分析HLA-DQA1基因与干燥综合征患者临床特征的相关性

目的 探讨人类白细胞抗原DQA1(human leucocyte antigen-DQA1,HLA-DQA1)与干燥综合征(Sjögren’s syndrome,SS)患者临床特征的相关性。方法 选取2022年8月至2023年8月包头医学院第一附属医院收治的242例SS患者为研究对象,根据HLA-DQA1检测结果,将患者分为HLA-DQA1阳性组(n=147)和HLA-DQA1阴性组(n=95)。比较两组患者的临床表现、实验室指标、唇腺活检和疾病活动度。采用受试者操作特征曲线分析HLA-DQA1对SS患者疾病活动度的诊断价值。结果 HLA-DQA1阳性组患者的口干、眼干、紫癜占比和抗干燥综合征A抗体(anti-Sjögren’s syndrome A antibody,抗SSA抗体)、抗干燥综合征B抗体(anti-Sjögren syndrome’s B antibody,抗SSB抗体)、抗核抗体(antinuclearantibody,ANA)阳性占比及免疫球蛋白G水平均显著高于HLA-DQA1阴性组(P<0.05),血红蛋白水平显著低于HLA-DQA1阴性组(P<0.05);HLA-DQA1阳性组患者的疾病活动度显著高于HLA-DQA1阴性组(P<0.05)。HLA-DQA1、抗SSA抗体、抗SSB抗体判断SS患者疾病活动度的曲线下面积分别为0.593、0.534、0.593。三者联合判断SS患者疾病活动度的曲线下面积为0.638。结论 HLA-DQA1与SS患者的疾病活动度相关,在HLA-DQA1阳性患者中,口干、眼干、高球蛋白血症、贫血和紫癜等症状更明显,同时,抗SSA/SSB抗体和ANA阳性率较高,提示HLA-DQA1表达有助于判断SS患者的病情。

HLA-DQA1*0501、HLA-DQB1*02基因多态性与抗Ro/SSA抗体阳性pSS易感性的关系分析

目的基于数据库相关数据分析人类白细胞抗原(HLA)-DQA1*0501和HLA-DQB1*02基因多态性与抗Ro/SSA抗体阳性的原发性干燥综合征(pSS)易感性的关系。方法使用计算机检索相关数据库,筛选并收集pSS患者、抗Ro/SSA抗体阳性的pSS患者、抗Ro/SSA抗体阴性的pSS患者以及健康对照人群的HLA-DQA1*0501、HLA-DQB1*02基因多态性资料。使用STATA 16.0(USA)统计软件分析抗Ro/SSA抗体阳性的pSS患者中HLA-DQA1*0501和HLA-DQB1*02基因多态性与pSS发生的关系。结果纳入文献5篇,涉及420例pSS患者、250例抗Ro/SSA抗体阳性pSS患者、120例抗Ro/SSA抗体阴性的pSS患者和733例健康对照者。在pSS患者中,HLA-DQA1*0501和HLA-DQB1*02基因阳性分别为159、246例;在健康对照者中,HLA-DQA1*0501和HLA-DQB1*02基因阳性分别为196、282例;在抗SSA抗体阳性pSS患者中,HLA-DQA1*0501和HLA-DQB1*02基因阳性分别为129、158例;在抗SSA抗体阴性pSS患者中,HLA-DQA1*0501和HLA-DQB1*02基因阳性分别为30、46例。HLA-DQA1*0501和HLA-DQB1*02基因多态性与pSS的易感性有关(I2分别为62.99%、40.75%,合计OR值分别为2.60、2.43,95%CI分别为1.49~4.55、1.88~3.14,P均<0.05)。HLA-DQA1*0501和HLA-DQB1*02基因多态性也与抗Ro/SSA抗体阳性pSS的易感性有关(I2分别为0.00%、9.41%,合计OR值分别为3.85、2.61,95%CI分别为1.81~8.21、1.52~4.48,P均<0.05)。结论HLA-DQA1*0501和HLA-DQB1*02基因多态性与抗Ro/SSA抗体阳性的pSS患者的易感性相关。具有HLA-DQA1*0501和HLA-DQB1*02基因阳性的抗Ro/SSA抗体阳性患者更容易患pSS。

