宫颈癌患者淋巴结转移的危险因素分析及血清TFF3、AIF-1、S100-A11、DKK1预测价值分析

目的 探讨宫颈癌患者淋巴结转移的危险因素分析及血清三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)、同种异体移植物炎性因子-1(allograft inflammatory factor-1,AIF-1)、S100钙结合蛋白-A11(S100 calcium-binding protein-A11,S100-A11)、Wnt通路抑制因子Dickkopf-1(Wnt pathway inhibitor Dickkopf-1,DKK1)的预测价值。方法 选择2021年1月—2023年1月本院收治的71例宫颈癌患者作为研究对象,根据患者有无盆腔淋巴结转移分为淋巴结转移阳性组(28例)和淋巴结转移阴性组(43例)两组。收集两组患者临床病理特征,并检测血清TFF3、AIF-1、S100-A11、DKK1水平。结果 单因素分析显示,FIGO分期、宫旁浸润、肌层浸润、血清TFF3、S100-A11、DKK1是患者发生宫颈癌淋巴结转移的影响因素(P<0.05)。与年龄、分化程度、肿瘤大小、组织学类型、脉管浸润及血清AIF-1无关(P>0.05);Logistic多元回归分析显示,FIGO分期、宫旁浸润、肌层浸润及血清TFF3是影响宫颈癌淋巴结转移的独立因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,TFF3对淋巴结转移有中等预测价值(AUC=0.649),明显大于机会参考线下面积(P<0.05)。而AIF-1、S100-A11、DKK1对淋巴结转移无预测价值(AUC分别为0.477、0.517、0.524),与机会参考线下面积比较无统计学意义(P>0.05)。结论 FIGO分期高、宫旁浸润、肌层浸润、血清TFF3异常升高是宫颈癌淋巴结转移的危险因素,血清TFF3有望成为预测宫颈癌淋巴结转移的新标志物;血清AIF-1、S100-A11、DKK1对宫颈癌淋巴结转移的预测效能不理想。

肿瘤侵袭相关基因EMP3、PCDH-γ-A11在脑胶质瘤中的表达研究

目的探讨肿瘤侵袭相关基因EMP3和PCDH-γ-A11的mRNA在原发人脑胶质瘤组织中的表达情况,分析其表达变化与胶质瘤恶性程度的关系。方法分别应用传统的RT-PCR和SYBR Green实时定量PCR检测方法检测EMP3和PCDH-γ-A11基因mRNA在30例原发胶质瘤(WHO分级:Ⅱ级10例,Ⅲ级10例,Ⅳ级10例)和10例正常脑组织中的表达情况。统计学分析两个基因在胶质瘤和正常脑组织间的表达差异,并进一步结合临床资料分析不同分级、不同性别和不同年龄组间的表达差异。结果在各级别胶质瘤中EMP3和PCDH-γ-A11的mRNA与正常脑组织相比均表达下调,并具有显著意义(P<0.01);EMP3在Ⅱ级和Ⅳ级及Ⅲ级和Ⅳ级胶质瘤间的表达也存在统计学差异(P<0.05);PCDH-γ-A11在Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级胶质瘤相互之间的表达无统计学差异(P>0.05)。结论各级别胶质瘤中EMP3和PCDH-γ-A11的mRNA表达均显著低于正常脑组织,并随胶质瘤恶性程度的增加表达量逐渐降低。EMP3基因的表达下调与胶质瘤的恶性程度密切相关。

