p16、PCNA联合检测对恶性浆膜腔积液的诊断价值

目的：探讨p16、PCNA联合检测在恶性浆膜腔积液鉴别诊断中的价值。方法：采用免疫细胞化学法，分别对22例结核性浆膜腔积液和41例恶性浆膜腔积液进p16、PCNA检测。结果：p16在结核性浆膜腔积液组和恶性浆膜腔积液组中阳性率分别为72．73％、17．07％，PCNA在结核性浆膜腔积液组和恶性浆膜腔积液组中阳性率分别为45．45％、87．80％，统计学分析，p〈0．05。结论：p16在结核性浆膜腔积液中的表达优于恶性浆膜腔积液；PCNA在恶性浆膜腔积液中的表达优于结核性浆膜腔积液。联合检测p16、PCNA可提高浆膜腔积液鉴别诊断的灵敏度，具有一定的临床参考价值。

反流性食管炎和食管腺癌组织中P16、P53、PCNA表达及其临床意义

为了探讨P16、P5 3、PCNA基因表达在反流性食管炎、Barrett食管和食管腺癌中的临床生物学行为之间的关系。采用免疫组织化学法 ,检测了 30例食管腺癌、2 0例反流性食管炎和 10例Barrett食管组织中P16、P5 3、PCNA基因表达 ,2 0例正常人的食管组织作为正常对照。结果表明 :三项基因在食管腺癌中的蛋白表达率均较正常对照组显著增高 (P <0 .0 5 )。P5 3在食管腺癌、Barrett食管和反流性食管炎中的阳性表达率分别为 5 6 .7%、30 %和 2 0 % ;P16在食管腺癌、Barrett食管和反流性食管炎中的阳性表达率为 36 .7%、30 %和 2 5 % ;PCNA在食管腺癌组织和Barrett食管中较正常食管表达强度和阳性表达率明显增强 (P <0 .0 1) ;食管腺癌组织中蛋白表达较Barrett食管和反流性食管炎表达增强 ,但统计学检验却差异无显著性意义 ,Barrett食管较反流性食管炎表达增强。食管腺癌患者 3项基因的表达至少有 1项呈现为阳性。

PCNA、P16、MMP9在人参皂甙Rg3抗肝癌淋巴道转移中的表达及意义

目的 :通过检测PCNA、P16及MMP 9在人参皂甙Rg3抗荷瘤小鼠淋巴道转移中的表达 ,探讨人参皂甙Rg3抗肿瘤作用的机制。方法 :建立小鼠肝癌淋巴道转移模型 ,应用免疫组织化学方法检测PCNA、P16及MMP 9在各实验组 (Rg3预防组、Rg3治疗组、Rg3+DDP合用组、DDP阳性对照组和生理盐水阴性对照组 )的原发瘤及相应转移瘤 (淋巴结 )中的表达水平。结果 :应用人参皂甙Rg3组较未用药组 ,PCNA及MMP 9在原发瘤的表达减少 ,P16的表达增加 ,差异显著 (P <0 0 0 1) ;而在转移瘤中的变化不明显。结论 :人参皂甙Rg3抗淋巴道转移作用的机制与上调P16表达及下调PCNA和MMP9表达有关。

p16、Ki-67和PCNA的表达与胃肠道平滑肌肿瘤性质的关系

目的 :探讨p16、Ki-67和PCNA的表达与胃肠道平滑肌肿瘤 (gastrointestinalsmoothmuscletumors,GISMT)性质的关系。方法 :采用免疫组织化学S -P法检测86例GISMT患者p16的表达情况,采用微波修复抗原及免疫组织化学S -P法检测人抗增殖细胞核抗原Ki-67及增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)来反映细胞的增殖活性。结果 :p16表达按平滑肌瘤、平滑肌肉瘤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级的顺序依次明显下降 (P<0.01)。同时 ,p16的表达与肿瘤的良恶性生长方式、肿瘤大小、中心有无坏死亦有明显的关系 (P<0.01或P<0.05)。p16阳性表达组5年生存率明显高于阴性表达组 (P<0.05)。p16阴性表达组的Ki-67和PCNA表达明显高于阳性表达组(P<0.01)。结论 :p16可考虑是反映GISMT某些生物学特性的良好标志物 ,可以用来判断其某些生物学特性、估计预后、指导制定合理的治疗方案。p16与Ki-67、PCNA可以互补作为判断GISMT良恶性、恶性程度、转移及预后的参考指标。

