山茱萸总萜调控伴胰岛素抵抗的PCOS大鼠及其卵巢颗粒细胞分泌作用的机制

目的研究山茱萸总萜调控伴胰岛素抵抗的PCOS大鼠及其卵巢颗粒细胞分泌作用的机制。方法 22日龄雌性SD大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠9 mg·100g-1·d-1共20 d,伴高脂饮食喂养60 d建立伴IR的PCOS大鼠模型,将PCOS大鼠随机分为模型组和治疗组。治疗组以山茱萸总萜、氯米芬和罗格列酮干预。葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FBG)。放射免疫法测定空腹胰岛素(Fins)、睾酮(T)、雌二醇(E2)、促卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的含量。同时,随机取各组大鼠2只皮下注射PMSG 10 IU/kg,48 h后颈椎脱臼法处死。在无菌条件下迅速剖取卵巢,刺破卵泡,获取卵巢颗粒细胞。光镜观察卵巢形态及颗粒细胞分布,用不同浓度山茱萸总萜、氯米芬和罗格列酮干预培养,检测颗粒细胞对葡萄糖的摄取量和分泌孕激素(P)的量。结果与模型组比较,治疗组大鼠Fins浓度均显著降低(P<0.01),ISI显著升高(P<0.01),T和E2浓度均显著降低(P<0.01),FSH浓度显著升高(P<0.01),大鼠卵巢卵泡内颗粒细胞层数明显增加,孕激素分泌增加(P<0.05),葡萄糖摄取能力增加(P<0.05)。与氯米芬和罗格列酮双阳性对照组相比,无明显区别(P>0.05,P>0.05)。结论山茱萸总萜可改善胰岛素抵抗,细胞葡萄糖摄取,并增加其雌激素和孕酮的分泌。

补肾益气安神方剂对来曲唑诱导的PCOS大鼠卵泡中AMH表达的影响

目的:探讨补肾益气安神方剂对来曲唑诱导的PCOS大鼠卵泡中AMH表达的影响。方法:采用来曲唑诱导法建立PCOS大鼠模型45例,分为模型组、对照组(给予达英-35)、治疗组(给予补肾益气安神方剂)。比较各组大鼠血清中E_2、P、T、LH、FSH、AMH的表达差异,从而观察检测指标在PCOS中的作用以及补肾益气安神方剂对PCOS的治疗效果。结果:与模型组相比,治疗组大鼠血清E_2、P水平明显升高(P<0.05),血清LH、T、FSH、AMH水平显著降低(P<0.01)。与对照组相比,治疗组大鼠血清LH、FSH、T、AMH水平略偏高(P<0.01),血清E_2水平略低(P<0.05),而血清P水平无显著差异(P>0.05)。结论:补肾益气安神方剂对来曲唑诱导的PCOS大鼠有显著治疗效果,可能因其参与了大鼠内分泌调节,对卵巢的局部微循环有改善作用,有利于卵泡发育、成熟及排卵,从而改善卵巢的多囊状态。

补肾调经汤对PCOS大鼠血清激素水平影响的实验研究

观察补肾调经汤对多囊卵巢综合症(PCOS)大鼠卵巢分泌激素LH、FSH、T值的影响。总结其临床疗效,探索其作用机理,为其临床应用提供科学依据。方法:规律发情周期SD雌性大鼠50只,应用人绒毛膜促性腺激素(HCG)联合胰岛素(INS)造模法制作为动物模型,随机分为正常对照组、模型对照组、二甲双胍组、补肾调经汤低剂量组、补肾调经汤高剂量组。运用放射免疫法测定血清性激素水平的变化。结果:补肾调经汤高剂量组通过调整内分泌,降低血清T、LH水平,以及降低LH/FSH比值,此可能是临床治疗多囊卵巢综合症高雄激素血症和高LH方法之一。

