期刊文献+
共找到12篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
结核分支杆菌临床分离株的基因检测研究 被引量:10
1
作者 罗振华 王和 《贵州医药》 CAS 2004年第2期103-105,共3页
目的检测结核分支杆菌临床分离株的IS986和embB基因序列 ,了解结核分支杆菌及其药物敏感性的基因检测同Bactec 4 6 0自动检测系统的相关性。方法用Bactec 4 6 0检测系统对获自肺结核患者的 8株临床分离菌和 1株质控菌进行菌种及EMB药物... 目的检测结核分支杆菌临床分离株的IS986和embB基因序列 ,了解结核分支杆菌及其药物敏感性的基因检测同Bactec 4 6 0自动检测系统的相关性。方法用Bactec 4 6 0检测系统对获自肺结核患者的 8株临床分离菌和 1株质控菌进行菌种及EMB药物敏感性的鉴定 ,采用PCR和PCR DS技术对菌株进行IS986和embB基因检测和序列分析。结果 8株临床分离菌经Bactec 4 6 0自动检测系统鉴定为结核分支杆菌 ,其中 7株对EMB敏感、1株耐药 ,质控株耐药。各分离菌株及质控株PCR检测出IS986和embB基因序列 ,符合率 10 0 %。 1株临床分离耐药株embB基因的第 30 6位密码子发生突变 ,1株敏感株embB基因的第 2 78位和 2 79位密码子有突变 ,其余 6株敏感菌及质控株未发现序列改变 ,符合率 77 8%。结论PCR扩增是一种快速、敏感、特异性的结核分支杆菌鉴定方法 ,鉴定结果同Bactec 4 6 0TB检测系统一致。结核分支杆菌对EMB耐药性的形成同embB基因突变有关。Bactec 4 6 0TB系统检测药物敏感性可发生漏诊或误诊 ,可能造成药敏结果与临床治疗效果不一致的情况。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 临床分离株 基因检测 IS986基因 EMBB基因 序列测定
下载PDF
哈萨克羊多胎基因的多态性研究 被引量:5
2
作者 刘宜勇 丁克奇 +5 位作者 杨光维 刘建明 道尔基 团勇 吐来力江 陈春华 《中国草食动物科学》 CAS 2017年第1期7-10,共4页
为了探索绵羊多胎性的分子机理以及为绵羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供理论依据,采用PCR-RFLP及直接测序方法,对哈萨克羊群体BMP15基因Fec XI和Fec XH及第1内含子进行多态性检测。结果表明:BMP15基因Fec XI和Fec XH酶切位点均未出现... 为了探索绵羊多胎性的分子机理以及为绵羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供理论依据,采用PCR-RFLP及直接测序方法,对哈萨克羊群体BMP15基因Fec XI和Fec XH及第1内含子进行多态性检测。结果表明:BMP15基因Fec XI和Fec XH酶切位点均未出现多态性,在第1内含子存在2种基因型,AA型和AB型;优势基因型为AA型,优势等位基因为A基因,多态信息含量小于0.25,属于低度多态;χ~2适合性检验表明:处于Hardy-Weinberg平衡状态;测序结果表明:AB型个体在该基因第1内含子的第667位点发生G→T的突变,出现G/T的杂合。显著性检验分析表明:该突变位点在哈萨克羊群体中的产羔生产性能无显著性差异(P>0.05)。 展开更多
关键词 哈萨克羊 BMP15基因 PCR-RFLP pcr-ds 多态性
下载PDF
水稻Ac×Ds后代基因组DNA中Ds侧翼序列的扩增及其Ds插入分析 被引量:6
3
作者 孙丙耀 谈建中 +3 位作者 陆小平 曲春香 万志刚 顾福根 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1555-1561,共7页
采用TAIL-PCR技术从经鉴定含Ac/Ds双元件的材料中扩增Ds侧翼序列并测序,对水稻Ac×Ds后代基因组DNA进行Ac和Ds插入的PCR分析。利用NCBI的BLAST软件,以Ds侧翼序列为待查询序列进行GenBank在线搜索比对,获得Ds插入相关基因的染色体定... 采用TAIL-PCR技术从经鉴定含Ac/Ds双元件的材料中扩增Ds侧翼序列并测序,对水稻Ac×Ds后代基因组DNA进行Ac和Ds插入的PCR分析。利用NCBI的BLAST软件,以Ds侧翼序列为待查询序列进行GenBank在线搜索比对,获得Ds插入相关基因的染色体定位和功能注释等信息。对扩增的93个有效Ds侧翼序列进行分析,结果显示,有21个水稻杂交后代中Ds插入于基因编码区,其余72个插入在基因间序列,其中12个插入在特定基因的上游3kb以内的间隔区。本研究强调了提高Ds侧翼序列扩增和Ac/Ds植株筛选效率的技术关键。 展开更多
