曲格列酮对凝血酶诱导的内皮细胞诱导型一氧化氮合酶和黏附分子表达的抑制作用

目的:研究过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPARγ)配体(曲格列酮)对凝血酶刺激的人脐静脉内皮细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和黏附分子表达的影响,旨在探讨曲格列酮对血管内皮细胞保护作用。方法:培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分别设立空白对照组、凝血酶对照组和不同浓度的(1、5、10、25、50、100μmol/L)曲格列酮实验组预作用2h,然后以凝血酶(5U/ml)诱导作用4h。采用免疫组织化学和Western-blot分析法检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)以及诱导型一氧化氮合酶蛋白表达水平。结果:在凝血酶诱导作用下HUVEC表达的ICAM-1、VCAM-1和诱导型一氧化氮合酶均较空白对照组明显增加(P<0.05);当曲格列酮浓度大于1或5μmol/L预作用后,给予凝血酶诱导,曲格列酮可显著抑制凝血酶诱导的ICAM-1、VCAM-1和诱导型一氧化氮合酶表达增加(P<0.05),且在一定浓度范围内表现为剂量依赖性。结论:PPARγ配体曲格列酮能够抑制凝血酶诱导的内皮细胞ICAM-1、VCAM-1和诱导型一氧化氮合酶表达的增加,具有对内皮细胞保护作用。

苦杏仁苷对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠肿瘤坏死因子-α和细胞间黏附分子-1的影响

目的探讨苦杏仁苷对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的抗炎作用机制。方法 Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、苦杏仁苷组、雷公藤多苷组。采用Ⅱ型胶原诱导建立CIA大鼠模型,造模后第15日,各给药组予相应药物灌胃,连续28 d。ELISA检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间黏附分子-1(sICAM-1)水平,免疫组化法检测大鼠关节滑膜TNF-α表达。结果苦杏仁苷组和雷公藤多苷组关节滑膜TNF-α阳性表达相似,较模型组明显减少,且苦杏仁苷组和雷公藤多苷组大鼠外周血中TNF-α、sICAM-1水平与模型组比较均明显下降(P<0.05),与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论苦杏仁苷通过有效抑制TNF-α、sICAM-1水平及TNF-α表达,达到治疗类风湿关节炎的作用。

哮喘患儿诱导痰中ECP、MMPs、黏附分子、T细胞亚群含量检测及临床意义

目的:研究哮喘患儿诱导痰中嗜酸细胞阳离子蛋白(ECP)、基质金属蛋白酶(MMPs)、黏附分子、T细胞亚群含量检测及临床意义。方法:将本院收治的120例支气管哮喘患儿纳入观察组、将同期体检的120例健康儿童纳入对照组,收集诱导痰后检测ECP、MMPs、黏附分子、T细胞亚群含量。结果:观察组诱导痰中ECP、MMP2、MMP9的含量高于对照组,TIMP1含量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组诱导痰中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管黏附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)、P-选择素(P-selectin)、CD44含量均高于对照,差异有统计学意义(P<0.05);观察组诱导痰中Th1细胞、CD4+CD25+T细胞和CD8+CD28-T细胞含量低于对照组,Th2细胞、Th17细胞含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:哮喘患儿诱导痰中ECP、MMPs、黏附分子、T细胞亚群含量异常,并且与嗜酸性粒细胞过度活化、气道重塑、免疫功能失衡密切相关。

