰腺癌细胞株ASPC-1和Panc-1进行PCBP1的功能实验及铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和核因子样2(NRF2)表达变化检测。结果PCBP1在PDAC中表达显著上调(P<0.05),高表达PCBP1的患者无疾病生存差(Log-rankP<0.05),分层分析发现男性高PCBP1表达预后差(Log-rankP<0.05),低突变状态高PCBP1表达预后差(Log-rankP=0.026),分子互作网络发现PCBP1与聚(rC)结合蛋白3、剪接因子3a亚基2等基因,与异质核核糖核蛋白K、基本同源物增强子等蛋白存在相互作用,富集分析发现PCBP1可能参与到细胞凋亡、坏死性凋亡、程序性细胞死亡等途径,PCBP1表达下调后,细胞迁移、侵袭、增殖能力显著下降(所有P<0.05),GPX4和NRF2表达显著升高。结论PCBP1在PDAC中发挥癌基因作用并通过调控铁死亡通路而影响PDAC预后。 展开更多
关键词 pcbp1 胰腺癌 铁死亡
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LncRNA PCBP1-AS1通过调节PCBP1/miR-199/XBP1通路促进肝癌细胞EMT转化
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作者 贺斌 胡国潢 夏丹 《湖南师范大学学报(医学版)》 2023年第6期35-43,共9页
目的:本研究旨在探讨lncRNA PCBP1-AS1在肝细胞癌EMT转化中的调控作用及其机制,为肝细胞癌的防治提供新靶点。方法:收集了21例肝细胞癌患者的肝癌组织和相应的癌旁正常组织作为细胞检测标本。采用Real-Time PCR检测和蛋白免疫印迹法检... 目的:本研究旨在探讨lncRNA PCBP1-AS1在肝细胞癌EMT转化中的调控作用及其机制,为肝细胞癌的防治提供新靶点。方法:收集了21例肝细胞癌患者的肝癌组织和相应的癌旁正常组织作为细胞检测标本。采用Real-Time PCR检测和蛋白免疫印迹法检测细胞中lncRNA PCBP1-AS1,miR-199,XBP1等基因的表达;使用皮尔逊相关系数法分析lncRNA PCBP1-AS1表达水平与肝细胞癌TNM分期的相关性;并利用生物信息学预测及荧光素酶报告基因实验验证lncRNA PCBP1-AS1与miR-199间的相互作用;通过转染miR-199 mimc或inhibitor构建miR-199 mimc或inhibitor的Hep3B细胞模型;Transwell实验检测细胞的侵袭能力;划痕实验检测细胞的迁移能力;CCK-8法检测细胞活力;LDH释放实验检测细胞毒性。结果:与癌旁组织相比,肝癌组织中LncRNA PCBP1-AS1表达明显增加,其水平与肝细胞癌的TNM分期呈正相关;信息学预测lncRNA PCBP1-AS1与miR-199存在相互作用;miR-199 mimic可以显著减少转染lncRNA PCBP1-AS1-wt报告基因质粒的Hep3B细胞荧光素酶活性;转染lncRNA PCBP1-AS1质粒可明显上调Hep3B细胞中lncRNA PCBP1-AS1、XBP1、Snai1、Vimentin mRNA及蛋白的表达,下调miR-199、E-cadherin mRNA及蛋白的表达,增加Hep3B细胞的活力、迁移、侵袭能力,减少Hep3B细胞LDH的释放,而上述作用可被miR-199 mimic抑制或被miR-199 inhibitor促进。结论:lncRNA PCBP1-AS1通过结合miR-199并减少其表达水平,可上调肝癌细胞中XBP1Snai1、Vimentin的表达,同时下调E-cadherin基因的表达,从而促进了上皮-间充质转化(EMT),是肝细胞癌的潜在靶点。 展开更多
关键词 肝细胞癌 lncRNA pcbp1-AS1 miR-199 XBP1 上皮间充质转化
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PCBP1在神经发育和神经系统疾病中的作用
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作者 马凌云 霍丽蓉 《生命的化学》 CAS 2023年第11期1781-1789,共9页
Poly(rC)结合蛋白1[poly(rC)-binding protein 1,PCBP1]是一种相对分子质量为38000的RNA或DNA结合蛋白。众所周知,PCBP1通过其特有的KH结构,参与了细胞内的转录和转录后调控,包括选择性的pre-mRNA剪接、mRNA稳定性和翻译。PCBP1不仅在... Poly(rC)结合蛋白1[poly(rC)-binding protein 1,PCBP1]是一种相对分子质量为38000的RNA或DNA结合蛋白。众所周知,PCBP1通过其特有的KH结构,参与了细胞内的转录和转录后调控,包括选择性的pre-mRNA剪接、mRNA稳定性和翻译。PCBP1不仅在促进神经干细胞的增殖和调控轴突导向相关基因的表达中至关重要,而且可以调节疾病相关基因的表达来影响神经退行性疾病的病理生理过程,调控细胞增殖和转移基因影响神经肿瘤细胞的行为,影响炎症细胞的活化和炎症反应的程度,以此参与多种神经疾病的发病机制。综上所述,深入研究PCBP1的功能可以帮助我们更好地理解其分子机制,并为神经系统疾病的治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 pcbp1 神经发育 神经疾病
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