海南汉族和黎族人群PCSK9基因E670G多态性与急性心肌梗死的相关性

目的研究海南地区黎、汉族人群PCSK9基因E670G多态性与急性心肌梗死的相关性,为不同种族人群心肌梗死的预防、治疗提供科学基础依据。方法选取海南地区急性心肌梗死患者210例(黎族104例,汉族106例)为实验组、健康人群223名(黎族110名,汉族113名)为对照组,测定两组研究对象血清三酰甘油(triacylglycerol,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)浓度,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction linked restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)检测PCSK9基因E670G酶切位点多态性。结果心肌梗死组患者血压、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、TG、TC、LDL-C浓度高于健康对照组,HDL-C浓度低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。心肌梗死组患者PCSK9基因AG、GG基因型频率及G等位基因频率高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。黎族、汉族心肌梗死组患者AG、GG基因型频率、G等位基因频率均高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。黎族心肌梗死组患者GG基因型频率、G等位基因频率低于汉族心肌梗死组,差异有统计学意义(P<0.05)。黎族、汉族健康对照组GG基因型频率、G等位基因频率比较,差异无明显统计学意义(P>0.05)。心肌梗死组中GG基因型患者的TG、TC、LDL-C浓度高于AA基因型;AG与AA、GG与AG基因型患者间TG、TC、HDL-C、LDL-C浓度比较,差异无统计学意义(P>0.05),但与AA基因型相比,G等位基因携带者有较高的TG、TC、LDL-C浓度趋势。结论海南地区黎、汉族人群PCSK9基因E670G多态性与急性心肌梗死及血脂浓度密切相关;海南地区黎、汉族人群急性心肌梗死患者PCSK9基因E670G多态性存在差异。

绞股蓝总苷对PCSK9基因表达及辛伐他汀降血脂作用的影响

目的:探讨绞股蓝总苷(gypenosides,GPs)对大鼠肝脏前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因表达及辛伐他汀的降血脂作用的影响。方法:采用高脂饲料喂饲建立大鼠高脂血症模型。60只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(control组)、高脂模型组(model组)、辛伐他汀组(Simvastatin组)、GPs组和GPs与辛伐他汀联合用药组(combined组)。除正常对照组喂食普通饲料外,其余3组大鼠均喂食高脂饲料。将GPs溶于0.3%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液中,用灌胃方式给药。Control组和model组灌0.3%CMC-Na(1mL/100 g),GPs组灌GPs 160 mg·kg^(-1)·d^(-1),simvastatin组灌辛伐他汀5mg·kg^(-1)·d^(-1),combined组灌两者联合剂量。实验8周后,处死大鼠。取腹腔动脉血,测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);称大鼠体重及肝脏组织湿重,测定肝指数;取肝脏用4%多聚甲醛固定,石蜡包埋,HE染色作常规形态学检测;另取肝脏提取总RNA,real-time PCR测定PCSK9和低密度脂蛋白受体(LDLR)的mRNA表达;提取肝脏总蛋白,Western blot测定PCSK9和LDLR蛋白的表达。结果:成功建立高脂血症大鼠模型。与model组大鼠比较,simvastatin组、GPs组以及combined组TC、TG和LDL-C水平均明显下降(P<0.05),各组HDLC水平有不同程度的上升(P<0.05)。与model组大鼠比较,simvastatin组、GPs组以及combined组肝指数均明显下降(P<0.05)。肝组织病理结果显示,高脂血症性大鼠出现脂肪肝病变;Simvastatin组、GPs组以及combined组大鼠肝细胞脂肪变性程度有不同程度减轻,尤以combined组效果显著。与model组比较,simvastatin组PCSK9和LDLR的mRNA表达均明显升高,GPs组以及combined组PCSK9的mRNA表达明显降低(P<0.05),GPs组LDLR的mRNA表达变化不明显,combined组LDLR的mRNA表达明显升高(P<0.05)。与model组比较,Simvastatin组PCSK9和LDLR的蛋白表达均明显升高;GPs组和combined组的PCSK9蛋白表达明显降低,LDLR蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:GPs能抑制肝脏PCSK9表达,增加LDLR表达量;与辛伐他汀联用可增强其降血脂和减轻肝脏脂肪病变的效果。

