Effects of UVB on the expression of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in dinoflagellate Prorocentrum donghaiense Lu

PCNA has been considered as a useful marker for the estimation of growth rates of marine phytoplankton at the species level. Since dinoflagellates are noted for having many prokaryotic features in that they are the only eukaryotes to have permanently condensed chromosomes as well as lacking histones and a nucleosome, the sensitivity to UVB radiation and the validity of PCNA as a maker of growth rate in dinoflagellate need to be evaluated. Prorocentrum donghaiense Lu was investigated to valuate the UVB sensitivity in relation to cellular and molecular aspects of PCNA as a growth indicator. The effects of UVB radiation on PCNA were studied using the methods of western blots technology and whole-cell immunoflurescence with one mono-antibody. UVB changed the cell morphology, halted the growth and increased the cell size, even caused cell death to a certain extent after treatment with UVB radiation in P. donghaiense. Compared with the control, treating the algal cultures in exponential phases with UVB radiation for 24 h caused chromatin release and increases in protein levels of PCNA.

甜菜基因BvPCNA-like的克隆及结构分析

本文旨在利用分子标记位点克隆糖用甜菜(Beta vulgaris L.)中的BvPCNA-like基因的基因组位点及完整的编码区(Coding sequence,CDS),并对该CDS在基因组中的结构进行分析与验证,为进一步研究该基因的功能奠定基础。利用甜菜EST-SSR标记BvRE049,以糖用甜菜种质‘DP02’(标记检测阳性)为材料,通过电子克隆策略获得标记相关基因的基因组位点,进而克隆基因CDS片段;预测CDS在基因组中的外显子和内含子个数及内含子剪接位点分布范围,并设计PCR引物组合对以上结构进行验证;同时用在线生物信息学分析软件分析该基因产物的基本特征。克隆获得了甜菜基因BvPCNA-like的编码区,全长1164 bp,编码产物含387个氨基酸,分子量约42736.25 Da,等电点约4.46,在基因组中,该基因由3个内含子分隔成4个外显子。本研究克隆了BvPCNA-like基因的完整编码区,预测并验证了其在基因组位点中的结构,为进一步深入研究BvPCNA-like基因在甜菜体内的功能奠定了基础。

脑肿瘤细胞PCNA和Ki-67表达的对比观察

观察45例（4组）原发性脑肿瘤的免疫组化研究发现：增殖细胞核抗原（PCNA）和Ki67抗原（Ki－67）阳性率均为100％，两种阳性细胞密度均随肿瘤恶性程度增加而升高，并与肿瘤体积呈正相关，两种阳性细胞密度间也呈正相关，各肿瘤组PCNA阳性细胞密度均高于同组Ki－67阳性细胞密度。提示PCNA和Ki－67表达水平均能较客观地反应脑肿瘤的增殖速度和恶性程度。PCNA能用于石蜡切片是检测增殖期细胞更实用的标记物。

粘附分子CD44、CD44V3、CD44V6及PCNA在人骨肉瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨骨肉瘤组织中CD44、CD44V3、CD44V6及PCNA的表达情况及其临床意义。方法 应用免疫组织化学方法对 40例骨肉瘤、15例骨软骨瘤中CD44、CD44V3、CD44V6及PCNA的表达情况进行检测 ,并结合临床资料分析其与肿瘤恶性程度和预后的关系。结果 ①骨肉瘤中CD44、CD44V3、CD44V6阳性表达率明显高于骨软骨瘤。②骨肉瘤中CD44V6阳性表达率明显高于CD44、CD44V3。③骨肉瘤组织中CD44V6的表达与临床病理类型无关 ,与预后无关。④CD44及CD44V6的表达与PCNA的关系密切 ,尤以CD44V6更能反映肿瘤的恶性程度。结论 CD44V6可作为骨肿瘤恶性表型的标志 。

