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UDPE在鼠疫腐败材料检测中的应用 被引量:1
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作者 王加熊 陈亮 +1 位作者 林代华 王灵岚 《海峡预防医学杂志》 CAS 2004年第4期58-59,共2页
[目的 ]探讨UDPE在鼠疫腐败材料检测中的实际应用价值。[方法 ]用鼠疫EV菌感染小白鼠 ,未腐败前同时进行反向血凝试验 (RIHA)及UDPE检测 ,确认感染 ;经实验室模拟自然腐败不同天数后 ,再次检测。 [结果 ]经 16d以下(含 16d)腐败的脏器 ... [目的 ]探讨UDPE在鼠疫腐败材料检测中的实际应用价值。[方法 ]用鼠疫EV菌感染小白鼠 ,未腐败前同时进行反向血凝试验 (RIHA)及UDPE检测 ,确认感染 ;经实验室模拟自然腐败不同天数后 ,再次检测。 [结果 ]经 16d以下(含 16d)腐败的脏器 (肝、脾 )RIHA和UDPE法检测均阳性 ,经 5 0d腐败取骨髓材料 ,UDPE法检测阳性率比RIHA法高。[结论 ]UDPE法适用于鼠疫腐败材料的检测。 展开更多
关键词 鼠疫 尿嘧啶糖基化酶(UDG) UDG-Duplex pcr—eia(udpe) 腐败材料
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类鼻疽伯克霍尔德氏菌UDPE检测方法的建立和应用 被引量:1
2
作者 宋亚军 王津 +2 位作者 张敏丽 郭兆彪 杨瑞馥 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第2期35-37,共3页
目的 建立防止产物污染的UDPE(UDG -DuplexPCR -EIA)技术 ,用于检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌。方法 选择类鼻疽伯克霍尔德氏菌FUR(FerricUptakeRegulator)基因为靶序列 ,设计两对引物进行PCR扩增 ,用UDG(尿嘧啶糖基化酶 )防止PCR产物污... 目的 建立防止产物污染的UDPE(UDG -DuplexPCR -EIA)技术 ,用于检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌。方法 选择类鼻疽伯克霍尔德氏菌FUR(FerricUptakeRegulator)基因为靶序列 ,设计两对引物进行PCR扩增 ,用UDG(尿嘧啶糖基化酶 )防止PCR产物污染 ,并用微孔板杂交 -酶联显色检测扩增的PCR产物片段 ;用不同的模板考察方法的特异性和灵敏度。结果 该检测系统可以特异性地检测类鼻疽伯克霍尔德氏菌 ;对于纯DNA模板 ,检测灵敏度可以达到 10fg/ μl;对于系列稀释菌液提取的模板 ,灵敏度可达 0 1个菌 / μl;对于模拟污水标本、模拟组织标本和模拟土壤标本的检测灵敏度分别为 10个菌 / μl,10 0个菌 / μl和 10 0个菌 / μl;检测系统可以防止 10 9个PCR产物分子的污染 ;检测系统可以在 37℃下稳定保存 7d。结论 本研究建立了稳定的 ,防止产物污染 。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德氏菌 尿嘧啶糖基化酶 UDG pcr 微孔板杂交 udpe
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用UDPE技术检测和鉴定鼠疫耶尔森氏菌 被引量:13
3
作者 郭兆彪 张敏丽 +5 位作者 汪晓辉 王津 杨瑞馥 张春华 丛显斌 张景林 《中国地方病防治》 1999年第5期262-265,共4页
我们建立了用UDG(尿嘧啶糖基化酶)防PCR产物污染,以两个不同基因为靶序列扩增检测同一病原菌和用微孔板杂交-酶联显色检测PCR产物的UDPE(UDG-Duplex PCR-EIA)技术,并用于鼠疫耶尔森氏菌的检测与鉴定。结果表明,该系统可以特异地检测和... 我们建立了用UDG(尿嘧啶糖基化酶)防PCR产物污染,以两个不同基因为靶序列扩增检测同一病原菌和用微孔板杂交-酶联显色检测PCR产物的UDPE(UDG-Duplex PCR-EIA)技术,并用于鼠疫耶尔森氏菌的检测与鉴定。结果表明,该系统可以特异地检测和鉴定鼠疫耶尔森菌,检测灵敏度可以达到1CFU/ml。 展开更多
关键词 pcr 鼠疫 耶尔森氏菌 udpe
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PCR法和EIA法检测沙眼衣原体的比较
4
作者 谢林森 李莉 《实用医技杂志》 2002年第12期920-920,共1页
关键词 pcr eia 检测 沙眼衣原体
