PCR-SSCP法快速检测鉴定临床病原菌的探讨

目的 :探讨利用 PCR- SSCP快速检测和鉴别临床病原菌的方法。方法 :采用细菌保守的 1 6 s r RNA基因为模板 ,以 PCR-SSCP方法检测病原菌 ,并以普通 PCR法和 PCR- RFL P法作比较。结果 :普通 PCR法很难从电泳图谱中鉴别细菌 ;PCR-RFCP法电泳图谱虽呈多态性 ,但仍有部分细菌图谱相同和相似 ,不易区分 ;经 PCR- SSCP电泳出来的细菌图谱差异明显 ,可以互相区分。结论 :PCR- SSCP技术能快速简便地检测。

KLF6基因在原发性肝癌中遗传不稳定性的研究

目的研究KLF6基因M1、M2、M4、D10S1716位点的微卫星不稳定性（MSI）和杂合性缺失（LOH）与原发性肝癌进展的关系，为揭示抑癌基因作用机制和肿瘤发生、发展机制提供实验依据。方法从肝癌组织标本中抽提DNA，应用PCR一单链构象多态性（PCR—SSCP）法进行KLF6基因遗传不稳定性的研究。结果肝癌KLF6基因微卫星位点LOH的检出率为35．71％（1O／28），与肝癌分化程度、有无包膜无相关性（均P〉0．05），但与临床TNM分期密切相关（P〈0．01），LOH在肝癌Ⅲ～IV期检出率为（75．00％，6／8）明显高于I～II期（20．00％，4120）。MSI检出率为17．86％（5／28），MSI与肝癌分化程度、淋巴转移、临床TNM分期和有无包膜均无相关性（均P〉O．05）。结论KLF6基因的遗传不稳定性可能是原发性肝癌发生、发展的一个重要机制，KLF6基因LOH的发生率与临床TNM分期正相关。LOH在KLF6杂合性缺失的过程中起了重要作用，可作为肝癌恶化及进展的一个指标，MSI则可能影响肿瘤的预后。