2例PCDH19簇集性癫痫患儿的临床特征并文献复习

目的探讨PCDH19簇集性癫痫患儿的临床特征及其基因检测分析,以提高临床医师对该病的早期认识。方法收集2例婴幼儿起病的PCDH19簇集性癫痫患儿的临床资料、基因测序结果进行回顾性分析及随访,并复习相关文献。结果2例患儿均为女童,起病年龄分别为7月龄、19月龄。癫痫发作形式以局灶性发作、GTCS发作为主,均具有丛集性发作的特点,发作频率10余次/d,持续1-2分钟/次,1次病程持续8-10d不等,均伴热敏感性。2例基因变异均为PCDH19杂合突变,其中1例突变位于1号外显子,含有c.1019A>T(p.Asn340Ile)错义突变,1例含有大片段缺失(PCDH19全基因缺失),均为新生突变,父母均为野生型。治疗1例给予丙戊酸钠、左乙拉西坦、氯硝西泮联合维持治疗,1例给予丙戊酸钠单药维持治疗,均得到有效控制,2例患儿急性发作期均使用咪达唑仑静脉泵入治疗,有效改善了丛集性发作。结论婴幼儿起病以热敏感性和丛集性发作为特点的癫痫,需警惕PCDH19簇集性癫痫综合征,应尽早行基因检测。

circ_LARP4调控miR-135a-5p/PCDH9抑制膀胱癌细胞T24生物学行为

目的探讨circ_核糖核蛋白(LARP)4对膀胱癌细胞T24增殖、迁移和凋亡的影响及分子机制。方法选取膀胱癌患者的癌组织及癌旁组织,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_LARP4和miR-135a-5p的表达水平;Western印迹法检测原钙黏蛋白(PCDH)9蛋白表达;将T24细胞随机分为pcDNA-circ_LARP4组、pcDNA组、anti-miR-135a-5p组、anti-miR-NC组、pcDNA-circ_LARP4+miR-135a-5p组;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖抑制率;克隆形成实验检测集落形成数;细胞移动范围采用划痕实验进行检测;采用流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验检测circ_LARP4、miR-135a-5p、PCDH9之间的靶向关系。结果与癌旁组织相比,膀胱癌组织中circ_LARP4和PCDH9蛋白的表达水平显著降低,miR-135a-5p表达水平显著升高(P<0.05)。过表达circ_LARP4或抑制miR-135a-5p表达,PCDH9蛋白表达水平升高,miR-135a-5p表达水平降低,T24增殖抑制率升高,集落形成数减少,迁移距离缩短,细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-135a-5p可逆转circ_LARP4对T24细胞增殖、迁移的抑制和凋亡的诱导作用。circ_LARP4靶向miR-135a-5p,miR-135a-5p靶向PCDH9。结论circ_LARP4通过调控miR-135a-5p/PCDH9轴抑制膀胱癌细胞T24的增殖、迁移,诱导细胞凋亡。

PCDH10基因在多发性骨髓瘤细胞中的作用

目的探讨PCDH10(protocadherin 10)基因对多发性骨髓瘤细胞系RPMI-8226增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法采用脂质体将pcDNA3.1(+)PCDH10及pcDNA3.1(+)质粒稳定转染入骨髓瘤RPMI-8226细胞,分别为PCDH10转染组、空质粒转染组,未转染组作为对照。采用RT-PCR及Western blot检测转染前后PCDH10基因和蛋白的表达,应用MTT法检测转染前后细胞的增殖能力;应用Transwell小室实验检测转染前后细胞的迁移及侵袭能力;应用Western blot检测增殖、迁移和侵袭相关蛋白表达水平。结果 PCDH10基因转染RPMI-8226细胞后,PCDH10在基因和蛋白水平均呈现高表达。MTT结果显示,PCDH10转染组增殖能力较对照组减弱;Transwell实验结果显示PCDH10能抑制瘤细胞的迁移、侵袭能力,PCDH10转染组迁移、侵袭的细胞数分别为(51.00±2.65)、(51.00±8.00)个,与对照组比较显著减少(P<0.05);Western blot检测结果显示PCDH10基因可下调AKT、p-AKT、cyclinD1和MMP-9的表达(P<0.05)。结论 PCDH10基因可能通过下调PI3K/AKT通路活性而抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226的增殖、迁移和侵袭。