雷公藤内酯醇对肾缺血再灌注大鼠凋亡诱导因子及细胞间黏附分子-1表达的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(TP)对肾缺血再灌注(I/R)大鼠的肾保护作用,及对凋亡诱导因子、细胞间黏附分子-1的影响。方法:48只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、I/R模型组(I/R组)、TP高、中、低剂量干预组、泼尼松对照组(Pred组)。采用夹闭双侧肾动脉30 min,再灌注18 h的方法制作肾I/R大鼠模型。检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),原位末端标记法检测肾小管上皮细胞凋亡,观察肾病理改变,计算肾小管损伤(ATN)评分。Western印迹和RT-PCR分别检测AIF、ICAM-1蛋白和基因表达。结果:(1)I/R组血Scr、BUN、ATN评分及细胞凋亡指数较假手术组显著升高(P<0.01);与I/R组比较,TP各组以上指标均改善(P<0.01),pred组血Scr、BUN、ATN评分改善(P<0.01),但细胞凋亡指数无明显变化(P>0.05)。(2)I/R组大鼠肾组织AIF、ICAM-1较假手术组高表达(P<0.01);与I/R组比较,TP各组二者表达均减弱(P<0.01),pred组ICAM-1表达减弱(P<0.01)但AIF表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TP对肾I/R大鼠具有肾保护作用,其部分机制可能与抑制肾小管上皮细胞过度凋亡及AIF、ICAM-1表达有关。

老年多发性骨髓瘤患者血清增殖诱导配体、可溶性细胞间黏附分子-1、血小板生成素和血管内皮生长因子表达水平

多发性骨髓瘤主要特征是恶性变的细胞分泌大量单克隆免疫球蛋白。由于树突细胞是重要的抗原递呈细胞，在激发和控制获得性免疫反应的程度和范围中起重要的作用，也是免疫应答的起始细胞〔1，2〕，因此与其相关的蛋白，可能是促使骨髓瘤发生和发展的因子〔3〕。血清增殖诱导配体（ APRIL）、可溶性细胞间黏附分子（sICAM）－1、血小板生成素（TPO）和血管内皮生长因子（ VEGF）均为此类相关蛋白，骨髓瘤患者四种蛋白血清表达升高〔4～7〕，四者对病变有一定促进作用。本文关注 A－PRIL、sICAM－1、TPO和VEGF在老年人多发性骨髓瘤中的表达及其相关性。

土茯苓抑制白介素-1诱导的血管内皮细胞细胞间黏附分子-1的表达

目的 :探讨中药土茯苓对白介素 1 (IL 1 )诱导的血管内皮细胞表面的细胞间黏附分子 1 (ICAM 1 )表达升高的保护作用。方法 :以原代培养的人脐静脉内皮细胞 (HU VEC)为研究对象 ,采用细胞培养、免疫荧光染色、中药血清药理学方法、流式细胞仪等技术 ,观察IL 1对培养的HUVECICAM 1表达的影响并研究不同时间点及不同浓度的含药血清的抑制作用。结果 :IL 1使HUVEC的ICAM 1的表达明显升高 ,同时含药血清组的ICAM 1的表达比空白血清组低。结论 :土茯苓含药血清能拮抗IL 1致内皮细胞ICAM 1表达升高。

老年毛细支气管炎患者血清和诱导痰上清液中气道上皮细胞间黏附分子-1表达及临床意义

目的探讨老年毛细支气管炎患者血清及诱导痰上清液中气道上皮细胞间黏附分子(ICAM)-1的表达和临床意义。方法经确诊并接受住院治疗的老年毛细支气管炎患者89例为毛细支气管炎组,按照诊断标准分为轻度组(n=32)、中度组(n=28)和重度组(n=29),并收集同期门诊行健康体检的健康老年人74例为对照组。采集外周血与痰液,检测各组ICAM-1表达。毛细支气管炎发病确诊当天为急性期,经7~14 d治疗后患者无发热、呼吸平稳、咳嗽缓解、肺部无啰音,即毛细支气管炎缓解期。结果轻、中、重度组血清和诱导痰液中ICAM-1含量均显著高于对照组(P<0.05);中度组与重度组血清和诱导痰液ICAM-1含量均显著高于轻度组(P<0.05),且重度组血清和诱导痰液ICAM-1含量显著高于中度组(P<0.05)。经治疗后,缓解期轻、中、重度组血清和诱导痰液中ICAM-1含量均显著低于急性期(P<0.05)。毛细支气管炎急性期老年患者诱导痰液与血清中ICAM-1含量呈正性相关(P<0.05),缓解期患者诱导痰液与血清中ICAM-1含量无相关性(P>0.05)。结论 ICAM-1参与毛细支气管炎的发病过程,血清与诱导痰液中ICAM-1的表达存在正相关性。