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用EIA和PCR检测牛血清中类HBV的研究 被引量:6
5
作者 余为一 潘玲 +1 位作者 周维翰 谢三星 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1994年第3期10-11,F004,共3页
本文报道了用EIA(enzyme-immunoassay,酶免疫测定)从50头奶牛和120头黄牛的血清中共检测出41份人HBV(乙型肝炎病毒)标志物呈阳性的样品;并进一步用PCR(polymerasechainrea... 本文报道了用EIA(enzyme-immunoassay,酶免疫测定)从50头奶牛和120头黄牛的血清中共检测出41份人HBV(乙型肝炎病毒)标志物呈阳性的样品;并进一步用PCR(polymerasechainreaction聚合酶链反应)测定其中的部分阳性(5份HBsAg、5份HBeAg、2份HBaAg+HBeAg、7份抗HBc、1份HBsAg+抗HBe和1份HBs-Ag+抗HBc)及阴性(4份)样品中的人HBVDNA,结果全部为阴性。此外,牛血清中的HBsAg、HBeAg和抗HBc滴度明显低于人血清中同类标志物滴度。上述这些结果表明,在人HBV标志物阳性的牛血清中并不存在人HBV;并提示牛和人血清中HBV标志物滴度差异是由不同的嗜肝性病毒引起的。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 乙型肝炎病毒
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PCR、EIA对乙型肝炎病毒检测的比较
6
作者 陈志清 《中国卫生检验杂志》 CAS 1999年第2期153-154,共2页
多聚酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是近几年发展起来的先进的快速体外基因扩增技术,已经在很多医学领域得到应用,目前PCR技术已逐渐推广至病毒性疾病的诊断和研究中。为了寻找比目前常用的... 多聚酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)是近几年发展起来的先进的快速体外基因扩增技术,已经在很多医学领域得到应用,目前PCR技术已逐渐推广至病毒性疾病的诊断和研究中。为了寻找比目前常用的EIA技术更敏感更有效的检测方法,... 展开更多
关键词 乙型肝炎 HBV pcr eia 诊断
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Cloning a Full-length cDNA Encoding UDP-glucose Pyrophosphorylase from Amorpha fruticosa by PCR-based Methods
7
作者 刘文哲 Hu Xuejun +4 位作者 Gao Xiaorong Yuan Xiaodong Liu Zhe FAN Qi An Lijia 《High Technology Letters》 EI CAS 2002年第3期5-10,共6页
A method based on degenerate Oligo primed polymerase chain reaction (PCR) and random amplification of cDNA end (RACE) PCR for cloning a full length cDNA is described. An Amorpha fruticosa cDNA clone encoding UDP gluco... A method based on degenerate Oligo primed polymerase chain reaction (PCR) and random amplification of cDNA end (RACE) PCR for cloning a full length cDNA is described. An Amorpha fruticosa cDNA clone encoding UDP glucose pyrophosphorylase (UGP), a key enzyme producing UDP glucose in the synthesis of sucrose and cellulose, is cloned by using this method. We design 5’ RACE primers based on UGPA1 fragment, which obtains from degenerate PCR. Inverse PCR and nested PCR enable cloning of the remainder 5’ and 3’ end fragments of the gene. The deduced amino acid sequence exhibits significant homology with the other UGP genes cloned. This method is more simple and inexpensive than screening cDNA library, and can be easily adapted to clone other genes. 展开更多