甲基化修饰致PCDH10基因在多发性骨髓瘤中沉默

目的研究PCDH10基因在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者及细胞系KM3、RPMI-8226中的甲基化状态,分析甲基化对其沉默的影响。方法常规骨髓穿刺术获取MM患者骨髓样本,培养骨髓瘤细胞系KM3、RPMI-8226,以增生性骨髓象骨髓样本作为对照。RT-PCR检测其中PCDH10基因表达水平,甲基化特异性PCR(methylation-sensitive PCR,MSP)法检测PCDH10基因甲基化状态,通过5-氮杂-2'-脱氧胞苷和组蛋白去乙酰化酶抑制剂[5-aza-2'-deoxycytidine(Aza)and trichostatin A(TSA),A+T]处理MM细胞系,检测药物处理前后PCDH10甲基化状态及表达水平。结果 PCDH10基因在正常人群中表达,但在MM患者骨髓及细胞系中广泛低表达,且77.27%(34/44)的MM患者PCDH10呈甲基化状态。PCDH10基因可经A+T试验逆转甲基化状态并恢复表达。结论 DNA甲基化可能在多发性骨髓瘤的PCDH10基因沉默中发挥作用,从而参与骨髓瘤的发生。

PCDH10基因促进多发性骨髓瘤细胞凋亡及机制研究

目的探讨PCDH10(protocadherin 10)基因诱导多发性骨髓瘤KM3细胞凋亡的作用及相关机制。方法采用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1(+)PCDH10以及pcDNA3.1(+)空质粒稳定转染入人骨髓瘤KM3细胞,以未转染组和转染pcDNA3.1(+)空质粒组作为对照,通过RT-PCR和Western blot检测PCDH10基因和蛋白的表达,应用MTT法检测PCDH10转染后细胞增殖能力;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;应用透射电镜观察细胞凋亡超微结构;应用Western blot检测凋亡相关蛋白表达水平。结果 PCDH10转染KM3细胞后,PCDH10基因和蛋白表达水平均明显升高。MTT结果显示PCDH10转染后细胞增殖明显受到抑制(P<0.05);流式细胞仪结果显示转染PCDH10基因的KM3细胞凋亡率明显增高(P<0.05);透射电镜下观察,PCDH10转染组细胞可以看到胞质空泡样变,核固缩以及明显的凋亡小体,对照组未见明显异常;Western blot结果显示PCDH10能降低Bcl-2的表达,促进P53、Fas的表达(P<0.05)。结论 PCDH10基因有促进多发性骨髓瘤细胞KM3凋亡作用。

胃癌中PCDH8基因启动子甲基化状态及其临床意义

目的:本研究旨在明确胃癌中PCDH8表达水平以及PCDH8基因启动子甲基化情况,分析PCDH8的甲基化差异表达与胃癌临床病理因素的关系。方法:我们通过RT-PCR、Western blot方法检测了65例胃癌组织标本和30例正常胃黏膜标本中PCDH8 mRNA及蛋白的表达,然后分析了其在不同组织中的表达差异。并运用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测PCDH8基因启动子区在不同组织中的甲基化情况,并分析其基因启动子区甲基化情况与胃癌临床病理因素的关系。结果:PCDH8 mRNA、蛋白在正常胃组织中为阳性表达,而在胃癌组织中则表达缺失或下调,其差异有统计学意义(P<0.05)。PCDH8甲基化情况在胃癌组织(55.38%,36/65)与正常组织(0%,0/65)、癌旁组织(41.54%,27/65)与正常组织间存在显著差异(P<0.05)。65例胃癌患者中,其甲基化情况与胃癌患者性别、年龄、肿瘤大小、远处转移及TNM分期均无关(P>0.05)。多因素回归分析结果表明,淋巴结转移为PCDH8基因启动子区甲基化的独立因素(P=0.026,95%CI 1.12～86.84)。结论:PCDH8甲基化及表达情况与胃癌患者肿瘤分化程度及淋巴结转移有关。PCDH8在调节胃癌的发生和转移过程中具有重要作用,它有可能作为胃癌的抑癌基因而发挥作用,并作为标记物对胃癌的诊断、预后判定及治疗提供研究方向。

