金标记免疫层析法测定沙眼衣原体检测下限的确定

目的比较金标记免疫层析法与定量PCR的方法检测沙眼衣原体的结果,确定金标记免疫层析法检测沙眼衣原体的最低下限。方法25例临床标本同时进行金标记免疫层析法与定量PCR的方法检测,比较这两种检测方法的结果差异。结果定量PCR方法检测结果拷贝数在105指数级的标本8例。其金标记免疫层析法检测2例为阴性,6例为弱阳性。结论金标记免疫层析法检测沙眼衣原体的最低下限为105拷贝数。

免疫层析金标法测粪潜血试验的对比分析

目的 评价 3种粪潜血试验的方法 .方法 采用联苯胺法、试纸法、一步法对粪潜血试验进行对比分析 ,分别进行敏感性、特异性、干扰性评价试验 .结果 联苯胺法、试纸法阳性率高 ,但受某些食物及药物的外来因素干扰 ,特异性欠佳 ,一步法可克服食物及药物干扰 ,特异性较好 .结论 联苯胺法、试纸法适用于过筛 。

金标记免疫层析法联合ELISA法检测HBsAg

目的探讨金标记免疫层析法检测HBsAg在临床检验中的应用价值。方法金标记法检测HBsAg阳性者,再经ELISA法检测HBsAg阳性符合率。结果金标记法检测HBsAg阳性者400份,再经ELISA法检测HBsAg阳性者360份,符合率达90%(360/400),不符合率10%。结论金标记免疫层析法联合ELISA法可准确检测HBsAg。

免疫层析金标法测定甲胎蛋白浓度筛查出生缺陷

目的:用免疫层析金标法测定甲胎蛋白(AFP)浓度,观察其临床适用性。方法:应用AFP金标试条在SC-1金标试条智能测定仪上对102例血清样本进行AFP测定,并与电化学发光免疫测定仪测定结果对比。结果:两种方法测定结果相关性良好,相关系数γ=0.984,两测定值的比值为0.990;其直线回归方程Y=3.391+0.990X。且经自身对照计量比较的t检验得d=1.9015ng/mL,t=1.122,P=0.264>0.05。结论:用免疫层析金标法定量AFP有临床应用价值。

金标记免疫层析法初筛不同人群无偿献血者HBsAg结果分析

目的初步了解益阳市无偿献血者不同人群HBsAg阳性率流行情况，从而减少HBsAg阳性血的无效采集，确定低危献血群体，为安全输血提供保障。方法采用金标记免疫层析法对献血者进行HBsAg初筛检测，回顾性分析2006—2008年流动采血车上72935名无偿献血者基本资料及初筛检测结果。统计学方法采用χ^2检验。结果HBsAg总阻性率5．12％，2006～2008年各年阳性率呈递降趋势；男性阳性率为5．98％、女性阳性率为3．48％，差异有统计学意义（P〈0．05）；不同年龄段阳性率差异无统计学意义（P〉0．1）；军人和学生HBsAg阳性率比较无统计学意义（χ^2=0．68，P〉0．01），但学生和军人HBsAg阳性率比其他人群显著（r=34．67，P〈0．05）。结论益阳地区HBsAg阳性率逐年呈下降趋势，学生和现役军人是安全输血的低危人群，应作为主要选择对象。

胶体金免疫层析法检测金黄色葡萄球菌的初步研究

目的建立一种快速检测金黄色葡萄球菌的方法。方法以金黄色葡萄球菌菌体抗原免疫家兔获得多克隆抗血清,利用胶体金免疫层析技术,采用二步法检测金黄色葡萄球菌,并对该方法的特异性、敏感性进行评价。结果建立的胶体金免疫层析试纸法能在60min内完成检测,灵敏度实验结果显示检测灵敏性为1×106cfu/ml;特异性实验检测显示与副溶血弧菌、鼠伤寒沙门氏菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌小川型、O139型及569B型等菌无交叉反应,但与耶尔森氏菌、大肠杆菌标准株(ATCC25922)、铜绿假单胞菌标准株(ATCC27853)有一定交叉。结论建立的检测金黄色葡萄球菌的胶体金免疫层析法,能快速、灵敏地检测金黄色葡萄球菌。

