检测HBVDNA/Ig-双特异性循环免疫复合物的免疫捕捉法PCR

目的:建立一种免疫捕捉法PCR技术,研究血清免疫复合物中不同Ig类型抗体结合HBV的情况,并初步探讨其意义。方法:以羊抗人μ、γ、α链的IgG为捕捉抗体,再利用PCR扩增捕捉物中的HBVDNA。结果:成功地建立了检测HBVDNA/IgM、IgG和IgATCIC的免疫捕捉法PCR技术。该技术特异性强、敏感性高、重复性好,可以显著提高HBVDNA的检出率。同时发现,结合HBV的抗体的Ig类型组合有明显差异,三者均阳性最高。结论:说明乙肝患者血清免疫复合物中有较多的病毒颗粒。研究HBVDNA/IgTCIC对乙肝发病机理的深入阐明可能具有重要意义。

一种简单的检测甲型肝炎病人血清循环免疫复合物中HAV RNA的免疫捕获聚合酶链反应方法

目的 建立一种简单的检测甲型肝炎病人血清循环免疫复合物中HAV RNA的方法。方法 应用差速离心法分离甲肝病人血清中的循环免疫复合物,置于已用抗人μ链包被的离心管中吸咐,再用RT/PCR法扩增,用PAGE银染法检定扩增结果。结果 检测24份甲肝病人血清标本,其中19份为HAV RNA阳性,而检测正常人与乙型肝炎及丙型肝炎病人血清标本均为阴性。结论 该方法简便,敏感性及特异性较高,是检测甲型肝炎病人血清循环免疫复合物中HAV RNA的较好方法之一。

激活补体类乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)循环免疫复合物在急慢性乙型肝炎中的意义

激活补体类HBsAg循环免疫复合物(HBsAg/C3-CIC )的检出率,与HBV复制标志的关系,在急慢性乙型肝炎病毒感染中表现不同。在慢性肝病(包括慢性迁延性乙型肝炎、慢性活动性乙型肝炎、乙型肝炎后肝硬化和HBV感染指标阳性的原发性肝癌)患者中,HBeAg阳性者,其HBsAg/C3-CIC的检出率显著高于HBeAg阴性者,且随HBeAgS/N值的升高而增加。在由HBV e系统组合成的四种模式中,单纯HBeAg阳性模式的检出率显著高于其它三种模式;在多聚白蛋白受体(PHSAr)阳性者中检出率显著高于PHSAr阴性者。而急性乙型肝炎(AH)的HBsAg/C3-CIC检出率无类似差异。这些结果提示,HBsAg/C3-CIC在HBV感染的急慢性肝病中具有不同的病理生理意义。

不同临床类型乙型肝炎血清IgA特异性激活补体类免疫复合物的研究

采用捕捉法ELISA检测HBsAg无症状携带者、急性肝炎,慢性迁延型肝炎,慢性话动性肝炎、重型肝炎和肝炎后肝硬化患者的血清,共275例。发现其中120例为血清IgA特异性激活补体类免疫复合物(IgA/C_3-CIC)高于健康人的阳性病例,阳性率依次为9.8％、36.4％、35.2％、58.2％、72.2％和61.5％,相互间差异非常显著(P<0.01)。经Cochran-Armira-ge趋势分析证明,阳性率随肝损害程度加重而上升,差异非常显著(P<0.01)。阳性率在慢性活动性肝炎中还与谷丙转氨酶密切相关。这些结果说明,IgA/C_3-CIC的存在与乙型肝炎临床病型有关,可作为乙型肝炎临床鉴别诊断的一个辅助指标;其阳性率与乙型肝炎肝损害之间存在互为因果的关系,这种关系在不同临床类型乙型肝炎中的表现形式不同,以慢性活动性肝炎最为明显。IgA/C_3-CIC在乙型肝炎中的病理作用不容忽视。