前列腺癌中PCDH9表达缺失在抑制细胞凋亡、促进肿瘤进展中的作用

目的分析PCDH9在调控前列腺癌细胞周期中的作用,探讨其表达缺失对抑制前列腺癌细胞凋亡、促进肿瘤进展中的分子机制。方法采用免疫组化SP法检测92例前列腺癌和36例良性前列腺组织中PCDH9、STAT3和细胞周期调控基因Cyclin D1和C-myc的表达情况,分析其表达与临床病理特征的关系。结果PCDH9在前列腺癌组织中的阳性率(72.8%)低于良性前列腺组织(100%)(P<0.05);前列腺癌组织中STAT3、Cyclin D1及C-myc的阳性率分别为82.6%、68.5%、64.1%。不同WHO/ISUP分级分组、PSA水平、临床分期的前列腺癌组间PCDH9的阳性率差异有显著性(P<0.05),高WHO/ISUP分级分组、PSA>20 ng/mL及临床分期Ⅲ+Ⅳ期组前列腺癌患者的PCDH9阳性率明显降低。STAT3表达与WHO/ISUP分级分组、PSA水平相关(P<0.05)。PCDH9表达与STAT3、Cyclin D1、C-myc表达均呈负相关(r值分别为-0.216、-0.414、-0.457,P均<0.05)。结论PCDH9表达缺失前列腺癌中存在STAT3过表达,进一步提示STAT3信号通路在介导前列腺癌中PCDH9表达缺失、抑制肿瘤细胞凋亡和促进肿瘤进展中具有重要作用。

胃癌组织中PCDH8基因甲基化及Dnmt1表达的关系

目的探讨PCDH8(protocadherin 8)基因在人胃癌组织中的甲基化状态及其与甲基转移酶1(Dnmt1)表达之间的关系,分析其与胃癌发生、发展的关系。方法取60例手术切除的胃癌组织及其相应癌旁正常胃黏膜组织(距癌组织5 cm以上),以甲基化特异性聚合酶链式反应(methylationspecific PCR,MSP)检测60例胃癌组织及其癌旁正常胃黏膜组织中PCDH8基因启动子区甲基化的状态;以免疫组化SP法分别检测PCDH8基因蛋白及Dnmt1蛋白的表达水平。结果胃癌组织中PCDH8甲基化率为55.0%(33/60),癌旁正常胃黏膜组织中PCDH8的甲基化率为3.3%(2/60),两者比较差异有统计学意义(χ2=38.76,P<0.001),PCDH8甲基化的发生率与患者年龄、性别及TNM分期等差异均无统计学意义(P均>0.05),而与有无淋巴结转移的差异有统计学意义(χ2=17.47,P<0.001)。PCDH8蛋白在癌旁正常胃黏膜组织中的表达(90.0%)明显高于胃癌组织(11.7%)(χ2=73.65,P<0.001),Dnmt1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率(73.3%)明显高于癌旁正常胃黏膜组织的表达率(5.0%)(χ2=58.79,P<0.001)。胃癌组织中PCDH8蛋白与Dnmt1蛋白的表达呈负相关(r=-0.544,P<0.001)。结论PCDH8基因甲基化及Dnmt1的高表达可能参与了胃癌的发生和发展。