东莞汉族人PCSK9基因SNP与冠心病及其预后关系探讨

目的探讨东莞汉族人PCSK9基因E670G位点SNP与冠心病(CAD)及其预后的关系。方法选择在该院CAD患者100例及非CAD患者100例为研究对象,取患者血液,提取DNA并采用PCR法分析PCSK9基因E670G位点SNP,并采用基因测序法验证。采用酶法检测患者血脂水平,并随访CAD患者采用他汀类治疗后血清脂质水平的变化、心血管事件发生率。结果冠心病(CAD)组血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著高于健康对照组,HDL-C显著低于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。基因型主要为AA即298bp和152bp的纯合子,其次为AG即450bp和298bp、152bp的杂合子,尚未检测到450bp GG纯合子基因型,等位基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。CAD组患者AA基因型的患者LDL-C水平显著低于AG基因型,HDL-C水平显著高于AG基因型的患者(P<0.05)。随访半年发生心血管的例数总共为27例,AA基因型占66.7%,AG基因型占33.3%,G等位基因携带者心血管事件例数和平均病变支数差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 PCSK9基因E670G多态性与LDL-C、HDL-C水平及CAD病变程度相关,CAD患者中G等位基因的携带可能增加发病概率和再发病风险。

PCSK9基因单核苷酸多态性与冠心病的关联研究

目的：研究前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/西布曲明9a型（proprotein convertase subtilisin/kexin 9,PCSK9）基因多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary artery disease,CAD）的发病关系及对血脂水平、CAD病变严重程度和预后的影响。方法：对184例正常人和212例CAD患者采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测PCSK9基因多态性,检测CAD患者的病变支数及随防出院后心血管事件。结果：CAD组中G等位基因频率高于对照组（P=0.001）,CAD组中GG基因型的总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、低密度脂蛋白-胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C）含量比AA基因型增高（P值分别为0.023、0.000、0.036）,在CAD组中G等位基因携带者与AA基因型患者相比,出院后2年心血管事件增加（P=0.004,OR=2.013,95%CI：1.225~3.018）。结论：中国汉族人群基因多态性PCSK9基因E670G多态性可能与CAD发病相关;E670G基因多态性可能与CAD预后相关;PCSK9基因E670G多态性与冠脉狭窄程度无关。

东莞汉族人PCSK9基因SNP与冠心病及其预后关系研究

取所有纳入研究者的外周静脉血,离心,取血细胞500μL、血清1000μL,-80℃低温保存。检测两组血脂水平相关指标。观察组和对照组在TC、LDL-C、HDL-C水平方面,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者AA同AG基因型之间TG、TC差异无统计学意义(P>0.05),LDL-C、HDL-C水平方面,差异具有统计学意义(P<0.05)。东莞汉族人PCSK9基因SNP与冠心病及其预后有相关性,临床可通过其血脂水平变化进行病症预测和疗效评价。

应用ALM-ASA法检测PCSK9基因F216L、D374Y多态性

目的:研究PCSK9基因F216L、D374Y、N425S位点多态性与冠心病的相关性。方法:采集2009-2011年冠心病(CAD)患者血液标本288例,健康人血液标本300例;分别提取基因组DNA,应用基于适配器连接介导的等位基因特异性扩增法(ALM-ASA),检测PCSK9基因F216L、D374Y和N425S位点的多态性,并用基因测序法验证结果。血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平采用酶法测定。结果:广东地区CAD患者和健康人群基因中尚未发现N425S多态性位点;F216L、D374Y位点等位基因频率、基因型频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。CAD患者组和对照组之间TC、LDL-C、HDL-C水平差异具有统计学意义(P<0.05)。CAD患者组中,FF与FL基因型、DD与DY基因型之间,TC、TG、LDL-C、HDL-C水平的差异无统计学意义(P>0.05)。FF与FL基因型、DD与DY基因型之间的冠脉病变支数差异无统计学意义(P>0.05)。结论:广东地区人群的基因尚未发现N425S多态性位点,尚未发现PCSK9基因F216L、D374Y多态性与TC、TG、LDL-C、HDL-C水平及冠心病存在相关性。

