PD-1抗体调节糖尿病大鼠CD8^(+)T细胞和Treg平衡促进糖尿病足溃疡愈合的疗效研究

目的:探讨PD-1抗体治疗糖尿病大鼠足溃疡的疗效及其作用机制。方法:将30只6~8周龄健康Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只,三组大鼠足部人为造成溃疡创口。采用流式细胞术计数三组大鼠脾脏中CD8^(+)T细胞和调节性T细胞;Image J对创口照片进行分析计算伤口愈合率;HE染色和组织病理学分析溃疡创口处皮肤愈合情况;ELISA测定大鼠足部溃疡创口组织中TNF-α和IL-1β的水平。结果:与对照组相比,模型组大鼠CD8^(+)T细胞计数明显下调,Treg细胞计数明显升高(P<0.05);模型组大鼠足部溃疡创口愈合不佳,没有形成完整的新生表皮组织和肉芽组织,未见胶原沉积;模型组大鼠创口处组织中TNF-α和IL-1β的水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,治疗组大鼠CD8^(+)T细胞计数明显回升,Treg细胞计数明显回落(P<0.05);治疗组大鼠足部溃疡创口愈合良好,有较为完整的新生表皮组织、肉芽组织和一定的胶原沉积;治疗组大鼠创口处组织中TNF-α和IL-1β的水平明显降低(P<0.05)。结论:应用人源化PD-1抗体治疗糖尿病大鼠足溃疡具有明显的疗效。

肾透明细胞癌来源的IL4I1介导PD1^(+)CD8^(+)T淋巴细胞募集的相关研究

目的:探讨肾透明细胞癌(ccRCC)来源的白细胞介素4诱导蛋白1(IL4I1)对表达PD1的CD8^(+)肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)的诱导与募集作用。方法:利用公共数据库分析ccRCC组织中IL4I1的表达与CD8^(+)T淋巴细胞浸润及免疫功能相关分子表达的关系,通过免疫组织化学法进行验证;构建过表达IL4I1蛋白的769P细胞系并验证;荧光定量PCR(qPCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测过表达IL4I1 ccRCC细胞表达趋化因子的变化。结果:高表达IL4I1的ccRCC组织中有更多的CD8^(+)T淋巴细胞浸润(P=6.843×10^(-7)),其浸润水平与IL4I1的表达水平呈正相关(r^(2)=0.5764,P<0.001);且浸润的CD8^(+)T细胞多表达抑制型分子PD1。过表达IL4I1的ccRCC 769P细胞所表达的趋化因子配体(CCL2、CCL4、CCL5、CCL17)在mRNA水平显著下调(t=95.16、116.1、21.28、68.47,均P<0.05)。同时,细胞培养上清中CCL4、CCL5浓度明显升高(t=6.760、6.846,均P<0.05)。结论:ccRCC组织中IL4I1与PD1+CD8^(+)T淋巴细胞浸润密切相关,可能通过调控趋化因子的表达,参与免疫抑制型CD8^(+)T淋巴细胞在肿瘤局部的募集。

恶性黑色素瘤中CD8及Foxp3的表达与PD-1抑制剂治疗疗效的关系

目的探讨CD8及Foxp3在恶性黑色素瘤组织中的表达与PD-1抑制剂治疗的近远期疗效的关系。方法选取江西省肿瘤医院2019年1月至2021年6月经PD-1抑制剂治疗的恶性黑色素瘤患者,通过免疫组化检测CD8及Foxp3在恶性黑色素瘤组织中的表达,分析其与恶性黑色素瘤PD1抑制剂疗效及患者预后的相关性。结果CD8阳性表达患者疾病控制效果及无进展生存期显著好于阴性患者(P<0.05)。Foxp3阳性表达者疾病控制率及无进展生存期明显低于阴性表达者(P<0.05)。CD8的表达和PD-1抑制剂的应用之间为正向关系,而Foxp3的表达则与其之间为负反馈关系,且有统计学差异(P<0.05)。结论CD8及Foxp3在恶性黑色素瘤组织中的表达与PD-1抑制剂的近远期疗效密切相关。