钙粘附分子CDH18、PCDH17在人无精子症睾丸中的表达

目的:评价钙粘附家族分子CDH18和PCDH17在人无精子症及正常睾丸组织中的表达及意义。方法:常规病理组织学切片观察人非梗阻性无精子症及正常睾丸组织支持细胞-生精细胞紧密连接改变情况,随后应用包含有多个人钙粘附家族分子在内的cDNA微矩阵芯片对正常人及无精子症睾丸组织中差异表达情况进行研究;依据杂交结果设计Western蛋白印迹验证。结果:37.5%的无精子症睾丸组织出现明显的支持细胞-生精细胞紧密连接失常;部分钙粘附分子表达出现明显改变,其中CDH18及PCDH17表达下调。结论:钙粘附家族分子CDH18及PCDH17可能在无精子症的发生与进展过程中起一定的作用,该作用可能与支持细胞-生精细胞紧密连接失常有关。

PCDH19基因相关癫痫四例临床与遗传学分析

目的 探讨PCDHl9基因突变阳性的癫痫患儿的基因型和临床表型特点。方法 收集2015年10月至2018年10月在湖南省儿童医院神经内科住院的癫痫发作具有热敏感性及从集性发作特点的女性癫痫患儿,收集患儿及其家系成员的临床资料和外周血DNA进行遗传病全外显子组基因测序。结果 4例患儿基因筛查结果均提示PCDH19基因突变阳性,均为1号外显子上的新发突变。首次发作均为发热诱发,有热敏感和丛集性的特点,发作形式多样,包括局灶性发作、全面性强直-阵挛发作及部分继发全面性发作,发作时间较短,仅1例出现过癫痫持续状态,智力发育正常或轻中度落后,其中1例可疑孤独症样表现,1例有明显好动、躁动等行为异常。结论 PCDHl9是继SCNlA之后另一个热敏感相关性癫痫的重要致病基因,以新生突变为主,发作具有热敏感和丛集性的特点,且多数发作持续时间短,1min以内,很少持续状态,常有智力发育落后,部分可有孤独症样或多动、躁动等精神行为异常表现。早期基因检测对于明确病情、判断预后及遗传咨询均至关重要。

肺癌A549细胞中PCDH8表达及对细胞增殖、迁移、侵袭的影响

目的探讨原钙黏蛋白8(PCDH8)表达对肺癌A549细胞增殖、侵袭、迁移和AKT/GSK3β/β-catenin信号通路的影响。方法体外培养A549细胞,采用脂质体介导质粒pcDNA3.1-PCDH8(PCDH8转染组)与pcDNA3.1空质粒(阴性对照组)转染A549细胞,另设不做任何处理的空白对照组,采用实时荧光定量PCR(QPCR)和Western blotting验证转染效率。采用MTT法、克隆形成实验、Transwell法和划痕实验检测细胞增殖、集落形成、侵袭和迁移能力。Western blotting检测各组中AKT、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)、β-catenin、GSK3β、p-GSK-3β(Ser9)蛋白的表达。结果A549细胞中PCDH8表达水平为0.34±0.10,显著低于BEAS-2B细胞的0.98±0.08;PCDH8转染组PCDH8基因和蛋白相对表达量为2.26±0.31和1.06±0.17,明显高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。24、48、72、96 h PCDH8转染组细胞增殖率分别为(62.07±4.25)%、(106.90±5.14)%、(159.87±7.46)%、(213.79±8.28)%,明显低于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PCDH8转染组A549细胞集落形成数目为(255±38)个、24 h愈合率为(31.89±7.62)%、24 h侵袭细胞数为(217±39)个,均低于空白对照组的和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PCDH8转染组p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)、β-catenin、p-GSK-3β(Ser9)蛋白表达量明显低于空白对照组和阴性对照组。PCDH8与AKT具有相同的细胞定位。结论PCDH8在肺癌中低表达,上调PCDH8表达可通过抑制AKT/GSK3β/β-catenin信号通路的激活进而降低肺癌细胞增殖、成瘤、迁移、侵袭能力。