快速检测猪囊虫抗体的金免疫层析法的建立及应用

目的 研制一种简便快速检测囊虫抗体的新方法 ,提供基层单位使用。方法 应用胶体金和免疫层析合成技术进行研究 ,建立检测囊虫抗体的金免疫层析法 ;以ELISA为对照 ,观察GICA法敏感性、特异性和稳定性。结果 每ml胶体金中兔抗猪IgG最适标记量为 30 8μg ,最佳抗原包被浓度为 1mg/ml。建立的GICA法检测囊虫病猪血清均为阳性 ,正常猪及其他疾病猪血清 ,结果均为阴性 ;整个实验仅一步操作 ,检测时间 5～ 15min。同ELISA法比较 ,两种方法检测囊虫抗体的相符率达 96 8% (P >0 0 5 )。GICA试纸条分别在 4℃和室温下保存 10 5d及 37℃保存 4 5d ,检测结果均未发现改变。结论 检测囊虫抗体的GICA法简便、快速、敏感、特异、稳定。

检测家畜血吸虫抗体的二步金标免疫渗滤法研究

将待检家畜血纸浸出液点在硝酸纤维素膜上，以金标记的血吸虫虫卵可溶性抗原为探针（以下简称血吸虫抗原胶体金），建立了检测家畜血吸虫抗体的二步金标免疫渗滤法（Two-step Dot Immunogold Filtration Assay，T—DIGFA）。家畜血吸虫病阳性血样在50-90S形成肉眼可观察的红色斑点，可进行快速诊断。该法可以检测出人工感染血吸虫尾蚴7d和7d以上的阳性牛和兔血纸抗体，与肝片吸虫、锥虫、蛔虫病之间无交叉反应。T—DIGFA检测粪孵血吸虫毛蚴阳性牛血纸139份、阴性牛血纸130份，与粪孵法阳性符合率为100％，阴性符合率为99．2％；T—DIGFA与斑点酶联SPA法阳性符合率和阴性符合率完全相同。血吸虫抗原胶体金在4～8℃保存期可达6个月、室温保存期为3个月。试验证实，T-DIGFA有很高的敏感性、特异性、重复性和稳定性，适合于基层单位和现场进行家畜血吸虫病抗体的快速诊断、普查和检疫。

免疫金标法粪便潜血试验的质量控制

目的:对免疫金标法粪便潜血试验进行质量控制。方法 通过灵敏度试验及不同的采样量探讨对潜血试验结果影响的原因。结果 免疫金标法潜血试验的质量问题主要是假阴性结果的产生。结论 试纸条的质量,标本的采样量及稀释液用量的严格控制是潜血试验质量控制的关键。

检测肌红蛋白的半定量金免疫层析法的研究

目的建立一种半定量检测人血清肌红蛋白的金免疫层析方法,用于急性心肌梗死的快速检测。方法一株抗人肌红蛋白单克隆抗体标记胶体金,另一株抗人肌红蛋白单克隆抗体包被膜作为检测线,兔抗鼠IgG抗体包被膜作为对照线,建立半定量金免疫层析测定方法。结果本法测定结果分为3个半定量判定区段：〈70、70-150和〉150μg/L;与化学发光免疫测定对照检测83份血清标本,符合性良好。结论金免疫层析测定法具有半定量的特点,方法简便、快速、准确,适用于急性心肌梗死的早期检测。