用PCR-RFLP方法研究藏族HLA-DQA1和-DQB1基因多态性

应用目前HLA研究领域中成熟的,有效的PCR-RFLP基因分型技术,从DNA水平对藏族健康群体进行了HLA-DQA1(49人)和-DQB1(49人)基因分型,这在国内外属首次。所采用的PCR-RFLP基因分型技术是在HLA-DQA1和-DQB1各等位基因全部序列已知的情况下,对其第2个外显子碱基序列扩增进而进行RFLP分析的方法。这种方法得到的RFLP的所有片段都是已知序列,因而精确度很高,同时为发现新的等位基因提供了成熟而有效的分析方法。研究结果表明,在藏族DQA1的8个等位基因,DQA1*0301的基因频率最高(36.74％)。DQA1*0601(4.08％)、*0103(4.08％)和*0401(5.10％)最低。在DQB1的16个等位基因中,OQB1*0302(16.33％)、*0303(15.31％)和*0602(15.31％)为最常见,没有观察到*0504。统计分析表明,在DQA1各等位基因分布上,藏族与新疆汉族、北方汉族、上海汉族十分相近;与维吾尔族和哈萨克族也没有明显差异。在OQB1各等位基因的分布上,藏族与汉族、维族、哈族之间略有差异,而汉族、维族、哈族之间也存在一些差异。

用PCR-RFLP方法检测天津地区汉族人群HLA-DQA1等位基因多态性

目的:应用PCR-RFLP方法对天津地区96名汉族人进行HLA-DQA1等位基因的分型研究,以了解天津地区汉族人群HLA-DQA1多态性的分布。方法:通过PCR反应扩增HLA-DOA1第二外显子多态性片段,以限制性内切酶Dde Ⅰ、Hae Ⅲ、Rsa Ⅰ、Fok Ⅰ及Mnl ;Ⅰ、Mbo Ⅱ进行酶切反应,对HLA-DQA1基因进行分型。结果:在天津地区汉族人群中共检出8种DOA1等位基因,其中HLA-DQA1*0301出现频率最高(28.13%),DQA1*0401出现频率最低(0.52%)。结论:通过与其他人群HLA-DQA1分布特点进行比较得出,DQA1*0301和*0401是中国汉族人群HLA-DQA1基因中2个最具特点的等位基因。

PCR-RFLP用于HLA-DQA1基因分型的方法建立

目的建立一种简便、快速、价廉的ＨＬＡ－Ⅱ类基因分型方法，即ＰＣＲ－ＲＦＬＰ（ＲｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎＦｒａｇｍｅｎｔＬｅｎｇｔｈＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）。方法通过对４０例正常献血员及３０例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者ＨＬＡ－ＤＱＡ１基因的分型，介绍ＰＣＲ－ＲＦＬＰ的原理，具体方法及应注意的问题。结果正常献血员与ＳＬＥ患者有明显不同的基因型别。结论ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分型方法更易为一般实验室所接受。

PCR-RFLP法鉴别浙贝母及其混淆品湖北贝母

目的建立PCR-RFLP法鉴别浙贝母及其混淆品湖北贝母。方法对比两者叶绿体ycfl基因,选择湖北贝母的特异性酶切位点EcoRI设计引物,优化反应条件,并进行方法学考察。结果退火温度58℃、循环数35时,湖北贝母或掺有湖北贝母的浙贝母经特异性引物扩增后能被EcoRI酶酶切,200~400bp处检出2条单一DNA条带,而浙贝母无此条带,检出限达3%。结论该方法方便快捷、灵敏度高,可用于浙贝母、湖北贝母及前者掺混后者的快速检测,为浙贝母质量控制提供参考。

新疆维吾尔族、哈萨克族人群HLA-DQA1、-DQB1两基因座多态性的研究及与25个种族或民族的比较分析

应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ基因分型技术，首次对我国新疆地区维吾尔族和哈萨克族２个少数民族群体的ＨＬＡ－ＤＱＡ１、－ＤＱＢ１两个基因座的多态性进行了研究。结果显示，在ＤＱＡ１８个等位基因中，维族和哈族均表现为ＤＱＡ１＊０３０１最常见。最少见的ＤＱＡ１等位基因，在维族中为ＤＱＡ１＊０４０１和＊０６０１，而在哈族中为ＤＱＡ１＊０６０１；在ＤＱＢ１１６个等位基因中，ＤＱＢ１＊０２０１和＊０３０１在维族和哈族中均表现为最常见。在维族中未观察到ＤＱＢ１＊０５０２、＊０５０３２和＊０５０４，在哈族中未观察到ＤＱＢ１＊０５０３２、＊０５０４和＊０６０５等位基因。统计分析表明，维族和哈族ＤＱＡ１、ＤＱＢ１各等位基因的分布无显著性差异，说明维、哈族间具有较密切的亲缘关系。在以２７个种族或民族的ＨＬＡ－ＤＱＡ１、－ＤＱＢ１两基因座基因频率构建的分子系统树上，维族和哈族独立于其他群体而聚类，独处一支。维族和哈族接近蒙古人种，而离高加索人种较远。