关键词 gene cloning random amplification of cDNA end pcr udp glucose pyrophosphorylase Amorpha fruticosa
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PCR方法用于我国A组轮状病毒的分型研究 被引量:45
8
作者 方肇寅 晋圣瑾 +2 位作者 秦树民 赵宪法 吴狄 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期316-321,共6页
A组轮病毒(RV)是婴幼儿秋冬季病毒性腹泻的最主要病原。当RV感染时,组成病毒外壳的两个蛋白VP7和VP4都能刺激机体产生中和抗体。本文采用套式PCR方法对我国河北、河南1989-1990年141份RV阳性便样进行了... A组轮病毒(RV)是婴幼儿秋冬季病毒性腹泻的最主要病原。当RV感染时,组成病毒外壳的两个蛋白VP7和VP4都能刺激机体产生中和抗体。本文采用套式PCR方法对我国河北、河南1989-1990年141份RV阳性便样进行了分型研究。便样悬液中的病毒经硫氰酸胍裂解,玻璃珠吸附、洗脱,提取RNA。分别选择编码VP7和VP4基因的高保守序列设计引物,先经逆转录cDNAPCR一次放大后,再分别选择基因内不同血清型的特征序列设计一组分型引物,与另一端的保守序列引物配对,经PCR二次放大,从放大产物的特征分子量大小,区别RV样品的不同血清型。结果表明,河北、河南两省流行的RV以(G1、P1)型为主,其次为(G2、P2)型,个别为(C3、P1)型和(G4、P1)型,未发现其它P型毒株。G型PCR分型与McAbELA分型结果比较,符合率为97.7%。毒株G型和P型的关系与文献报道的一些规律相比,符合率为97.1%。个别毒株型别特殊,与RNAPAGE结果亦不能对应,有待进一步研究。本实验结果对研制轮状病毒疫苗有重要的指导意义。 展开更多
关键词 轮状病毒 血清型 聚合酶链反应
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Microtrak Ⅱ EIA法检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染 被引量:3
9
作者 郑和平 李美玲 +3 位作者 黄进梅 吴兴中 曾维英 潘慧清 《岭南皮肤性病科杂志》 2004年第3期207-209,共3页
目的 :评价MicrotrakⅡEIA法用于女性宫颈拭子、男性尿道拭子和尿沉渣标本沙眼衣原体检测效果。方法 :采用细胞培养法作为“金标准”方法 ,PCR为辅助标准 ,MicrotrakⅡEIA法平行测定。结果 :共检测 1 64例标本 ,以细胞培养法作金标准 ,... 目的 :评价MicrotrakⅡEIA法用于女性宫颈拭子、男性尿道拭子和尿沉渣标本沙眼衣原体检测效果。方法 :采用细胞培养法作为“金标准”方法 ,PCR为辅助标准 ,MicrotrakⅡEIA法平行测定。结果 :共检测 1 64例标本 ,以细胞培养法作金标准 ,总体MicrotrakⅡEIA检出率高于细胞培养法 ( χ2 =5 0 0 ,P <0 0 5 ) ;对于女性宫颈和男性尿沉渣标本 ,MicrotrakⅡEIA法与培养法的检出率无显著性差异( χ2 =1 0 0和 χ2 =0 2 0 ,P均 >0 0 5 ) ,而男性尿道拭子标本的MicrotrakⅡEIA法检出率高于培养法 ,差异有统计学意义 ( χ2 =4 0 0 ,P <0 0 5 )。以细胞培养法加PCR法作标准 ,检测各样本的结果差异无统计学意义。结论 :MicrotrakⅡEIA法具有较高的敏感性和特异性 ,适合于泌尿生殖道沙眼衣原体感染的实验室诊断。 展开更多
关键词 eia 细胞培养法 泌尿生殖道 沙眼衣原体感染 标本 检出率 金标准 男性尿道 检测效果 测定 pcr
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龙须菜UDP-葡萄糖焦磷酸化酶基因的克隆及其表达与琼胶产量的关系 被引量:6
10
作者 张杨 隋正红 +1 位作者 丁弘叶 仲洁 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期80-86,共7页