长链非编码RNA ABHD11-AS1促进胃癌细胞糖酵解并加速肿瘤恶性进展

目的探讨长链非编码RNA ABHD11-AS1对胃癌细胞糖酵解的影响及其作用的分子机制。方法分别将空载质粒pcDNA-Vector和过表达质粒pcDNA-ABHD11-AS1转染入ABHD11-AS1低表达的MKN45和MGC803胃癌细胞中,构建过表达组(pcDNA-ABHD11-AS1)和空载质粒对照组胃癌细胞株。运用CCK-8法检测细胞的增殖活性并绘制生长曲线,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell检测细胞迁移、侵袭能力,葡萄糖摄取实验及乳酸生成实验检测细胞糖酵解水平的变化;LncMAP数据库分析查找ABHD11-AS1可能调控的转录因子,查阅文献进行分析挑选候选转录因子,Western blot明确ABHD11-AS1是否影响候选转录因子的表达量。结果与对照组相比,转染pcDNA-ABHD11-AS1后,MGC803和MKN45胃癌细胞中ABHD11-AS1基因表达量明显上升(P<0.01),CCK8和成克隆实验表明细胞增殖加快(P<0.05),克隆形成能力增强,Tanswell实验结果证实细胞迁移(11±2 vs 27±3;17±4 vs 28±3,P<0.01)、侵袭(15±3 vs 26±2;10±1 vs 35±2,P<0.01)作用增强;上调ABHD11-AS1后,胃癌细胞葡萄糖摄取及乳酸生成增多(P<0.05)。分析数据库结果显示ABHD11-AS1可能调控经典糖酵解相关基因c-Myc,Western blot结果证实上调ABHD11-AS1后,c-Myc表达量随之升高。结论ABHD11-AS1通过上调c-Myc促进胃癌细胞内的糖酵解,并加速胃癌进展。

LncRNA ABHD11-AS1在Erastin诱导的胰腺癌细胞铁死亡中的作用及其机制

目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)α/β-水解酶结构域蛋白11的反义链1(α/β-hydrolase domain containing protein 11-antisense strand 1,ABHD11-AS1)在Erastin诱导的胰腺癌细胞铁死亡中的作用及其潜在机制。方法:通过GEPIA平台分析ABHD11-AS1在胰腺癌中的表达和患者预后。采用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测人胰腺癌PANC1、MIApaca-2和PaTu8988细胞中ABHD11-AS1表达,CCK8法计算Erastin半数抑制浓度(IC_(50))。在PANC1细胞中过表达ABHD11-AS1,分别转染pcDNA3.1、pcDNA3.1-ABHD11-AS1质粒;在PaTu8988细胞中干扰ABHD11-AS1表达,分别转染siControl、siRNA1、siRNA2,qRT-PCR检测转染效率,分别予以对照(0μmol/L Erastin)、Erastin(IC_(50)浓度)处理,CCK8法检测细胞活性,ELISA法检测丙二醛和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量;另在pcDNA3.1-ABHD11-AS1和siRNA1组加入Erastin的同时加入铁死亡挽救剂Ferrostatin-1,坏死挽救剂Necrostatin-1或凋亡挽救剂Z-VAD-FMK,CCK8法检测细胞活性;免疫印迹法检测5组胰腺癌细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)以及磷酸化mTOR(p-mTOR)表达水平。结果:胰腺癌组织中ABHD11-AS1表达水平明显高于癌旁组织,高表达ABHD11-AS1组患者预后较差(P<0.05)。ABHD11-AS1相对表达量由低到高依次是人胰腺癌PANC1、MIApaca-2和PaTu8988细胞,Erasin IC_(50)趋势与ABHD11-AS1表达量相同,依次是2.245、11.760、17.120μmol/L。与pcDNA3.1组相比,pcDNA3.1-ABHD11-AS1组细胞活性及GSH含量明显增高,而丙二醛含量明显降低(P<0.05);与siControl组相比,siRNA1组和siRNA2组细胞活性及GSH含量明显降低,丙二醛含量明显增高(P均<0.05)。仅Ferrostatin-1可以挽救pcDNA3.1-ABHD11-AS1和siRNA1组细胞活性(P<0.05)。过表达ABHD11-AS1可促进mTOR活化,增强GPX4表达(P<0.05);而干扰ABHD11-AS1则相反。结论:LncRNA ABHD11-AS1可通过活化mTOR促进GPX4表达,从而促进胰腺癌细胞铁死亡抵抗。

