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PCR-ELISA法及荧光定量PCR法检测HBV感染者精液HBV-DNA的探讨 被引量:4
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作者 钟剑峰 高兴成 +1 位作者 黄伟佳 史利华 《海南医学》 CAS 2009年第11期9-11,22,共4页
目的探讨PCR-ELISA法及荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测HBV感染者精液中HBV-DNA检出情况及其临床意义。方法选取男性HBV感染者60例,采集患者精液、静脉血,用PCR-ELISA法来检测患者精液及血清中HBV-DNA。同时采用荧光定量PCR检测患者精液中HBV... 目的探讨PCR-ELISA法及荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测HBV感染者精液中HBV-DNA检出情况及其临床意义。方法选取男性HBV感染者60例,采集患者精液、静脉血,用PCR-ELISA法来检测患者精液及血清中HBV-DNA。同时采用荧光定量PCR检测患者精液中HBV-DNA。结果PCR-ELISA法:60例精液标本HBVDNA阳性12例,阳性率18.33%,拷贝数为1.267×103-6.532×105/ml,平均拷贝数为4.781×104/ml;60例血清标本阳性53例,阳性率为88.33%,拷贝数1.462×103-5.153×107/ml,平均拷贝数为2.451×106/ml。荧光定量PCR法:60例精液标本HBVDNA阳性13例,阳性率21.67%,拷贝数为1.357×103-7.113×105/ml,平均拷贝数为4.983×104/ml;两种检验方法检测精液HBV-DNA的阳性检出率比较无显著性意义(P>0.05)。结论PCR-ELISA法与荧光定量PCR定量检测精液中HBVDNA同样具有较强的特异性和灵敏度,为临床了解乙型肝炎患者精液中肝炎病毒的感染状态提供了帮助,具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 pcr-elisa FQ-pcr乙型肝炎病毒DNA 精液
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PCR-ELISA检测乙型肝炎病毒DNA的临床应用 被引量:1
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作者 孟涛 《黄石理工学院学报》 2006年第1期36-37,40,共3页
评价PCR-ELISA(聚合酶链式反应-酶联吸附试验)测定乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)的临床应用价值。采用定量PCR-ELISA和ELISA法分别检测208例乙型肝炎患者血清的HBV DNA和HBV血清标志物(HBVm),34份健康体检者作为阴性对照。结果为:血清HBV DN... 评价PCR-ELISA(聚合酶链式反应-酶联吸附试验)测定乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)的临床应用价值。采用定量PCR-ELISA和ELISA法分别检测208例乙型肝炎患者血清的HBV DNA和HBV血清标志物(HBVm),34份健康体检者作为阴性对照。结果为:血清HBV DNA含量>4×106拷贝/m l分别是抗HB-cIgM组、HBeAg组、抗HBc组、抗HBe组和三抗体组(抗HBs、抗HBe、抗HBc),其HBV DNA阳性率分别为100%,97.75%,62.30%,41.67%,16.00%。PCR-ELISA法定量检测HBV DNA具有较强的特异性和灵敏度,为临床早期诊断,了解乙型肝炎病毒复制情况,判断有无传染性以及药物疗效观察具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 pcr-EHSA 乙型肝炎病毒DNA 乙型肝炎病毒标志物
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ELISA、AGID和PCR方法检测牛白血病的比较试验研究 被引量:5
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作者 赵祥平 王建华 +5 位作者 董志珍 王玉玲 王乃福 张永年 刘亚峰 刘红梅 《中国动物检疫》 CAS 2013年第9期56-58,共3页
