基于谐波磁化响应半峰宽模型的非零场点磁性纳米粒子距离层析测量

磁粒子成像技术是一种以生物功能化超顺磁性纳米粒子为示踪剂的全新人体功能层析成像技术,其通常必须构建基于梯度场的零磁场点/线并对其进行空间扫描以实现示踪剂定位,其空间分辨率正比于梯度场强度。而高强度梯度场需大体积电/永磁体构建,使其无法用于微创淋巴结术中定位。本研究在不使用梯度定位场条件下,提出基于朗之万函数和激励-磁化场空间分布计算的窄带磁纳米粒子深度定位理论,推导不同深度磁性纳米粒子产生的磁化响应与空间方位角的函数关系,建立半峰宽-距离检测与真实浓度解析模型,并进一步开发了磁粒子深度层析装置(即非梯度式一维磁粒子成像仪),体外实验测量结果表明其空间定位分辨率为15 mm,误差5.21%,浓度模型还原误差为2.61%。对比已获批上市的欧洲Sentimag等静磁场磁粒子定位装置具有显著性能优势,可完全满足术中淋巴结定位等创新临床应用需求。

磁微粒化学发光法与胶体层析法对HIV抗体诊断效能的比较

目的 比较磁微粒化学发光法与胶体层析法对人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)抗体的检出率及诊断效能。方法 选取邵武市立医院输血科2022年1—12月检测HIV抗体的140例患者,对所有患者均采用磁微粒化学发光法与胶体层析法、蛋白印迹法(western blotting test,WB)检测HIV。以WB结果作为“金标准”,比较磁微粒化学发光法与胶体层析法对HIV抗体的检出率及诊断效能。结果 140例检测HIV抗体的患者,经WB结果确证,56例患者检测结果为阳性,84例患者检测为阴性;经磁微粒化学发光法检测,HIV抗体的检出率为94.64%(53/56);经胶体层析法检测,HIV抗体的检出率为78.57%(44/56),磁微粒化学发光法对HIV抗体的检出率高于胶体层析法,差异有统计学意义(P <0.05)。磁微粒化学发光法对HIV抗体的检测结果与WB确证结果具有极好的一致性(Kappa=0.925),胶体层析法对HIV抗体的检测结果与WB确证结果具有理想的一致性(Kappa=0.742)。以WB确证结果为“金标准”,磁微粒化学发光法检测HIV抗体敏感度为94.64%(53/56),准确度为96.43%(135/140),阴性预测值为96.47%(82/85),高于胶体层析法的78.57%(44/56)、87.86%(123/140)、86.81%(79/91),差异有统计学意义(P <0.05)。结论 磁微粒化学发光法对HIV抗体的检出率高于胶体层析法,对HIV抗体的诊断效能中敏感度、准确度、阴性预测值高于胶体层析法,整体诊断效能优于胶体层析法。

PCR-金磁微粒层析法检测MTHFR C677T基因多态性方法的建立及评价

目的建立一种用于检测亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C667T基因型的方法,并对该方法进行评价。方法以MTHFR基因C667T位点为标靶设计引物,采用PCR-金磁微粒层析法结合扩增受阻突变体系PCR技术(ARMS-PCR)进行基因分型,将所建立的方法应用于临床样本检测。结果ARMS-PCR与金磁微粒层析法联合检测MTHFR C677T基因分型,全程耗时约60 min。检测最低限度为10^(3)copies/μL。PCR-金磁微粒层析法能特异性检测MTHFR基因分型,应用于50份人全血样本MTHFR基因分型检测,其结果与测序结果完全符合,符合率为100%(50/50)。结论PCR-金磁微粒层析法检测MTHFR C677T基因多态性方法具有特异性强、敏感性高、准确率高的特点,无需特殊大型设备,具有快速、便捷、准确、经济等优势,适合在各级医疗机构开展。

单分散磁性亚微米粒子固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定牛奶中的双酚A

采用溶剂热还原法制备的单分散性Fe3O4磁性亚微米粒子(Fe3O4-magnetic submicron particles)进行固相萃取(SPE),结合高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)测定了牛奶中的双酚A(BPA)。对溶液的pH、磁性粒子用量、洗脱溶剂和体积等影响因素进行了优化,得到的最优萃取条件为:溶液的pH 6,磁性粒子用量3.5 mg,用0.4 mL甲醇洗脱。以Agilent XDB C18柱为分析柱,流动相为乙腈-0.25 mmol/L氨水(80∶20,v/v)溶液,在负离子模式下进行MS/MS测定。双酚A在1～100μg/L范围内线性关系良好(r=0.999 3);在3个添加水平下,回收率为85.3%～96.1%,相对标准偏差小于10%;通过不断稀释加标浓度确定方法的检出限(信噪比为3)为1.0μg/L。该方法简单、准确,能用于牛奶中双酚A的快速测定。