血清TFF3、AIF-1和S100-A11水平在宫颈癌早期诊断和预后评估中的临床价值

目的观察血清三叶因子3(TFF3)、同种异体移植物炎性因子-1(AIF-1)和S100钙结合蛋白-A11(S100-A11)水平在宫颈癌早期辅助诊断和预后评估中的临床价值。方法选取2019年1月至2020年6月在该院确诊的128例宫颈癌患者作为宫颈癌组,选取同期在该院确诊的75例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者作为CIN组,选取同期在该院行健康体检的45例女性作为健康对照组。观察各组血清TFF3、AIF-1和S100-A11水平变化情况,血清TFF3、AIF-1和S100-A11水平在宫颈癌中的诊断效能,以及其与临床指标和预后的关系。结果宫颈癌组血清TFF3、AIF-1和S100-A11水平均明显高于CIN组和健康对照组,CIN组血清TFF3、AIF-1和S100-A11水平均明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清TFF3、AIF-1和S100-A11水平在诊断宫颈癌中具有较高的价值,3项指标联合检测的灵敏度为89.1%,特异度为97.3%,受试者工作特征曲线下面积为0.968,明显高于TFF3(Z=4.627,P<0.05)、AIF-1(Z=4.164,P<0.05)和S100-A11(Z=5.217,P<0.05)单独检测。低分化、人乳头瘤病毒(HPV)阳性、临床分期为Ⅱ期和有淋巴结转移宫颈癌患者血清TFF3、AIF-1和S100-A11水平均明显高于高中分化、HPV阴性、临床分期为Ⅰ期和无淋巴结转移宫颈癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05);而不同年龄、病理类型、肿瘤最大径、浸润肌层深度、脉管浸润和神经浸润宫颈癌患者血清TFF3、AIF-1和S100-A11水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。随访1年后死亡组患者血清TFF3、AIF-1和S100-A11水平均明显高于存活组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清TFF3、AIF-1和S100-A11水平在宫颈癌诊断和预后评估中具有较高的临床价值,3项指标联合检测有助于提高宫颈癌的辅助诊断效能。

沉默HOXA11-AS靶向miR-766-3p对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)同源异形盒基因A11反义RNA(HOXA11-AS)靶向微小RNA-766-3p(miR-766-3p)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响.方法以100μg/mL的ox-LDL处理人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)24 h建立细胞损伤模型.将HUVEC分为对照(con)组、ox-LDL组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-HOXA11-AS组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-766-3p组、ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-miR-NC组、ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-miR-766-3p组.RT-qPCR检测HOXA11-AS和miR-766-3p表达.流式细胞术分析细胞凋亡.试剂盒检测LDH释放量、胞内SOD活性.ELISA法检测培养液中TNF-α、IL-1β水平.双荧光素酶报告实验确定HOXA11-AS和miR-766-3p的靶向关系.结果与con组比较,ox-LDL组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量、HOXA11-AS表达量以及培养液中TNF-α、IL-1β水平显著升高(P<0.05),SOD活性、miR-766-3p表达量显著降低(P<0.05).与ox-LDL+si-NC组比较,ox-LDL+si-HOXA11-AS组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量以及培养液中TNF-α、IL-1β水平显著降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05).与ox-LDL+miR-NC组比较,ox-LDL+miR-766-3p组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量以及培养液中TNF-α、IL-1β水平显著降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05).miR-766-3p是HOXA11-AS的直接靶点.与ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-miR-NC组比较,ox-LDL+si-HOXA11-AS+anti-miR-766-3p组HUVEC细胞凋亡率、LDH释放量以及培养液中TNF-α、IL-1β水平显著升高(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05).结论沉默HOXA11-AS通过靶向上调miR-766-3p表达能够抑制ox-LDL诱导的血管内皮细胞凋亡、氧化应激和炎性反应.