为比较ELISA、AGID和PCR方法检测牛白血病的检出率和符合率,本试验采用这三种方法对隔离期间总数为3998头的乌拉圭进口奶牛进行了牛白血病检测。试验结果表明,对奶牛的牛白血病检测以ELISA方法检出率最高,检出牛白血病抗体阳性牛23头,... 为比较ELISA、AGID和PCR方法检测牛白血病的检出率和符合率,本试验采用这三种方法对隔离期间总数为3998头的乌拉圭进口奶牛进行了牛白血病检测。试验结果表明,对奶牛的牛白血病检测以ELISA方法检出率最高,检出牛白血病抗体阳性牛23头,检出率为0.58%(23/3998);AGID方法检出牛白血病抗体阳性牛18头,检出率为0.45%(18/3998),与ELISA方法的符合率为78%;而PCR方法检出牛白血病前病毒核酸阳性牛12头,检出率为0.30%(12/3998),与ELISA方法和AGID方法的符合率分别为43%和55%。 展开更多
关键词 牛白血病 elisa AGID pcr 比较试验
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出口家禽新城疫病毒PCR和ELISA联合检测方法的建立
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作者 蒋凤英 李春华 +6 位作者 王英 周宗清 张春玲 邹勇 何锡忠 张婉华 刘晨 《上海农业学报》 CSCD 2008年第2期36-39,共4页
针对出口家禽新城疫泄殖腔棉拭样品病毒检测的需要,建立了IK2R和ELISA联合检测方法。结果表明:检测时间较常规缩短7~14d;通过被检样品鸡胚传代,提高了阳性检测率;特异性强,只与不同类型新城疫病毒反应,不与其他常见禽类病毒反... 针对出口家禽新城疫泄殖腔棉拭样品病毒检测的需要,建立了IK2R和ELISA联合检测方法。结果表明:检测时间较常规缩短7~14d;通过被检样品鸡胚传代,提高了阳性检测率;特异性强,只与不同类型新城疫病毒反应,不与其他常见禽类病毒反应;所检的3216个样本,符合率98.8%;用多重RT-IK2R和脑内接种试验两种方法鉴定的114份样品,符合率99.1%;与G朗Bank中部分新城疫病毒F基因比较,同源性81%~100%。 展开更多
关键词 新城疫病毒检测 多重RT-pcr elisa 泄殖腔棉拭样品
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脾源鸭γ-干扰素基因的RT-PCR扩增、序列分析及表达 被引量:2
5
作者 张晓宇 李凤华 +6 位作者 邵钢 宋晓林 陈艳 康丽娟 江庆国 庄国宏 江国托 《中国家禽》 北大核心 2005年第11期14-16,共3页
从丝裂原刺激的鸭脾淋巴细胞中提取基因组 RNA,采用 RT-PCR 扩增鸭干扰素γ基因并进行了序列分析。序列分析结果表明,鸭干扰素γ基因序列全长477bp,开放阅读框架内401个核苷酸,共编码132个氨基酸。将鸭γ-IFN 基因定向克隆到原核表达载... 从丝裂原刺激的鸭脾淋巴细胞中提取基因组 RNA,采用 RT-PCR 扩增鸭干扰素γ基因并进行了序列分析。序列分析结果表明,鸭干扰素γ基因序列全长477bp,开放阅读框架内401个核苷酸,共编码132个氨基酸。将鸭γ-IFN 基因定向克隆到原核表达载体pBV220中,重组质粒经酶切鉴定后,转化到宿主菌 DH5a 中,温度诱导表达,SDS-PAGE 分析,表达产物与标记抗鸡干扰素抗体出现 Dot-ELISA 阳性反应。 展开更多
关键词 pcr扩增 序列分析 Γ-干扰素基因 RT 开放阅读框架 PBV220 原核表达载体 脾淋巴细胞 elisa 干扰素γ 分析结果 基因序列 定向克隆 酶切鉴定 重组质粒 诱导表达 PAGE 阳性反应 鸡干扰素 表达产物 RNA 基因组 丝裂原 核苷酸
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枯草芽孢杆菌肽聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(SBD-1)表达的影响 被引量:1
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作者 齐盟 辛雅明 +2 位作者 白绥明 胡亮 杨银凤 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第11期52-58,共7页
为了探究来源于枯草芽孢杆菌细胞壁的肽聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)中β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本试验使用30μg/mL肽聚糖刺激ORECs不同时间(2、4、6、8、10和12 h),采用荧光定量PCR(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检... 为了探究来源于枯草芽孢杆菌细胞壁的肽聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs)中β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本试验使用30μg/mL肽聚糖刺激ORECs不同时间(2、4、6、8、10和12 h),采用荧光定量PCR(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测SBD-1的mRNA和蛋白表达量,确定最佳刺激时间;再使用不同浓度的肽聚糖(0、10、20、30、40和50μg/mL)刺激ORECs 2 h,采用qPCR和ELISA方法检测SBD-1的mRNA和蛋白表达量,确定最佳刺激浓度。