关键词 水稻 Ds侧翼序列 Ds插入 温度非对称交互PCR
下载PDF
两株中国腮腺炎野毒SH基因cDNA直接测序和克隆测序
4
作者 武力 白植生 +3 位作者 李益民 周旭 宁小军 杨朝晖 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期33-37,共5页
对来源于兰州和上海两市的两株腮腺炎病毒野毒的小疏水蛋白(SH)基因及其旁侧区cDNA的PCR扩增产物,分别进行直接测序和克隆测序。用直接测序法测定2株腮腺炎野毒378个核苷酸序列,在此范围内存在16个核苷酸(4.2%... 对来源于兰州和上海两市的两株腮腺炎病毒野毒的小疏水蛋白(SH)基因及其旁侧区cDNA的PCR扩增产物,分别进行直接测序和克隆测序。用直接测序法测定2株腮腺炎野毒378个核苷酸序列,在此范围内存在16个核苷酸(4.2%)差异,其中11个(2.9%)位于编码区序列中,所推导的SH蛋白序列有6个氨基酸(10.5%)差异。克隆测序法测定的这两株腮腺炎野毒的核苷酸序列相当于直接法的78-378位核苷酸。两种方法在所测301个核苷酸(nt)的共同区域内序列完全一致。证明PCR产物直接测序用于腮腺炎病毒分子流行病学研究不仅特异性强,敏感度高,而且比克隆测序法更为快速简便。 展开更多
关键词 腮腺炎病毒 小疏水蛋白 基因 PCR 克隆 测序
下载PDF
幽门螺杆菌在干槽症发病中的意义初探 被引量:2
5
作者 陈发明 孙海花 +1 位作者 贾保军 邓玲玲 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期125-126,共2页
目的 初步探讨幽门螺杆菌 (Hp)在干槽症 (DS)发病中的作用。 方法 通过对 2 0例DS患者拔牙窝和对侧相应部位牙齿龈下菌斑的Hp -PCR检测了解Hp感染情况 ;并分组治疗观察抗幽门螺杆菌 (抗Hp)治疗DS的效果。结果  2 0例DS患者中有 19例 ... 目的 初步探讨幽门螺杆菌 (Hp)在干槽症 (DS)发病中的作用。 方法 通过对 2 0例DS患者拔牙窝和对侧相应部位牙齿龈下菌斑的Hp -PCR检测了解Hp感染情况 ;并分组治疗观察抗幽门螺杆菌 (抗Hp)治疗DS的效果。结果  2 0例DS患者中有 19例 (95 .0 % )拔牙窝Hp -PCR检测阳性 ,其对侧相应部位牙菌斑阳性率亦高达 6 5 .0 % ;分组治疗结果两组差异显著 (P <0 .0 5 )。结论 Hp可能与DS发病有关 ,其致病机理的研究尚待深入。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 干槽症 聚合酶链反应
下载PDF
哈萨克羊BMPl5基因多态性研究 被引量:1
6
作者 陈春华 刘宜勇 +5 位作者 丁克奇 刘建明 杨光维 吐来力江 团勇 道尔基 《甘肃畜牧兽医》 2016年第24期103-106,共4页
为了探索绵羊多胎性的分子机理以及为绵羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供理论依据,采用PCR-RFLP及PCR-DS方法,对哈萨克羊群体BMPl5基因FecXG和FecXB及第2外显子进行多态性检测。结果表明:BMPl5基因FecXG和FecXB位点均未出现多态性... 为了探索绵羊多胎性的分子机理以及为绵羊繁殖力的标记辅助选择和育种提供理论依据,采用PCR-RFLP及PCR-DS方法,对哈萨克羊群体BMPl5基因FecXG和FecXB及第2外显子进行多态性检测。结果表明:BMPl5基因FecXG和FecXB位点均未出现多态性,在第2外显子存在2种基因型,AA型和AB型;测序结果表明:AB型个体在该基因第775位点发生G→C的突变,出现G/C的杂合。优势基因型为AA型,优势等位基因为彳基因,多态信息含量小于0.25,属于低度多态;贮适合性检验表明:处于Hardy-weinberg平衡状态;显著性检验分析表明:该突变位点在不同产羔数母羊群体中的分布有一定的差异。该突变位点可以作为控制绵羊多胎产羔的潜在分子标记位点。 展开更多
关键词 哈萨克羊 BMPl5基因 PCR-RFLP pcr-ds 多态性
下载PDF
家蚕质多角体病毒片段IV的全序列测定
7
作者 林伟 杨文利 +4 位作者 徐安龙 梁玉尧 陈森雄 戴伟君 张景强 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期41-44,共4页