对红藻龙须菜(Gracilarialei maneiformis)UDP葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)基因的表达与不同藻株中藻体琼胶产量之间的相关性进行研究。通过PCR扩增的方法得到了龙须菜UGPase的基因序列。该基因cDNA序列的全长为2 200 bp,开放阅读框1 485 ... 对红藻龙须菜(Gracilarialei maneiformis)UDP葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)基因的表达与不同藻株中藻体琼胶产量之间的相关性进行研究。通过PCR扩增的方法得到了龙须菜UGPase的基因序列。该基因cDNA序列的全长为2 200 bp,开放阅读框1 485 bp,编码494个氨基酸;龙须菜UGPase基因的氨基酸序列与其它物种的UGPase氨基酸序列相似性较高;该基因是单拷贝的,缺乏内含子;具有特殊的加尾信号。利用荧光实时定量PCR的方法检测UGPase基因相对表达量。结果表明,该基因的表达与琼胶含量存在显著相关性,即在高琼胶组藻株中的表达量显著高于低琼胶组藻株,对琼胶含量高低具有指示作用,显示了在产业化应用中的潜能。 展开更多
关键词 龙须菜 udp-葡萄糖焦磷酸化酶 琼胶 实时定量pcr
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坛紫菜UDP-葡萄糖焦磷酸化酶基因(Phugp)的克隆及表达分析 被引量:1
11
作者 於辰佳 张晗晗 +3 位作者 徐燕 纪德华 陈昌生 谢潮添 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2017年第5期1-9,共9页
UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)是红藻琼胶生物合成过程中的关键限速酶。以坛紫菜(Pyropia haitanensis)转录组测序获得的unigene序列为基础,采用RACE技术克隆获得了坛紫菜编码UGPase的基因序列:Phugp。序列分析结果表明:Phugp基因序列全... UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)是红藻琼胶生物合成过程中的关键限速酶。以坛紫菜(Pyropia haitanensis)转录组测序获得的unigene序列为基础,采用RACE技术克隆获得了坛紫菜编码UGPase的基因序列:Phugp。序列分析结果表明:Phugp基因序列全长1734 bp,包含一个1530 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含510个氨基酸,相对分子质量为56.190 ku,等电点为6.24,具有UGPase特有的底物结合位点和红藻UGPase保守的N端和C端多肽结合位点。基因表达水平的定量分析结果表明:在不同程度的高温和高光胁迫条件下,Phugp基因的表达水平均极显著下调,而在不同程度的失水胁迫条件下,Phugp基因的表达则呈现为逐渐上调的趋势,说明Phugp基因在坛紫菜遭受不同的胁迫条件时呈现为不同的表达模式,并可能在应答失水胁迫中发挥着应激调节作用。 展开更多
关键词 坛紫菜 udp-葡萄糖焦磷酸化酶 克隆 表达水平定量分析
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长春市儿童医院1998~2001年婴幼儿杯状病毒腹泻流行病学研究 被引量:75
12
作者 谢华萍 方肇寅 +9 位作者 王光 孙利炜 吕红霞 Zhong WM Tai JH 林思恩 童志礼 章青 Glass RI Jiang X 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期332-336,共5页
人类杯状病毒(humancalicivirus,HuCV)是引起儿童和成人非菌性胃肠炎的主要病原之一。为了掌握HuCV在我国的流行情况,1998年7月至2001年6月,从长春市儿童医院2343例5岁以下腹泻患儿中共收集粪便标本1264份,其中1056份来自2135例住院患... 人类杯状病毒(humancalicivirus,HuCV)是引起儿童和成人非菌性胃肠炎的主要病原之一。为了掌握HuCV在我国的流行情况,1998年7月至2001年6月,从长春市儿童医院2343例5岁以下腹泻患儿中共收集粪便标本1264份,其中1056份来自2135例住院患儿。对轮状病毒检测为阴性的588份标本,经多价酶免疫试验(EIA)和两组引物反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HuCV,202份为阳性,其中住院患儿标本178份,HuCV检出率为16 9%。HuCV腹泻以2岁以下儿童为主(占96%),流行高峰季节为11月至次年3月。选择17株HuCV进行分子鉴定,15株属GⅡ 4群,1株属GⅡ 3群,另1株属GⅠ 2群,表明GⅡ 4群HuCV是我国流行的优势株。根据HuCV住院患儿的监测资料初步估计,HuCV腹泻住院率约为0 5‰~2 4‰。讨论了长春地区HuCV的流行趋势和疾病负担。以上结果为我国HuCV腹泻的预防和控制提供了科学依据。 展开更多