补肾益气安神方剂治疗来曲唑诱导的PCOS大鼠的实验研究

目的:探讨补肾益气安神方剂在来曲唑诱导的PCOS模型大鼠治疗过程中的作用。方法:采用来曲唑诱导法建立PCOS大鼠模型40例,给予达英-35作阳性对照组、给予补肾益气安神方剂为治疗组。比较治疗前后各组大鼠血清中E2、P、FSH、LH、T、FPG、FINS、HOMA-IR水平的变化。结果:与治疗前相比,治疗后两组大鼠血清E2、P水平明显升高(P<0.05),LH、T、FSH、FPG、FINS较治疗前明显降低。经统计学分析,治疗后两组的E2、LH比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组的P、T、FSH、FPG、FINS、HOMA-IR比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:补肾益气安神方剂对PCOS胰岛素抵抗大鼠的疗效确切,本方通过调节内分泌,使卵巢血流量增加,胰岛素抵抗得到改善,胰岛素效应得到增强,从而促使卵泡发育、诱发排卵。

补肾活血方对促排卵PCOS大鼠子宫内膜整合素αvβ3的表达调节

目的观察补肾活血方对促排卵的PCOS模型大鼠子宫内膜上的ανβ3及雌孕激素受体的表达影响,研究此方剂对PCOS大鼠子宫内膜容受性的是否有调节作用。方法用来曲唑灌胃法建立PCOS大鼠模型,对建模成功的大鼠以克罗米芬溶液灌胃促排卵,并将随机分为对照组和方剂组,方剂组额外给予补肾活血方灌胃。五天后处死大鼠取子宫内膜,检测雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及整合素ανβ3的表达情况。结果(1)正常组大鼠子宫内膜上的ER和PR表达与方剂组相似(P>0.05),均高于对照组(P<0.05);(2)关于整合素ανβ3表达,正常组高于其他组(P<0.05),方剂组高于模型组(P<0.05)。结论补肾活血方可以调节促排卵PCOS大鼠子宫内膜上雌孕激素受体含量,并在一定程度上增加整合素ανβ3的表达,认为其有改善PCOS大鼠子宫内膜容受性的作用。

模拟肾虚痰湿特征信息PCOS大鼠模型中GDF-9、BMPR-2的表达研究

目的:探讨生长分化因子-9(GDF-9)及骨形态发生蛋白受体-2(BMPR-2)在有肾虚痰湿特征信息的肥胖多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型的卵巢颗粒细胞中的表达。方法:分别在来曲唑(Letrozole)和脱氢表雄酮(DHEA)造模基础上加用高脂乳剂,建立肥胖PCOS动物模型,结合阴道脱落细胞涂片、大鼠体质量增加幅度、血脂水平和卵巢形态学的改变进行模型验证,选用免疫组化法检测大鼠模型卵巢组织卵泡颗粒细胞中GDF-9、BMPR-2的表达。结果:模型建立成功,Letrozole模型组、Letrozole肥胖模型组GDP-9积分光密度总和均显著低于高脂模型组。此外,Letrozole肥胖模型组GDP-9平均灰度均值低于高脂模型组,DHEA模型组和DHEA肥胖模型组GDF-9积分光密度总和均显著高于空白对照组,Letrozole模型组BMPR-2积分光密度总和均显著高于高脂模型组,DHEA模型组BMPR-2积分光密度总和显著高于高脂模型组。结论:推测GDF-9、BMPR-2在肥胖PCOS大鼠模型卵巢的卵泡颗粒细胞中表达降低可能是肥胖PCOS发生发展的重要原因。

Ki-67在肥胖PCOS大鼠模型卵巢颗粒细胞中的表达研究

目的:探讨子宫内膜生存素Ki-67在肥胖多囊卵巢综合(PCOS)大鼠模型卵巢颗粒细胞中的表达。方法:分别在来曲唑(Letrozole)和脱氢表雄酮(DHEA)造模基础上加用高脂乳剂,建立肥胖PCOS动物模型,结合血清性激素、大鼠处死时体重增加幅度及脏器指数改变进行模型验证,选用免疫组织化学法检测大鼠模型卵巢组织卵泡颗粒细胞中Ki-67的表达。结果:模型建立成功。Letrozole模型组和DHEA模型组Ki-67积分光密度总和、平均灰度均值显著低于空白对照组(P<0.05),此外,Letrozole肥胖模型组和DHEA肥胖模型组Ki-67积分光密度总和、平均灰度均值极显著低于空白对照组和高脂模型组(P<0.01);Letrozole肥胖模型组Ki-67平均灰度均值显著低于Letrozole模型组(P<0.05),DHEA肥胖模型组Ki-67平均灰度均值显著低于DHEA模型组(P<0.05),差异有统计学意义。结论:Ki-67在PCOS大鼠模型卵巢的卵泡颗粒细胞中表达降低可能是PCOS发生发展的重要原因,且Ki-67在肥胖PCOS大鼠模型卵巢卵泡颗粒细胞中表达降低更明显。

