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人PD-1基因克隆及其在L929基因转染细胞上的表达 被引量:2
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作者 明志君 肖淑宁 +2 位作者 陈永井 施勤 张学光 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期561-563,共3页
目的克隆人PD-1基因,构建含有该目的基因的重组逆转录病毒载体,并转染入L929细胞,获得稳定高表达PD-1分子的L929细胞。方法用PCR法从pGEX-5X-3-PD-1扩增出PD-1基因,通过双酶切(PstI BamHI)装入逆转录病毒载体pGEZ Term中,脂质体法共转... 目的克隆人PD-1基因,构建含有该目的基因的重组逆转录病毒载体,并转染入L929细胞,获得稳定高表达PD-1分子的L929细胞。方法用PCR法从pGEX-5X-3-PD-1扩增出PD-1基因,通过双酶切(PstI BamHI)装入逆转录病毒载体pGEZ Term中,脂质体法共转染包装细胞293T,用含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清感染L929细胞,72 h后,加入Zeocin进行筛选,挑选出能稳定表达PD-1分子的L929细胞株。结果成功克隆了人PD-1基因,构建了含PD-1基因的重组逆转录病毒载体,包装出具有感染能力的重组PD-1逆转录病毒,筛选出具有稳定表达人PD-1分子的L929基因转染细胞。经流式细胞仪检测:PD-1分子在L929基因转染细胞中具有高表达,达到97.6%。结论构建了含人PD-1基因重组逆转录病毒的载体,筛选出稳定表达人PD-1分子的L929细胞株。 展开更多
关键词 pd-1基因 逆转录病毒
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C57BL/6小鼠PD-1基因敲除后心房肌细胞氧化应激水平和心房结构重构研究 被引量:2
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作者 付国强 曹义战 +2 位作者 何乾锋 田小溪 王伯良 《河北医药》 CAS 2014年第15期2256-2258,共3页
目的 PD-1基因敲除后会激活T细胞并提高机体炎症水平并可能影响机体氧化应激水平,本研究旨在观察C57BL/6小鼠在PD-1基因敲除后心房细胞氧化应激水平变化及其对小鼠心房结构重构的影响。方法我们同时对两组动物进行了观察:C57BL/6小鼠和C... 目的 PD-1基因敲除后会激活T细胞并提高机体炎症水平并可能影响机体氧化应激水平,本研究旨在观察C57BL/6小鼠在PD-1基因敲除后心房细胞氧化应激水平变化及其对小鼠心房结构重构的影响。方法我们同时对两组动物进行了观察:C57BL/6小鼠和C57BL/6-PD-1-/-小鼠。对比观察两组心房肌细胞氧化应激水平和心房肌心肌纤维化水平。结果和对照组相比较,C57BL/6-PD-1-/-小鼠心房肌细胞细胞内活性氧水平明显升高,同时心房肌Masson染色显示基因敲除后心房肌出现了纤维化,而对照组没有出现。结论 PD-1基因敲除后出现心房肌细胞活性氧水平的升高并导致了C57BL/6小鼠的心房结构重构。 展开更多
关键词 pd-1基因敲除 活性氧 心房结构重构 心房颤动
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N-3不饱和脂肪酸对C57BL/6 PD-1基因敲除小鼠心房结构重构的影响 被引量:2
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作者 付国强 曹义战 +2 位作者 何乾锋 田小溪 王伯良 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第1期1-5,共5页
目的观察N-3不饱和脂肪酸饲养对C57BL/6-PD-1^(-/-)小鼠心房细胞氧化应激水平变化及心房结构重构的影响。方法流式细胞仪检测心房肌细胞活性氧,比较C57BL/6小鼠、C57BL/6-PD-1^(-/-)小鼠和、N-3不饱和脂肪酸饲养的C57BL/6-PD-1^(-/-)小... 目的观察N-3不饱和脂肪酸饲养对C57BL/6-PD-1^(-/-)小鼠心房细胞氧化应激水平变化及心房结构重构的影响。方法流式细胞仪检测心房肌细胞活性氧,比较C57BL/6小鼠、C57BL/6-PD-1^(-/-)小鼠和、N-3不饱和脂肪酸饲养的C57BL/6-PD-1^(-/-)小鼠(每组10只,雄性,6-8周龄)的心房肌细胞氧化应激水平,Masson染色检测心房肌纤维化水平,电子天平称重检测心脏/体质量比值变化。结果与C57BL/6小鼠比较,C57BL/6-PD-1^(-/-)小鼠心房肌细胞细胞内活性氧水平明显升高(P<0.05),心房肌Masson染色显示基因敲除后心房肌出现了明显纤维化、心脏/体质量比值明显升高(P<0.001),N-3不饱和脂肪酸饲养后的C57BL/6-PD-1^(-/-)小鼠心房肌细胞内活性氧水平(P<0.05)及心房肌纤维化、心脏/体质量比值(P<0.01)升高趋势得到明显遏制。结论 PD-1基因敲除C57BL/6小鼠的心房肌细胞活性氧水平升高,同时出现了的心房结构重构,N-3不饱和脂肪酸饲养能够遏制这种变化趋势。 展开更多