LRIG3基因沉默对神经胶质瘤细胞系GL15增殖及PCNA和Ki-67表达的影响

背景与目的:富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白3(leucine-rich repeats and immunoglobin-like domains3,LRIG3)是LRIG基因家族成员之一,在多种肿瘤中均有表达下调,但其作用尚不明了。本研究旨在探讨RNA干扰沉默LRIG3基因表达对神经胶质瘤细胞系GL15增殖及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和Ki-67表达的影响及其机制。方法:用携带U6启动子和LRIG3特异性短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列的质粒载体pGenesil2-LRIG3-shRNA1、pGenesil2-LRIG3-shRNA2及含非特异性shRNA编码序列的对照质粒pGenesil2-negative shRNA(neg)转染胶质瘤细胞系GL15,G418筛选出稳定株,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测LRIG3表达的改变,应用噻唑蓝(MTT)法检测稳定转染后对GL15细胞增殖的影响,应用免疫组化SABC法检测对照组和实验组GL15细胞中PCNA和Ki-67的表达。结果:shRNA1及shRNA2组细胞LRIG3 mRNA水平与对照组相比分别下降了52.4%和63.8%,LRIG3蛋白水平分别下降了50.9%和67.4%。MTT结果显示实验组细胞增殖率高于对照组。对照组细胞PCNA阳性率为(35.40±5.69)%,shRNA1及shRNA2组细胞PCNA阳性率分别为(72.13±5.64)%和(81.93±5.23)%,差异均有统计学意义(P<0.01)。Ki-67阳性率在对照组细胞为(49.73±5.73)%,shRNA1及shRNA2组细胞分别为(82.27±5.50)%和(88.67±3.52)%,差异均有统计学意义(P<0.01)。Ki-67表达与PCNA表达呈正相关(r=0.932,P<0.001)。结论:下调LRIG3基因表达可促进胶质瘤细胞的增殖。

人脑胶质瘤组织中nm23与PCNA的表达及其意义

背景与目的:脑胶质瘤极少发生颅外转移,死亡的主要原因是肿瘤的原位复发,因此,通过检测基因表达进一步了解其生物学特性很重要。本研究旨在探讨胶质瘤组织中肿瘤转移抑制基因(non-metastasis,nm23)、增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)的表达及其对肿瘤恶性程度的判断、患者预后评估和复发预测的意义。方法:用免疫组化SP法测定50例不同恶性程度的胶质瘤组织中nm23、PCNA的表达情况。结果:(1)低度恶性胶质瘤标记指数(labelindex,LI)nm23为3.40±0.27,PCNA为3.60±0.05;高度恶性胶质瘤nm23LI为1.72±0.18,PCNALI为6.20±0.23,有显著性差异(P<0.05);(2)25例低度恶性胶质瘤中nm23阳性14例(56%),PCNA阳性16例(64%);而25例高度恶性胶质瘤中nm23阳性3例(12%),PCNA阳性22例(88%)。低度和高度恶性胶质瘤两组nm23、PCNA表达阳性率有显著性差异(P<0.05);(3)复发组9例,无nm23阳性者(0%),PCNA全部阳性(100%),未复发组8例,4例nm23阳性(50%),4例PCNA阳性(50%),两组nm23、PCNA的表达阳性率均有显著性差异(P<0.05);(4)胶质瘤nm23与PCNA的标记指数呈负相关(r=-0.5335,P<0.001)。结论:(1)nm23的表达随胶质瘤恶性程度增加而下降;(2)PCNA的表达随胶质瘤恶性程度的增加而升高;(3)nm23、PCNA可作为胶质瘤恶?

星形细胞肿瘤p53蛋白和PCNA免疫组化及其临床病理意义

应用免疫组化和图象分析技术对人脑星形细胞肿瘤中抑癌基因ｐ５３蛋白（４７例）和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）（９７例）的定位、分布及反应强度与分级和预后的关系进行了研究。结果显示；３种ｐ５３蛋白抗体的阳性率为２３．４％～６６．７％，其中ＣＭ－１抗体阳性率高于ｐＡｂ１８０１和ｐＡｂ２４０；ｐ５３表达水平在Ⅱ～Ⅳ级高于１级，并与ＰＣＮＡ标记指数之间相关。ＰＣＮＡ反应强度既与分级相关，又与预后相关，对于分析星形细胞瘤增殖活性和恶性程度有重要意义。

鼻咽癌癌细胞群体的PCNA免疫组化研究

应用免疫组化技术对４７例石蜡包埋组织的鼻咽癌癌细胞群体的增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）进行分析。结果显示：角化性癌细胞和梭形癌细胞、不规则形癌细胞至泡状核癌细胞群体，其ＰＣＮＡ阳性率依次递增，表明鼻咽癌存在增殖潜能异质性的癌细胞群体，泡状核癌细胞增殖能力最高，不规则形癌细胞次之。作者认为不同形态的癌细胞群体在组织中的比例不但决定鼻咽癌的组织类型，而且其增殖潜能异质性将影响鼻咽癌治疗和临床预后。