应用酶联免疫吸附试验检测不同类型乙型肝炎中激活补体类HBsAg循环免疫复合物

本文以抗人C_(?)的羊IgG为包被抗体,以HRP-HBs抗体为指示抗体,建立了可检测激活补体类HBsAg循环免疫复合物(HBsAg/C3-CIC)的C_3捕捉法酶联免疫吸附试验。检测了236例六种类型临床诊断为乙型肝炎的病人血清标本,其阳性率分别为:无症状携带者(ASC)12.9％(4/31),急性肝炎(AH)36.7％(22/60),慢性迁延性肝炎(CPH)33.3％(7/21),慢性活动性肝炎(CAH)59.6％(34/57),重型肝炎(SH)77.8％(14/18),肝炎后肝硬化(PLC)67.3％(33/49),阳性率与肝损严重程度明显相关(P<0.01)。认为HBs-Ag/C3-CIC可能在乙型肝炎病毒引起的慢性活动性肝炎、重型肝炎和肝炎后肝硬化的发病过程中起重要作用,并可作为乙型肝炎的诊断、临床分型和预后判断的指标之一。

乙型肝炎HBV-DNA与HBs特异性免疫复合物的测定及意义

目的 :了解各型乙型肝炎 (乙肝 )中HBV DNA的含量与HBs特异性免疫复合物 (HBs IC)的关系及其意义。方法 :共检测 172例血清标本。用定量PCR测HBV DNA及ELISA法测HBs IC。结果 :(1) 各型乙肝患者HBs IC阳性率和含量都明显升高 ,但HBV DNA阳性组的乙肝患者升高更为显著 ;HBs IC与HBV DNA的测定结果无明显相关 ;(2 ) HBV DNA阳性率在不同肝病有所不同 ;在HBV DNA阳性组中 ,DNA复制量在各病型无明显差异 ;(3) .HBs IC检出率在无症状携带者最低 (59% ) ;慢性乙肝轻度、中度和原发性肝癌检出率中等 (6 0 %、75%及 80 % ) ;慢性乙肝重度 ,乙肝后肝硬化及急性乙肝检出率最高 ,均为 10 0 %。结论 :在免疫应答功能正常的机体中 ,HBV DNA的扩增常伴有HBs IC的升高。推测 :HBs IC产生主要与机体的免疫功能有关 ,对HBV

IgM类HBsAg免疫复合物与乙肝肝损害关系初探

对六类不同临床病型236例乙肝患者的IgM类HBsAg循环免疫复合物（HBsAg/IgM—CIC）阳性率与ALT和肝损害严重性之间的相互关系进行了探讨。结果发现，其阳性率与肝损害严重程度呈正相关，与ALT的关系则取决于临床类型。提示免疫复合物的肝损作用具有临床类型相关性和异质性。

应用捕捉法ELISA检测乙肝患者血清中IgG类HBsAg特异性免疫复合物

本文建立了一种检测HBsAg/IgC—CIC(Circulating ImmuneComplex)捕捉法ELISA(Enzyme Linked Immunosorbert Assays)。该法特异性强,敏感性高,重复性好,避免了固相抗HBs双抗体ELISA受血清中游离HBsAg的抑制作用而影响HBsAg/IgG—CIC检出的缺点。并行检测HBsAg/IgG—CIC和血清C_3发现,乙肝患者血清中HBsAg/IgG—CIC检出率血清C_3下降显著高于非下降组,提示HBsAg/IgG—CIC可能是导致乙肝患者血清C_3下降的又一重要因素。

IgG类HBsAg循环免疫复合物在各类乙型肝炎肝损害中的意义

本文对五类205例乙型肝炎患者血清标本并行检测IgG类HBsAg循环免疫复合物和血清谷丙转氨酶(SGPT)。结果表明,205例乙型肝炎患者IgG类HBsAg循环免疫复合物的检出率与SCPT的变化无明显关系。但按临床类型分析发现,急性乙型肝炎、慢性迁延性乙型肝炎及乙型肝炎后肝硬化IgG类HBsAg循环免疫复合物的检出率在SGPT正常和异常者中无明显差异;而在慢性活动性乙型肝炎和重症乙型肝炎中SGPT异常者IgG类HBsAg循环免疫复合物的检出率均显著高于SGPT正常者。提示IgG类HBsAg循环免疫复合物在后两类乙型肝炎的肝损害过程中起重要作用。同时还说明,分型分析对研究乙型肝炎具有重要意义。