关键词 pd-1基因敲除 N-3不饱和脂肪酸 活性氧 心房结构重构 心房纤颤
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PD-1基因遗传变异与上皮性卵巢癌发病风险的关联 被引量:2
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作者 李琰 张会兰 +2 位作者 康山 周荣秒 王娜 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第11期1541-1545,共5页
目的探讨细胞程序性死亡受体-1(PD-1)基因遗传变异与上皮性卵巢癌发病风险的关系。方法用聚合酶连接酶检测反应技术(PCR-LDR)检测分析620例上皮性卵巢癌患者和620名对照妇女PD-1.1 A/G和PD-1.5 C/T两个单核苷酸多态位点的基因型和等位... 目的探讨细胞程序性死亡受体-1(PD-1)基因遗传变异与上皮性卵巢癌发病风险的关系。方法用聚合酶连接酶检测反应技术(PCR-LDR)检测分析620例上皮性卵巢癌患者和620名对照妇女PD-1.1 A/G和PD-1.5 C/T两个单核苷酸多态位点的基因型和等位基因频率。结果 PD-1.1 A/G多态的AA、AG、GG 3种基因型频率在病例组和对照组中具有显著差异(P<0.05)。比较AA基因型携带者,AG和GG基因型携带者显著降低上皮性卵巢癌的发病风险(OR=0.71,95%CI=0.54~0.94和OR=0.68,95%CI=0.50~0.94)。病例组中G等位基因频率明显低于对照组(P<0.05)。与A等位基因相比,G等位基因显著降低妇女上皮性卵巢癌的发病风险(OR=0.83,95%CI=0.71~0.97)。PD-1.5 C/T多态C和T等位基因频率在2组间具有统计学意义,病例组中T等位基因频率明显低于对照组(P<0.05)。与C等位基因相比,T等位基因显著降低妇女上皮性卵巢癌的发病风险(OR=0.82,95%CI=0.69~0.98)。结论 PD-1.1 A/G和PD-1.5 C/T两个单核苷酸多态位点可能是中国北方妇女上皮性卵巢癌发病风险的分子标志物。 展开更多
关键词 pd-1基因 遗传变异 上皮性卵巢癌 发病风险
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PD-1基因单核苷酸多态性与肝细胞癌血液学分子标志物的关联性研究
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作者 陆小华 袁洪新 《智慧健康》 2023年第15期97-101,共5页
目的 探讨程序性死亡受体1(programmed death receptor 1,PD-1)基因单核苷酸多态性与肝细胞癌血液学分子标志物的关联性研究。方法 选择2021年1-12月南通大学附属医院介入放射科收治的165例新发肝癌患者作为入组对象,提取基因组DNA,采用... 目的 探讨程序性死亡受体1(programmed death receptor 1,PD-1)基因单核苷酸多态性与肝细胞癌血液学分子标志物的关联性研究。方法 选择2021年1-12月南通大学附属医院介入放射科收治的165例新发肝癌患者作为入组对象,提取基因组DNA,采用Panel高通量数据分析进行PD-1基因分型,分析各基因型与肝癌血液学分子标志物的关联性。结果 AFP的不同分组情况,在rs10204525、rs2227982、rs36084323基因分型情况,各位点突变基因型在AFP不同分组上差异无统计学意义(P>0.05);PIVKA-Ⅱ不同分组上,对于rs2227982分组,野生型CC、杂合突变型CT、纯合突变型TT、突变型CT+TT在PIVKA-Ⅱ(-)与PIVKA-Ⅱ(+)比较,差异无统计学意义(P> 0.05),而对rs2227982分组,其中杂合突变型AG(34例vs19例)、纯合突变型AA在PIVKA-Ⅱ(-)与PIVKA-Ⅱ(+)(30例vs15例)比较差异有统计学意义(χ^(2)=3.125,7.158P<0.05);rs10204525、rs36084323分组,CT、TT、CT+TT与PIVKA-Ⅱ指标无明显关联(P>0.05)。结论 PD-1基因rs36084323位点单核苷酸多态性与异常凝血酶原指标之间存在一定关联。 展开更多
关键词 pd-1基因 单核苷酸多态性 肝细胞癌 血液分子标志物 相关性
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C57BL/6小鼠PD-1基因敲除后炎症与心房电重构的关系研究
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作者 付国强 曹义战 +2 位作者 仲月霞 何乾锋 王伯良 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第22期4249-4251,共3页
目的:研究C57BL/6小鼠在PD-1基因敲除后体内炎症升高对房颤发病易感性的影响。方法:对两组动物进行了观察:C57BL/6小鼠和C57BL/6-PD-1基因敲除小鼠(各组均为15只,雄性,6-8周龄)。应用流式细胞仪微球芯片捕获技术对比了实验组与对照组的... 目的:研究C57BL/6小鼠在PD-1基因敲除后体内炎症升高对房颤发病易感性的影响。方法:对两组动物进行了观察:C57BL/6小鼠和C57BL/6-PD-1基因敲除小鼠(各组均为15只,雄性,6-8周龄)。应用流式细胞仪微球芯片捕获技术对比了实验组与对照组的血清炎性细胞因子表达水平,应用多导电生理记录仪检测了实验组与对照组心房有效不应期和有效不应期离散度。结果:和对照组相比较,C57BL/6-PD-1-/-小鼠血清炎性细胞因子水平明显升高,C57BL/6-PD-1-/-小鼠心房肌有效不应期较对照组减低,而有效不应期离散度则明显升高。结论:PD-1基因敲除后出现的机体内炎性细胞因子水平的升高导致了C57BL/6小鼠的心房电重构,并由此使得C57BL/6-PD-1-/-小鼠心房纤颤发病易感性升高。 展开更多