鼻咽癌放化疗治疗患者外周血PD-1及免疫指标水平的变化及其临床意义

目的探讨鼻咽癌放化疗治疗患者外周血程序性死亡受体1(PD-1)及免疫指标水平的变化及其临床意义。方法回顾性选取2020年1月至2023年江苏省肿瘤医院收治的90例鼻咽癌患者,所有患者均经病理确诊并接受放化疗治疗,采集其血液样本之后采用流式细胞术对不同时间段(治疗前、新辅助化疗后、放疗后)外周血淋巴细胞亚群比例、外周血PD-1、CD8^(+)CD28^(+)细胞比例的水平变化予以动态监测并比较。结果鼻咽癌患者新辅助化疗后CD3^(+)、CD4^(+)细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)比值分别为(72.28±8.37)%、(39.27±8.58)%、1.58±0.67,均明显高于治疗前,CD3-CD16^(+)CD56^(+)、CD19^(+)细胞比例分别为(18.27±8.38)%、(7.87±4.08)%,均明显低于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05);新辅助化疗后与治疗前的CD8^(+)细胞比例比较,差异无统计学意义(P>0.05)。鼻咽癌患者新辅助化疗之后CD8^(+)CD28^(+)细胞比例为(10.68±3.87)%,明显高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);新辅助化疗后与治疗前的外周血PD-1水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。放疗后与治疗前的CD3^(+)细胞比例比较,差异无统计学意义(P>0.05);鼻咽癌患者放疗后CD4^(+)细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)比值、CD19^(+)细胞比例分别为(26.68±6.09)%、0.88±0.29、(3.69±2.36)%,均明显低于治疗前,CD8^(+)、CD3-CD16^(+)CD56^(+)细胞比例分别为(31.03±8.08)%、(27.39±10.26)%,均明显高于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。鼻咽癌患者放疗后CD8^(+)CD28^(+)细胞比例为(7.08±2.57)%,明显低于治疗前,外周血PD-1水平为(13.38±6.27)%,明显高于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论新辅助化疗之后鼻咽癌患者外周血T细胞亚群比值处于持续上调趋势,而放疗完成后处于下降趋势,表明鼻咽癌患者于放疗完成后免疫功能受损;放疗完成后鼻咽癌患者T细胞PD-1表达水平明显上调,提示PD-1抑制剂最佳使用时间可能为放化疗完成时,抗PD-1维持治疗可发挥持久、高效的抗肿瘤作用。

系统性红斑狼疮患者外周血CD4^+和CD8^+T细胞PD-1的表达和意义

目的探讨程序性死亡分子1(PD-1)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4^+和CD8^+T细胞上的表达及临床意义。方法应用流式细胞仪检测51例SLE患者和38例健康对照者外周血T细胞亚群表面PD-1表达水平,比较SLE稳定组、活动组和健康对照组以及狼疮肾炎组和无狼疮肾炎组之间CD4^+和CD8^+T细胞表面PD-1表达的百分比,并分析其与临床表现及实验室检查数据的相关性。结果 SLE活动组CD4^+T细胞PD-1表达水平高于健康对照组和不活动组,差异均有统计学意义(P<0.05)。SLE活动组、稳定组CD8^+T细胞PD-1表达水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。狼疮肾炎患者CD4^+PD-1^+和CD8^+PD-1^+T细胞分别高于无狼疮肾炎患者(P<0.01)。SLE患者中抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗核小体抗体阳性组外周血CD4^+和CD8^+T细胞PD-1表达水平均高于对应阴性组。SLE患者CD4^+和CD8^+T细胞PD-1表达百分率与SLE疾病活动度指数(SLEDAI)、尿蛋白定量呈正相关,与补体C3呈负相关。结论 SLE患者外周血CD4^+和CD8^+T细胞PD-1表达异常,与SLEDA1和自身抗体产生有明确的相关性。

HIV-1感染过程中CD8^+T细胞PD-1水平增高与其活化状态正相关

目的分析人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者CD8+T细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)、CD38、人白细胞抗原DR(HLA-DR)及KI-67抗原(ki67)的表达水平,探讨HIV-1感染过程中CD8^+T细胞PD-1表达水平与免疫活化和免疫耗竭的关系及意义。方法收集HIV-1感染者87例,健康志愿者22例,密度梯度法分离外周血单个核细胞;采用流式细胞术分析其CD8+T细胞PD-1、CD38、HLA-DR、ki67的表达水平;观察用抗PD-L1 m Ab阻断PD-1/PD-L1通路后CD8^+T细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的水平变化。结果 HIV-1感染者CD8^+T细胞PD-1表达水平显著高于健康对照组;CD8^+T细胞PD-1水平与病毒载量呈正相关,与CD4^+T细胞数呈负相关;CD8^+T细胞PD-1与CD38、HLA-DR表达呈正相关,与ki67表达无相关性;体外阻断PD-1/PD-L1通路后TNF-α、IFN-γ的表达量增加。结论 HIV-1感染者外周血CD8^+T细胞PD-1表达增加;PD-1过表达与HIV感染过程中CD8^+T细胞功能受抑、免疫耗竭及疾病进程相关;体外阻断PD-1/PD-L1通路可恢复CD8^+T细胞功能。