Decorin、p16和PCNA在乳腺癌中表达的意义及与淋巴结转移的关系

目的 :探讨乳腺癌原发癌中Decorin、p16和PCNA之间的关系以及它们与淋巴结转移的关系。方法 :本实验利用免疫组化的方法检测了乳腺癌原发癌中Decorin、p16和PCNA的表达。结果 :Decorin在癌周纤维细胞及胶原均有表达 ,癌细胞胞浆和 /或胞核表达 ;癌旁增生的乳腺小叶呈强阳性表达 ;癌周纤维组织染色强度与癌细胞染色强度呈正相关。p16染色部位为胞核或胞核与胞浆同时表达 ,无淋巴结转移组的染色强度明显高于有转移组。PCNA仅于胞核表达 ,无淋巴结转移组的表达明显低于有转移组。Decorin的表达强度与p16的表达强度有很好的正相关 ;p16的染色强度与PCNA的表达有明显的负相关。结论 :Decorin可能通过调节p16的表达来调控细胞增殖 ;乳腺癌的增殖状态与淋巴结转移有关。

热化疗对恶性胸腔积液中肿瘤细胞表达Ki-67、PCNA、Bcl-2、p53的影响

目的研究射频热疗联合胸腔灌注化疗对恶性胸腔积液中肿瘤细胞表达Ki-67、PCNA、Bcl-2和p53的影响。方法 85例确诊为恶性胸腔积液患者随机分为热化疗组和灌注化疗组,采用中心静脉导管胸腔闭式引流,尽可能排尽胸水后,热化疗组44例,给予顺铂胸腔灌注化疗,然后进行胸腔射频热疗;灌注化疗组41例,仅予顺铂胸腔灌注化疗。通过免疫组化法检测治疗前和治疗1疗程后胸腔积液中肿瘤细胞Ki-67、PCNA、Bcl-2和p53的表达情况。结果热化疗组治疗后胸腔积液中肿瘤细胞中Ki-67和PCNA的表达率均较治疗前下降,两者比较均有统计学意义(P<0.05);两组治疗后Ki-67、PCNA、p53和Bcl-2的表达率比较均无显著差异(P>0.05)。结论射频热疗能够显著提高化疗抑制恶性胸腔积液中肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡的作用。

肝细胞癌SCT表现特征与p21^(WAF1)、p16^(INK4)、PCNA关系的研究

目的 探讨肝细胞癌 (HCC)螺旋CT(SCT)表现特征与癌细胞中p2 1WAF1、p16 INK4 及PCNA表达的关系。资料与方法 对 39例 (共 41个病灶 )经手术病理证实且行SCT动、静脉双期增强扫描的HCC患者 ,观察每个病灶SCT表现特征 ,包括肿瘤大小、包膜的形成、侵袭危险性及强化类型。用免疫组织化学方法检测癌组织中p2 1WAF1、p16 INK4 、PCNA的表达情况。分析评价SCT表现特征与这 3种蛋白之间的关系。结果 SCT图像上HCC肿瘤大小、侵袭危险性、强化类型分别与p2 1蛋白、p16蛋白及PCNA有相关性 (P <0 .0 5 ) ,HCC包膜形成与p2 1蛋白、p16蛋白及PCNA无相关性 (P >0 .0 5 )。结论 根据HCC的SCT表现特征 (肿瘤大小、侵袭危险性、强化类型 ) ,可在一定程度上推测p2 1WAF1、p16 INK4 及PCNA表达情况 ,有助于HCC的早期诊断及治疗方案的选择。