HOXA11-AS/miR-149-3p通路在肺鳞状细胞癌中的作用及机制研究

目的探究长链非编码RNA HOXA11-AS在肺鳞状细胞癌发生过程中的确切机制。方法采用定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测HOXA11-AS、miR-149-3p和SPT16表达变化。并通过MTT法检测细胞活力。双荧光素酶报告基因检测miR-149-3p与HOXA11-AS或SPT16的互作关系。结果在肺鳞状细胞癌组织和细胞中HOXA11-AS和SPT16的表达升高,而miR-149-3p的表达降低。miR-149-3p是HOXA11-AS的作用靶点,而SPT16是miR-149-3p的作用靶点。HOXA11-AS的敲低抑制了肺鳞状细胞癌细胞的增殖能力,而使用miR-149-3p抑制剂可拮抗HOXA11-AS敲低对肺鳞状细胞癌细胞增殖的抑制作用。此外,上调SPT16可减弱si-HOXA11-AS介导的肺鳞状细胞癌细胞的抗增殖作用。结论HOXA11-AS的敲低可通过调控miR-149-3p/SPT16轴在肺鳞状细胞癌中发挥抑癌作用。

黑素瘤相关抗原-A9和-A11在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨黑素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-A9和-A11在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况,分析其与食管癌患者临床病理学特征及其预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2010年9月至2010年11月住院手术切除的食管癌组织及距癌组织边缘5 cm以上且病理诊断证实为正常组织的癌旁组织标本各60例,同时选取5例该院前列腺癌住院患者术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测食管鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A9和-A11蛋白的表达。结果:食管鳞状细胞癌组织中MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的阳性表达率分别为45%(27/60)和66.67%(40/60),而相应的癌旁组织未发现MAGE-A9和-A11蛋白的表达。MAGE-A9蛋白的表达与食管鳞状细胞癌患者的年龄、临床分期、肿瘤大小、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与组织学分级相关(P<0.05);MAGE-A11蛋白表达与食管鳞状细胞癌患者的年龄、组织学分级、淋巴转移均无相关性(P>0.05),但与临床分期、肿瘤大小呈正相关(P<0.05)。Log-Rank检验显示,MAGE-A9(P=0.037)和-A11(P=0.039)蛋白表达阳性的食管鳞状细胞癌患者和贲门腺癌患者的生存期均显著低于其表达阴性的患者。Cox多因素分析提示,MAGE-A9(P=0.026)和MAGE-A11(P=0.038)蛋白表达、组织学分级(P=0.026)、临床分期(P=0.008)及淋巴结转移(P=0.010)可作为整体生存的独立预后因素。结论:MAGE-A9和-A11蛋白是食管鳞状细胞癌的特异性抗原,似可作为食管鳞状细胞癌预后不良的预测指标。

MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨黑色素瘤相关抗原A9(MAGE-A9)、MAGE-A11-和Ki67在喉鳞状细胞癌组织中的表达,并分析其与喉鳞状细胞癌患者临床病理学特征及预后的关系。方法:选取河北医科大学第四医院2012-2014年住院手术切除的喉鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织标本各73例,同时选取该院3例前列腺癌住院患者去势治疗术后的睾丸组织作为阳性对照,应用免疫组织化学法检测喉鳞状细胞癌组织及相应癌旁组织中MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67蛋白的表达水平。结果:喉鳞状细胞癌组织中MAGE-A9、MAGE-A11蛋白和Ki67的表达率[47.94%(35/73)]、[49.32%(36/73)]和[46.58%(34/73)]均显著高于相应的癌旁组织[0(0/75)(P<0.01)],MAGE-A9和MAGE-A11蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者的临床分期和淋巴转移有关(P<0.05),Ki67LI表达与喉鳞状细胞癌患者的肿瘤大小、临床分期和淋巴转移有关(P<0.05)。相关性分析显示,MAGE-A9和MAGE-A11蛋白表达均与Ki67指数呈正相关(r=0.258,P=0.027;r=0.672,P=0.001)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67LI蛋白高表达阳性患者的生存率均显著低于低表达的患者,而且MAGE-A9和Ki67LI均高表达或MAGE-A11和Ki67LI均高表达患者的生存期均显著低于其单一高表达或均低表达的患者(P<0.05或P<0.01)。单因素和多因素Cox回归模型分析进一步提示,MAGE-A9蛋白和MAGE-A11蛋白是喉鳞状细胞癌患者总体生存的独立预后因素(P<0.05)。结论:MAGE-A9、MAGE-A11和Ki67是喉鳞状细胞癌的肿瘤相关抗原,其可作为预测喉鳞状细胞癌患者的预后指标。