NOD小鼠人源化后CD4~＋ Tregs和CD8~＋ Tregs频率和功能变化及意义

目的观察NOD小鼠人源化后,CD4^+和CD8^+调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)频率和功能的变化,揭示Tregs在人源化NOD小鼠1型糖尿病中的作用及免疫学机制可能的变化。方法流式细胞术分别分析12周龄未发病的人源化NOD小鼠和NOD小鼠脾淋巴细胞和胰腺淋巴结细胞中CD8^+CD122^+T、CD8^+CD28-T、CD8^+CD25^+Foxp3^+T和CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞的频率,并采用3H-Td R掺入法检测脾CD4^+CD25^+T和CD8^+CD25^+T细胞的免疫抑制功能。结果人源化NOD小鼠和NOD小鼠的脾淋巴细胞和胰腺淋巴结细胞中CD4^+CD25^+Foxp3^+T细胞频率无显著性差异(P>0.05),而人源化NOD小鼠脾淋巴细胞和胰腺淋巴结细胞中CD8^+CD122^+T、CD8^+CD28-T、CD8^+CD25^+Foxp3^+T细胞等CD8^+Tregs亚群的频率较NOD小鼠都显著降低,但NOD小鼠人源化后,CD4^+CD25^+T和CD8^+CD25^+T细胞的免疫抑制功能并没有显著性差异;同时与人源化NOD小鼠相比,NOD小鼠的胰腺淋巴结细胞中CD8^+T细胞频率更低。结论人源化NOD小鼠脾脏和胰腺淋巴结中CD8^+Tregs亚群频率的降低,引起其胰腺淋巴结中CD8^+T细胞频率的升高,导致胰岛β细胞破坏更严重,可能是引起人源化NOD小鼠自发1型糖尿病较NOD小鼠明显提前且加重的因素之一。

慢阻肺小鼠肺组织CD8^(+)T细胞功能耗竭及抑制性受体阻断剂干预研究

目的 初步探讨慢性阻塞性肺疾病小鼠CD8^(+)T细胞功能耗竭状态及抑制性受体抗体干预后变化。方法 将28只小鼠分为正常对照组、COPD对照组、PD-1抗体干预治疗组(COPD+Anti-PD-1组),以烟熏及LPS吸入方式建立COPD模型,PD-1抗体干预治疗组在造模12周后腹腔注射PD-1干预,16周后用小动物肺功能仪检测各组小鼠肺功能,流式细胞仪检测各组小鼠肺组织CD8^(+)T细胞PD-1表达水平及分泌细胞因子功能。留取小鼠部分肺组织行病理检查评估肺气肿程度。结果 COPD对照组CD8^(+)T细胞数量较正常对照组增多(P<0.01),COPD对照组表达PD-1的CD8^(+)T细胞较正常对照组增多(P<0.05),PD-1抗体干预治疗组CD8^(+)T细胞表达TNF-α比例较COPD对照组增多(P<0.01)。PD-1抗体干预治疗组小鼠气道阻力较COPD对照组小鼠下降(P<0.05)。PD-1抗体干预治疗组平均线性截距较COPD对照组下降(P<0.05),PD-1抗体干预治疗组平均肺泡数较COPD对照组增加(P<0.01)。结论 慢性阻塞性肺疾病小鼠肺组织CD8^(+)T细胞较正常对照组表达抑制性受体PD-1,存在功能耗竭,应用PD-1抗体治疗后可部分恢复CD8^(+)T细胞功能及改善肺功能。