PCNA和Ki-67在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨PCNA和ki-67在非小细胞肺癌中的表达及意义。方法收集临床手术切除的非小细胞肺癌组织蜡块128例及正常肺组织32例,应用免疫组化检测组织中PCNA和Ki-67的表达,结合临床病理资料和随访资料进行回顾性研究。结果发现非小细胞肺癌组织中PCNA的表达和Ki-67表达均明显高于正常肺组织(P<0.01)。PCNA表达增高与肿瘤病理分级、分期增加以及淋巴结转移之间有相关性(P<0.01),但与肿瘤组织学分型无相关性(P>0.05)。PCNA表达与Ki-67表达之间呈显著正相关(P<0.01)。结论 PCNA及Ki-67高表达是影响患者预后的主要因素,两者的异常表达与肺癌的发生、发展及转移关系密切,对判断肺癌恶性程度及预后有重要参考价值。

幽门螺杆菌感染与胃癌及癌前病变中PCNA和Bcl-2表达关系的研究

目的 :研究幽门螺杆菌 ( Helicobacter pylori,H.pylori)感染对胃癌及癌前病变患者增殖细胞核抗原 ( PCNA)和关键性凋亡调节基因 Bcl- 2蛋白表达的影响 ,探讨 H .pylori可能的致癌机制。方法 :应用免疫组化方法测定 2 0例胃癌组织、1 8例重度异型增生、1 2例肠上皮化生、2 4例萎缩性胃炎、1 6例浅表性胃炎组织中 Bcl- 2、PCNA蛋白表达情况 ,快速尿素酶法和 HE染色检测H.pylori感染情况。结果 :胃癌组 H.pylori感染 1 2例 ,与慢性浅表性胃炎相比差异有显著性 ( P<0 .0 5 )。从浅表性胃炎到胃癌 PCNA指数呈递增趋势 ,各组间差异均有显著性 ( P<0 .0 5 )。浅表性胃炎和萎缩性胃炎组中 H.pylori阳性组与 H.pylori阴性组的 PCNA LI差异有显著性( P<0 .0 5 ) ,其余各组间 H.pylori阳性和 H.pylori阴性病例间的 PCNA LI差异无显著性。Bcl- 2蛋白在异型增生组中的阳性表达率与胃癌、肠上皮化生相比差异无显著性 ,与慢性胃炎相比差异有显著性。 H .pylori阳性组肠上皮化生、异型增生组织中 Bcl- 2阳性表达率显著高于 H .pylori阴性组 ,它们之间差异有显著性 ( P<0 .0 5 )。结论 :H .pylori感染可促使 PCNA、Bcl- 2蛋白表达增加 ,H.

实验性脑挫伤GFAP,PCNA免疫组织化学研究

采用改进的Ｆｅｅｎｅｙ氏落体打击致Ｗｉｓｔａｒ大鼠脑挫伤模型，利用免疫组织化学染色，观察大鼠实验性脑挫伤后ＧＦＡＰ、ＰＣＮＡ的改变，用图像分析仪对免疫组化染色阳性细胞灰度和面积进行测量，ＳＡＳ统计软件分析，得出脑挫伤后ＧＦＡＰ、ＰＣＮＡ变化的时间规律性，为脑挫伤形成时间推断提供新的手段。ＧＦＡＰ阳性细胞面积和灰度伤后呈上升趋势，伤后３ｈ，即有显著增加（Ｐ＜０．０１），至４天时，阳性细胞灰度，面积达到峰值（Ｐ＜０．０１），伤后７天仍保持较高水平（Ｐ＜０．０１）。ＰＣＮＡ阳性细胞伤后１２ｈ出现，灰度呈上升趋势，面积呈下降趋势，伤后３天时达到最大值（Ｐ＜０．０１）。因此，ＧＦＡＰ、ＰＣＮＡ免疫组织化学染色阳性细胞的数量，灰度，面积改变有时间性规律；推断２～７天的脑挫伤则以ＧＦＡＰ、ＰＣＮＡ改变为主；脑挫伤后星形胶质细胞数目增多，只有很少一部分为星形胶质细胞增殖而来。

蜈蚣败毒饮对小鼠阴道上皮增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响

目的:研究蜈蚣败毒饮对银屑病模型小鼠的影响,探讨蜈蚣败毒饮治疗寻常型银屑病的机理,为临床治疗银屑病提供实验依据。方法:采用雌化小鼠阴道上皮作为模型,复方青黛丸为阳性对照组,设生理盐水组、正常对照组、蜈蚣败毒饮低、中、高剂量组和复方青黛丸组,观察蜈蚣败毒饮对小鼠阴道上皮增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。结果:蜈蚣败毒饮高剂量组表达最弱,生理盐水组表达最强,中药各组表达强度依次是:高剂量<中剂量<低剂量。正常组未见增强,PCNA阳性细胞低表达。结论:中药蜈蚣败毒饮能显著抑制小鼠阴道上皮增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,抑制作用呈一定的量-效依赖关系。