PCDH8基因甲基化在食管癌诊断中的价值及其与患者临床特征的关系

目的探讨食管癌(EC)组织中PCDH8基因启动子的甲基化状态与蛋白表达情况及其与患者临床特征的关系。方法选取74例EC患者的EC组织标本及其相应的癌旁正常组织标本。采用免疫组织化学染色法检测PCDH8蛋白的表达情况,采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测PCDH8基因启动子的甲基化水平,并分析其与患者临床特征的关系。结果癌旁组织中可见大量细胞的细胞膜被染成黄色。EC组织中的PCDH8蛋白的高表达率为28.4%(21/74),明显低于癌旁正常组织的64.9%(48/74),差异有统计学意义(P﹤0.01)。EC组织中PCDH8基因启动子甲基化率为87.8%(65/74),明显高于癌旁正常组织的16.2%(12/74),差异有统计学意义(P﹤0.01)。PCDH8蛋白的高表达情况与EC患者的年龄、性别、肿瘤直径、TNM分期、WHO组织学分级和淋巴结转移情况均无关(P﹥0.05)。PCDH8基因启动子甲基化率与EC患者的年龄、性别、肿瘤直径、WHO组织学分级、淋巴结转移均无关(P﹥0.05),但是与EC患者的TNM分期有关(P﹤0.05)。结论 PCDH8基因启动子甲基化与食管癌的发生、发展密切相关,可作为诊断和治疗食管癌的潜在靶点。

5-氮杂-2'-脱氧胞苷对胰腺癌细胞株Capan-2增殖及其PCDH8基因表达的影响

目的探讨5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'deoxycytidine,5-Aza-CdR)对胰腺癌细胞株增殖的影响以及对其原钙黏附素(protocadherin 8,PCDH8)基因表达的影响。方法用不同浓度的5-Aza-CdR处理胰腺癌Capan-2细胞。阴性对照组不加药,根据5-Aza-CdR处理的剂量分为:0.08μmol/L组、0.40μmol/L组、2.00μmol/L组、10μmol/L组、50μmol/L组,检测细胞的生长情况;采用RT-PCR和Western Blot检测各组胰腺癌细胞PCDH8基因和蛋白的表达。结果5-Aza-CdR对胰腺癌细胞具有明显的抑制作用,且随着浓度的增加,抑制率逐渐增强(P<0.01);但是随着时间的增加,抑制率逐渐下降(P<0.01)。5-Aza-CdR和吉西他滨联用对胰腺癌细胞的抑制作用和诱导凋亡作用最强(P<0.05,P<0.01)。5-Aza-CdR能显著增加胰腺癌细胞PCDH8基因和PCDH8蛋白的表达水平,且随着浓度的升高,增加作用越明显(P<0.01)。结论5-Aza-CdR能够抑制胰腺癌细胞的增殖,增加PCDH8基因的表达,与吉西他滨联合后抑制作用更强。

过表达PCDH10基因对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨过表达原钙黏蛋白10(PCDH10)基因对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响及机制。方法:采用qRT-PCR检测不同结直肠癌细胞(SW620、HT29、LoVo、HCT116)及正常结肠上皮细胞NCM460中PCDH10 mRNA的表达水平。以含pcDNA-PCDH10过表达载体质粒的慢病毒感染结直肠癌SW620细胞(PCDH10组),以感染含空载质粒的慢病毒为阴性对照,未感染细胞为空白对照。采用qRT-PCR和Western blot法检测上述3组细胞的转染效率,MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移能力,采用Western blot法检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平。结果:PCDH10在结直肠癌细胞中的表达水平均低于正常结肠上皮细胞NCM460(P<0.05)。与二对照组相比,感染组SW620细胞中PCDH10 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞增殖和迁移受抑,同时细胞中PCNA和MMP-2蛋白的表达水平降低(P<0.05)。结论:PCDH10基因在结直肠癌细胞中呈低表达,过表达PCDH10能够抑制结直肠癌SW620细胞增殖和迁移能力,该过程可能与抑制PCNA和MMP-2蛋白的表达有关。

白山毛桃根提取物通过调控miR-182-5p/PCDH10表达抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭

目的探讨白山毛桃根提取物是否调控miR-182-5p/PCDH10表达影响非小细胞肺癌细胞生物学行为。方法设置对照组(无白山毛桃根提取物)、白山毛桃根提取物组(浓度40 mg/ml)、白山毛桃根提取物+miR-182-5p组、白山毛桃根提取物+miR-NC组、anti-miR-182-5p组、anti-miR-NC组。四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)法检测各组细胞增殖。Transwell检测各组细胞的侵袭和迁移;qRT-PCR检测非小细胞肺癌H1299细胞中miR-182-5p和PCDH10 mRNA的表达;蛋白免疫印迹检测PCDH10蛋白表达。双荧光素酶报告实验检测荧光活性。结果相较于对照组,白山毛桃根提取物组非小细胞肺癌H1299细胞迁移和侵袭数量显著减少(P<0.05),PCDH10 mRNA和蛋白表达升高,miR-182-5p表达显著降低(P<0.05);miR-182-5p可靶向调控PCDH10的表达。抑制miR-182-5p表达后,迁移和侵袭的H1299细胞数量显著降低(P<0.05)。miR-182-5p过表达可逆转白山毛桃根提取物对非小细胞肺癌的影响。结论白山毛桃根提取物可能通过下调miR-182-5p/PCDH10轴对非小细胞肺癌H1299细胞发挥抗增殖、抗迁移和抗侵袭作用。

PCDH9、BAG-1S蛋白表达对非小细胞肺癌新辅助化疗预后状况的影响

目的:探讨原钙黏附蛋白9(Protocadherin 9,PCDH9)、抗凋亡蛋白BAG-1S(Bcl-2associated athanogenel,BAG-1S)表达对非小细胞肺癌(NSCLC)新辅助化疗预后状况的影响。方法:选取2008年1月-2009年12月本院肿瘤科收治的非小细胞肺癌手术联合新辅助化疗患者178例作为研究对象,术中采集非小细胞肺癌组织标本(178例)和癌旁组织标本(154例),采用免疫组化法检测组织标本中PCDH9、BAG-1S蛋白的表达。结果:非小细胞肺癌组织PCDH9蛋白阳性表达率明显低于癌旁组织,BAG-1S蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织,比较差异均有统计学意义(P<0.05);PCDH9蛋白阳性表达者总生存时间和无进展生存期均明显高于PCDH9蛋白阴性表达者,BAG-1S阳性者总生存时间和无进展生存期均明显低于BAG-1S蛋白阴性表达者,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:PCDH9、BAG-1S蛋白表达可预示非小细胞肺癌新辅助化疗预后状况,其中PCDH9阳性表达越高,BAG-1S阳性表达越低,疾病预后越佳。

前列腺癌患者血清PCDH10甲基化检测及临床意义

目的:通过测定前列腺癌患者及前列腺增生患者血清中PCDH10基因启动子甲基化水平,探讨其作为一种肿瘤标志物对前列腺癌诊断的临床价值。方法:收集20例前列腺癌患者和20例前列腺增生患者的血清样本作为研究对象,应用甲基化特异性聚合酶链式反映(MSP)方法,测定血清样本中PCDH10基因甲基化状态,同时分析20例前列腺癌患者的临床资料。结果:20例前列腺癌患者中8例检出PCDH10基因甲基化,20例前列腺增生患者中无一例检出PCDH10基因甲基化。将检测结果阳性和阴性两类前列腺癌患者的拎出啊资料进行统计学分析。发现2类患者在年龄、前列腺特异性抗原(PSA值)、以及临床Jewett分期的差别无统计学意义(P>0.05),但是在Gleason评分的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PCDH10基因启动子甲基化仅出现在前列腺癌患者血清中,而在前列腺增生(BPH)患者中未出现,并且PCDH10基因出现甲基化的比率与前列腺癌患者的Gleason评分呈正相关性。