急性脑梗死患者外周血CD8^(+)T细胞中PD-1、Tim-3和CTLA-4的表达

目的:探讨急性脑梗死患者外周血CD8^(+)T细胞中PD-1、Tim-3和CTLA-4的表达,并分析其与患者预后的关系。方法:用流式细胞学的方法检测108例急性脑梗死患者以及90例健康对照外周血CD8^(+)T细胞中PD-1、Tim-3和CTLA-4的表达。急性脑梗死患者随访90 d后给予modified Rankin Scale(mRS)评分评价患者预后(0~2分为预后好,3~5分为预后差)。采用logistic回归筛选影响急性脑梗死患者预后的因素。采用ROC曲线评价患者外周血CD8^(+)T细胞中PD-1、Tim-3和CTLA-4阳性率对患者预后的预测价值。结果:急性脑梗死患者CD8^(+)T细胞中PD-1和CTLA-4的阳性率降低(P<0.001)。患者外周血CD8^(+)T细胞中PD-1阳性率在预后好的急性脑梗死患者中表达上调(P<0.001)。Logistic回归结果显示PD-1阳性率是急性脑梗患者预后的影响因素(OR为1.794,95%CI:1.411~2.281)。急性脑梗患者外周血CD8^(+)T细胞中PD-1阳性率预测患者较好预后的ROC曲线下面积为0.888(95%CI:0.825~0.951),截断值是13.65%,此时的敏感度为88.4%,特异度为80.0%。结论:CD8^(+)T细胞中PD-1阳性率可能成为急性脑梗死患者的预后指标。

转录因子TCF-1对HIV-1特异性CD8+T细胞免疫应答的调节作用

目的探究转录因子TCF-1对HIV-1特异性CD8^(+)T细胞免疫应答的调节作用。方法收集HIV-1感染者的外周血,使用HIV-1特异性抗原肽刺激病人PBMC(外周血单个核细胞),应用流式细胞术检测CD8^(+)T细胞的数目、TCF-1和T细胞耗竭相关的标志物的表达水平,定量PCR技术检测外周血的HIV-1病毒滴度。结果本研究发现,HIV-1慢性感染者的HIV-1特异性CD8^(+)T细胞中的TCF-1高表达的细胞亚群具有较好的细胞效应功能、较低的抑制性受体TIM3表达水平,并且TCF-1+CD8^(+)T细胞数目与血清中的HIV-1病毒载量呈负相关关系。结论TCF-1对病毒特异性CD8^(+)T细胞控制HIV-1感染具有重要的作用。

PD-1/PD-L1和CD8^+Tils在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨PD-1/PD-L1表达及PD-L1结合CD8^+肿瘤浸润淋巴细胞(Tils)密度与宫颈鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化染色法检测2008年至2017年山西医科大学第一医院病理科手术切除或活检的131例宫颈鳞癌组织中PD-1/PD-L1表达和CD8^+Tils密度,分析宫颈鳞癌组织中PD-1、PD-L1表达与临床病理特征的关系及PD-L1的表达与CD8^+Tils密度相结合对宫颈鳞癌患者预后的影响。Kaplan-miere法绘制生存曲线,并行Log-rank检验。Cox风险比例回归模型分析影响预后的因素。结果131例宫颈鳞癌患者中PD-L1的阳性率为64.89%,与间质浸润深度、FIGO分期、分化程度、淋巴血管间隙侵犯、淋巴结转移及宫旁浸润有统计学意义(P<0.05);PD-1的阳性率为61.07%;PD-1/PD-L1的表达与CD8^+Tils密度呈显著相关;PD-L1/CD8^+Tils密度组与肿瘤大小、FIGO分期及淋巴血管间隙侵犯有相关性(P<0.05)。PD-L1阴性表达患者较PD-L1阳性表达患者预后好(P<0.05);CD8^+Tils高密度表达患者较CD8^+Tils低密度表达患者预后好(P<0.05);PD-L1-/CD8^+Tils高密度组预后最好,PD-L1^+/CD8^+Tils低密度组预后最差(P<0.05);而PD-1的表达与预后无统计学意义(P>0.05)。Cox多因素分析显示:分化程度、淋巴血管间隙侵犯、淋巴结转移和FIGO分期均为影响宫颈鳞癌患者OS的独立因素。结论宫颈鳞癌组织中PD-1/PD-L1的表达与CD8^+Tils细胞的密度有关。PD-L1结合CD8^+Tils密度可以评估宫颈鳞癌患者的预后,为临床提供新的治疗靶点。

冠心病患者CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14血浆含量与冠状动脉狭窄程度的相关性分析及预测价值