P16和PCNA在乳房外Paget病的检测及相关性分析

目的探讨P16和PCNA在乳房外Paget病中的表达特点及二者的关系。方法应用免疫组化二步法检测34例乳房外Paget病及20例正常对照皮肤组织中P16和PCNA的表达。结果乳房外Paget病组织中P16阳性率为29.4%,正常皮肤组织未见表达,两者差异有显著性(P<0.05)。PCNA在乳房外Paget病组织中阳性率为85.29%,在正常皮肤组织为55.00%,两者差异有显著性(P<0.05)。有淋巴结转移组中P16,PCNA的阳性表达均高于无淋巴结转移组,但P16的表达差异无显著性(P>0.05)。结论P16和PCNA可能参与了乳房外Paget病的发病过程,并且PCNA与乳房外Paget病的淋巴结转移有关。

Cyclin D_1和p16、p27在脑胶质瘤中的表达及其与PCNA的相关性

目的 :检测CyclinD1 和p16、p2 7以及PCNA在脑胶质瘤中的表达状况 ,以探讨不同病理类型脑胶质瘤中各自的表达及其相关性。方法 :应用免疫组化S P法 ,检测 12例正常脑组织、5 8例脑胶质瘤组织中CyclinD1 、p16、p2 7及PCNA表达及其特征。结果 :CyclinD1 在由低度恶性胶质瘤向高度恶性胶质瘤转化中阳性表达逐渐增强 (χ2 检验 ,P <0 0 0 5 ,χ2 =5 1 6 7) ;而p16、p2 7阳性表达却是随着胶质瘤恶性程度的升高而降低 (χ2 检验 ,P值均 <0 0 0 5 ,χ2 分别为 15 4 1和 12 81)。CyclinD1 与PCNA呈正相关 ,rs =0 74 5 ;p16和p2 7与PCNA呈负相关 ,rs分别为 - 0 5 6 6和 - 0 6 12。结论 :脑胶质瘤中CyclinD1的表达程度对胶质瘤的细胞增殖活性起促进作用 ,而p16、p2 7的表达则起抑制作用。

食管癌中P16、PCNA基因蛋白的表达及意义

目的：探讨Ｐ１６、ＰＣＮＡ基因蛋白表达与食管鳞癌发生发展的关系。方法：应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学方法对８４例食管鳞癌及１０例正常食管组织分别检测Ｐ１６蛋白、ＰＣＮＡ蛋白表达。结果：８４例食管鳞癌中Ｐ１６蛋白表达率为５４８％（４７／８４），Ｐ１６表达与淋巴结转移、临床分期、术后生存期显著相关（Ｐ＜００５）；ＰＣＮＡ表达阳性率与食管癌组织分化程度显著性正相关（Ｐ＜００５），淋巴结转移组显著高于未转移组，并与术后生存期互相关（Ｐ＜００１），与临床分期无显著相关。Ｐ１６与ＰＣＮＡ表达呈反相关系（Ｐ＜００１）。结论：表明Ｐ１６在食管癌生长、转移中起重要作用，Ｐ１６。

人口腔粘膜鳞状细胞癌及白斑P16蛋白及PCNA表达的研究

现已知抑癌基因ｐ１６的编码产物Ｐ１６蛋白可通过抑制细胞周期依赖性蛋白激酶ＣＤＫ４的活化而使细胞停滞在Ｇ１期，从而抑制细胞的增殖［１，２］。增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔ－ｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）是ＤＮＡ聚合酶σ的辅助...

