HBV DNA C区BCP双突变PCR-FP检测方法的建立及其临床应用

目的 :建立简便的 HBV DNA序列中 BCP双突变的检测方法。方法 :采用终点终止法和偏振光检测技术进行点突变的检测。首先对 HBVC区基因进行 PCR扩增 ,然后用特异探针与扩增产物中待测核苷酸的下游序列杂交 ,使探针的 3’端可以在 DNA聚合酶的催化下 ,依据其互补链上的待测核苷酸连接上一个标有特定荧光素的 d NTP,然后检测该3’端带有荧光素的探针 ,根据检测到的荧光素种类和偏振光的强度可以判定待测点是何种核苷酸。结果 :该方法可以检测出 HBV基因序列中 BCP双突变核苷酸类型 ,可以检测 1个拷贝的模板 ,并且可以从 BCP野生型株 DNA序列中检出 5 % BCP双突变 DNA序列 ,对 76例 HBV DNA阳性患者进行检测 ,结果 HBV BCP基因双突变率为 5 3.9( 4 1 /76)。结论 :该技术可以对血清中 HBV DNA C区 BCP双突变。

运用变性PAGE和荧光检测技术对广州汉族人群六个STR位点的研究

运用STR-PCR、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结合荧光DNA自动检测技术对广州汉族人群6个STR位点(vWA31A、TH01、F13A01、FES、TPOX和CSF1PO)等位基因频率和基因型频率进行了调查,并与其它人群的等位基因频率进行了对比。所有位点的结果均符合Hardy-Weinberg平衡,且各位点等位基因间无相关性。本方法可靠、灵敏,所得的等位基因频率等数据可为汉族人群法医个人识别、亲子鉴定及遗传学研究提供基础数据。