斑点金标免疫渗滤法诊断家畜血吸虫病的敏感性和特异性

研制成家畜血吸虫病斑点金标免疫渗滤法（DIGFA）诊断试剂盒可测出人工感染血吸虫14—42d的病牛、猪和兔的血清及血纸抗体，比病原体检查法提早28d查出病畜，达到早期诊断的要求；同时亦能检出仅感染1对血吸虫病牛抗体，证实DIGFA具有较高的敏感性。血吸虫与肝片吸虫、锥虫、蛔虫、囊虫和旋毛虫病之间未见交叉反应现象，说明本法具有较强的特异性。

免疫金标法检测D-二聚体的临床应用及结果分析

目的评价免疫金标法检测D-二聚体的临床应用价值。方法应用固相免疫双抗体夹心法原理,使用胶体金免疫渗透试验测定冠脉综合征等593例患者D-二聚体血浆浓度,并与健康对照组比较分析。结果 593例患者D-二聚体检测分组结果(mg/L):弥散性血管内凝血组:6.78±3.61;心肌梗死组:3.21±1.81;脑梗死组:2.30±1.47;肺癌组:2.29±1.30;脑出血组:1.83±1.51;胃肠癌组:1.79±1.20;肺心病组:1.59±1.10;冠脉综合征组(除外心肌梗死):1.11±0.84;高血压组:0.87±0.57;糖尿病组:0.84±0.47;上感组:0.44±0.35;心率失常组:0.39±0.21;健康对照组:0.29±0.16。前10组与健康对照组比较差异有统计学意义。结论多种致机体出现高凝状态及纤溶亢进疾病均能使血浆中D-二聚体升高,D-二聚体检测能有效监测体内血栓形成及纤溶亢进,免疫金标法是目前检测D-二聚体快速、有效的检验方法。

抗C3d单抗制备及免疫金层析法的建立

目的 研制抗C3d单抗 ,建立免疫金层析法检测血浆补体片段C3d ,判断补体活化情况。方法 用菊糖 C3b作抗原 ,免疫Balb/c小鼠 ,并制备杂交瘤 ,以羊抗C3包被酶标反应板并结合C3d为检测板 ,筛选分泌抗C3d单抗的杂交瘤。利用proteinG柱亲和层析提取抗C3d单抗IgG和C3d结合物 ,进行SDS PAGE电泳 ,鉴定单抗的特异性。将抗C3d单抗标以胶体金 ,制备免疫金层析测试条。通过在免疫金中加未标金的抗C3d单抗 (游离单抗 )来调整试纸条的灵敏度 ,并测定C3d。结果 SDS PAGE电泳图上 ,出现IgG的重链、轻链、及C3d 3个条带 ;金标记抗C3d单抗的试条 (Ⅰ )测C3d的灵敏度在 6～ 10ng/ml,当加入 0 .1μg/ml游离抗C3d单抗 (Ⅱ )后 ,灵敏度为 10～ 15ng/ml。利用两种试条灵敏度的不同 ,对轻、中重型肝炎检测 ,结果轻型肝炎患者在纸条Ⅰ上阳性率为 83 3% (2 5 / 30 ) ,纸条Ⅱ全为阴性 ,中重型肝炎者在纸条Ⅰ、Ⅱ的阳性率为 10 0 % (30 / 30 )。结论 用本试验建立的免疫金层析法测定肝炎患者血浆C3d水平 ,可判断补体活化程度 ,辅助乙型肝炎轻、重分型。

金免疫层析法检测囊虫循环抗原试验研究

应用胶体金和免疫层析技术进行了检测金免疫层析法(GICA)囊虫循环抗原(CA)试验研究。5株抗囊虫McAb和一株多抗用于最佳配对的筛选,一株用于标记胶体金,另一株包被NC膜。以双抗体夹心ELISA为对照,GICA用于CA检测,观察其敏感性、特异性和稳定性。结果显示,以McAb 1A5和1B6配对的结果最佳,1A5最适标记量为10μg／mL,186最佳包被浓度为1 g／L;用GICA和ELISA两种方法检测囊虫CA,痈猪血清和囊液的符合率达100％,病人血清和脑脊液的符合率达80％;CA最低检测量为10 ng,检测正常猪、人及其他疾病血清,均呈阴性;检测时间5-15 min,整个实验仅一步操作;GICA试纸条分别在4℃和室温下保存105 d以及在37℃保存45 d,检测结果均未发现改变。以上结果表明,快速检测囊虫循环抗原的金免疫层析法具有简便、快速、敏感、特异和稳定的特点,适合基层使用。