巢式MSP法检测恶性血液病细胞株p16基因启动子甲基化状态的研究

本研究应用改进的甲基化特异性PCR(MSP)法,即巢式甲基化特异性PCR法检测6种肿瘤细胞株p16基因启动子的甲基化状态效率,探讨其在筛选p16基因启动子高甲基化的肿瘤细胞株,及将其作为研究基因甲基化与表达关系的理想细胞模型中的应用。6种肿瘤细胞株基因组DNA经碱变性后以亚硫酸盐修饰,再用巢式甲基化特异性聚合酶链反应扩增,分析检测其p16启动子区CpG岛的甲基化状态。结果表明:CA46、U266都有不同程度的p16基因启动子区甲基化,而Molt4、K562、HL-60、Jurkat的p16基因启动子区均未甲基化。结论:用巢式甲基化特异性PCR可以准确的检测出恶性血液病细胞株p16基因的甲基化状态,方法简单,灵敏且重复性强,可以广泛用于筛选各种p16基因启动子区甲基化的恶性血液病细胞株以及恶性血液病诊断。

肺鳞癌及癌前病变PCNA、p16、p21、p53表达及细胞凋亡观察

目的 :观察肺癌癌变过程中细胞增殖与凋亡活性的改变 ,分析它们在肺癌发生发展过程中的意义并探讨其调控基因的作用。方法 :收集 86例支气管黏膜活检标本 ,采用免疫酶标法对各组病例进行PCNA、p5 3、p2 1、p16蛋白表达检测 ,用 3′ OH末端DNA原位标记技术进行凋亡细胞检测。结果 :在正常与鳞化组 ,PCNA只在极个别细胞中表达 ,p2 1、p5 3未见表达 ,p16阳性表达率分别为 10 0 %、93 3% ,凋亡细胞阳性率为 (2 9± 5 6 ) %、(2 4± 4 7) %。轻、中度非典型增生组 ,PCNA也只在少数细胞中表达 ,p2 1、p5 3没有表达或极少数细胞表达 ,p16表达率分别为 91 7%、83 3% ,凋亡细胞阳性率分别为 (2 2 0± 4 3) %和 (18 5± 3 7) %。在重度非典型增生与高分化鳞癌组织中PCNA阳性率显著增加 ,而凋亡细胞阳性率却明显减少 ,p2 1、p5 3表达增加 ,p16显著下降。结论 :支气管黏膜癌变是一个由量变到质变的过程 ,而中到重度非典型增生是这一过程中的关键性阶段 ,不仅增殖活性增加 ,而且凋亡活性下降 ,它们的调控基因p16、p2 1、p5 3也发生了显著的变化 ,可能起着重要的调节作用。

胃肠道类癌中p27^(kip1)、PCNA表达及p16基因缺失

目的 :探讨 p2 7kip1 、PCNA及 p1 6与胃肠道类癌转移的关系。 方法 :采用免疫组化SABC法检测 2 5例胃肠道类癌组织中p2 7kip1 和PCNA蛋白表达 ,同时用PCR法检测 p1 6基因的缺失情况。 结果 :p2 7kip1 在胃肠道类癌阳性表达率为 64 % (1 6/ 2 5) ,PCNAⅠ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级表达率分别为 56 %、44 %。 2种蛋白阳性表达率与分化程度无相关性 (P >0 0 5) ,与淋巴结转移相关 (P <0 0 5)。p2 7kip1 与PCNA表达负相关。p1 6基因纯合性缺失率为 48% (1 2 / 2 5) ,其缺失率与类癌分化程度和淋巴结转移无关。结论 :p2 7kip1 低表达、PCNA高表达与胃肠道类癌转移有关 ,胃肠道 ;类癌的发生与p1 6基因缺失有关 ,但可能为早期分子事件。