HOXA11-AS在胃癌中的表达及其功能研究

目的探讨长链非编码HOXA11-AS在胃癌及癌旁正常组织中的表达及其在胃癌细胞系中的生物学功能。方法实时荧光定量PCR验证胃癌组织及胃癌细胞系中HOXA11-AS的表达量;核质分离实验及荧光定量PCR检测胃癌细胞胞核与胞质中HOXA11-AS的分布量,明确HOXA11-AS的亚细胞定位;用慢病毒构建HOXA11-AS过表达质粒,筛选稳转株进行细胞功能学实验:细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期、细胞迁移能力、细胞侵袭能力。结果 HOXA11-AS在胃癌组织及胃癌细胞的表达量升高(P<0.05);核质分离实验表明,HOXA11-AS在胃癌细胞胞质的分布量高于细胞核(P<0.05);过表达lncRNA HOXA11-AS可促进胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力(P<0.05),抑制细胞凋亡及阻滞细胞周期。结论 HOXA11-AS在胃癌中高表达,可促进胃癌细胞的肿瘤细胞行为,可作为胃癌治疗的候选分子靶点。

全身辐射损伤大鼠伤口中性粒细胞凋亡及W_(11)-a_(12)促进伤口愈合的作用

目的:促愈合药W_11-a_12能显著提高伤口中性粒细胞(neutrophils,Neu)的数量和功能,观察合并全身放射损伤大鼠伤口Neu凋亡率的变化,并观察促伤口愈合药W_11-a_12的作用。方法:实验于1999-05/10在解放军第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所完成。将健康成年大鼠随机分为单纯创伤组和6Gy放射复合伤组。6Gy放射复合伤组动物在接受6Gyγ射线全身照射后立即在背部致创伤,伤口局部给予生理盐水或W_11-a_12(每伤口10mg)。从埋入伤口的海绵分离伤口细胞,分别采用TUNEL法、Westemblot及RT-PCR方法检测伤口Neu凋亡率、Neu中Bcl-2蛋白、mRNA含量,透射电镜观察伤口凋亡的Neu。结果:伤后3,6,12,24及48h6Gy放射复合伤组伤口Neu凋亡率变化曲线呈“∧”型,而单纯创伤组呈“∨”型。伤后6,12,24h6Gy放射复合伤组Neu凋亡率分别为(9.90±2.26)%,(12.50±1.83)%和18.16±5.56)%,显(著高于单纯创伤组的(6.44±1.96)%,(2.74±1.22)%和(7.38±2.10)%(t=2.01,2.81,2.52,P<0.05),同时Neu中Bcl-2蛋白及mRNA表达均低于单纯创伤组。W_11-a_12使用组与对照组伤口Neu凋亡率无明显差异。结论:全身电离辐射后伤口Neu凋亡率增加且变化规律与单纯创伤组明显不一致,这与电离辐射引起伤口愈合延缓有关。