PCSK9基因rs662145位点多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病血脂的关系

目的探讨PCSK9基因rs662145位点多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease,CHD)的关系,并观察他汀在PCSK基因rs662145位点不同基因型中调脂效果的差异。方法选取行CAG检查的福建汉族患者261例,根据CAG结果分为CHD组和对照组,收集患者的基本资料并留取空腹血标本,测定TG、TC、LDL-C等血脂指标,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测PCSK9基因rs662145位点多态性,并在完成随访的57例患者复测相应血脂指标。结果 CHD组rs662145位点C等位基因频率为20.59%,高于对照组的10.53%(χ~2=6.011,P=0.019);CC、CT、TT基因型频率在两组间分布差异也有统计学意义(χ~2=9.418,P=0.007);含C等位基因CHD组患者TC及LDL-C水平更高(CC>CT>TT,P<0.05),但HDL-C较低(CC<CT<TT,P<0.05)。CHD组患者血浆TC、HDL-C、LDL-C、ApoA水平在CC、CT、TT基因型亚组间的差异有统计学意义(P<0.05),对照组血脂水平在各基因型亚组间的差异无统计学意义(P>0.05)。CHD患者经过他汀治疗后,血浆TG、TC及LDL-C水平均较前降低,HDL-C水平较前升高(P<0.05),但CC、CT、TT各基因型患者经他汀治疗前后血脂变化值差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PCSK9基因rs662145位点多态性与福建汉族冠心病人群血脂异常有关,rs662145位点C等位基因可能是冠心病高风险突变位点。

PCSK9基因E670G位点多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病罹病风险及脂代谢的相关性研究

目的探讨PCSK9基因E670G位点多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary heart disease，CHD，简称冠心病）罹病风险的相关性，并观察阿托伐他汀钙对PCSK9基因E670G位点不同基因型患者的调脂疗效。方法选取778例行冠脉造影检查的患者，包括确诊为CHD的患者组502例和对照组276例，留取空腹血标本，分离血清、血浆，测定各种血脂指标，采用聚合酶链-限制性片段长度多态性法分析PCSK9E670G基因多态性，再次测定随访12周的231例CHD组患者的血脂水平。结果PCSK9基因E670G基因型分布在CHD和对照组中差异有统计学意义（P〈0．01），等位基因G在CHD组和对照组的分布频率分别为15．99％和9．34％，差异有统计学意义（P〈0．01），等位基因G可能增加CHD的罹病风险（OR=1．847，95％CI：1．301～2．622）。携带G等位基因的CHD患者有较高的血总胆固醇和三酰甘油水平，GG基因型患者的低密度脂蛋白胆固醇水平高于AA基因型患者，差异有统计学意义（P〈0．05）。高密度脂蛋白胆固醇是CHD的保护性因素（0R=0．203，95％CI：0．100=0．414，P〈0．05）。与AG及GG基因型患者相比，AA基因型患者对阿托伐他汀钙的降脂疗效更为敏感，低密度脂蛋白胆固醇水平明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论PCSK9基因E670G位点多态性可能与冠心病罹病风险及脂代谢水平有关。

广东汉族人PCSK9基因E670G位点多态性与冠心病相关性研究

目的通过对中国广东地区冠心病(CAD)患者和健康个体前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/西布曲明9a型(PCSK9)基因E670G位点单核苷酸多态性(SNP)的研究,分析其在CAD患者和健康人中的分布,以及与冠心病和血脂代谢的相关性。结论采集经冠脉造影确诊的CAD患者血液标本165例,健康人血液标本180例,分别提取基因组DNA模板,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法分析PCSK9基因E670G位点SNP,并用基因测序法验证结果。血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度水平采用酶法测定。结果中国广东地区CAD患者和健康人群在该位点的等位基因频率、基因型频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。CAD患者组和对照组之间TC、LDL-C、HDL-C水平差异具有统计学意义(P<0.05),TG水平差异无统计学意义(P>0.05)。CAD患者组中AA和AG基因型之间LDL-C、HDL-C的差异具有统计学意义(P<0.05),TC、TG的差异没有统计学意义(P>0.05);与非670G携带者比较,670G携带者血LDL-C水平增高,血HDL-C水平降低。AG基因型的冠脉病变支数明显高于AA基因型,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 PCSK9基因E670G多态性与血LDL-C、HDL-C水平,以及冠心病病变严重程度相关联。