关键词 长春市 儿童医院 1998-2001年 婴幼儿 杯状病毒 腹泻 流行病学研究
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核酸诊断技术规范化的研究 被引量:12
13
作者 杨瑞馥 郭兆彪 +3 位作者 张敏丽 汪晓辉 宋亚军 王津 《生物技术通讯》 CAS 1999年第2期81-88,91,共9页
针对 PCR技术应用中的一些问题 ,从下述几方面开展了核酸诊断技术标准化的研究 :1探讨了设计引物的影响因素 ,发现根据同一基因设计的不同引物对 PCR敏感性影响较大 ,可相差 2 0倍 ,进一步研究表明 ,引物的自由能 ,尤其是引物 3′端 6... 针对 PCR技术应用中的一些问题 ,从下述几方面开展了核酸诊断技术标准化的研究 :1探讨了设计引物的影响因素 ,发现根据同一基因设计的不同引物对 PCR敏感性影响较大 ,可相差 2 0倍 ,进一步研究表明 ,引物的自由能 ,尤其是引物 3′端 6个碱基的自由能可能决定着 PCR的敏感性 ;2研制成功室温稳定的 PCR试剂 ,将所有 PCR成分 (加入一种酶保护剂 )配制并分装于微量离心管中 ,并干燥 ,试剂室温放置 8个月 ,37℃破坏 2周对检测结果无任何影响 ;3因尿嘧啶糖基化酶( UDG)可特异降解 DNA双链中的尿密啶核苷 ,PCR体系中以 d UTP代替 d TTP,并在 PCR扩增前用 UDG消化 1 5 min,就可以特异防止 PCR产物的污染。对炭疽杆菌、鼠疫杆菌、土拉杆菌和布鲁氏菌扩增结果表明 ,0 .1 U的 UDG可完全消化 1 0 3~ 1 0 8个产物分子的污染 ;4建立了微孔板杂交技术代替电泳方法检测扩增产物 ,将 PCR产物克隆作为捕获探针包被聚乙烯微孔板 ,PCR引物5′末端生物素标记 ,扩增后作为待检测探针杂交 ,通过比较影响微孔板杂交的包被、杂交和显色等因素 ,建立了 PCR- EIA技术。通过比较包被缓冲液发现镁离子及其离子强度是影响 DNA包被的重要因素 ,包被的 DNA以线型质粒最佳 ,每孔包被 30 0 ng左右的 DNA杂交效果最好 ;杂交液中加和不加甲? 展开更多
关键词 聚合酶链反应 微孔板杂交 防污染 酶免疫测定 规范化
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男性泌尿道沙眼衣原体三种检测方法的比较 被引量:3
14
作者 朱晓亮 彭学标 张三泉 《中国麻风皮肤病杂志》 北大核心 2004年第1期49-50,共2页
我们对 10 4例拟似衣原体性尿道炎患者的尿道拭子 ,采用衣原体快速免疫测定法 (EIA)、PCR法和LCR法进行沙眼衣原体检测。结果三种方法的敏感性和特异性PCR分别为 10 0 %和 95 .6 % ;LCR为 94 .4 %和 10 0 % ;EIA为 86 .1%和 10 0 %。PC... 我们对 10 4例拟似衣原体性尿道炎患者的尿道拭子 ,采用衣原体快速免疫测定法 (EIA)、PCR法和LCR法进行沙眼衣原体检测。结果三种方法的敏感性和特异性PCR分别为 10 0 %和 95 .6 % ;LCR为 94 .4 %和 10 0 % ;EIA为 86 .1%和 10 0 %。PCR的敏感性最高 ,特异性最低 (95 .6 % ) ;LCR和EIA敏感性均低于PCR ,但特异性均高于PCR。 展开更多
关键词 男性 泌尿道感染 沙眼衣原体 检测 eia pcr LCR
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快速检测、抗原-抗体联合酶联检测和集合核酸检测在MSM人群HIV-1检测中的应用研究 被引量:13
15
作者 韩梅 冯连贵 +5 位作者 蒋岩 潘品良 赵金扣 凌华 丁贤斌 张敏 《国际检验医学杂志》 CAS 2011年第11期1185-1186,共2页