老年乙型肝炎患者血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体、可溶性血管细胞黏附分子-1、白细胞介素-18和-23的表达

目的分析乙型肝炎老年患者血清可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)、可溶性血管细胞黏附分子(sVCAM)-1、白细胞介素(IL)-18和IL-23表达及临床意义。方法确诊为乙型肝炎的老年患者165例为观察组,体检证实为健康的老年人90例为对照组,均抽取静脉血,分离血清后应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测sTRAIL、sVCAM-1和IL-18、-23表达。结果观察组sTRAIL、sVCAM-1和IL-18、-23表达明显高于对照组,观察组sTRAIL、sVCAM-1和IL-18、-23表达与病变严重程度密切相关。观察组sTRAIL和sVCAM-1、IL-18和-23表达均正相关。结论乙型肝炎老年患者血清sTRAIL、sVCAM-1、IL-18和-23高表达可促进疾病发生及进展,四者对判断病情有一定价值。

黏附因子N-cadherin在体外骨髓间质细胞诱导分化中的表达

目的 :探讨黏附因子N cadherin在骨髓间质细胞诱导分化中的表达及其转化机制。方法 :体外分离 ,扩增Wistar大鼠骨髓间质细胞 ,按一定浓度种植于 2 4孔板内 ,并加入TGF β诱导剂 ,于不同时间点取材固定。用免疫组化方法动态观察N cadherin在骨髓间质细胞诱导分化中表达时相。同时加入抗N cadherin抗体干扰细胞聚集。结果 :N cadherin主要表达于加入诱导剂后 2 4h ,之后呈下调控趋势 ,并呈现时间依赖性。加入抗体后可明显干扰细胞聚集 ,当浓度为 30 0 μl/孔时 ,未见细胞小结形成。 结论 :N cadherin介导了细胞与细胞之间的相互作用 ,在体外间质细胞转化中发挥重要作用。

西罗莫司对缺氧/复氧诱导内皮细胞-中性粒细胞黏附的影响及机制

目的 探讨西罗莫司对缺氧 复氧后血管内皮细胞表面黏附分子的表达和中性粒细胞 内皮细胞黏附的影响及机制。方法 采用 β N 乙酰氨基己糖苷酶比色法检测黏附率 ,流式细胞术检测内皮细胞表面黏附分子E 选择素、细胞间黏附分子 1(ICAM 1)的表达 ,Fenton反应测定活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)的含量 ,Western杂交法检测内皮细胞c JunN端激酶 (JNK)及核因子 κB[nuclearfactor κB ,NF κB(P6 5 ) ]蛋白的表达。结果 血管内皮细胞经缺氧 复氧处理后ROS释放增多 ,JNK及NF κB(P6 5 )蛋白表达增加 ,E 选择素、ICAM 1的表达上调 ,其表面中性粒细胞的黏附增加 ,西罗莫司显著抑制缺氧 复氧的上述作用。结论 西罗莫司抑制缺氧 复氧后血管内皮细胞与中性粒细胞的黏附 ,并可能通过抑制ROS、JNK、NF