结果显示:(1)使用30μg/mL肽聚糖刺激ORECs不同时间时,SBD-1的mRNA和蛋白表达量随着时间的增加呈先下降后升高的趋势,2 h时表达量最多并极显著高于对照组(P<0.001)。(2)使用不同浓度肽聚糖刺激ORECs 2 h时,SBD-1的mRNA和蛋白表达量随着肽聚糖浓度的升高呈现先升高后降低的趋势,在20μg/mL时表达量最多并极显著高于对照组(P<0.001)。(3)不同时间刺激试验和不同浓度刺激试验均不会对ORECs产生细胞毒性作用。结果表明,来源于枯草芽孢杆菌的肽聚糖能够诱导ORECs表达SBD-1,最佳刺激条件为20μg/mL枯草芽孢杆菌肽聚糖刺激ORECs 2 h。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌肽聚糖 绵羊瘤胃上皮细胞(ORECs) β-防御素-1(SBD-1) 荧光定量pcr(qpcr) 酶联免疫吸附试验(elisa) CCK8
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CAEV感染的ELISA和PCR诊断比较
7
作者 刘伯淳 《畜牧兽医科技信息》 2001年第12期13-13,共1页
本研究旨在改进PCR的山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)诊断,并将其结果与血清学实验结果作比较。用标准方法采取山羊羔白细胞DNA的PCR结果与用微量法制备DNA采取者的比较,表明标准方法检测有更高的敏感度。用微量法的阳性率,有约70%与标准方... 本研究旨在改进PCR的山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)诊断,并将其结果与血清学实验结果作比较。用标准方法采取山羊羔白细胞DNA的PCR结果与用微量法制备DNA采取者的比较,表明标准方法检测有更高的敏感度。用微量法的阳性率,有约70%与标准方法的附陸率相符合,ELISA的效果与nested 展开更多
关键词 elisa pcr诊断 标准方法 微量法 血清学 阳性率 敏感度 制备DNA 关节炎-脑炎 山羊羔
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试纸条法和PCR法检测抗草甘膦转基因大豆的外源基因 被引量:9
8
作者 阚贵珍 喻德跃 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期18-21,共4页
分别以转基因抗草甘膦大豆及其受体材料为阳性对照和阴性对照,对喷施除草剂草甘膦后部分存活的5个常规大豆材料后代进行试纸条检测和PCR检测。结果发现2种方法均在被检大豆材料中检测到抗草甘膦基因CP4EPSPS,而且这2种方法的检测结果能... 分别以转基因抗草甘膦大豆及其受体材料为阳性对照和阴性对照,对喷施除草剂草甘膦后部分存活的5个常规大豆材料后代进行试纸条检测和PCR检测。结果发现2种方法均在被检大豆材料中检测到抗草甘膦基因CP4EPSPS,而且这2种方法的检测结果能相互验证;对这2种检测技术的应用前景进行了讨论。 展开更多
关键词 抗草甘膦大豆 外源基因 试纸条检测 pcr检测
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酿酒酵母甘露聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞β-防御素-1(S BD-1)表达的影响 被引量:6
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作者 金鑫 张曼 +3 位作者 王云鹤 魏方 温婧怡 杨银凤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1117-1121,共5页
为探究酿酒酵母菌细胞壁成分甘露聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(RECs)β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本研究用不同浓度的甘露聚糖刺激RECs 8 h后,利用荧光定量PCR (qPCR)和ELISA方法分别检测RECsSBD-1 mRNA的转录水平和蛋白表达变化,确定甘露... 为探究酿酒酵母菌细胞壁成分甘露聚糖对绵羊瘤胃上皮细胞(RECs)β-防御素-1(SBD-1)表达的影响,本研究用不同浓度的甘露聚糖刺激RECs 8 h后,利用荧光定量PCR (qPCR)和ELISA方法分别检测RECsSBD-1 mRNA的转录水平和蛋白表达变化,确定甘露聚糖诱导SBD-1表达量最高的刺激浓度。