在随机引物建库的基础上 ,通过交叉设计引物及加单链DNA接头 ,应用RT PCR技术克隆了家蚕质多角体病毒dsRNA片段Ⅳ的全长cDNA ,并测定了它的全序列。该片段长 3,2 6 2bp ,含有一个完整的开放读码框 ,编码一个长 1 ,0 5 8氨基酸的成熟多... 在随机引物建库的基础上 ,通过交叉设计引物及加单链DNA接头 ,应用RT PCR技术克隆了家蚕质多角体病毒dsRNA片段Ⅳ的全长cDNA ,并测定了它的全序列。该片段长 3,2 6 2bp ,含有一个完整的开放读码框 ,编码一个长 1 ,0 5 8氨基酸的成熟多肽。序列分析表明 ,该片段与日本BmCPV片段Ⅳ的核苷酸序列同源性为 89% ,氨基酸序列同源性为 95 %。 展开更多
关键词 家蚕质多角体病毒 BmCPV 双链RNA RT-PCR 序列测定
下载PDF
从水稻Ac/Ds插入突变体扩增Ds侧翼序列的最适TAIL-PCR引物(英文) 被引量:14
8
作者 孙丙耀 PIAO Hai-Long +1 位作者 PARK Sung-Han HAN Chang-Deok 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期821-826,共6页
温度非对称交互PCR(TAIL PCR)技术已广泛应用于从多种生物体系克隆侧翼于已知序列的DNA片段的分子操作中 ,并极大地促进了反向遗传学研究。但是 ,可能由于不同物种间基因组大小和序列存在显著差异 ,在采用该技术进行转座元件Ds水稻插入... 温度非对称交互PCR(TAIL PCR)技术已广泛应用于从多种生物体系克隆侧翼于已知序列的DNA片段的分子操作中 ,并极大地促进了反向遗传学研究。但是 ,可能由于不同物种间基因组大小和序列存在显著差异 ,在采用该技术进行转座元件Ds水稻插入突变体鉴定过程中 ,常因TAIL PCR反应的稳定性差而影响突变体筛选效率。有鉴于此 ,根据Ds核苷酸序列设计了分别对应或互补于Ds插入元件两端长度不同的 12个特异引物组成 32个组合 ,在大量预试验基础上与 6个不同简并性 (32~ 2 5 6 )的随机简并引物分别组合进行TAIL PCR反应 ,较系统地研究了引物特性对以水稻基因组DNA为模板的TAIL PCR反应效率的影响。结果发现 ,第一反应采用长序列特异引物(36~ 4 0mer)可显著提高扩增特异性 ,随机简并引物的简并度对反应的影响显著。还选择出两个适于从水稻Ds插入突变体基因组高效扩增出Ds插入侧翼片段的最优特异引物组合和最适简并引物。应用本研究结果可显著地提高TAIL 展开更多
关键词 随机简并(AD)引物 Ds-特异引物 Ds侧翼序列 水稻 温度非对称交互PCR
下载PDF
Primer/Probe Optimization of RTq-PCR for Identification of Double-stranded (ds) RNA in Rhizoctonia solani
9
作者 Mary S. Chey Ashlee M. Long +1 位作者 Seema Bharathan Narayanaswamy Bharathan 《Journal of Life Sciences》 2015年第11期535-540,共6页
关键词 DSRNA 立枯丝核菌 引物序列 探针 MgCl2浓度 优化 双链 卵巢癌
下载PDF
Cloning of Ds MAPK Gene and Construction of Antisense Expression Vector
10
作者 Jinrong YUE Yuting CONG +3 位作者 Xiangnan GAO Zhenyu XING Wenjing YUE Xiaojie CHAI 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2018年第4期8-11,24,共5页
In order to investigate the role of MAPK gene in adaptation of Dunaliella salina to hypersaline environment, the Ds MAPK gene of D. salina was amplified by PCR. After inverted insertion of the open reading flame ofDs ... In order to investigate the role of MAPK gene in adaptation of Dunaliella salina to hypersaline environment, the Ds MAPK gene of D. salina was amplified by PCR. After inverted insertion of the open reading flame ofDs MAPK gene into downstream sequence of 35S promoter of plant expression vector, an antisense expression vector of Ds MAPK gene was