siRNA敲减缺氧诱导因子1α表达对口腔鳞癌细胞活力及癌胚抗原相关细胞黏附分子1表达的影响

目的:探究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)与口腔鳞癌细胞活力和凋亡的关系以及作用机制。方法:采用RT-PCR和Western blot检测口腔鳞癌细胞系Tca8113和CAL27以及正常口腔上皮细胞NOK中HIF-1α和癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)的mRNA和蛋白表达量; RNA干扰技术沉默口腔鳞癌CAL27细胞中HIF-1α的表达,实验分为空白对照组、无义对照组和siRNA-HIF1-α组,MTT实验检测敲减HIF-1α表达对细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化,Western blot检测HIF-1α、P21、血管内皮生长因子(VEGF)、Bcl-2和Bax的蛋白水平。结果:HIF-1α和CEACAM1在口腔鳞癌细胞中的表达量显著高于正常口腔细胞(P <0. 05),且二者表达量呈正相关; HIF-1α和CEACAM1在CAL27细胞中的表达量显著高于Tca8113细胞(P <0. 05)。siRNA-HIF-1α组细胞中的HIF-1α蛋白表达量显著低于空白对照组(P <0. 05)。敲减HIF-1α表达显著抑制CAL27细胞的活力(P <0. 05),促进其凋亡(P <0. 05),显著增加P21和Bax的蛋白水平(P <0. 05),明显降低VEGF和Bcl-2的蛋白水平(P <0. 05)。结论:HIF-1α在口腔鳞癌中高表达,干扰HIF-1α的表达可显著抑制细胞的活力,促进其凋亡。这可能是通过调控HIF-1α下游靶基因的表达以及肿瘤血管的生成来发挥作用的。

氟伐他汀对抗磷脂综合征患者血清诱导人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子-1表达的影响及机制

抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome，APS）是一种非器官特异性自身免疫性疾病，其特征为血清抗磷脂抗体Canti-phosphoslipid antibody，APA）阳性，临床表现为反复的动静脉血栓形成、习惯性流产和血小板减少等症状。

缺血缺氧性脑病新生儿血清缺氧诱导因子-1α、神经元特异性烯醇化酶、细胞间黏附分子-1水平表达及意义

目的探讨缺血缺氧性脑病(hypoxic ischemic encephalopathy,HIE)新生儿血清缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)、神经元特异性烯醇化酶(Neuron-specific enolase,NSE)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecules-1,ICAM-1)水平表达及临床应用价值。方法选取2016年1月至2019年6月海南省海口市琼山区妇幼保健院就诊的75例足月HIE患儿为研究对象,根据病情轻重程度分为轻度组(26例)、中度组(31例)和重度组(18例),同时根据患儿恢复情况分为预后良好组(58例)和预后不良组(17例)。检测血清HIF-1α、NSE、ICAM-1水平,分析其表达与HIE患儿病情的关系,研究HIF-1α、NSE、ICAM-1检测对HIE预后的预测价值。结果重度组血清HIF-1α、NSE、ICAM-1水平高于中度组,中度组又明显高于轻度组(P<0.05);重度组新生儿神经行为评分(neonatal behavioral neurological assessment,NBNA)显著低于中度组,而中度组又低于轻度组(P<0.05);血清HIF-1α、NSE、ICAM-1水平与HIE患儿NBNA评分均呈负相关(P<0.05);预后不良组血清HIF-1α、NSE、ICAM-1水平显著高于预后良好组(P<0.05);血清HIF-1α、NSE、ICAM-1预测HIE患儿预后不良的接受者操作特征曲线下面积为0.821、0.850、0.817。结论血清HIF-1α、NSE及ICAM-1水平与HIE患儿病情密切相关,三者可作为评估患儿预后的参考指标。