冷应激反应加重大鼠多囊卵巢综合征生殖功能障碍

目的研究冷应激刺激对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠生殖功能的影响及其作用机制。方法将大鼠分为对照组(Contral)、模型组、冷应激组、抑制剂组(给予HSP90抑制剂50 mg/kg)及联合组(冷应激联合HSP90抑制剂),每组10只。ELISA检测血清性激素及氧化应激水平、HE染色观察卵巢形态、TUNEL检测卵巢细胞凋亡、免疫印迹检测HSP90、NF-κB p65、IkB、TAK-1和RIP蛋白表达。结果与对照组FSH[(16.37±2.14)mU/mL]、LH[(9.32±1.46)nmol/L]、T[(1.23±0.17)nmol/L]比较,模型组FSH[(7.21±1.54)mU/mL]与联合组FSH[(7.25±1.51)mU/mL]降低(P<0.05),模型组LH[(20.34±2.81)nmol/L]、T[(1.58±0.26)nmol/L]与联合组LH[(20.28±2.85)nmol/L]、T[(1.56±0.27)nmol/L]升高(P<0.05);与模型组比较,抑制剂组FSH[(6.28±1.24)mU/mL]降低、LH[(22.08±2.73)nmol/L]、T[(1.64±0.25)nmol/L]升高(P<0.05),与抑制剂组比较,冷应激组FSH[(5.34±0.67)mU/m L]降低、LH[(23.17±2.95)nmol/L]与T[(1.79±0.31)nmol/L]升高(P<0.05)。与对照组比较,模型组与联合组SOD、GSH-Px水平降低,MDA水平升高(P<0.05),与模型组比较,抑制剂组SOD、GSH-Px水平升高,MDA水平降低(P<0.05),与抑制剂组比较,冷应激组SOD、GSH-Px水平降低,MDA水平升高(P<0.05)。对照组大鼠卵巢组织结构正常;模型组与联合组卵巢皮质黄体及卵泡减少,卵泡囊性扩张并有闭锁产生;冷应激组与抑制剂组大鼠的卵巢主要表现为大量的小窦卵泡、囊性卵泡和增大的卵泡膜细胞层,且以冷应激组更为严重。对照组、模型组、抑制剂组、冷应激组与联合组的细胞凋亡率分别为(5.62±0.58)%、(41.38±3.92)%、(52.67±4.22)%、(63.48±5.71)%、(40.62±4.28)%,对照组卵巢组织中细胞凋亡率低于模型组、联合组(F=168.200,P<0.001),抑制剂组卵巢组织中细胞凋亡率较模型组高(t=6.213,P<0.001),冷应激组细胞凋亡率较抑制剂组高(t=4.815,P<0.001)。与对照组比较,模型组大鼠卵巢组织中HSP90、NF-κB p65、IkB、TAK-1、RIP升高(P<0.05),与模型组比较,冷应激组与对照组大鼠卵巢组织中HSP90、NF-κB p65、IkB、TAK-1、RIP升高(P<0.05)。大鼠卵巢组织中HSP90与PI3K在冷应激刺激后的表达呈正相关关系(R=0.581,P<0.001)。结论冷应激加重PCOS大鼠生殖功能障碍。