目的比较快速检测(胶体硒)和抗原-抗体联合酶联检测(4代酶联检测)以及集合核酸检测对男男同性恋人群(MSM)HIV急性感染的检验效能。方法结合该市2008年男男同性恋人群HIV感染专项调查工作,应用快速检测、4代酶联检测对接受调查的2 165例... 目的比较快速检测(胶体硒)和抗原-抗体联合酶联检测(4代酶联检测)以及集合核酸检测对男男同性恋人群(MSM)HIV急性感染的检验效能。方法结合该市2008年男男同性恋人群HIV感染专项调查工作,应用快速检测、4代酶联检测对接受调查的2 165例MSM进行HIV抗体初筛,对结果阴性者进行集合核酸检测,直至找到急性期感染者;对不同方法的检测成本进行估算,比较发现1例感染者的性价比。结果快速检测和4代酶联检测应用于MSM人群HIV筛查时,分别存在7.6%和2.9%的漏检率。本次调查使用集合核酸检测共发现10例急性期感染者。使用快速检测、4代酶联检测发现1例感染者的成本分别为48.8、50.5元,使用集合核酸检测发现1例急性期感染者的成本为7 380.2元。结论 4代酶联检测与快速检测成本接近,但前者功效更高,应该成为目前针对MSM人群HIV检测策略的组成部分,集合核酸检测应成为必要的补充,在该市MSM人群中使用上述方法的成本低于国外同类报道。 展开更多
关键词 HIV抗体 男男性行为者 急性期感染 快速诊断 抗原-抗体联合酶联检测实验 集合核酸检测
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七叶一枝花中尿苷二磷酸糖基转移酶基因的筛选和分析 被引量:4
16
作者 宋发军 李妍清 +1 位作者 杨瑞霜 孟艳艳 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2021年第2期144-152,共9页
重楼皂苷是重楼(Paridis rhizoma)中最重要的药用成分,但其生物合成途径仍不完全清楚.有研究表明,尿苷二磷酸糖基转移酶(uridine diphosphate glycosyltransferase,UGT)是重楼皂苷生物合成下游步骤的关键酶.为此,利用生物信息学工具及qR... 重楼皂苷是重楼(Paridis rhizoma)中最重要的药用成分,但其生物合成途径仍不完全清楚.有研究表明,尿苷二磷酸糖基转移酶(uridine diphosphate glycosyltransferase,UGT)是重楼皂苷生物合成下游步骤的关键酶.为此,利用生物信息学工具及qRT-PCR技术,对七叶一枝花(Paris polyphylla var.Chinensis)转录组数据库中UGTs的基因结构、系统进化、基因表达特征及其蛋白质理化性质和蛋白质结构等进行了分析,共得到45个UGTs基因,其主要分布在9个组及家族中;同时还获得了与重楼皂苷合成密切相关的UGT73和UGT80亚家族中的5个候选UGTs.表达量分析表明,5个候选UGTs多在叶或花中的表达量较高.研究结果可为进一步探究UGT家族的基因功能,以及深入解析重楼皂苷合成途径提供理论参考. 展开更多
关键词 七叶一枝花 尿苷二磷酸糖基转移酶基因 QRT-pcr 序列分析 表达
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版纳微型猪近交系AO血型基因外显子7和外显子8遗传特征分析
17
作者 潘伟荣 查星琴 +5 位作者 霍金龙 卿玉波 肖晶 魏红江 曾养志 成文敏 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期584-590,共7页
猪的UDP-N-乙酰半乳糖胺转移酶(UDP-N-acetylgalactosamine transferase,UDP-Gal NAc)是负责转移一分子的N-乙酰-D-半乳糖胺基(NAc Ga1)到H底物上形成A抗原,从而决定A型血的转移酶,AO血型系统的A基因编码A转移酶。采用PCR技术和直接测... 猪的UDP-N-乙酰半乳糖胺转移酶(UDP-N-acetylgalactosamine transferase,UDP-Gal NAc)是负责转移一分子的N-乙酰-D-半乳糖胺基(NAc Ga1)到H底物上形成A抗原,从而决定A型血的转移酶,AO血型系统的A基因编码A转移酶。采用PCR技术和直接测序的方法对版纳微型猪近交系UDP-Gal NAc基因外显子7和外显子8进行多态性分析,均仅检测到1种基因型。通过序列比较发现,版纳微型猪近交系UDP-Gal NAc基因外显子7和外显子8与NCBI数据库中14个其他物种的ABO血型基因存在较高的同源性。与人相比,猪外显子7第92~97位缺失编码两个氨基酸的6个碱基。构建的基因进化树分析结果显示版纳微型猪近交系与牛、羊、鲸亲缘关系最近。 展开更多
关键词 udp-N-乙酰半乳糖胺转移酶基因 版纳微型猪近交系 外显子7和8 pcr 序列分析
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不同HCV感染者对不同区段HCV抗原的反应性研究
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作者 胡本忠 金鲁明 马加宝 《菏泽医学专科学校学报》 1997年第4期3-5,共3页