shRNA干扰HIF-1α对人宫颈癌细胞黏附分子表达的影响

目的:在细胞和移植瘤水平研究shRNA干扰低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)对宫颈腺癌HeLa细胞中黏附分子CD44v6及上皮型钙黏素(E-cadherin)表达的影响。方法:将人宫颈癌Hela细胞株(记为H0细胞)、转染pGenesil-1空白质粒的HeLa细胞株(记为H1细胞)及转染HIF-1α-shRNA质粒的HeLa细胞株(记为H2细胞)分别行常氧培养及低氧(1%O2)培养,应用Western blotting检测每组HeLa细胞中HIF-1α、CD44v6、E-cadherin及β连接素(β-catenin)在细胞水平的表达情况,应用免疫组织化学法检测HIF-1α、CD44v6、E-cadherin及β-catenin在上述3种HeLa细胞裸鼠移植瘤模型瘤组织水平的表达情况。结果:Western blotting分析显示,H0和H1细胞低氧组检测到HIF-1α、β-catenin、CD44v6蛋白呈强阳性,而E-cadherin表达减弱;常氧状态下H0、H1和H2组及低氧下H2组HIF-1α无表达、E-cadherin表达呈阳性。免疫组化分析发现H0及H1组移植瘤组织中HIF-1α、E-cadherin、β-catenin及CD44v6的表达分别为0.651±0.057、0.198±0.015、0.465±0.061及0.687±0.102,0.671±0.069、0.201±0.020、0.452±0.038及0.701±0.071,H2组分别为0.194±0.023、0.548±0.045、0.421±0.052及0.187±0.057,H2组与H0和H1组间HIF-1α、E-cadherin、及CD44v6表达的差异有统计学意义(P<0.05);相关性分析提示HIF-1α与E-cadherin、CD44v6的表达有一定相关性。结论:通过shRNA干扰抑制人宫颈癌HeLa细胞HIF-1α,可一定程度上下调低氧环境中宫颈癌HeLa细胞黏附分子CD44v6及上调E-cadherin的表达。

辛夷挥发油对内皮细胞与中性粒细胞黏附的抑制作用

目的探讨辛夷挥发油对内皮细胞与中性粒细胞黏附的抑制作用。方法利用TNF-α诱导活化的内皮细胞与人外周血中性粒细胞的体外黏附实验,观察辛夷挥发油对其黏附功能的影响。结果体外培养的人脐静脉内皮细胞在TNF-α刺激后,与人外周血中性粒细胞发生黏附,计数法计算的黏附量为248.6±13.8;而辛夷挥发油处理后,黏附量明显降低,在0.5、1.0、2.0μl/ml浓度的黏附量分别为191.6±8.2,158.2±9.0,155.2±9.7(均P<0.05)。结论辛夷挥发油能抑制活化的人内皮细胞与中性粒细胞黏附,具有抗炎与抗黏附效应。

生物材料诱导细胞凋亡的研究进展

针对近些年生物材料诱导细胞凋亡的现象和机制的研究情况,从凋亡信号传导角度分类综述了生物材料诱导细胞凋亡的途径,包括传统信号传导途径、死亡受体途径、以及近年发现的线粒体途径,另外也论述了生物材料诱导活性氧产生而发生的凋亡和影响细胞黏附导致的细胞凋亡等途径,发现生物材料诱导的细胞凋亡产生的途径具有明显的多样性、交叉性和多途径同时作用的特点。本综述对于生物材料诱导细胞凋亡机制的深入研究特别是生物材料的研制具有重要的指导意义。此外也为生物材料广泛应用于人类疾病特别是应用于与细胞凋亡紧密相关的癌症治疗提供了借鉴。