补肾化痰祛瘀类中药对PCOS模型大鼠生殖内分泌系统影响的实验研究

目的:观察PCOS模型大鼠血清性激素T、FSH、LH及卵巢重量、面积的变化,探讨补肾化痰祛瘀类中药对PCOS模型大鼠生殖内分泌系统的影响。方法:用Poresky法诱导多囊卵巢综合征大鼠,并分别以补肾化痰祛瘀类中药、西药(罗格列酮)、中西药联合用药治疗,观察治疗后对血清性激素T、FSH、LH的影响以及卵巢重量和面积的变化。结果:补肾化痰祛瘀类中药能降低降低血清T、LH水平,以及降低LH/FSH比值,降低卵巢重量及卵巢平均面积。结论:补肾化痰祛瘀类中药能改善PCOS大鼠的生殖内分泌功能。

补肾化瘀方对PCO大鼠血清性激素水平影响的研究

目的:通过研究补肾化瘀法及其组方对PCO大鼠血清性激素水平的影响,从而探讨补肾化瘀方影响PCO大鼠性激素水平的机制,为临床治疗PCOS提供理论依据。方法:选用6周龄SPF级SD有规律的动情周期雌性大鼠79只,随机分为模型对照组,补肾化瘀方高、中、低剂量组,阳性药物对照组,空白对照组。进行药物干预后,检测大鼠血清性激素水平。结果:经补肾化瘀方灌胃后,高、中剂量组INS水平低于模型组(P<0.01)。低剂量组和阳性药物组LH水平下降明显(P<0.01)。E2水平高、中、低剂量组与模型组无明显差异(P>0.05),与阳性药物组差异显著(P<0.01)。结论:补肾化瘀方有可能通过对下丘脑-垂体-卵巢生殖轴的调节,达到改善PCOS内分泌的状况;补肾化瘀方和达英-35均能影响激素水平,但可能作用环节不同;激素参数的差异,可能提示与中药作用的多层次有关;且中药降胰岛素水平优于达英-35,体现了中药治疗的优势。

益五合方对PCO大鼠子宫内膜容受性的影响

目的通过建立多囊卵巢(polycystic ovarian,PCO)大鼠模型,观察名老中医刘云鹏经验方—益五合方对多囊卵巢大鼠的子宫内膜容受性的临床影响。方法研究时间为2020年6月—2021年6月,60只SD大鼠随机分10只为空白对照组,50只为模型制备组,予颈背部皮下注射脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)溶液建立PCO大鼠模型,判定造模成功后随机分为模型对照组、中药组(益五合方组)、西药组(克罗米芬组)、联合用药组(益五合方联合克罗米芬组),各组分别连续干预2周,采用ELISA法检测经药物干预后各组大鼠血清T水平,用于免疫组化检测大鼠炎性因子VEGF、TGF-β。结果成功建造PCO大鼠模型,益五合方可提高PCO大鼠炎性因子VEGF、TGF-β,炎性因子差异有统计学意义(P<0.05)。结论推测CC促排卵周期中合用经验方益五合方,可减少克罗米芬在促排卵过程中对子宫内膜容受性产生的负面影响,提高子宫内膜的容受性,使得受孕机率得以提升。

不同造模方法对大鼠多囊卵巢综合征模型的影响

目的采用不同方法诱导SD清洁级雌性大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)动物模型,造模完成后检测大鼠血清相关激素并观察卵巢局部形态学改变,并探讨其意义。方法分别采用来曲唑、硫酸普拉睾酮钠、硫酸普拉睾酮钠联合HCG诱导大鼠PCO模型,RIA法测定血清LH、FSH、E2、P、T、PRL、INS水平,HE染色后光镜下观察卵巢局部形态。结果A组(对照组)和B组(来曲唑组)比较,B组较A组血清FSH浓度升高,血清P浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05);B组血清T浓度较A组明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。D组(硫酸普拉睾酮钠组)与C组(对照组)比较,两组间血清性激素及INS差异无显著性(P>0.05)。E组(硫酸普拉睾酮钠联合HCG组)与C组比较,E组血清T浓度、LH/FSH比值较C组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。E组与D组比较,血清P、T浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05)。A、C两组卵巢局部形态基本正常,可见发育成熟的卵泡及优势卵泡,B、D、E三组未见优势卵泡,均可见卵巢多囊样改变。结论使用来曲唑或硫酸普拉睾酮钠联合HCG诱导大鼠PCOS模型,无论在影响血清性激素还是卵巢局部形态学改变方面与临床表现很接近,符合动物PCOS造模要求。