利用HCV不同区段抗原的单片段EIA试剂及RT-PCR方法,对HCV的不同临床症状表现者进行检测,结果显示不同临床症状表现阶段的病人对抗原的反应性有所不同。任性肝炎病人抗原反应性较强,表现在抗体的检出车及S/Co值均高;肝癌病人对各... 利用HCV不同区段抗原的单片段EIA试剂及RT-PCR方法,对HCV的不同临床症状表现者进行检测,结果显示不同临床症状表现阶段的病人对抗原的反应性有所不同。任性肝炎病人抗原反应性较强,表现在抗体的检出车及S/Co值均高;肝癌病人对各抗原及RT-PCR反应较低,推测可能与肝癌的特株病理变化有关。在ALT正常而抗HCV阳性组中,抗原的反应性低于任性肝炎和急性肝炎组,而其RT-PCR的阳性率高于其它组,因此,推测此时期病人传染性强。结果发现E1、E2抗体阳性时存在病毒血症。研究显示抗NS3和抗C抗体在各组的检出率和反应性均强。在肝癌病人中抗NS3抗体显示了很高的检出率,结果证明核心和抗NS3抗体的检测是目前抗体的主要检测手段,同时RT-PCR检测具有早期诊断价值。 展开更多
关键词 HCV抗原 感染者 RT-pcr方法 抗HCV阳性 RT-pcr 早期诊断价值 症状表现 eia试剂 抗原反应性 S/CO值 pcr反应 NS3 肝炎病人 肝癌病人 病理变化 急性肝炎 病毒血症 抗体阳性 抗C抗体 检测手段 检出率 显示 ALT 阳性率 传染性
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MPTS转多路SPTS的IP输出实现 被引量:3
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作者 王涛 《电视技术》 北大核心 2013年第5期11-14,共4页
介绍了一种接收解码器,它是一种广泛应用于三网融合的信源接收设备,它可以将接收到的MPTS多节目传输流转换为多个SPTS单节目传输流,并且通过TS OVER IP的形式将各个节目分别输出到不同的IP主机或端口。详细介绍了整个系统各个模块的功... 介绍了一种接收解码器,它是一种广泛应用于三网融合的信源接收设备,它可以将接收到的MPTS多节目传输流转换为多个SPTS单节目传输流,并且通过TS OVER IP的形式将各个节目分别输出到不同的IP主机或端口。详细介绍了整个系统各个模块的功能和实现过程。 展开更多
关键词 三网融合 OTT TSOVERIP pcr PSI udp RTP
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石榴PgUGT基因表达特性与重组表达分析 被引量:6
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作者 招雪晴 杨静 +1 位作者 沈雨 苑兆和 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期390-397,共8页
由糖基转移酶参与的糖基化反应是植物次生代谢产物合成中最广泛的一种修饰方式,也是次生代谢产物结构多样性的机制之一。该研究基于石榴(Punica granatum L.)转录组数据,以石榴果皮为材料,采用RT-PCR克隆得到石榴UDP-糖基转移酶(UDP-gly... 由糖基转移酶参与的糖基化反应是植物次生代谢产物合成中最广泛的一种修饰方式,也是次生代谢产物结构多样性的机制之一。该研究基于石榴(Punica granatum L.)转录组数据,以石榴果皮为材料,采用RT-PCR克隆得到石榴UDP-糖基转移酶(UDP-glycosyltransferase,UGT)基因(PgUGT);采用生物信息学技术对编码蛋白的基本特性进行分析,并构建系统发育树;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析该基因在果实发育期内的表达模式;结合果实发育期内的总类黄酮和总花色苷含量,分析了基因表达与总类黄酮和总花色苷合成的关系;构建PgUGT的原核表达载体,对其进行原核重组表达。结果表明:(1)成功克隆得到石榴PgUGT基因(GenBank登录号为MW414607);PgUGT基因具有一个1557 bp的开放阅读框(ORF),编码518个氨基酸,预测蛋白分子质量为55.9 kD,等电点为6.55,为不稳定的亲水蛋白;PgUGT具有糖基转移酶家族保守的PSPG基序,属于GT-B糖基转移酶基因家族。进化树分析表明,该编码蛋白属于拟南芥UGT的F类群,与葡萄和草莓的UGT亲缘关系较近。(2)qRT-PCR结果表明,石榴PgUGT基因的表达量在果实发育期内呈先升后降的模式,与总类黄酮含量的逐渐下降和总花色苷含量的逐渐上升趋势并不完全一致。(3)成功构建原核表达载体pCZN1-PgUGT;重组原核表达结果显示,重组质粒在大肠杆菌中为可溶性表达,表达的蛋白分子量约为58 kD。该研究结果为PgUGT基因在石榴类黄酮糖基化反应中的作用及功能奠定了基础。 展开更多
关键词 石榴 udp-糖基转移酶 QRT-pcr 类黄酮 重组表达
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