苏皖地区PCSK9基因E670G位点多态性与急性心梗相关性研究

目的研究苏皖地区PCSK9基因位点E670G位点多态性与急性心肌梗死的相关性。方法采集2012-2014年心肌梗死病患血液标本160例,健康人血液标本182例;分别提取基因组DNA,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测苏皖地区急性心肌梗死患者PCSK9基因E670G的分布情况,并分析该位点与急性心肌梗死的关系。结果本研究患者中尚未发现E670G多态性位点;位点等位基因频率基因型频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论苏皖地区汉族AMI患者和健康人群在该位点的基因型频率和等位基因分布差异不明显,尚未发现PCSK9基因E670G多态性与AMI之间存在相关性。

高胆固醇血症患者PCSK9基因突变分析

目的探讨高胆固醇血症与枯草溶菌素转化酶9(PCSK9)基因的相关性,为高胆固醇血症的早期防治提供遗传学依据。方法在300例高胆固醇血症患者中选取LDLR基因与Apo B100基因第26号外显子未发生突变的高胆固醇血症患者100例,同时选取健康对照者50例作为研究对象,采集所有研究对象外周血并抽提各研究对象全血基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)对PCSK9基因全部12个外显子进行扩增、测序,将测序结果在BLAST比对分析。结果 50例健康对照者未发现PCSK9基因的突变;100例高胆固醇血症患者中,共发现7个突变位点,其中3个同义突变(L112L、V460V、C626C),3个错义突变(p.R93C、p.V474L、p.G670E),1个框移突变(416-417ins CTG),其中p.R93C及416-417ins CTG未见文献报道。结论本研究通过对PCSK9基因突变位点的筛查,了解高胆固醇血症患者PCSK9基因的突变情况,为高胆固醇血症的早期预防、诊断及治疗提供理论依据。

PCSK9基因表达在食管胸中段鳞癌中转移与预后的关系

对食管胸中段鳞癌进行研究,进一步分析PCK9基因在这一病症中的表达同时对患者术后的病理以及日后指标数据进行研究。方法:对于本院2015年至2017年收治的食管胸中段鳞癌的患者资料进行研究,从中选取出进行手术切除的96例患者的患者资料进行回顾性的研究和分析。然后使用免疫组织化学染色方法,对肿瘤组织中,PCSK9基因的表达进行相关性的研究并且进一步调查其差异性。之后使用Cox比例风险模型进行多因素的分析和判断。结果:在这96例资料当中其中有41.28%的患者,有PCSK9基因的阳性表达。结论:食管胸中段鳞癌患者的 PCSK9基因表达的提升受肿瘤分化程度的影响,并且通过对患者近几年的资料比对可以发现 PCSK9基因表达为阴性的患者,其生存率要明显的高于PCSK9基因表达为阳性的患者。所以为了进一步判断食管胸中段鳞状细胞癌手术愈后的效果,就可以使用PCSK9基因表达的方式进行研究。

PCSK9/NARC-1:动脉粥样硬化干预的新靶点?

PCSK9是一个新发现不久的与脂质代谢调节密切相关的基因。目前对其分子结构、分布、基因突变及表达调节和通过调节肝脏低密度脂蛋白受体的降解等功能特性有了一定的了解。但是由于对PCSK9作用底物目前缺乏系统的研究,使得对其功能研究受到了局限。但是有一点可以肯定的是,针对PCSK9的药物研发已经且必将是动脉粥样硬化防治领域的一个新突破。

聚焦2014年高脂血症药物研究进展

介绍2014年高脂血症治疗领域在临床开发方面的三大主要进展:一是靶向PCSK9的新型单克隆抗体抑制剂可清除血液中的"坏的"低密度脂蛋白胆固醇,且临床试验表明其疗效良好;二是他汀类药物的安全性和有效性经重新评估后,可与其他药物联合广泛应用于临床;三是一些主要的药品监管和学术机构均发布了有关高脂血症的最新临床诊疗指南。