目的借助生物信息学分析和临床样本检测,探究人血浆白细胞分化抗原(CD8)、程序性死亡受体-1(programmed cell death protein-1,PD-1)、细胞程序性死亡配体-1(programmed cell death ligand-1,PD-L1)、转化生长因子-β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))和膜型基质金属蛋白酶-1(membrane type 1 matrix metalloproteinase, MT1-MMP,又名MMP-14)与冠心病发病过程及冠状动脉狭窄程度的相关性,为冠心病的早期筛查及预测提供新的思路。方法通过生物信息学分析,对CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14进行GO和KEGG通路富集分析,并构建各分子间PPI网络图。选取39例冠心病患者作为研究对象,根据Gensini评分系统将其冠状动脉狭窄程度分为轻、中、重3组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14血浆含量,并分析各分子血浆含量与患者Gensini评分的相关性,评估其对冠心病发病的预测价值。结果 GO和KEGG通路富集分析显示CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14可作用于冠心病及其炎症反应通路,PPI网络分析显示各分子间具有一定相互作用关系。PD-L1血浆含量与Gensini评分呈显著正相关。CD8、PD-1、TGF-β_(1)、MMP-14与Gensini评分线性关系不显著,但是从趋势上看PD-1及MMP-14血浆含量与Gensini评分存在正相关趋势,CD8及TGF-β_(1)与Gensini评分存在负相关趋势。结论 CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14可联合作用于冠心病的发生发展过程,各分子血浆含量与冠状动脉狭窄程度存在一定程度相关,可能作为冠状动脉狭窄程度的预测指标。

七氟烷麻醉对乳腺癌患者全血凝血功能的影响及血CD4+CD8+比值、Th1Th2比值、NK细胞及Treg细胞比例研究

目的研究七氟烷麻醉对乳腺癌患者全血凝血功能的影响及血CD4+CD8+比值、Th1Th2比值、NK细胞及Treg细胞比例。方法随机选取乳腺癌患者120例分为2组:七氟烷麻醉组(60例),异氟烷麻醉组(60例),统计分析两组患者的麻醉时间、手术时间、全血凝血功能、血CD4+CD8+比值、Th1Th2比值、NK细胞及Treg细胞比例。结果七氟烷麻醉组患者完成手术后的PT、APTT均显著长于麻醉诱导前(P<0.05),FIB水平显著低于麻醉诱导前(P<0.05);异氟烷麻醉组患者完成手术后的TT、PT、APTT均显著长于麻醉诱导前(P<0.05),FIB水平显著低于麻醉诱导前(P<0.05);完成手术后七氟烷麻醉组患者的TT显著短于异氟烷麻醉组(P<0.05)。两组患者完成手术后的血CD4+CD8+比值、Th1Th2比值、NK细胞比例均显著低于麻醉诱导前(P<0.05),Treg细胞比例均显著高于麻醉诱导前(P<0.05);完成手术后七氟烷麻醉组患者的血CD4+CD8+比值、Th1Th2比值、NK细胞比例均显著高于异氟烷麻醉组(P<0.05),Treg细胞比例显著低于异氟烷麻醉组(P<0.05)。结论七氟烷麻醉较异氟烷麻醉对乳腺癌患者全血凝血功能的影响小,更能有效提升患者的血CD4+CD8+比值、Th1Th2比值、NK细胞比例,降低患者的Treg细胞比例。

CD11b+细胞诱导CD8+T细胞表达PD-1研究

目的探究肿瘤微环境中CD8+T细胞免疫抑制性受体PD-1的表达。方法使用小鼠肺癌细胞系3LL建立荷瘤小鼠模型,流式细胞术检测分析肿瘤微环境中各类免疫细胞的比例以及CD8+PD-1+T细胞比例;使用免疫磁珠细胞分选法MACS分别分选CD11b+细胞以及CD8+T细胞,两种细胞按照1∶1比例共培养,并加入3LL肿瘤细胞培养上清,培养48 h,流式细胞术检测分析CD8+T细胞PD-1表达水平。结果(1)肿瘤微环境中存在大量CD11b+细胞,此外还包含16.4%左右CD3+T细胞,肿瘤实质的重量与肿瘤微环境中T细胞比例呈负相关。(2)荷瘤小鼠淋巴结中CD8+PD-1+T比例升高(P<0.05);肿瘤微环境中CD8+PD-1+T细胞比例显著升高(P<0.01),占CD8+T细胞的40%左右,肿瘤微环境中CD8+T细胞还表达其他免疫抑制分子如TIM-3、LAG-3;(3)相比单独使用肿瘤细胞培养上清,CD11b+细胞加肿瘤细胞培养上清可诱导CD8+T细胞表达PD-1(P<0.05)。结论在肿瘤微环境中,CD11b+细胞可诱导CD8+T细胞表达免疫抑制性受体PD-1。