关键词 pd-1基因敲除 炎性细胞因子 心房电重构 心房纤颤
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N-3多不饱和脂肪酸的抗炎效应对C57BL/6-PD-1^(-/-)基因敲除小鼠心房电重构的影响
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作者 付国强 曹义战 +2 位作者 仲月霞 田小溪 王伯良 《国际心血管病杂志》 2016年第4期235-238,共4页
目的:观察N-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)饲养对C57BL/6-PD-1^(-/-)小鼠体内炎症和心房电重构的影响。方法:观察和比较C57BL/6、PD-1^(-/-)和PUFAs组小鼠的血清炎性细胞因子表达水平和心房有效不应期。结果:与C57BL/6组小鼠相比,PD-1^(-/-)... 目的:观察N-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)饲养对C57BL/6-PD-1^(-/-)小鼠体内炎症和心房电重构的影响。方法:观察和比较C57BL/6、PD-1^(-/-)和PUFAs组小鼠的血清炎性细胞因子表达水平和心房有效不应期。结果:与C57BL/6组小鼠相比,PD-1^(-/-)组小鼠血清白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子(TNF)和γ干扰素(IFN-γ)水平明显升高,同时PD-1^(-/-)小鼠右心耳、右房低侧壁、右房高侧壁、右房游离壁心房肌有效不应期明显缩短;PUFAs组小鼠血清炎性细胞因子水平较C57BL/6小鼠组大部分仍升高,但升高趋势较PD-1^(-/-)组得到一定程度的遏制,PUFAs组心房有效不应期和C57BL/6组相比无统计学差异。与PD-1^(-/-)组相比,PUFAs组血清炎性细胞因子水平均明显降低,心房有效不应期明显延长。结论:PD-1基因敲除后C57BL/6小鼠体内炎性细胞因子水平明显升高,并出现心房有效不应期缩短,N-3多不饱和脂肪酸饲养能够遏制这种变化趋势。 展开更多
关键词 pd-1基因敲除 炎性细胞因子 心房电重构 心房颤动 N-3多不饱和脂肪酸
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Eur Urol:PARP1用于预测携带PBRM1基因突变的透明细胞型肾癌患者对PD-1抑制剂免疫治疗效果的价值研究 被引量:1
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作者 朱国栋 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2022年第4期350-351,共2页
免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibi⁃tors,ICIs)已成为包括透明细胞型肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)在内的多种不同肿瘤的新型治疗策略。但是,这类药物仅对病理类型为ccRCC的肾癌患者有效,而且有时很难对疗... 免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibi⁃tors,ICIs)已成为包括透明细胞型肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)在内的多种不同肿瘤的新型治疗策略。但是,这类药物仅对病理类型为ccRCC的肾癌患者有效,而且有时很难对疗效进行预测。为解决这一问题,有必要对预测ICIs疗效的生物学标志物进行筛选及评估。另外,前期研究发现聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)与DNA损伤的发生有关,已成为多种癌症重要治疗靶点。 展开更多
关键词 透明细胞型肾癌 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶 PBRM1基因突变 pd-1抑制剂 免疫治疗
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The expression of PD-1 and level of CXCL10 in patients with systemic lupus erythematosus 被引量:4
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作者 YING NAN LI FENG SHAN ZHANG LU LU LI HUI MIN YU YING KUN NIE 《Journal of Microbiology and Immunology》 2005年第3期182-186,共5页