然后用该浓度甘露聚糖对RECs进行不同时间的刺激,同样利用qPCR和ELISA方法对SBD-1 mRNA转录水平和蛋白的表达变化进行检测,确定甘露聚糖诱导SBD-1表达的最佳时间。qPCR和ELISA结果显示:不同浓度甘露聚糖刺激RECs8 h后,SBD-1 mRNA转录水平和蛋白的表达量均有所增加,但随着甘露聚糖浓度的增加,SBD-1表达量呈现先升高后降低的趋势,且当甘露聚糖浓度为50μg/mL时SBD-1表达量达到最大,并与对照组相比差异极显著(p<0.01)。当用50μg/mL的甘露聚糖分别刺激RECs不同时间后,SBD-1 mRNA转录水平和蛋白的表达量先是随着刺激时间的延长而呈上升趋势,刺激时间为4 h时SBD-1表达量达到峰值,且极显著高于对照组(p<0.01),之后呈下降趋势。结果表明甘露聚糖能够提高绵羊RECs SBD-1的表达,且甘露聚糖浓度为50μg/mL刺激RECs 4h时,SBD-1 mRNA转录水平和蛋白表达量达到最高。本研究为甘露聚糖在体内如何发挥先天性免疫提供了一种新解释,也为更好的开发利用甘露聚糖制剂提供实践指导。 展开更多
关键词 甘露聚糖 绵羊瘤胃上皮细胞 β-防御素-1 荧光定量pcr elisa
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奶牛病毒性腹泻-黏膜病毒(BVDV/MDV)病实证分析 被引量:1
10
作者 张玉红 金兰梅 +2 位作者 陈玉华 林铃 张志成 《甘肃科学学报》 2015年第3期41-45,共5页
采用酶联免疫吸附反应试验(ELISA),对南京某奶牛场的近期有流产史奶牛以及临场表现正常奶牛的血清进行BVDV及相应抗体的检测,再用反转录PCR(RT-PCR)技术对受感染奶牛所感染的BVDV类型进行分析。结果发现,该奶牛场近期有流产史奶牛BVDV... 采用酶联免疫吸附反应试验(ELISA),对南京某奶牛场的近期有流产史奶牛以及临场表现正常奶牛的血清进行BVDV及相应抗体的检测,再用反转录PCR(RT-PCR)技术对受感染奶牛所感染的BVDV类型进行分析。结果发现,该奶牛场近期有流产史奶牛BVDV重度感染,88个样本中,有84个检出BVDV,感染率高达97.62%,其中单独感染BVDV-Ⅰ(CP)型的比率有29.76%,单独感染BVDV-Ⅱ(NCP)型的比率为25%,同时感染两型的比率为42.86%。根据相对应的抗体检测结果发现有疑似持续感染(PI)牛存在。25个正常血清样本中,有8个样本检出携带有BVDV,且都是BVDV-Ⅰ(CP)型,与近期有流产史奶牛感染BVDV状况有明显差异,但由于正常血清样本数量过少,还需进一步深入研究。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻-黏膜病毒(BVDV/MDV) 酶联免疫吸附反应试验(elisa) 反转录pcr(RT-pcr) 持续感染牛(PI牛)
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麻疹病毒PCR检验的措施和效果探讨
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作者 程玲 韦肖云 《中外医疗》 2017年第14期29-30,33,共3页
目的研究并探讨麻疹病毒的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检验措施及其检验效果。方法方便选取2014年1月—2016年12月期间本疾控中心接到各辖区内上报的160例疑似麻疹病例作为研究对象,所有患者均采集咽拭子、血液标本送... 目的研究并探讨麻疹病毒的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检验措施及其检验效果。方法方便选取2014年1月—2016年12月期间本疾控中心接到各辖区内上报的160例疑似麻疹病例作为研究对象,所有患者均采集咽拭子、血液标本送检,咽拭子采取PCR检验,血液标本采取ELISA法检验,比较两种方法对麻疹病毒的检测结果。结果 160例疑似麻疹病例中,经两种方法检测后排除23例风疹病毒阳性病例,剩余137例病例中,发病后4 d内,PCR检验对麻疹病毒的阳性检出率明显高于ELISA法检验(80.28%vs 60.56%,P<0.05),而在发病4天后,PCR检验对麻疹病毒的阳性检出率与ELISA法检验比较差异无统计学意义(81.82%vs 78.79%,P>0.05)。ELISA法检验结果为阴性而PCR检验为阳性的病例中,其检测时间多分布于发病后1~4 d内。结论在麻疹病毒的病原学检测中,PCR检验可对早期麻疹患者进行诊断,还可对早期ELISA法诊断为阴性的患者进一步诊断,可有效减少漏诊,具有较高的辅助诊断价值。 展开更多
关键词 麻疹病毒 pcr检验 elisa 检验医学
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Diagnosis of Helicobacter pylori infection:A meta-analysis 被引量:1
12
