聚合酶链反应-增强化学发光法快速检测结核杆菌的研究

目的 建立聚合酶链反应 -增强化学发光法 (polymerasechainreaction enhancedchemilumine cence ,PCR ECL)快速高灵敏度和高特异性检测结核杆菌的方法。方法 以结核分支杆菌、牛分支杆菌特异性抗原Pab基因的 4 19bp片段为靶序列 ,PCR体系经优化 ,直接酶标法标记探针 ,增强化学发光检测 (ECL)进行分子杂交。结果 PCR体系对结核分支杆菌、牛分支杆菌、卡介苗的扩增为阳性 ,PCR体系灵敏度为 5fgDNA分子。ECL体系灵敏度为 0 .5pgDNA分子。采用模拟痰样 ,可检至 10个以下结核杆菌。结论 建立了结核杆菌的PCR ECL快速检测方法 。

电化学发光PCR定量检测H-ras癌基因点突变

提出了一种电化学发光PCR(ECL-PCR)分析方法, 该法可用于定量检测基因点突变. 其检测H-ras癌基因PCR扩增产物的灵敏度可达100 fmol;线性范围为0.1～500 pmol. 用ECL-PCR分析法对膀胱癌组织中H-ras癌基因进行突变检测, 只需要10 μL样品, 20 min的孵育时间和30 s的采集时间, 得出20例膀胱癌样品中有7例存在点突变, 通过标准曲线方程定量计算出突变样品的量. ECL-PCR分析方法在灵敏度、线性范围、分析时间等方面都优于传统的检测方法, 是一种安全、快速、灵敏、定量检测基因点突变的分析方法.

三种不同的方法检测HBsAg的比较

目的探讨三种检验方法间的关系及临床价值。方法对用ELISA法测出HBsAg阳性的标本,再用荧光定量PCR(FQ-PCR)和电化学发光(ECL)的方法测其拷贝数和含量。结果对用ELISA法“大三阳”的40份标本中,荧光定量PCR阳性率为85%,电化学发光的方法阳性率为100%;ELISA法“小三阳”的60份标本中,荧光定量PCR阳性率为8.3%,电化学发光的方法阳性率为98%。结论三种检验方法对临床有不同的指导意义。