The aim of this study was to investigate the expression of PD-1 on peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and the serum level of CXCL10 and those of roles in the pathogenesis in SLE patients. The expression of PD-... The aim of this study was to investigate the expression of PD-1 on peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) and the serum level of CXCL10 and those of roles in the pathogenesis in SLE patients. The expression of PD-1 on PBMCs was tested by flow cytometry and the serum level of CXCL10 was determined by ELISA in 47 SLE patients and 21 healthy controls. The correlation between PD-1, CXCL10 and ANA, anti-dsDNA antibody and SLEDAI (SLE disease activity index) were evaluated. The expression of PD-1 on PBMCs in SLE patients was significantly different from that of controls. The percentage of PD-1 on neutrophiles in SLE patients was decreased compared with that of healthy controls (P<0.01), and that on lymphocyte from inactive SLE was significantly lower than that of controls (P<0.02). However, the PD-1 expression and the level of serum CXCL10 in active SLE were significantly increased (P<0.01) than those of controls. Positive correlations were found between PD-1, CXCL10 and anti-dsDNA antibody, SLEDAI in active SLE. The abnormal expression of PD-1 on PBMCs and serum level of CXCL10 in SLE patients may impair the auto-immunological tolerance, and play an important role in the pathogenesis of SLE. 展开更多
关键词 Lupus erythematosus systemic pd-1 CXCL10
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猪PD-1分子及其配体的实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:2
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作者 彭金美 李登云 +4 位作者 田志军 安同庆 刘恒贵 周艳君 童光志 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期410-414,共5页
根据猪程序性死亡因子PD-1及其配体PD-L1和PD-L2的基因序列,分别设计了特异性引物和TaqMan探针,以10倍系列稀释的重组质粒pMD-PD-1、pMD-PD-L1和pMD-PD-L2为标准品,对实时荧光定量PCR的条件进行优化,以建立定量检测这3个基因的方法。结... 根据猪程序性死亡因子PD-1及其配体PD-L1和PD-L2的基因序列,分别设计了特异性引物和TaqMan探针,以10倍系列稀释的重组质粒pMD-PD-1、pMD-PD-L1和pMD-PD-L2为标准品,对实时荧光定量PCR的条件进行优化,以建立定量检测这3个基因的方法。结果表明,建立的方法在1×10^2-1×10^8copies/μL模板范围内具有良好的线性关系(r^2〉0.99),扩增效率均高于96%,可检测至少100 copies的阳性标准品。利用该方法对猪外周血单核细胞中这3个基因的表达情况进行了检测,结果也表明该方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可应用于临床样品的检测。 展开更多
关键词 实时荧光定量聚合酶链反应 pd-1基因 pd-L1基因 pd-L2基因
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