氟伐他汀对醛固酮诱导的系膜细胞SGK1及CTGF表达的影响

目的:观察氟伐他汀对醛固酮(Ald)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)血清与糖皮质激素诱导蛋白激酶1(SGK1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:以大鼠系膜细胞为实验对象,分为:(1)对照组;(2)不同浓度及时间Ald组;(3)Ald(10-7mol/L)+SPI(安体舒通10-9mol/L)组;(4)Ald(10-7mol/L)+LY294002(PI3K抑制剂20μmol/L)组;(5)Ald(10-7mol/L)+SB203580(P38MAPK抑制剂20μmol/L);(6)Ald(10-7mol/L)+F(氟伐他汀10-7、10-6、10-5mol/L)组;(7)Ald(10-7mol/L)+F(氟伐他汀10-5mol/L)+MVA(甲羟戊酸10-4mol/L)组;(8)Ald(10-7mol/L)+F(氟伐他汀10-5mol/L)+FPP(法尼酯焦磷酸10-5mol/L)组;(9)Ald(10-7mol/L)+F(氟伐他汀10-5mol/L)+GGPP(焦磷酸牛儿基牛儿酯10-5mol/L)组。Western印迹方法检测SGK1、CTGF蛋白表达水平。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞培养液中细胞外基质成分纤维连接蛋白(FN)、单核细胞趋化因子(MCP-1)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白含量。结果:Ald呈剂量依赖性上调SGK1和CTGF蛋白表达(P<0.05)。醛固酮刺激6h即可增加SGK1蛋白表达(P<0.05),12h达高峰,CTGF蛋白水平呈时间依赖性增加。安体舒通和PI3K特异性抑制剂LY294002可阻断Ald对SGK1的激活作用(P<0.01)。氟伐他汀可呈剂量依赖性下调Ald诱导的系膜细胞内SGK1和CTGF蛋白表达,以及其下游趋化因子MCP-1和ICAM-1表达(P<0.05)。甲羟戊酸和GGPP可逆转氟伐他汀的作用(P<0.05)。结论:醛固酮可通过抑制盐皮质激素受体(MR)和PI3K信号转导通路诱导大鼠系膜细胞内SGK1和CTGF蛋白的表达,氟伐他汀可通过SGK1信号转导通路缓解Ald的致纤维化作用。甲羟戊酸可部分逆转氟伐他汀的作用,可能与甲羟戊酸通路中的Rho蛋白活化有关。

重组MMP-14分解区蛋白诱导成骨样细胞凋亡的机制

目的 :观察重组基质金属蛋白酶 1 4 (matrixmetalloproteinase 1 4 ,MMP 1 4 )分解区蛋白 (recombinantma trixmetalloproteinase 1 4catalyticdomain ,RMC)对人成骨样细胞SaOS 2凋亡的影响 ,探讨MMP 1 4分解区蛋白在骨代谢中的作用。方法 :MMP 1 4分解区蛋白在细胞培养液中的表达用Westernblotting检测。RMC对SaOS 2细胞MMP 2酶原激活的影响用明胶酶谱检测 ,并检测其对SaOS 2细胞黏附功能的影响。细胞凋亡用吖啶橙 /溴乙啶染色与ELISA检测。结果 :观察到MMP 1 4分解区蛋白在SaOS 2细胞培养液中 5 6kD的MMP 1 4表达。RMC促进细胞凋亡的作用呈剂量依赖性 ,且此作用可被EDTA阻断。RMC激活MMP 2酶原 ,抑制SaOS 2细胞在Ⅰ型胶原上的黏附。结论 :重组MMP 1 4分解区蛋白可通过降解骨基质蛋白 ,诱导人成骨样细胞SaOS

TRAIL对人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226黏附和凋亡的影响及其作用机制的初步探讨

本研究探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL对人多发性骨髓瘤细胞系RMPI8226的生长抑制作用,对细胞黏附和凋亡的影响及其作用机制。用MTT法检测TRALL对RPMI8226黏附功能和生长的影响;用AnnexinⅤ/PI检测细胞凋亡;流式细胞学检测细胞表面黏附分子的表达;RT-PCR法测定凋亡相关基因表达水平和Western blot法检测凋亡相关蛋白表达。结果表明:TRAIL抑制RPMI8226细胞生长;可诱导RPMI8226细胞凋亡,并伴有抗凋亡基因Mcl-1、XIAP、cFLIP、CARP1、CARP2和Bcl-2mRNA表达水平下降,促凋亡基因Bax mRNA表达水平升高;RPMI8226细胞内的凋亡执行蛋白caspase-3和NF-κB P65(RelA)表达水平随TRAIL浓度的增加而下降。此外,TRAIL明显上调了RPMI8226细胞表面黏附分子CXCR4的表达。结论TRAIL上调人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞表面的黏附分子CXCR4表达水平。TRAIL可诱导人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226凋亡。在一定的浓度范围内,TRAIL对人骨髓瘤细胞株RPMI8226的生长抑制呈时间-剂量依赖性。