贲门腺癌中DDX11-AS1的异常表达及其作用

目的探讨长链非编码RNA DDX11-AS1在贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma,GCA)中的表达及其作用。方法应用qRT-PCR法检测GCA中DDX11-AS1的表达;应用MTS、Transwell侵袭实验检测DDX11-AS1异常表达对胃癌BGC823细胞增殖、侵袭能力的影响。结果DDX11-AS1在GCA组织中表达明显上调,DDX11-AS1高表达与GCA患者淋巴结转移、浸润深度、TNM分期有关(P均<0.01),并与生存期密切相关(P<0.01),且可作为GCA患者独立的预后因素(P<0.01)。DDX11-AS1在胃癌细胞中高表达,敲低DDX11-AS1表达明显抑制胃癌细胞BGC823的增殖及侵袭能力(P<0.01)。结论DDX11-AS1在GCA中可能作为癌基因发挥作用,其高表达促进了GCA的发生、发展,并有望成为GCA患者预后评估的候选分子标志物。

基因芯片技术筛查并鉴定乳腺癌细胞中MAGE-A11的相关基因

目的:应用高通量基因芯片技术筛查乳腺癌细胞中黑色素瘤相关抗原(melanoma antigen,MAGE)-A11的相关基因,并从数量和功能两方面加以验证。方法:采用基因芯片技术筛选乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231和BT-549中MAGE-A11下游靶基因的m RNA的差异表达,对有代表性的基因进行了聚类分析,并利用q RT-PCR进行验证。以CCK-8法、细胞划痕实验和Transwell实验检测MAGE-A11对乳腺癌细胞中增殖、迁移和侵袭功能的影响。结果:3种乳腺癌细胞过表达MAGE-A11导致1 608个下游基因差异表达,主要涉及蛋白泛素化、细胞增殖和凋亡、肿瘤侵袭和转移。基因芯片中典型高表达的ZNF-451、CENPTJ、CDK13、API5和LMO7在q RT-PCR在验证结果中也显著高于对照组(P<0.01),低表达的SHPRH、PML、MARK2、LIMA1和ANGPTL4也显著低于对照组(P<0.01)。转染MAGE-A11组的乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231和BT-549 72 h的增殖能力较对照组明显增强(均P<0.01),培养48 h后与对照组相比,转染MAGE-A11的3种细胞划痕出现明显愈合(P<0.05或P<0.01),穿膜数较对照组明显增多(均P<0.01)。结论:在MCF-7、MDA-MB-231和BT-549三种乳腺癌细胞中筛查到涉及蛋白泛素化、细胞增殖和凋亡、肿瘤侵袭和迁移等生物功能众多的表达差异基因,对其中10种典型差异基因从数量和功能两方面进行验证,并得到初步确认。

SLC7A11-AS1调控miR-429对口腔鳞癌细胞CAL-27细胞增殖、凋亡及迁移的影响

目的探讨SLC7A11-AS1对口腔鳞癌细胞CAL-27细胞增殖、凋亡及迁移的影响及分子机制.方法收集29例口腔鳞癌患者癌组织及癌旁组织;CAL-27细胞分为si-NC组、si-SLC7A11-AS1组、水SLC7A11-AS1+anti-miR-NC组、si-SLC7A11-AS1+anti-miR429组。实时荧光定暈PCR(RT-qPCR)检测SLC7A11-AS1和miR-429表达水平;平板克隆实验检测克隆形成细胞数;流式细胞术检测细胞凋亡率;Transwell检测细胞迁移数;蛋内质印迹(Western hlot)法检测蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证SLC7A11-AS1和miR-429的靶向关系.结果与癌旁组织相比,口腔鳞癌组织中SLC7A11-AS1表达水平升高,miR-429表达水平降低(P<0.05)。抑制SLC7A11-AS1表达后,CAL-27细胞克隆形成数减少,细胞凋亡率升高,迁移细胞数减少,Bax表达水平升高,Bcl-2表达水平降低(P<0.05)。同时抑制SLC7A11-AS1和miR-429表达后,CAL-27细胞克隆形成数增加,细胞凋亡率降低,迁移细胞数增加,Bax表达水平降低,Bcl-2表达水平升高(P<0.05).结论抑制SLC7A11-AS1表达可通过上调miR-429抑制口腔鳞癌细胞CAL-27增殖及迁移,且促进CAL-27细胞凋亡.