云南西部彝族HLA-DQA1基因构成及中华民族19个华人群体DQA1基因频率的比较分析

目的 :探讨云南漾濞彝族族群HLA DQA1频率分布特征 ,并与华人 19个群体比较。方法 :采用限制性片段长度多态性分析 (PCR RFLP)方法。结果 :DQA1 0 30 1(31 6 3 % )最高 , 0 40 1(1 0 2 % )最低。卡方总体检验表明 ,该族群与北方六个汉人群体、满族、新加坡群体及新疆维吾尔族无显著差异 (P >0 0 5 ) ,但有个别基因频率的显著差异 ;布依族、傣族、台湾群体组成复杂 ,与其他群体有很大显著差异 (P >0 0 0 1) ;广东汉人与广西壮族与其他群体也有极其显著的差异 ;哈萨克族与维吾尔族相似 ;维吾尔族与部分北方汉族并无显著差异 ;藏族与哈萨克族、新加坡群体无显著差异。结论 :南方各族群DQA1的复杂构成 ,可能与起源的多样性或地域环境有关。漾濞彝族族群HLA

青海土族、撒拉族HLA-DQA1和-DQB1基因多态性探讨

目的 :检测青海土族和撒拉族健康个体HLA DQA1和 DQB1等位基因频率 ,了解和分析这两个民族的HLA DQA1和 DQB1基因多态性。方法 :用PCR SSO方法检测 132名土族和 80名撒拉族健康个体的HLA DQA1和 DQB1的基因多态性 ,并将所得结果与国内其他民族的同类资料进行比较。结果 :土族和撒拉族在HLA DQA1和 DQB1高频率等位基因分布上有共同点 ,也有一定的独特性。这两种民族HLA DQA1 0 10 2和 0 5 0 1以及DQB1 0 2 0 1、 0 30 1、 0 4 0 2和 0 6 0 2基因分布频率上具有显著性差异。结论 :土族和撒拉族与北方诸民族的等位基因频率接近 ,而与其他南方诸民族的差异相对较大。

HLA-DQA1、-DQB1基因多态性与高原红细胞增多症的相关性研究

目的:探讨移居高原汉族男性人群HLA-DQA1、-DQB1基因多态性是否与其发生高原红细胞增多症(HAPC)的易感性相关联。方法:以60例移居高海拔地区男性HAPC患者和60例移居同地区健康男性为研究对象,应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术进行HLA-DQA1、-DQB1基因分型,并使用SPSS软件分析HLA-DQA1、-DQB1多态性的分布频率及其组间差异。结果:移居高海拔地区的HAPC患者组的HLA-DQA1*0401和*0501分布频率分别为0.125 0和0.258 3;而同地区健康对照组HLA-DQA1*0401和*0501分布频率分别为0.041 7和0.158 3。与对照组相比,HAPC组HLA-DQA1*0401相对危险性为3.67,校正P值<0.05;*0501危险性为2.31,校正P值<0.05。而HAPC组和对照组在DQA1*0101/0104、DQA1*0103、DQB1*0201、DQB1*0601等位基因未显示显著性差异。结论:HLA-DQA1*0401、*0501位点可能与HAPC的易感性关联。

HLA-DQA1基因多态性与HBV感染结局相关

目的探讨中国汉族人群人类白细胞抗原(HLA)-DQA1基因多态性是否与乙型肝炎病毒(HBV)感染结局相关联。方法以213例HBV自限性感染者和420例慢性乙肝患者为研究对象,应用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术进行HLA-DQA1基因分型,用EPI和SPSS软件分析DQA1多态性的分布频率及其组间差异。结果DQA1*0102在慢性乙肝组的分布频率显著低于HBV自限性感染组(15.47%比较20.42%,P<0.05),而DQA1*0201在慢性乙肝组的分布频率显著高于HBV自限性感染组(10.48%比较6.10%,P<0.05)。调整性别、年龄等混杂因素影响的非条件logistic回归分析结果显示,与HLA-DQA1其他等位基因相比,携带DQA1*0102者降低慢性乙肝发生的风险(P<0.05,OR=0.69,95%C I:0.49-0.96),而携带DQA1*0201者增加慢性乙肝发生的风险(P<0.05,OR=1.77,95%C I:1.09-2.87)。结论HLA-DQA1基因多态性可能是影响HBV感染结局的重要宿主遗传因素。