不同造模方法对大鼠多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗模型的影响

目的:采用不同方法诱导SD清洁级雌性大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)伴胰岛素抵抗(IR)动物模型,造模完成后检测大鼠血清相关激素、空腹血糖(FPG)及空腹胰岛素(FINS)并观察卵巢局部形态学改变。方法:分别采用来曲唑、脱氢表雄酮、左旋-十八甲基炔诺酮硅胶棒联合HCG诱导大鼠PCOS伴IR模型,ELISA法测定血清促黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、空腹胰岛素(FINS)水平,并用血糖仪测定FPG,HE染色后光镜下观察卵巢局部形态。结果:A组(对照组)和B组(来曲唑组)比较,B组较A组血清FSH、FINS及T浓度升高,差异有统计学意义(P<0.05);B组血清LH浓度较A组明显升高,差异有显著统计学意义(P<0.05)。D组(左旋-十八甲基炔诺酮硅胶棒联合HCG组)与C组(对照组)比较,D组血清LH、E2浓度较C组升高,差异有统计学意义(P<0.05);D组T浓度较C组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。E组(脱氢表雄酮组)中途失败剔除。A、C 2组卵巢局部形态基本正常,可见发育成熟的卵泡及优势卵泡,B、D二组未见优势卵泡,均可见卵巢多囊样改变。结论:使用来曲唑或左旋-十八甲基炔诺酮硅胶棒联合HCG诱导大鼠PCOS伴IR模型,无论在影响血清激素及FPG、FINS,还是卵巢局部形态学改变方面与临床表现很接近,符合动物PCOS伴IR造模要求。

电针联合补肾活血方对多囊卵巢综合征大鼠促排卵后子宫内膜容受性的影响

目的：观察电针联合补肾活血方对PCOS大鼠促排卵后子宫内膜容受性的影响。方法：将70只大鼠,分为正常组（G）-模型组（M）、克罗米芬组（CC）、克罗米芬＋补佳乐组（CC＋PVG）、克罗米芬＋电针组（CC＋A）、克罗米芬＋补肾活血方组（CC＋M）、克罗米芬＋针药结合组（CC＋M＋A）,每组10只。均于80日龄起进行干预,连续治疗5天。治疗结束后,摘取双侧子宫,左侧子宫固定作HE染色,测量子宫腺体和腺腔的等效直径、面积、子宫内膜平均厚度。光镜下观察子宫内膜形态及微血管密度。检测血清及子宫内膜上的E2、P4。右侧子宫刮取子宫内膜于~80℃保存备用,采用PCR及Western blotting蛋白分析技术,测定大鼠子宫内膜组织ER、PR、HOXA10、Integrinavb3蛋白表达。结果：（1）子宫内膜形态上,CC＋M＋A组与正常组无统计学差异（P〉0.05）;两组与模型组、CC组、CC＋PVG组、CC＋A、CC＋M组比较有升高,经统计学比较,有统计学意义（P〈0.05）;（2）各组血清、子宫内膜上性激素E2、P4比较：除CC＋PVG组E2明显高于其它几组外,其它几组间无明显差异;（3）各组ER、PR、HOXA10、Integrinavb3mRNA和蛋白表达基本一致。正常组与CC＋M、CC＋A、CC＋M＋A、CC＋PVG组比较明显升高,有统计意义（P〈0.05）;CC＋M、CC＋A、CC＋M＋A三组之间无明显差异（P〉0.05）,三组较模型组、CC组升高,有统计学意义（P〈0.05）。结论：CC＋M、CC＋A、CC＋M＋A组通过提高子宫内膜上ER、PR、HOXA10、Integrinavb3mRNA和蛋白表达机制,从而改善子宫内膜容受性。