胰腺癌PCNA和Tr检测及其意义的探讨

应用免疫组化方法观察５６例胰腺癌，癌旁组织及正常胰腺组织中ＰＣＮＡ和Ｔｒ的表达，结果表明胰腺癌及癌旁组织ＰＣＮＡ阳性细胞百分率（７１．４％±３．４％，５７．１％±６．１％）均高于正常胰腺组织（３７．５％±５．８％），癌细胞分化愈差或有淋巴结转移，ＰＣＮＡ过度表达愈多。胰腺癌Ｔｒ阳性细胞百分率（３９．５％±４．２％）明显高于正常胰腺组织（２１．６％±５．８％），且ＰＣＮＡ与Ｔｒ在胰腺癌中的表达有一致性关系。ＰＣＮＡ和Ｔｒ对判断肿瘤恶性程度及评估预后是一个较好指标，可指导临床综合治疗。

肺癌组织中hMSH2及PCNA的表达及意义

目的探讨人类错配修复基因hMSH2及增殖细胞核抗原PCNA在肺癌组织中的表达及意义。方法运用免疫组织化学S-P法对56例肺癌组织中的Hmsh2及PCNA的表达进行检测。结果56例肺癌组织中Hmsh2阳性表达率为28.6%,分化程度高者阳性率显著高于分化程度低者(P<0.01),有淋巴结转移者Hmsh2阳性率低于无淋巴结转移者(P<0.05),不同病理组织学类型之间Hmsh2表达无显著差别(P>0.05);56例肺癌组织中分化程度高者PCNA标记指数高于分化程度低者(P<0.01),有淋巴结转移者PCNA标记指数高于无淋巴结转移者(P<0.05),hMSH2阴性表达者的PCNA标记指数明显高于hMSH2阳性表达者(P<0.01),不同病理组织学类型之间PCNA标记指数无显著差别(P>0.05)。结论hMSH2基因的缺陷及PCNA的表达与肺癌的发生发展过程并与分化程度及有否淋巴结转移有关。

不同妊娠滋养细胞疾病组织中RFC2、PCNA表达的研究

背景与目的:基因表达谱芯片检测发现葡萄胎和绒毛膜癌存在复制因子C(replicationfactorC,RFC)高表达。复制因子C亚单位2(replicationfactorCsubunit2,RFC2)与DNA的复制和修复及细胞周期信号检查点的功能有关。本研究检测RFC2和增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)蛋白在妊娠滋养细胞疾病(gestationaltrophoblasticdisease,GTD)中的表达情况,探讨二者表达的意义。方法:采用免疫组化SP法检测15例正常绒毛、38例葡萄胎、42例侵蚀性葡萄胎和18例绒毛膜癌组织中RFC2和PCNA蛋白表达情况。结果:葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌组织中的RFC2和PCNA蛋白表达水平显著高于正常绒毛(PRFC2=0.000,PPCNA=0.004)。葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌组织中RFC2的表达水平无显著性差异(P值分别为1.000、0.256)。术前未化疗的滋养细胞肿瘤患者(包括侵蚀性葡萄胎和绒毛膜癌)的RFC2表达高于术前化疗≥3疗程者(P=0.028)。WHOⅢ期者RFC2蛋白表达高于Ⅰ期者(P=0.01)。WHO预后评分为高危者,其RFC2表达显著高于低危者(P=0.018)。绒毛膜癌组织中PCNA的表达高于葡萄胎(P=0.037),葡萄胎恶变者PCNA的表达高于未恶变者(P=0.039)。高危组、中危组PCNA的表达高于低危组(P=0.036,P=0.048)。PCNA的表达与滋养细胞肿瘤术前?

PCNA在骨巨细胞瘤的表达及与病理分级和复发的关系

应用免疫组织化学技术，对32便骨巨细胞瘤进行增殖细胞核抗元原（PCNA）的检测分析，探讨PCNA在骨巨细胞瘤的表达分布及与Jaffe病理分级和复发的关系。结果显示，PCNA的阳性反应只在骨巨细胞瘤波形蛋白阳性的单核基质细胞的胞核中出现，而多核巨细胞均无阳性表达；PCNA在骨巨细胞瘤中的增殖指数虽随Jaffe病理分级增高有呈递增趋势，但各级相互之间在交叉重叠现象；PCNA增殖指数低即低度增生的骨巨细胞瘤复发率低，PCNA增殖指数高即中度和重度增生者复发率明显增高。本文结果进一步支持单核基质细胞是骨巨细胞瘤的主要肿瘤细胞成份的观点，并提示PCNA的表达与Jaffe病理分级不完全一致，但PCNA是判断骨巨细胞瘤预后的一个重要参考指标。