右美托咪定通过调控LncRNA HOXA11-AS/miR-515-5p抑制膀胱癌细胞增殖并诱导细胞凋亡

目的探讨右美托咪定(Dex)通过调控长链非编码RNA HOXA11-AS(LncRNA HOXA11-AS)/微小RNA-515-5p(miR-515-5p)对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法采用不同浓度(25、50、100、200 ng/ml)的Dex处理膀胱癌T24细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率;流式细胞术检测Dex对T24细胞凋亡率的影响;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Dex对HOXA11-AS、miR-515-5p表达水平的影响。利用脂质体方法分别将si-HOXA11-AS及阴性对照(si-NC)、miR-515-5p模拟物(mimics)及阴性对照(miR-NC)转染至T24细胞,通过MTT、流式细胞术检测细胞增殖与凋亡能力变化。双荧光素酶报告实验确定HOXA11-AS与miR-515-5p的靶向关系。Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(C-caspase)-3表达量。结果Dex可明显提高细胞凋亡率及C-caspase-3、miR-515-5p的表达水平(P<0.05),明显降低HOXA11-AS的表达水平(P<0.05);抑制HOXA11-AS表达与miR-515-5p过表达后,细胞存活率及CyclinD1的表达水平明显降低(P<0.05),细胞凋亡率及C-caspase-3的表达水平明显升高(P<0.05);双荧光素酶报告实验证明HOXA11-AS可靶向结合miR-515-5p;HOXA11-AS过表达可逆转Dex对T24细胞增殖和凋亡的影响;miR-515-5p过表达可逆转HOXA11-AS过表达对Dex处理的T24细胞增殖和凋亡的影响。结论Dex通过下调HOXA11-AS及上调miR-515-5p抑制膀胱癌细胞增殖并诱导细胞凋亡。

循环外泌体介导的lncRNA HOXA11-AS通过上调SOX4促进血管内皮细胞增殖

目的:探索循环外泌体对内皮细胞增殖能力的影响及其可能机制。方法:收集支架内再狭窄患者(n=199)及对照组患者(n=32)血浆并提取外泌体,用患者血浆外泌体干预经雷帕霉素诱导的内皮细胞增殖抑制模型,MTT法测各组细胞的增殖能力,Western blot检测细胞中PCNA、Ki67的表达情况。基因芯片检测两组外泌体中差异的非编码RNA,qRT-PCR检测lncRNA HOXA11-AS表达情况。结果:与对照组比,雷帕霉素组细胞增殖能力减弱;PCNA、Ki67表达减少(P<0.05);相比于雷帕霉素组,对照组外泌体干预后内皮细胞增殖能力增强;PCNA、Ki67表达增加(P<0.05)。芯片结果显示lncRNA HOXA11-AS在ISR外泌体中表达减少(P<0.05)。pHOXA11-AS可以促进内皮细胞的增殖能力,增加细胞中PCNA、Ki67、SOX4的表达(P<0.05)。结论:血浆外泌体中的lncRNA HOXA11-AS可能是通过上调内皮细胞中SOX4的表达,增加内皮细胞的增殖能力。

SLC7A11-AS1调控miR-429对口腔鳞癌细胞CAL-27细胞的影响

分析口腔鳞癌患者通过 SLC7A11-AS1 对 miR-429 实施调控对 CAL-27 细胞迁移、凋亡、增殖的影响。 方法:分析对象为 2016.1~2019.12 期间在我院实施治疗的口腔鳞癌患者 29 例,对其癌旁组织和癌细胞进行收集,以 CAl-27 细胞为依据分成 4 组,si-SLC7A11-AS1 组、si-NC 组、anti-miR-429+si-SLC7A11-ASz1 组、anti-miR-NC+si-SLC7A11-AS1 组,了解 SLC7A11-AS1 对 miR-429 实施调控对 CAL-27 细胞迁移、凋亡、增殖的影响。 结果:对比癌旁组织,癌组织 miR-429 水平明显降低,SLC7A11 -AS1 水平明显较高,P<0.05;对 SLC7A11-AS1 进行抑制后,迁移细胞明显减少,细胞凋亡率明显提升,P<0.05;对 miR-429 和SLC7A11-AS1 进行抑制后,迁移细胞明显增加,细胞凋亡率明显降低,P<0.05。 结论:对于口腔鳞癌患者,对SLC7A11-AS1 进行抑制,通过 miR-429 的上调,可对 CAL-27 迁移、增殖进行抑制,同时对细胞凋亡可发挥促进作用。