甲型肝炎的免疫球蛋白－补体循环免疫复合物

采用捕捉法－ＥＬＩＳＡ检测１１５例甲型肝炎患者的ＩｇＭ、ＩｇＧ和ＩｇＡ特异性激活补体类循环免疫复合物（ＩｇＭ／Ｃ３－ＣＩＣ、ＩｇＧ／Ｃ３－ＣＩＣ和ＩｇＡ／Ｃ３－ＣＩＣ），其阳性率依次为４７．８％、５６．５％和４７．８％。分别与患者的性别、年龄、病程、丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、黄疸指数（ＢＴ）、免疫球蛋白（Ｉｇ）和补体作比较后发现，ＩｇＭ／Ｃ３－ＣＩＣ与这些指标均无相关性；ＩｇＧ／Ｃ３－ＣＩＣ与ＡＬＴ、ＢＴ和ＩｇＡ有关，ＩｇＡ／Ｃ３－ＣＩＣ与病程、ＡＬＴ、ＢＴ和ＩｇＡ有关。结果提示，不同免疫球蛋白类型的激活补体类ＣＩＣ在甲型肝炎中的病理生理意义不同，其中ＩｇＧ和ＩｇＡ／Ｃ３－ＣＩＣ可能参与肝损害过程。甲型肝炎具有一定程度的免疫应答紊乱。

乙型肝炎IgM和IgG-补体双特异性循环免疫复合物的意义

对不同临床类型的乙型肝炎患者，采用捕捉法ＥＬＩＳＡ，以ＩｇＭ和ＩｇＧ类抗体排除抗原性异物的免疫反应进行比较研究。结果发现，两种反应能力在慢性ＨＢＶ感染中基本相同，表现出明显的病型差异，而在急性ＨＢＶ感染中则不同，前者反应强度显著高于后者；二者阳性率在慢性ＨＢＶ感染的临床类型中虽均随其肝损害加重而显著上升，但ＩｇＧ／Ｃ３双特异性循环免疫复合物（ＴＣＩＣ）与ＡＬＴ有关，而ＩｇＭ／Ｃ３－ＴＣＩＣ与ＡＬＴ无关；二者阳性率与Ｃ４的关系亦不同。这些结果提示，ＩｇＭ和ＩｇＧ／补体－ＴＣＩＣ的病理意义不同，免疫复合物的异质性值得注意。

慢性丙型肝炎患者血清体液免疫指标的改变及其临床意义

目的:探讨慢性丙型肝炎(CHC)患者主要血清体液免疫指标的改变及其临床意义。方法:比较32例CHC患者和30例对照者的血清免疫球蛋白、循环免疫复合物(CIC)和补体水平。结果:CHC组IgG和IgM含量分别为17．2±3．68g／L和2．04±0．83g／L,显著高于正常对照组(P<0．01)。IgA含量略有升高,但和对照组相比无显著差异。C3、C4的含量分别为0．98±0．3g／L和0．19±0．075 g／L,低于正常对照组(P<0．01)。CHC组和对照组CIC含量分别为24．15±6．37mg／L和16．48±5．91mg／L,两组有显著差异(P< 0．01)。CHC组总蛋白和球蛋白的含量分别为77．2±8．16 g／L和35．0±5．19 g／L,高于正常对照组(P<0．05);白球比为1．23±0．26, 低于正常对照组(P<0．01)。结论:HCV慢性感染的病例,机体的体液免疫反应发生改变,动态监测HCV患者血清中的免疫球蛋白、补体及其CIC指标有助于疾病的诊断、治疗和预后判定。

慢性乙型肝炎中医辨证分型与免疫功能的关系

对116例慢性乙型肝炎患者和52例正常人进行了免疫复合物（CIC）、红细胞C3b受体花环率（C3b）、T淋巴细胞点状阳性率（ANAE）等指标的测定。结果：与正常人比较，慢性乙型肝炎患者CIC值增高（P＜0．01）；肝肾阴虚、瘀血阻络型组C3b降低（P＜0．01），而肝郁脾虚组无明显变化（P＞0．05）；肝郁脾虚、肝肾阴虚、脾肾阳虚组ANAE降低（P＜0．01），而湿热中阻、肝郁脾虚组无明显变化（P＞0．05）。经回归分析发现ANAE与C3b呈正相关，ANAE、C3b与CIC呈负相关。结果表明：慢性乙型肝炎患者存在细胞免疫功能降低、体液免疫功能亢进，中医辨证分型与免疫功能存在一定的关系。

病毒性肝炎循环免疫复合物的研究概况

从病毒性肝炎CIC的分类、检测、评价、研究意义及其中西医结合治疗等方面综述了近10余年来病毒性肝炎循环免疫复合物的研究概况 ;认为其中医治疗尚处于初步探索阶段 ,目前的治疗方法以凉血为主 ,但养阴、解毒、活血化瘀同样重要 ;有待今后大量的临床与实验研究 ,以进一步探索中医中药对病毒性肝炎CIC的影响或病毒性肝炎中医证型与CIC的关系 。