口蹄疫抗体免疫金标快速检测试纸法的建立

应用免疫学原理与胶体金层析技术,采用双抗原夹心ELISA建立了检测口蹄疫(O型)抗体水平的“口蹄疫抗体(O型)免疫胶体金快速检测试纸法”。应用该法与“口蹄疫正向间接血凝抗原法”对300份猪、鸡、鸭、牛、羊等血液或血清进行口蹄疫抗体水平检测试验,符合率达100%。试验结果显示,该法与间接血凝法一样,具有微量、特异、准确等优点,且操作简易,不需要任何仪器,检测时间短,结果直观,容易判定,适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积口蹄疫抗体普查。

猪伪狂犬病抗体免疫金标快速检测试纸法

应用免疫学原理与胶体金层析技术相结合 ,采用双抗原夹心法建立了检测猪伪狂犬病抗体水平的“猪伪狂犬病抗体免疫胶体金快速检测试纸法” ,用该法与美国Idexx公司的猪伪狂犬病ELISA试剂盒 ,同时对 1 6份猪血液或血清进行抗体水平检测 ,符合率达 1 0 0 %。同时使用金标法对 1 0 0份猪血液和对应血清进行检测 ,结果也相同。试验结果显示 ,金标法与ELISA一样 ,具有微量、特异、准确等优点 ,且操作简易 ,而金标法不需要任何仪器 ,检测时间短 ,结果直观 ,容易判定 ,适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积猪伪狂犬病抗体普查。

荧光定量PCR与免疫层析法检测沙眼衣原体的方法评价

目的评价沙眼衣原体(CT)检测的两种方法。方法分别用荧光定量PCR、免疫层析法检测129例门诊病人,以及粗略估算两种方法的检出下限。结果129例门诊病人中荧光定量PCR检出的阳性率为15.5%,免疫层析法检出的阳性率为9.3%,经统计学分析差异有显著性。在检出下限的估算中荧光定量PCR为103copies/ml,免疫层析法为105copies/ml。结论荧光定量PCR诊断衣原体感染具有较高的敏感性及特异性。

胶体金免疫层析法在乙型肝炎病毒表面抗原检测中的应用评价

胶体金免疫技术是20世纪80年代继三大标记技术（荧光素、放射性同位素和酶标记）发展起来的固相标记免疫测定技术，该法优点是可单份测定，简单快速。2005年卫生部门要求所有做胃镜与肠镜的患者检测前必须进行乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）检测，因时间关系，这部分患者均采用GICA进行。GICA能否取代酶联免疫吸附试验（ELISA），成为至关重要的一个问题，现将两种方法检测HBsAg进行比较，报告如下。

猪伪狂犬病抗体免疫金标快速检测试纸法的建立和应用

应用免疫学原理与胶体金层析技术相结合,采用双抗原夹心法建立了检测猪伪狂犬病抗体水平的“猪伪狂犬病抗体免疫胶体金标快速检测试纸法”,该法与美国Idexx公司的猪伪狂犬病ELISA试剂盒同时对16份猪血液或血清进行抗体水平检测,符合率达100%。同时对100份猪血液和对应血清进行检测,结果也相同。试验结果显示,本法与ELISA一样,具有微量、特异、准确等优点,且操作简易,而本方法不需要任何仪器,检测时间短,结果直观,容易判定,适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积猪伪狂犬病抗体普查。