前列腺癌患者血清PCDH8基因甲基化率的实验研究

目的:通过测定前列腺癌及前列腺增生患者血清中PCDH8基因启动子甲基化水平,分析两类病人的临床病理资料,探讨前列腺癌病人血清中PCDH8基因启动子甲基化水平是否具有肿瘤标记物的价值。方法:收集30例前列腺癌患者和30例前列腺增生患者的血清样本作为研究对象,提取60例血清样本中的基因组DNA,并使用PCR法扩增出PCDH8基因并进行修饰,测定血清样本中PCDH8基因甲基化状态,对所有前列腺癌患者的临床资料进行统计学分析。结果:30例前列腺癌患者血清样本中有12例检出PCDH8基因启动子甲基化,30例前列腺增生患者均未检出PCDH8基因启动子甲基化。将检测结果阳性和阴性两类前列腺癌患者的临床资料进行统计学分析。分析结果显示,PCDH8基因启动子甲基化水平与Gleason评分有统计学意义,而与患者年龄、病理分期、PSA值、以及淋巴转移等指标,并无明显统计学差异。结论:30例前列腺癌患者血清中有12例出现PCDH8基因甲基化,而30例前列腺增生患者血清中均未出现PCDH8基因甲基化,并且PCDH8基因出现甲基化的比率与前列腺癌患者的Gleason评分呈正相关性,而与其他临床系数如患者年龄、前列腺大小、PSA值、临床分期等无明显相关性。血液中PCDH8基因启动子甲基化水平的检测具有很高的特异性和较低的敏感性,现阶段不适合作为肿瘤标记物,但是对于前列腺癌的早期发现和前列腺癌病人预后的评估有一定帮助作用。

甲状腺肿瘤患者PCDH8基因启动子的甲基化状态及其临床意义

目的探讨甲状腺肿瘤患者PCDH8基因启动子的甲基化状态及其临床意义。方法选取48例甲状腺乳头状癌(PTC)、43例甲状腺滤泡状腺瘤、44例结节性甲状腺肿和45例正常甲状腺组织标本。采用焦磷酸测序法检测各组标本PCDH8基因的启动子甲基化状态,采用免疫组化检测各组标本的PCDH8蛋白表达情况,应用McNemar检验焦磷酸测序和免疫组化检测结果的一致性,并分析PCDH8基因启动子甲基化与PTC临床病理特征的关系。结果PTC的PCDH8基因启动子甲基化率高于正常甲状腺组织,PCDH8基因蛋白表达阳性率低于正常甲状腺组织(均P<0.05),而甲状腺滤泡状腺瘤、结节性甲状腺肿及正常甲状腺组织的上述指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。PCDH8基因发生甲基化与基因蛋白表达缺失在PTC的重合率为89.18%,两者的一致性检验结果差异无统计学意义(P>0.05)。PTC患者的PCDH8基因启动子甲基化与淋巴结转移有相关性(P<0.05),而与其年龄、性别、促甲状腺激素水平、抗甲状腺球蛋白抗体水平及肿瘤部位无明显关系(均P>0.05)。结论PTC中PCDH8基因启动子甲基化率高,PCDH8蛋白表达水平低,PCDH8基因甲基化与蛋白表达调控具有一定的关联性,且PTC患者的PCDH8基因启动子甲基化与淋巴结转移有相关性。

PCDH10、Neuritin、E-钙黏附素在胃癌患者组织中的表达及作用研究

目的研究PCDH10、Neuritin、E-钙黏附素在胃癌患者组织中的表达及作用。方法选取2017年1月至2019年11月西安市第四医院手术后胃癌组织标本和癌旁组织标本各80例,使用免疫组化染色检测PCDH10、Neuritin、E-钙黏附素阳性表达,并对胃癌患者按照TNM分期进行划分,分析PCDH10、Neuritin、E-钙黏附素表达和胃癌患者分期程度的关系。结果癌旁组织PCDH10表达高于胃癌组织,Neuritin、E-钙黏附素表达低于胃癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ期患者胃癌组织PCDH10表达低于Ⅰ~Ⅱ期,Neuritin、E-钙黏附素表达高于Ⅰ~Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移者中PCDH10表达低于无淋巴结转移者,而Neuritin、E-钙黏附素表达高于无淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Neuritin、E-钙黏附素在胃癌组织中处于高表达,而PCDH10处于低表达,其能够作为判断胃癌生物学行为的重要指标;将三者联合起来检测,可为临床上提高胃癌患者筛查及评估肿瘤的进展程度、判断预后提供一个新的手段。