巨细胞病毒感染与婴儿肝炎综合征的关系及其对体液免疫影响的研究

本文以巨细胞病毒(CMV)核酸杂交技术检测34例婴儿肝炎综合征患者尿标本的带病毒水平。结果表明其感染率(44.1％)明显高于正常对照组(15％,P<0.05)。并初步发现CMV感染在患者母婴间分布有较高的相关性(符合率为13/14)。对患者体液免疫分析的结果表明,伴发CMV感染的婴儿肝炎病理过程不涉及类似Ⅲ型变态反应的免疫病理变化,但其血清C_3水平明显低下,原因值得进一步探讨。

非特异性免疫核糖核酸治疗乙型慢性肝炎的研究

本文对临床诊断为乙型慢性肝炎68例病人随机分为两组。治疗组用卡介苗免疫羊的肝脾等组织提取的免疫糖核酸治疗。对照组用一般保肝药物治疗。结果:GPT、TTT、ZTT、恢复正常例数的百分数,治疗组各为62.5%,55.5%,64.2%;对照组各为14.8%,19.0%,30.0%。两组差异显著(前者P<0.01,后两者P<0.05)。HBeAg及循环免疫复合物的阴转率,治疗组各为60.7%及67.7%;对照组各为22.2%及31.5%,两组差异非常显著(P<0.005)。

慢性乙型肝炎患者外周血循环免疫复合物的临床意义探索

免疫复合物的形成是病毒在感染过程中造成机体损伤的重要原因之一。对病毒感染者进行免疫复合物的定量有助于监测疾病进展,了解病毒与宿主之间的相互作用。本研究对早期固相C1q结合荧光免疫法进行优化,并利用补体分子C1q特异性结合慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者血液中的循环免疫复合物(circulating immune complex,CIC),通过荧光标记的羊抗人IgG对CIC进行检测。针对220例CHB患者、20例非乙型肝炎的肝炎患者、20例健康者、10例CHB功能性治愈者,分析了CHB患者中的CIC水平及其与CHB诊断所用病毒学指标、肝功能生化指标之间的关系。结果显示:约97%的CHB患者存在CIC水平升高,且与病毒学指标乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)(r=0.1973,P=0.0058)、HBV DNA(r=0.2178,P=0.0023)显著正相关;与肝脏损伤相关生化指标丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)(r=0.1580,P=0.0200)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)(r=0.1513,P=0.0353)呈正相关,而与补体C4(r=-0.21,P=0.003)呈负相关。不同程度的炎症和纤维化患者之间CIC和补体水平有显著性差异,且随临床分期产生相应波动。在免疫耐受期和低复制期,患者CIC水平较低而补体水平升高;在免疫激活期和HBV e抗原(HBV e antigen,HBeAg)阴性肝炎患者中的结果则相反。结果提示,CHB患者血液循环中存在CIC生成所造成的肝脏损伤及补体大量消耗,对CIC进行监测能在一定程度上反映CHB患者潜在的肝损伤。

乙型肝炎IgA类HBsAg循环免疫复合物的检测及意义

本文报道用捕捉法ELISA检测各型乙肝IgA型HBsAg循环免疫复合物。结果表明,慢性乙肝IgA型HBsAg循环免疫复合物检出率显著高于急性乙肝;在慢性乙肝中,IgA型HBsAg循环免疫复合物的出现与HBVe系统关系密切,主要存在于HBeAg阳性血清中,并与HBeAg滴度有关。故IgA型HBsAg循环免疫复合物可作为HBV慢性感染的血清诊断标志之一;也可作为反映HBV在增殖并有传播危险的标志之一。

120例乙肝病人循环免疫复合物的检测

目的 探讨循环免疫复合物 (CIC)在乙肝发病机制上的作用。方法 应用聚乙二醇 (PEG)沉淀试验对 1 2 0例乙肝病人和 1 2 0例正常人群进行了循环免疫复合物检测。结果 乙肝病人CIC的阳性率达49 2 % ,正常人群CIC阳性率仅为 1 1 7% ,两者比较差异有非常显著意义 (P <0 0 0 5)。