长链非编码RNA HOXA11-AS在肝癌组织中的表达及临床意义

目的探讨长链非编码RNA HOXA11-AS在肝癌组织中的表达及临床意义。方法纳入106例原发性肝癌患者,qRT-PCR检测肝癌及癌旁正常组织样本中长链非编码RNA HOXA11-AS的表达量,并分析其与患者临床病理特征及预后的相关性。结果长链非编码RNA HOXA11-AS在肝癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织(2.97±0.81 vs.0.83±0.22,P<0.05);其在不同AJCC分期及是否发生淋巴结转移的肝癌组织中的表达量间的差异均有统计学意义(均P<0.05);长链非编码RNA HOXA11-AS高表达组3年生存率明显低于低表达组(22.22% vs.53.33%,P<0.05);长链非编码RNA HOXA11-AS高表达、AJCC分期增高是影响原发性肝癌患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论肝癌组织中长链非编码RNA HOXA11-AS表达上调,其可能参与肝癌的发生发展,可成为肝癌患者预后评估的新指标。

HOXA11-AS在恶性肿瘤中的表达及作用研究

长链非编码RNA HOXA11反义RNA(HOXA11-AS)是一种近年来发现的lncRNA。最早使用探针在小鼠胚胎c DNA文库中发现HOXA11-AS,随后在人宫颈癌、胃癌及神经胶质瘤等恶性肿瘤细胞中相继被学者发现并在其中发挥重要作用。HOXA11-AS能够通过与miRNA和EZH2蛋白等相互作用促进肿瘤的增殖、转移等恶性生物学行为,被认为是致癌性lncRNA。HOXA11-AS的发现为肿瘤的防治提供了新的思路。

长链非编码RNA HOXA11-AS在结直肠癌患者血清中的表达和意义

目的利用实时荧光定量PCR建立一种检测血清HOXA11-AS的方法,并探索其在诊断、治疗结直肠癌中的效果及预后价值。方法应用实时荧光定量PCR法检测53例结直肠癌初诊患者、16例结直肠癌手术患者、42例结直肠息肉患者、20例结直肠癌术后复发或转移患者和40例体检健康者血清HOXA11-AS水平。结果结直肠癌初诊患者HOXA11-AS水平M(P25~P75)为2.69(1.69~3.49),显著高于结直肠息肉患者(t=6.622,P<0.05)和体检健康者(t=6.535,P<0.05);结直肠癌术后复发或转移患者HOXA11-AS水平显著高于结直肠癌初诊患者(t=7.141,P<0.05)和结直肠癌手术患者(t=4.673,P<0.05);追踪16例患者血清HOXA11-AS表达各异,但总体术后较术前呈下降的趋势(t=3.666,P=0.000);HOXA11-AS高表达组患者的总体生存率明显低于HOXA11-AS低表达组患者(t=2.463,P<0.05);结直肠癌初诊患者受试者工作特征曲线下面积为0.8672,将1.495设为临界值时,HOXA11-AS作为结直肠癌血清诊断标志物的灵敏度为80.00%,特异度为83.02%,阳性预测值为82.49%,阴性预测值为85.59%。结论实时荧光定量PCR法检测血清HOXA11-AS稳定可靠,HOXA11-AS可作为新型分子诊断标志物,辅助诊断结直肠癌,评价治疗效果和评估预后。