PCR-金磁微粒层析法在叶酸代谢相关基因检测中的应用研究

目的:对PCR-金磁微粒层析法检测人叶酸代谢相关基因进行方法学评价,并初步应用于临床检测。方法:同时应用PCR-金磁微粒层析法和Sanger测序法两种方法分别检测221例临床样本的5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)C677T、A1298C位点及甲硫氨酸合成酶还原酶(MTRR)A66G位点的基因型,并对两种方法检测的结果进行比较,以评估PCR-金磁微粒层析法的准确性、灵敏度及特异性。结果:两种方法检测同一批样本的结果完全一致,准确性达100%。PCR-金磁微粒层析法的灵敏度高,对MTHFR C677T、A1298C位点的最低检测限分别为2.5、1.25 ng·μl^-1,MTRR A66G位点的最低检测限为1.25 ng·μl^-1;特异性强,扩增试剂的扩增反应呈高度专一性。结论:PCR-金磁微粒层析法检测人叶酸代谢相关基因快速、简便,结果准确,适合应用于各级具有PCR实验室资质的医疗机构。

载药磁纳米微粒在荷瘤小鼠体内的靶向性实验研究

目的 :应用高效液相色谱法考察在外磁场协同下载阿霉素金磁复合微粒于荷瘤小鼠体内靶向分布特性。方法 :建立小鼠肝细胞癌动物模型,并分成空白对照组、单纯磁阿霉素组和磁阿霉素加磁场组。空白对照组经尾缘静脉注射生理盐水,单纯磁阿霉素组和磁阿霉素加磁场组分别注射同等剂量的载阿霉素金磁复合微粒溶液,注射后于磁阿霉素加磁场组肿瘤靶区体表施加磁场固定(5 000 Gs、1 h)。然后移去磁场并立即处死各组小鼠,分别采集血液并完整摘取心、肝、肾和肿瘤组织标本。应用高效液相色谱法测定各组小鼠血液及各组织中阿霉素浓度,评价其在小鼠体内的靶向性。结果:经外置磁场固定作用后,靶区肿瘤组织中阿霉素浓度明显高于其他非靶区组织,而其他非靶区组织中(除心脏外)阿霉素浓度与空白对照组相当。在没有外置磁场作用时,阿霉素则在体内各组织中呈弥散性分布,但肝脏和肿瘤组织中阿霉素浓度较高。结论:磁纳米微粒作为药物载体具有明显的磁控靶向性,能将药物有效富聚于靶区肿瘤组织中。磁靶向药物有望成为最有效的抗肿瘤药物新剂型而用于临床。

DNA分离技术的研究进展

DNA是生物遗传信息的主要携带者,分离和检测DNA是生物学研究的重要组成部分。本文综述了近年来关于DNA的分离方法,如微纳毛细管的流体动力色谱、物理方法富集分离、微纳米磁颗粒分离富集及电泳芯片分离DNA等方法。

PCR-金磁微粒层析法检测MTHFR基因C677T多态性评价

目的探讨PCR-金磁微粒层析法检测MTHFR基因C677T多态性进行方法学评价和性能确认,为个性化叶酸补充剂量提供参考依据。方法从检测下限、准确性、抗干扰能力、稳定性方面进行评价和确认。检测下限:分别选取MTHFR基因C677T野生型(677CC)、杂合突变型(677CT)和纯合突变型(677TT)外周血样本,提取基因组DNA,A260/A280在1. 65～1. 95之间,定量并稀释至2. 5 ng/μl、5 ng/μl、10 ng/μl三个浓度,每种基因型各浓度一式三份,然后进行PCR-金磁微粒层析法检测,统计三种基因型各浓度样本的检出率。准确性:将992例PCR-金磁微粒层析法检测的样本,提取基因组DNA,送第三方检测机构进行Sanger测序验证,比较二者的一致性。抗干扰能力:取三种基因型的外周血样本,分别加入终浓度为10 mg/ml的血红蛋白(Hb)、0. 2 mg/ml的胆红素(BIL)和5 mg/ml三酰甘油(TG),然后与不加任何干扰物质的样本同时进行检测,比较干扰组与正常组的检出情况。稳定性:取三种基因型的样本各1例,每种基因型各一式十份做平行检测,比较各基因型的检出情况。结果 (1)三种基因型在2. 5 ng/μl浓度水平均没有被检出,而在5 ng/μl和10 ng/μl浓度水平一式三份全部被检出,灵敏度为5 ng/μl。(2)992例样本的测序结果与PCR-金磁微粒层析法的检出结果完全一致,准确性100%。(3)三种基因型加干扰物的检出结果与不加干扰物的检出结果完全一致,抗干扰能力强。(4)三种基因型样本各1例平行检测10次的结果高度一致,稳定性高。结论 PCR-金磁微粒层析法可有效用于MTHFR基因C677T多态性检测,该法具有灵敏度高、准确性高、抗干扰能力强、稳定性高等特点,且无需特殊大型设备,具有快速、便捷、准确、经济等优势,适合在各级医疗机构开展。