作者 姜建辉 徐德忠 +2 位作者 闫永平 门可 邵中军 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2007年第4期246-249,共4页
Objective:To evaluate effects of diagnostic tests for Helicobacter pylori(H.pylori)infec- tion.Methods:A meta-analysis was conducted in 22 identified studies through Chinese literature searching which were published a... Objective:To evaluate effects of diagnostic tests for Helicobacter pylori(H.pylori)infec- tion.Methods:A meta-analysis was conducted in 22 identified studies through Chinese literature searching which were published after 1995 and evaluated diagnostic tests for Helicobacter pylori(H.pylori)infec- tion.Results:Polymerase chain reaction(PCR)had the best performance with diagnostic odds ratio (DOR)of 6.7(5.5-7.8),followed by ^(13)C urea breath test and Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)quantitative serological test,with DOR being 6.4(5.4-7.4)and 4.5(3.8-5.2),respectively. Conclusion:Non-invasive tests are the appropriate methods for screening H.pylori infection,whereas in- vasive tests are the best methods for ascertaining the suspected patients. 展开更多
关键词 Helicobacter pylori diagnostic tests META-ANALYSIS ^13C urea breath tests elisa pcr
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人参果主要病毒检测方法研究 被引量:1
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作者 裴怀弟 宿兵兵 +4 位作者 李玉斌 李淑洁 王立光 李琦 刘新星 《寒旱农业科学》 2023年第4期365-368,共4页
为了给人参果病毒检验及抗病性研究提供支持,对人参果采用ELISA和RT-PCR两种检测方法对8份田间材料中的马铃薯M病毒(PVM)、番茄花叶病毒(ToMV)和烟草花叶病毒(TMV)进行检测,对比筛选病毒检测方法。结果表明,ELISA法检测PVM的阳性检出率... 为了给人参果病毒检验及抗病性研究提供支持,对人参果采用ELISA和RT-PCR两种检测方法对8份田间材料中的马铃薯M病毒(PVM)、番茄花叶病毒(ToMV)和烟草花叶病毒(TMV)进行检测,对比筛选病毒检测方法。结果表明,ELISA法检测PVM的阳性检出率为87.5%;ToMV为37.5%,疑似率为12.5%;TMV为37.5%。通过RT-PCR检测体系,从人参果样品中分别扩增出与试验设计大小相符的特异条带,PVM阳性检出率为100%,ToMV为50.0%,TMV为37.5%,检测灵敏性和准确性更高,检测结果符合率在87.5%以上。对扩增阳性产物进行凝胶回收测序,确定为目标条带。 展开更多
关键词 人参果 病毒 elisa检测 RT-pcr检测
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微生物检测技术在食品检验中的应用探讨
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作者 张明成 范志毅 冯莉 《食品安全导刊》 2023年第11期178-180,共3页
随着人们对食品安全关注度的不断提高,微生物检测技术在食品检验中的应用越来越广泛。本文介绍了常见的微生物检测方法,探讨了其在食品检验中的应用情况和优势,并分析了当前微生物检测技术面临的挑战和未来发展方向。
关键词 微生物检测 食品安全 聚合酶链式反应(pcr) 酶联免疫吸附试验(elisa)
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口蹄疫诊断技术研究进展 被引量:9