successfully constructed and introduced into D. salina cells by LiAc/PEG-mediated method. The expression of Ds MAPK gene in transgenic D. salina was analyzed by semi-quantitative RT-PCR method. The results showed that the expression of Ds MAPK gene in D. salina was significantly inhibited at the transcriptional level. The study laid the foundation for further identification of the function of Ds MAPK gene. 展开更多
关键词 Dunaliella salina Ds MAPK Antisense expression vector Semi-quantitative RT-PCR
下载PDF
播娘蒿转录因子DsCBF1突变体的构建及其蛋白质的EMSA试验分析 被引量:3
11
作者 陈麒名 常菲菲 +5 位作者 李茜 刘博 田磊 陈天盈 徐辉 乔代蓉 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期179-183,共5页
CBF(C-repeat binding factor)是调控植物冷驯化相关基因表达的调控转录激活因子,可与下游冷应答基因启动子的核心序列CBT/DRE元件(CCGAC)特异性地结合,启动耐寒基因的表达,提高植物的抗寒能力.为揭示播娘蒿(Descurainia sophia)的抗寒... CBF(C-repeat binding factor)是调控植物冷驯化相关基因表达的调控转录激活因子,可与下游冷应答基因启动子的核心序列CBT/DRE元件(CCGAC)特异性地结合,启动耐寒基因的表达,提高植物的抗寒能力.为揭示播娘蒿(Descurainia sophia)的抗寒机制,研究播娘蒿转录因子Ds CBF1蛋白AP2区域编码氨基酸对启动下游抗寒基因表达的作用.首先分析Ds CBF1蛋白AP2区域编码氨基酸的疏水性,设计重叠延伸PCR引物,定点突变Ds CBF1基因;然后构建p ET32a-Ds CBF1突变体原核表达载体,通过冻融法转化入宿主大肠杆菌BL21(DE3)中,进行原核表达,并通过镍离子亲和层析纯化Ds CBF1突变体蛋白;最后利用化学发光法EMSA试验(Electrophoretic mobility shift assay)方法分析Ds CBF1蛋白与含有CRT/DRE元件的DNA探针之间的相互作用.EMSA试验分析显示,播娘蒿Ds CBF1的AP2区域的57位苯丙氨酸F(TTT)和68位缬氨酸V(GTT)分别突变为精氨酸R(CGT)和谷氨酸E(GAA),导致播娘蒿顺式调控因子Ds CBF1蛋白与下游冷响应基因的CRT/DRE元件结合效率出现明显下降趋势,说明播娘蒿Ds CBF1蛋白AP2区域编码氨基酸位点的突变影响了播娘蒿的抗寒能力.本研究表明播娘蒿Ds CBF1的AP2区域的57位苯丙氨酸F(TTT)和68位缬氨酸V(GTT)位点对于播娘蒿的冷驯化具有十分重要的作用. 展开更多
关键词 播娘蒿 CRT/DRE元件 AP2区域 重叠延伸PCR p ET32a-Ds CBF1突变体 EMSA
原文传递
修饰的Ac/Ds转座子元件在油菜中的遗传转化与鉴定 被引量:4
12
作者 徐娟 闫晓红 +2 位作者 王力军 黄进勇 魏文辉 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期367-372,共6页
玉米Ac/Ds转座子系统已被成功应用于多种异源植物进行基因的分离与克隆.本研究利用农杆菌介导法将含有Ac元件的质粒pUbiAc及含有Ds元件的质粒pDsBar1300分别转化甘蓝型油菜中双6号的子叶柄与下胚轴,分别获得了Ac和Ds的转化植株.PCR检测... 玉米Ac/Ds转座子系统已被成功应用于多种异源植物进行基因的分离与克隆.本研究利用农杆菌介导法将含有Ac元件的质粒pUbiAc及含有Ds元件的质粒pDsBar1300分别转化甘蓝型油菜中双6号的子叶柄与下胚轴,分别获得了Ac和Ds的转化植株.PCR检测发现,在10株Ac转化植株中有1株为阳性苗,阳性率为10%;在28株Ds转化植株中有21株阳性苗,阳性率为75%.该结果为下一步构建油菜突变体群体及开展油菜功能基因组学研究将开辟一个新的途径. 展开更多
关键词 Ac/Ds转座子 甘蓝型油菜 转化 PCR鉴定
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部