改良多囊卵巢综合征大鼠模型卵泡颗粒细胞中凋亡调控蛋白Bcl-2 Bax表达的研究

目的:探讨凋亡调控蛋白Bcl-2和Bax在改良多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠模型卵巢的卵泡中颗粒细胞中的表达。方法:分别在来曲唑(Letrozole)和脱氢表雄酮(DHEA)造模基础上加用高脂乳剂,建立改良PCOS动物模型,结合阴道脱落细胞涂片、大鼠血清性激素水平、处死时体重增加幅度和卵巢形态学的改变进行模型验证,选用免疫组织化学法检测大鼠卵巢组织Bcl-2、Bax的表达。结果:模型建立成功。免疫组织化学结果显示高脂模型组、Letrozole模型组、Letrozole改良组、DHEA模型组和DHEA改良组Bax平均灰度均值均高于空白对照组,Bcl-2平均灰度均值均低于空白对照组,差异无统计学意义。结论:Bcl-2在卵巢的卵泡颗粒细胞中表达下调,Bax表达上调,推测两者表达改变可能是导致改良PCOS模型大鼠卵巢中颗粒细胞凋亡增多的关键因素。

神经节苷脂GM3在多囊卵巢综合征大鼠卵巢及卵泡中的定位研究

目的:探讨神经节苷脂GM3在多囊卵巢综合征大鼠卵巢发育过程中的表达及定位,为进一步研究神经节苷脂GM3在卵泡发育和排卵过程中的作用提供依据。方法:采用高性能薄层色谱分析法测定PCOS大鼠卵巢神经节苷脂GM3的表达;用免疫荧光激光共聚焦技术检测神经节苷脂GM3在PCOS大鼠的不同发育阶段卵泡中的表达及定位。结果:多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织中提取的神经苷脂主要成分为GM3;与正常对照组相比,PCOS大鼠卵巢组织中神经苷脂GM3的表达水平显著降低。PCOS大鼠的初级卵泡、次级卵泡及窦状卵泡中的神经苷脂GM3的表达水平显著降低。结论:多囊卵巢综合征大鼠的卵巢发育过程中神经苷脂GM3的表达水平显著降低。提示,卵泡发育异常可能与GM3的表达程度密切相关。

补肾调泡周期法对多囊卵巢模型大鼠卵巢AMH及AMHR Ⅱ表达的调控

目的研究补肾调泡周期法对多囊卵巢(PCO)模型大鼠卵巢抗苗勒氏管激素(AMH)及Ⅱ型受体(AMHR Ⅱ)蛋白表达的调控,初步探讨补肾调泡周期法治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的作用机制。方法110只SD雌性大鼠随机选取10只作为正常组,剩余100只采用来曲唑溶液灌胃法构建PCO大鼠模型成功后,设立模型组、阳性对照组、A-逍遥散(高、低剂量)组、B-三子汤(高、低剂量)组、A+B-逍遥散+三子汤周期用药4组,每组10只。统计分析各组大鼠治疗前后体质量增加量;卵巢脏器系数;HE染色法观察卵巢组织病理形态;免疫组织化学法检测PCO大鼠卵巢AMH、AMHRⅡ蛋白表达。结果体质量增加量:与正常组比较,PCO模型组大鼠体质量增加量明显增多(P<0.01);与模型组比较,A低B高组、B低组及阳性对照组大鼠体质量增加量减少(P<0.05)。卵巢系数:与正常组比较,PCO模型组大鼠卵巢系数明显升高(P<0.01);与模型组比较,A低组大鼠卵巢系数降低(P<0.05),A高组、B高组、A低B低组、A低B高组及阳性对照组大鼠卵巢系数明显降低(P<0.01)。AMH蛋白表达:与正常组比较,PCO模型组大鼠卵巢AMH蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,所有治疗组及阳性对照组大鼠卵巢AMH蛋白表达明显降低(P<0.01);治疗组间两两比较:与A高B高组比较,A(高、低)组、B(高、低)组、A低B低组、A低B高组大鼠卵巢AMH蛋白表达明显升高(P<0.01),A高B低组大鼠卵巢AMH蛋白表达升高(P<0.05)。AMHRⅡ蛋白表达:与正常组比较,PCO模型组大鼠卵巢组织AMHRⅡ蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,A低剂量组AMHRⅡ蛋白表达降低(P<0.05),余治疗组及阳性对照组AMHRⅡ蛋白表达明显降低(P<0.01);治疗组间两两比较:与B高组比较,A低组、B低组大鼠卵巢组织AMHRⅡ蛋白表达明显升高(P<0.01),A高组大鼠卵巢组织AMHRⅡ蛋白表达升高(P<0.05),A高B高组AMHRⅡ蛋白表达明显降低(P<0.01);与B低组比较,B高组、A+B周期用药4组及阳性对照组AMHRⅡ蛋白表达明显降低(P<0.01);与A低B低组比较,A(低、高)组、B低组、A高B低组AMHRⅡ蛋白表达明显升高(P<0.01);与A低B高组比较,A(低、高)组、B低组AMHRⅡ蛋白表达明显升高(P<0.01),A高B高组AMHRⅡ蛋白表达明显降低(P<0.01),A高B低组AMHRⅡ蛋白表达降低(P<0.05);与A高B高组比较,A(低、高)组、B(低、高)组、A低B高组、A高B低组AMHRⅡ蛋白表达明显升高(P<0.01);A+B周期用药4组间大鼠卵巢AMHRⅡ蛋白表达差异比较:A高B高组<A低B高组<A高B低组。结论补肾调泡周期法能明显降低PCO模型大鼠治疗前后体质量增加量;可明显降低PCO模型大鼠的卵巢系数;改善卵巢组织病理学形态;明显降低PCO模型大鼠卵巢AMH及AMHRⅡ蛋白表达,补肾调泡周期法可能通过抑制AMH信号通路,影响卵泡募集和选择,促进卵泡发育和成熟,进而恢复卵巢形态及功能。