皖籍汉人HLA-DQA1、-DQB1基因型与银屑病的相关性研究

目的探讨HLA－DQA1*0103、－DQA1*0201、－DQB1*0201、-DQB1*0303四种等位基因与皖籍汉族银屑病患者的相关性。方法利用聚合酶链反应一序列特异性引物（PCR-SSP）法，对84名银屑病患者及40名健康对照进行PCR反应，记录以上四种等位基因在他们中的分布情况。结果①HLA-DQA1*0201与皖籍汉族银屑病患者具有明显的相关性（Pc=0．0000191，OR-8．47）；②HLA1-DQA1*0103在无家族史患者中出现的频率较高（P=0．019）。结论①HLA-DQA1*0201可能是银屑病的易感基因或与易感基因相连锁；②有家族史与无家族史患者在其遗传基础上可能存在差异。

彝族儿童幽门螺杆菌感染HLA-DQA1免疫遗传学特征分析

目的研究人类白细胞抗原(HLA)DQA1基因位点上是否存在H.pylori感染的易感基因或抵抗基因,探讨免疫遗传因素在H.pylori感染中的作用。方法用聚合酶链反应?序列特异性引物(PCR?SSP)技术对用血清学试验及13C尿素呼气实验确诊的31例H.pylori感染的彝族儿童及39例无感染儿童进行HLA?DQA1基因分型。结果感染组HLA?DQA10102等位基因频率明显高于对照组(14.52%vs3.85%,P=0.025,Pc=0.35),OR=4.245(95%CI:1.097～16.428);感染组HLA?DQA10302等位基因频率低于对照组(0vs12.82%,P=0.003,Pc=0.042),OR=1.147(95%CI:1.053～1.249)。结论在HLA?DQA1位点上,H.pylori感染的彝族儿童与对照组儿童存在免疫遗传学差异,HLA?DQA10102基因可能是彝族H.pylori感染的易感基因,而HLA?DQA10302基因则可能是抵抗基因和具有免疫抵抗作用。

胸椎黄韧带骨化与HLA-DQA1等位基因的相关性研究

目的 :分析黄韧带骨化与HLA -DQA1等位基因的相关性。方法 :用聚合酶链式反应 /序列特异引物 (PCR-SSP)法对 3 0例OLF患者、5 1例正常对照进行HLA -DQA1等位基因的基因的分型。结果 :HLA -DQA1 0 40 1同OLF呈显著正相关 (GF =2 0 .0 % ,RR =7.3 2 7,P <0 .0 1) ,DQA1 0 2 0 1与OLF呈显著性负相关 (GF =5 .0 % ,RR =0 .2 0 1,P <0 .0 1) ;且DQA1 0 40 1的病因分数 >DQA1 0 2 0 1的预防分数 (EF/PF =0 .173 /0 .162 )。结论 :HLA -DQA1 0 40 1可能与OLF的疾病易感性相关 ,HLA -DQA1 0 2 0 1可能与OLF的抗性相关 ,在HLA -DQA1位点存在易感和抵抗双重作用 ,等位基因之间的共同作用可能是影响OLF发病的重要因素之一。

猪NCOA1基因PCR-RFLP多态性分析

[目的]研究猪NCOA1基因的PCR-RFLP多态性,为猪的分子育种和标记辅助选择提供理论依据。[方法]以81头山东寿光六和原种猪场的长白猪为研究对象,采取常规酚-氯仿抽提法从猪耳组织提取基因组DNA,以基因组DNA为模板进行PCR扩增获得440bp的NCOA1基因目的片段,利用限制性内切酶RsaⅠ对PCR产物进行酶切和琼脂凝胶电泳检测,并计算各等位基因频率和基因型频率。[结果]琼脂糖电泳检测酶切产物出现3种基因型:AA型(1条带:440bp)、AB型(3条带:440、282、158bp)、BB型(2条带:282、158bp);基因型频率分别为0.54、0.43和0.03;A和B2个等位基因的基因频率分别为0.76和0.24。[结论]该研究猪群中,A为优势等位基因,AA基因型频率较高。