细胞增殖相关基因p16,PCNA和CyclinD1在尖锐湿疣中的表达

目的探讨细胞增殖相关基因p16,PCNA和CyclinD1在尖锐湿疣中的表达及意义。方法分别采用免疫组织化学和RT-PCR法检测30例尖锐湿疣、寻常疣、跖疣中细胞增殖基因p16,PCNA和CyclinD1的表达情况,并与30例正常包皮组织进行对照。结果 p16蛋白在尖锐湿疣、寻常疣、跖疣和正常对照中的阳性表达率分别为:26.67%,16.67%,6.67%和0;p16 mRNA的阳性表达率分别为:23.33%,16.67%,6.67%和0。疣皮损p16蛋白表达评分和mRNA光密度高于正常对照,差异有统计学意义(P<0.05)。PCNA蛋白在各组的阳性表达率分别为:93.33%,86.67%,76.67%和70.00%;PCNA mRNA的阳性表达率分别为:90.00%,76.67%,70.00%和70.00%。疣皮损PCNA蛋白表达评分和mRNA光密度高于正常对照,差异有统计学意义(P<0.05)。CyclinD1蛋白和mRNA在各型疣和正常对照阳性表达率均为0。结论 p16和PCNA基因在尖锐湿疣、寻常疣和跖疣的发生发展中起一定作用,尤其是对尖锐湿疣的促增殖作用显著。

温下肠腑方对Lewis肺癌PCNA、p16、CyclinD1蛋白表达的影响

目的观察温下肠腑方对Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及对PCNA、p16、cyclinD1表达的影响。方法:C57BL/6小鼠皮下接种Lewis肺癌,随机分为4组,即模型组,化疗组,温下方组和综合治疗组,化疗组和综合治疗组DDP 0.1 mg腹腔注射3 d,温下方组和综合治疗组中药灌胃10 d。计算抑瘤率,免疫荧光组织化学方法,激光共聚焦显微镜观察PCNA、p16、cyclinD1的表达。结果温下方组抑瘤率为34.5%,平均瘤重低于模型组(P<0.05);温下方组、综合治疗组和化疗组PCNA、cyclinD1表达明显低于模型组(P<0.05),其余各组无显著差异。结论温阳除滞法为主的温下肠腑方有一定的抑制肺癌生长的作用,且与顺铂有协同作用,温下肠腑方可能通过对PCNA、cyclinD1的抑制,从而抑制肿瘤生长。

雷公藤内酯醇逆转人恶性淋巴瘤CA46细胞系p16基因甲基化的实验研究

目的:以p16基因存在异常甲基化的恶性淋巴瘤细胞CA46为研究对象,探究雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)对P16这一细胞周期调控中的重要基因的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:①运用四甲基偶氮唑盐(MTT)法等检测triptolide对CA46细胞株增殖的影响。②巢式甲基特异性PCR检测triptolide对CA46细胞p16基因甲基化模式的影响。③半定量RT-PCR检测经triptolide作用后CA46细胞p16基因mRNA的表达。结果:Triptolide对CA46细胞生长有明显的抑制作用,并有时间及剂量依赖性,48小时IC50为28.8ng/ml;triptolide可逆转P16基因的高甲基化;triptolide能够诱导CA46细胞p16基因mRNA的表达,具剂量依赖性。结论:小剂量triptolide可明显抑制CA46细胞的增殖,其可能机制为通过诱导CA46细胞中异常甲基化的p16基因去甲基化,使p16基因恢复表达,从而对细胞周期起负调控作用。

喉癌p16、c-myc及PCNA表达的临床病理研究

探讨ｐ１６、ｃ－ｍｙｃ及ＰＣＮＡ在喉癌发病中的作用。方法：应用ＳＡＢＣ免疫组化技术，检测４０例喉鳞癌手术标本中ｐ１６、Ｃ－ｍｙｃ及ＰＣＮＡ的表达，对三者表达与喉癌发生部位，临床分期。组织学分级和临床复发之关系进行探讨。结果：①ｐ１６阳性表达多见于高分化组和未复发组，阴性多见于低分化组和复发组病例；②Ⅲ、Ⅳ期的ｃ－ｍｙｃ得分显著高于Ⅰ、Ⅱ期得分；③Ⅲ、Ⅳ期，低分化，复发组的ＰＣＮＡ指数分别高于Ⅰ、Ⅱ期，高分化，未复发组的指数；④ｃ－ｍｙｃ得分与ＰＣＮＡ指数呈正相关。结论：ｐ１６、ｃ－ｍｙｃ及ＰＣＮＡ表达与喉癌临床病理指标有关，喉癌的发生与演进是多因素作用的结果，三种检测对估计喉癌的恶性度、判断预后及指导治疗有重要意义。