PGC-1ɑ在多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢组织的表达变化

目的 探讨多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠模型及肥胖PCOS大鼠模型卵巢组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)的表达,以及PCOS发生的可能机制.方法 SD大鼠30只,随机分为对照组、PCOS组及肥胖PCOS组,PCOS两组大鼠每日一次予脱氢表雄酮〔DHEA,60 mg/(kg·d)〕溶于0.2 mL注射用大豆油中皮下注射,共21 d,制备PCOS模型,肥胖PCOS模型组大鼠在DHEA制模基础上加入高脂饮食,每组大鼠各10只.造模前(0 d)和造模后第22天称体质量,取腹主动脉血检测血清睾酮(testosterone,T)水平,取大鼠卵巢组织,HE染色观察组织形态学改变,免疫组织化学染色和Western blot检测PGC-1ɑ蛋白表达.结果 造模前3组大鼠体质量差异无统计学意义,造模后第22天,大鼠增加的体质量以及大鼠血清T质量浓度,均为肥胖PCOS组>PCOS组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).大鼠卵巢组织HE染色结果显示,对照组大鼠卵巢组织镜下可见不同发育时期的卵泡和少量黄体,颗粒细胞排列多为4~6层;PCOS组及肥胖PCOS组大鼠卵巢组织中未成熟的小卵泡数量明显增加,颗粒细胞1~3层排列、较松散,部分卵泡闭锁,肥胖PCOS组大鼠卵巢闭锁卵泡直径增大,颗粒细胞层数减少,卵母细胞消失等现象更明显.免疫组化染色结果显示,对照组大鼠卵巢组织PGC-1ɑ蛋白阳性表达主要分布于卵丘及颗粒细胞.从PGC-1ɑ蛋白在卵巢组织的表达平均灰度均值来看,PCOS组(0.53±0.06)和肥胖PCOS组(0.36±0.03)均低于对照组(0.75±0.03),差异有统计学意义(P<0.05),肥胖PCOS组PGC-1ɑ表达低于PCOS组(P<0.01).Western blot检测结果与免疫组化染色结果一致.结论 PGC-1ɑ表达降低与高脂环境下卵巢颗粒细胞损伤有关.PGC-1ɑ在卵巢卵泡的颗粒细胞中表达降低可能是PCOS发生发展的重要原因.