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作者 彭贵青 陈焕春 钱平 《动物医学进展》 CSCD 2003年第6期29-31,共3页
口蹄疫的有效控制关键在于早期检测 ,然而有很多疾病症状与口蹄疫相似 ,仅靠临床症状难以确诊 ,因此必须进行实验室诊断。实验室诊断包括病毒学诊断和血清学诊断。病毒学诊断方法有病毒分离、补体结合试验、酶联免疫吸附试验 ( EL ISA)... 口蹄疫的有效控制关键在于早期检测 ,然而有很多疾病症状与口蹄疫相似 ,仅靠临床症状难以确诊 ,因此必须进行实验室诊断。实验室诊断包括病毒学诊断和血清学诊断。病毒学诊断方法有病毒分离、补体结合试验、酶联免疫吸附试验 ( EL ISA)、RT-PCR以及乳胶凝集试验 ( L AT)。 RT-PCR有待进一步完善 ,而用于野外检测的现场诊断方法已取得可喜进展。血清学诊断包括中和试验和 EL ISA,中和试验已经被 EL ISA方法取代 ,并且通过检测非结构蛋白的抗体可以区分感染动物和免疫动物。更加快速、敏感、可靠以及用于检测潜伏感染的诊断技术将是今后研究的热点。 展开更多
关键词 口蹄疫 诊断技术 非结构蛋白 症状 血清学诊断 病毒学诊断
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不同杂交方式获得高效表达乙肝病毒基因转基因小鼠 被引量:1
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作者 耿士忠 曾显营 +2 位作者 鞠辉明 杨跃飞 成勇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期744-746,共3页
By mating transgenic mice, transgenic mice model of high expression of foreign gene was screened. Making use of conventional way of breeding to mate 2(A♀,B♂)transgenic mice integrated Hepatitis B virus(HBV) gene, 2A... By mating transgenic mice, transgenic mice model of high expression of foreign gene was screened. Making use of conventional way of breeding to mate 2(A♀,B♂)transgenic mice integrated Hepatitis B virus(HBV) gene, 2A(♀♂) and 2B(♀♂)transgenic homozygote mice, and 6 bi-heterozygote mice(4♀2♂) by mating A and B homozygote mice were taken. Blood serum of these transgenic mice and their off-springs’ were collected, and HBV DNA expressing in blood serum of transgenic mice was tested by polymerase chain reaction and ELISA (PCR- ELISA). The results were as follows: HBV DNA expression in the blood of bi-heterozygote mice was much more than that of homozygote and heterozygote mice. Breeding bi-heterzygote mice is likely to be a good way of high expression of foreign gene in transgenic animals. 展开更多
关键词 杂交 乙型肝炎病毒 转基因小鼠 pcr酶联杂交定量检测
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幽门螺杆菌检测方法的研究进展 被引量:4
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作者 刘镭 曾常茜 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第1期33-39,共7页
幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori,Hp)感染是引起慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌的主要病因.阐述了传统的尿素酶试验、快速呼气试验及最近发展起来的Hp抗原和基因水平检测等多种检测Hp的方法.