AS_2O_3逆转人恶性淋巴瘤CA46细胞系p16基因甲基化状态及激活转录的实验研究

本研究旨在探讨三氧化二砷(As2O3)逆转恶性淋巴瘤CA46细胞株p16基因甲基化状态和调节转录作用及其可能的机制。以高甲基化的恶性淋巴瘤细胞株CA46作为研究基因甲基化与表达关系的实验对象。采用SRB法检测As2O3对人恶性淋巴瘤CA46细胞系增殖、活力的影响;nMSP法检测药物作用后p16甲基化状态变化;RT-PCR法检测p16、甲基转移酶DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA的表达;利用流式细胞术DNA倍体分析法探讨As2O3对恶性淋巴瘤细胞周期的影响。结果表明:①As2O3作用CA46细胞株72小时后p16基因甲基化程度明显减弱,p16基因异常甲基化的现象被逆转;②未处理组细胞p16基因呈微弱表达,As2O3作用72小时后p16基因表达增强,0.5μmol/L组、1.0μmol/L组和2.0μmol/L组p16基因表达阳性条带与β-actin灰度的比值分别为(0.33±0.10)、(0.57±0.11)、(0.67±0.09),阳性对照灰度比值为(0.73±0.13),差异有统计学意义(p<0.01);③与未处理组相比,As2O3作用72小时后甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B的表达下降并呈浓度依赖性,而DNMT1表达不受影响;④与对照组相比,3组不同浓度As2O3均能明显抑制肿瘤细胞生长,G0/G1期细胞增加。结论:As2O3可能通过抑制甲基转移酶DNMT3A、DNMT3B或(和)直接逆转p16基因甲基化状态,使p16基因表达上调,并恢复其活性,从而实现其细胞周期调控功能,将细胞阻滞于G0/G1期,抑制肿瘤细胞的增长。

幽门螺杆菌感染胃黏膜病变中组织硒含量与p16、PCNA关系的研究

为研究幽门螺杆菌感染的胃黏膜病变中组织硒含量与p1 6、PCNA表达相互关系 ,应用免疫组化染色法检测了 1 1 4例经胃镜及病理诊断证实的五种胃黏膜病变标本中p1 6及PCNA的表达 ;应用快速脲酶试验结合Warthin -Starry银染色确定了HP感染 ;应用MK光纤压力密闭微波溶解炉及RF -1 5 0 1荧光分光光度计检测了组织硒含量。结果表明 ,各种HP感染的胃黏膜病变中 ,组织硒含量除DYS与GC无显著性差异外 (P >0 0 5 ) ,其余各组均有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,在CSG中升高明显 ,并随病变加重相对降低 (P <0 0 5 ) ,但高于正常组 (P <0 0 5 )。硒含量与PCNA表达呈负相关 (rs=-0 9898,P <0 0 5 ) ,而与p1 6表达呈正相关 (rs=0 91 4 3 ,P <0 0 5 )。p1 6表达HP阳性标本明显低于HP阴性标本 (P <0 0 1 ) ;PCNA表达HP阳性标本明显高于HP阴性标本(P <0 0 1 )。p1 6表达与PCNA表达呈负相关 (rs=-0 60 75 ,P <0 0 1 )。提示HP感染直接或间接地促进PCNA的表达 ,抑制p1 6的表达。HP感染的胃黏膜组织中硒含量明显升高 ,可能不仅是保护性的对抗活性氧增加的反应 。