HLA-DQA1基因多态性与支气管哮喘及慢性支气管炎易感性的比较研究

目的 研究支气管哮喘与慢性支气管炎患者HLA DQA1等位基因的异同。方法 采用限制性片断长度多态性聚合酶链反应技术 (PCR RFLP) ,对 4 0例支气管哮喘及 2 1例慢性支气管炎江西籍汉族患者进行HLA DQA1等位基因频率的检测 ,与 4 2例江西籍汉族正常人进行比较分析。结果 与正常对照组比较 ,支气管哮喘及慢性支气管炎组HLA DQA1 0 4 0 1基因频率均明显增高 (P <0 0 1) ,且在支气管哮喘组中 ,HLA DQA1 0 6 0 1基因频率明显增高 (P <0 0 1) ;支气管哮喘组与慢性支气管炎组比较 ,HLA DQA1 0 4 0 1、 0 6 0 1基因频率的分布无显著性差异 (P >0 0 5 )。其余各等位基因频率在三组间分布也无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 江西汉族人群的HLA DQA1 0 4 0 1、 0 6 0 1基因可能为支气管哮喘的易感基因 ,HLA DQA1 0 4 0 1基因可能为慢性支气管炎的易感基因 ,提示哮喘和慢性支气管炎有部分相同的免疫遗传机制。

皖籍汉人HLA-DQA1基因型与SLE相关性研究

目的 探讨皖籍汉人HLA DQA1等位基因多态性与系统性红斑狼疮 (SLE)相关关系。方法 采用多聚酶链反应 /限制性片断长度多态性 (PCR/RFLP)方法 ,对 2 8例SLE患者和 2 8例健康对照血样HLA DQA1基因进行分析 ,寻找相关的基因型。结果 皖籍汉族SLE患者具有显著高的DQA1 0 10 1或 0 10 2 ,二者总OR =6.92 ,P <0 .0 0 5 ,未发现其他DQA1等位基因与SLE相关。结论 皖籍汉人SLE相关联的基因可能并不完全同于其他地区汉族人 ,结果为进一步研究皖籍汉族人SLE的遗传易感度和家族患病率的估计提供线索。

昆明白族儿童幽门螺杆菌感染与HLA-DQA1等位基因的相关性

目的:探讨昆明白族儿童HLA-DQA1等位基因位点上是否存在幽门螺杆菌(H pylori)感染的易感基因或抵抗基因,研究H pylori感染的免疫遗传机制．方法:应用聚合酶链反应-序列特异性引物 (PCR-SSP)方法对应用胶体金标疫渗滤法 (DIGFA)和免疫印迹法联合诊断的32例H pylori感染昆明白族儿童(实验组)和34例无 H pylori感染的昆明白族儿童(对照组)进行 HLA-DOA1基因分型检测．结果:实验组HLA-DQA1*010401或*0402基因频率明显低于对照组,两组比较差异存在显著性(0 vs 15％,X2=0,P=0．001,Pc=0．014, OR=1．172,95％CI:1．062-1．294)．结论:HLA-DQA1*010401或*0402基因可能对H pylori感染具有免疲抵抗作用．

罗城汉族、壮族和仫佬族儿童HLA-DQA1多态性与幽门螺杆菌感染相关性的研究

目的 了解广西罗城县汉族、壮族和仫佬族儿童的HLA DQA1等位基因多态性及其与幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)感染状况的关系。方法 (1)对 36例汉族、5 4例壮族和 76例仫佬族儿童采用间接酶联免疫吸附法 (ELISA)测定抗Hp IgG抗体和免疫印迹法检测Hp空泡毒素 (CagA)、毒素相关蛋白 (VacA)及尿素酶抗体 ;(2 )采用聚合酶链反应 -序列特异引物 (PCR SSP)方法对三个民族儿童的HLA DQA1等位基因进行检测 ,并采用疾病关联分析法进行HLA DQA1等位基因分布与Hp感染检测结果相关性分析。 结果 (1)罗城汉族儿童Hp阳性率为 77 8% ,壮族儿童为 6 4 8%、仫佬族儿童为 5 7 9% ,各民族之间Hp阳性率差异无显著性意义 ;(2 ) 3个人群中HLA DQA1等位基因分布比较接近 ,其中HLA DQA1 0 10 4等位基因检出频率最高。用疾病关联分析法进行HLA DQA1等位基因分布与Hp感染相关性分析 ,发现三个民族中Hp阳性儿童和Hp阴性儿童在HLA DQA1 0 10 4等位基因上存在差异 ,HLA DQA1 0 10 4等位基因可能是Hp感染的易感基因。 结论 罗城汉族、壮族、仫佬族儿童Hp感染率较高 ,但各民族间无显著差异 ;HLA DQA1 0 10 4等位基因可能是Hp感染的易感基因。