PCR-STR分型技术的研究发展

本文系统的介绍了 PCR- STR分型技术的诞生、发展及其应用 ,并阐述了研究制备 STR等位基因阶梯的重要性及研究现状。

联合应用多种技术分析性别异常者

目的对1例Amelogenin基因座分型结果为"X,Y"的"女性"进行分子遗传学分析。方法采用PCR-STR技术检测Y-STR和X-STR基因座,实时荧光定量PCR技术检测SRY基因,原位荧光杂交(FISH)技术分析外周血细胞性染色体情况。结果采用Y-filer试剂盒仅检见短臂上的4个Y-STR基因座,AGCU X19试剂盒的19个X-STR基因座全部检出,但均为纯合子;SRY基因检测为阳性;外周血细胞FISH检测结果显示只有一条X染色体。结论推断该个体是伴有Y染色体物质隐匿嵌合的Turner综合征患者。在法医物证检验中,应重视该类社会性别与Amelogenin基因座检测结果不符的特殊个体,防止发生性别误判。

STR分型中无效等位基因的分析研究

PCR-STR自动分型技术是当前法医学个体识别和亲权鉴定的主要技术,具有高灵敏度、高鉴别能力和标准化自动分型等特征[1].在STR自动分型时,也会出现一些影响其准确分型的因素,本文结合1例三联体亲权鉴定中父亲与孩子Penta基因座上不符合遗传规律现象,通过用3种不同试剂盒、改变退火温度、重新设计引物以及测序等方法,对STR分型中无效等位基因现象进行分析和探讨.

杯口边缘附着微量口唇脱落细胞的检验

目的 探讨对遗留在杯口边缘的微量口唇黏膜脱落细胞进行DNA分型的可行性及影响因素 ,为案件的侦查提供指导作用。方法 分类提取饮水后容器边缘口唇黏膜脱落细胞中的DNA ,应用荧光标记PCR STR分型技术进行DNA分析。根据每个样本DNA基因座的检出个数 ,分别计算出基因座检出率。结果 不同容器、不同饮料对口唇黏膜脱落细胞DNA检验的影响不同。结论 杯口遗留的口唇黏膜脱落细胞 ,可作为一种法庭生物检材进行DNA分析 。

异体同型输血检测方法研究

目的:探讨异体同型输血的科学检测方法。方法:将若干份单一血液按比例实施体外两两混合,分别采用流式细胞的免疫血液学检测法及PCR-STR分析技术检测样本是否为混合血。结果:流式细胞仪检测法检测205份有效混合血样,检测出为混合血样的198份,其中2例为真正的输血病人,疑似混合血样品7份,无假阴性报告;相对于洛桑的8种目标检测抗原,采用21种目标检测抗原提高了确诊率。对291份有效混合血样采用PCR-STR分析技术进行检测,结果确定为混合血样的240份,其中1份为真正的输血病人,疑似混合血样39份,其中1份为输血病人,未检测出混合血迹象的12份;当血样混合比例高于1:10时,确诊率才明显下降。结论:在现阶段,流式细胞仪检测法和PCR-STR分析法是可行的异体同型输血检测方法。

遗传学

β地贫CD41-42突变杂合子复合缺失型α地贫双重杂合子的基因检测与血液学分析；HSP70在米非司酮引产胎儿肝、肾、脑组织中的表达；重组人TNF-α在大肠杆菌中的表达、纯化及生物学活性研究；应用PCR-酶切法进行脊肌萎缩症基因诊断；应用PCR-STR分型技术快速产前基因诊断Down’s综合征；与Down’s综合征发生相关的环境因子的流行病学分析；HBsAg携带者母亲及新生儿的细胞遗传学研究；缺糖损伤的PC12细胞中grp75基因的表达；血管紧张素系统基因多态性与支架内再狭窄的相关性研究；早老素-1基因启动子区-48C／T位点多态性与LOAD的遗传相关性；转化生长因子β1及其受体1在妊娠肝内胆汁淤积症患者胎盘绒毛组织中的表达及其意义。