关键词 幽门螺杆菌 检测方法 研究进展 胃肠道疾病 尿素酶试验 快速呼气试验 Hp抗原检测
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引进种质西瓜中黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测 被引量:17
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作者 赵世恒 李明福 +4 位作者 张永江 王进忠 李桂芬 孙淑玲 张涛 《北京农学院学报》 2007年第2期32-34,共3页
从日本引进的西瓜种子隔离种植后,采用生物学、双抗体夹心酶联方法及反转录PCR(RT-PCR)技术对其幼苗样品进行了黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的检测,结果表明:生物学试验接种的黄瓜健康植株全部发病;... 从日本引进的西瓜种子隔离种植后,采用生物学、双抗体夹心酶联方法及反转录PCR(RT-PCR)技术对其幼苗样品进行了黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的检测,结果表明:生物学试验接种的黄瓜健康植株全部发病;双抗体夹心酶联试验结果均为阳性;RT-PCR反应后进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,结果出现预期的715 bp特异性扩增产物。3种方法均表明此次从日本引进的西瓜种质已经受到黄瓜绿斑驳花叶病毒的侵染,须做销毁处理。试验结果表明,采用3种方法中的2种对样品进行检测,即可以根据检测结果确诊被检对象是否带有CGMMV病毒。 展开更多
关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 生物学检测 双抗体夹心酶联 反转录pcr技术
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盐渍肠衣猪瘟病毒实验室检测的相关性研究 被引量:4
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作者 刘增再 朱中武 +5 位作者 唐连飞 胡述光 刘毅 徐霞 李娜 彭运潮 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期644-647,共4页
参考GenBank中发表的猪瘟病毒(CSFV)序列,设计一对CSFV特异性引物;从CSFV感染猪盐渍小肠中提取总RNA,经逆转录后进行PCR扩增,在盐渍小肠中成功扩增出与预期大小(168bp)一致的特异性条带,而正常猪和感染猪伪狂犬病病毒的猪小肠扩增结果... 参考GenBank中发表的猪瘟病毒(CSFV)序列,设计一对CSFV特异性引物;从CSFV感染猪盐渍小肠中提取总RNA,经逆转录后进行PCR扩增,在盐渍小肠中成功扩增出与预期大小(168bp)一致的特异性条带,而正常猪和感染猪伪狂犬病病毒的猪小肠扩增结果均为阴性.用此方法对40例盐渍猪肠衣样本进行检测,结果与经典抗原检测方法(抗原捕获ELISA法)一致,而兔体交叉反应试验的阳性检出率为RT-PCR的66.7%,表明本RT-PCR技术能应用于盐渍猪肠衣的CSFV检测. 展开更多
关键词 逆转录聚合酶链式反应 酶联免疫吸附试验 兔体交叉反应试验 猪瘟病毒 盐渍肠衣
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四种方法检测广西奶水牛结核病的比较 被引量:4
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作者 谢志勤 谢芝勋 +7 位作者 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢丽基 温娟 蓝如束 张振荣 黄海强 《中国动物检疫》 CAS 2010年第11期52-55,共4页
应用牛结核菌素对奶水牛进行牛结核病皮内变态反应的检测,然后对皮内变态反应阳性牛采样进行分离培养、γ-干扰素ELISA和聚合酶链反应检测,比较这四种检测方法的符合率。结果共对1850头奶水牛进行皮内变态反应检测,皮内变态反应阳性的... 应用牛结核菌素对奶水牛进行牛结核病皮内变态反应的检测,然后对皮内变态反应阳性牛采样进行分离培养、γ-干扰素ELISA和聚合酶链反应检测,比较这四种检测方法的符合率。结果共对1850头奶水牛进行皮内变态反应检测,皮内变态反应阳性的奶水牛有78头,从78头反应阳性的奶水牛中分离鉴定为牛分枝杆菌的有2份,γ-干扰素ELISA方法检测为牛分枝杆菌阳性的有5份,PCR方法鉴定阳性的有4份;阳性检出率以变态反应为最高78/1850(4.21%),γ-干扰素ELISA方法为5/78(0.27%),PCR检测方法为4/78(0.21%),而分离培养为最低2/78(0.105%)。变态反应与分离鉴定的符合率最低,为0.105%;γ-干扰素ELISA方法、PCR方法与分离鉴定的符合率较接近,分别为40%和50%。γ-干扰素ELISA检测方法和PCR检测方法具有较好的特异性,可以作为变态反应检测的补充。 展开更多
关键词 牛结核病 变态反应 γ-干扰素elisa 聚合酶链反应 分离
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