PCNA和Ki-67在脑膜瘤组织中的表达及其意义

目的 探讨增殖细胞核抗原 (PCNA )和Ki-6 7核抗原在脑膜瘤中的表达及其与肿瘤良、恶性及复发的关系。方法 采用LSAB法检测 80例脑膜瘤组织中PCNA和Ki-6 7的表达。结果 恶性脑膜瘤PCNA标记指数 (PCNALI)和Ki -6 7标记指数 (Ki -6 7LI)明显高于良性脑膜瘤 (P <0 .0 1)和非典型性脑膜瘤 (P <0 .0 5 ) ,复发脑膜瘤PCNALI显著高于未复发脑膜瘤 (P<0 .0 1) ,复发脑膜瘤Ki -6 7LI也显著高于未复发脑膜瘤 (P <0 .0 1)。Ki -6 7表达与PCNA表达呈正相关。结论 脑膜瘤细胞标记指数可作为判断脑膜瘤良、恶性的客观指标之一 ,标记指数对预测脑膜瘤的复发有一定意义。

早期胃癌及癌旁组织P53及PCNA蛋白表达的意义

[目的]探讨抑癌基因蛋白P53及PCNA蛋白在早期胃癌发生中所起的作用。[方法]应用免疫组化技术检测28例早期胃癌及其癌旁组织的PCNA及抑癌基因蛋白P53的表达情况,采用t检验和χ2检验统计分析。[结果](1)正常胃黏膜、肠上皮化生黏膜、异型增生病灶及早期胃癌的PCNA阳性细胞率分别为11.7%、20.3%、36.4%和49.2%,细胞增殖活性逐渐增高,各组间有显著差异(P<0.05);在异型增生黏膜中,随异型程度的增高,增殖活性也逐渐升高,轻度、中度、重度病变的PCNA阳性细胞率分别为29.4%、35.5%和43.2%,各组与癌灶的PCNA阳性细胞率(49.2%)相比有显著差异(P<0.05)。(2)抑癌基因蛋白P53在轻度、中度、重度异型增生及早期胃癌中可见表达,阳性率分别为11.1%、14.3%、30.0%和42.4%,各组间相比无显著差异(P>0.05);而正常胃黏膜、肠上皮化生黏膜P53未见表达。(3)抑癌基因蛋白P53阳性表达的病例PC-NA阳性细胞率明显高于P53阴性表达的病例(P<0.05)。[结论]PCNA及抑癌基因蛋白P53在胃癌的发生中起重要的作用。

PCNA和p53蛋白表达与鼻咽癌放射敏感性关系的研究

目的 探讨增殖细胞核抗原 (PCNA )和p5 3蛋白表达与鼻咽癌放射敏感性的关系。方法 应用免疫组化法 ,检测 5 1例放疗前鼻咽癌组织中PCNA和 p5 3蛋白表达情况。 结果 5 1例鼻咽癌组织中PCNA和 p5 3蛋白表达阳性者分别有 5 0例( 98.0 % )和 46例 ( 90 .2 % ) ,高表达者分别有 16例 ( 3 1.4% )和 2 2例 ( 4 3 .1% ) ;鼻咽癌组织中PCNA表达与 p5 3蛋白表达显著相关(P <0 .0 1) ;PCNA和 p5 3蛋白阳性表达水平越高 ,则鼻咽癌对放射治疗越敏感 ,放疗后鼻咽局部癌肿完全消退率越高 (P <0 .0 5 ) ;PCNA和 p5 3蛋白同时高表达者比单一指标高表达者 ,对放射敏感性更高 (P <0 .0 5 )。 结论 PCNA和 p5

胃癌组织中CD44、PCNA的表达及其意义

目的 研究胃癌组织中CD44、PCNA的表达及其与临床病理的关系。方法 采用免疫组化方法 (S P法 )检测 5 4例胃癌组织中CD 44、PCNA的表达。结果 胃癌组织中CD 44阳性率为 64 .8% ,PCNA的阳性率为 10 0 .0 % ,其中弱阳性 (Ⅰ～Ⅱ级 )表达率为 2 4.1% ,强阳性 (Ⅲ～Ⅳ级 )表达率为 75 .9%。CD 44、PCNA的表达率与胃癌的组织学类型、浸润深度及淋巴结转移密切相关 ,CD 44与PCNA的表达存在正相关。结论 检测CD 44、PCNA在胃癌中的表达对判断胃癌的生物学行为有一定参考价值。