常乐康对早产小鼠CD8+T细胞CD28和PD-1表达的实验研究

目的:探讨常乐康早期干预对早产小鼠外周血CD8+T细胞表达CD28和PD-1的影响。方法:随机选取孕18 d的孕鼠,用米福RU486诱导早产,获得胎龄<20 d的早产小鼠,随机分为早产实验组(A组)和早产对照组(B组);随机选择部分孕鼠自然分娩,获得足月新生小鼠为足月对照组(C组),每组20只。A组自生后第1天起予以常乐康进行灌胃,B、C组用等量生理盐水灌胃,连续1周。在生后第14天和第21天,取外周血用流式细胞仪检测CD8+T细胞表面CD28和PD-1的百分率及其平均荧光强度(MFI)。结果:①第14天时,A组CD28百分率高于C组(P<0.05),但低于B组(P<0.05);第21天时,C组高于A、B组(P<0.05)。第14天时,A组CD28 MFI高于B、C组(P<0.05);第21天时,A组高于B组(P<0.05),但低于C组(P<0.05)。②第14天时,A组PD-1百分率均高于B、C组(P<0.05);第21天时,B组高于A、C组(P<0.05)。第14天时,A组PD-1 MFI高于B、C组(P<0.05);第21天时,A、C组高于B组(P<0.05)。结论:常乐康的干预能促进早产小鼠免疫系统的发育和成熟,其生物学作用可能是通过对CD8+T细胞表面CD28和PD-1表达的调控。

PD-1阻断和CD27活化可以协同增强CD8^+T细胞抗肿瘤活性

PD-1免疫检查点抑制在肿瘤免疫治疗领域具有革命性的突破,但是有反应的患者比例较低,原因与活化DC细胞较少导致的T细胞不完全激活有关。DC信号可以通过CD27激动剂增强,Clin Cancer Res近期发表了一篇文章,研究联合CD27激动性抗体是否可以增强抗PD-1/L1的疗效。作者在多种肿瘤模型中比较了抗PD-1/L1.

艾滋病CD8^+T细胞表面PD-1表达及与疾病的关系

目的针对艾滋病感染患者其CD8+T细胞表面PD-1表达水平间的联系与患者病症发展的联系加以分析。方法本研究共计纳入5 000例研究对象作为观察样本,由艾滋病患者200例,与健康群体4 800例构成,结合流式细胞术法针对本组病例CD8+T细胞表面PD-1表达水平加以测定。结果对比可知,健康体检者与艾滋病感染者在CD8+T细胞表面PD-1表达水平上差异有统计学意义(P<0.05);且表达水平与患者病症程度表现为正相关。结论艾滋病患者CD8+T细胞表面PD-1将出现异常表达的情况,且表达程度与患者病症发展表现为正相关。

PD-1/PD-L1及Treg细胞在JAK2 V617F阳性骨髓增殖性肿瘤中的表达及意义

【目的】探讨程序性死亡受体-1(PD-1)、程序性死亡配体-1(PD-L1)及CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)、CD4+/CD8+比值在JAK2 V617F突变阳性骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者骨髓中的表达及临床意义。【方法】收集45例JAK2 V617F阳性的MPN患者,其中原发性血小板增多症(ET)17例、真性红细胞增多症(PV)13例、原发性骨髓纤维化(PMF)15例;包括初治组30例、治疗组15例。15例健康志愿者作为对照组。荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测突变型与野生型JAK2比值。免疫组化检测患者及对照骨髓病理切片p-JAK2、PD-1、PD-L1表达情况,流式细胞术检测Treg和淋巴细胞亚群在MPN患者及对照组外周血中的变化。【结果】初治组p-JAK2、PD-1、PD-L1及Treg表达水平明显高于治疗组及对照组(P均<0.05),而CD4+/CD8+比值明显低于治疗组及对照组(P均<0.05)。JAK2 V617F突变量与PD-1及PD-L1正相关,与CD4+/CD8+负相关(r=0.593,P<0.01;r=0.723,P<0.01;r=-0.771,P<0.01)。【结论】p-JAK2、PD-1、PD-L1及Treg、CD4+/CD8+与JAK2 V617F共同参与了骨髓增殖性肿瘤发病。

HBV慢性感染患者外周血CD8^+ T细胞程序性死亡受体-1和黏蛋白结构域-3的表达及意义

目的探讨乙型肝炎病毒慢性感染患者外周血CD8+T细胞程序性死亡受体-1(PD-1)、黏蛋白结构域-3(Tim-3)的表达及意义。方法采用流式细胞术和定量PCR等技术测定42例慢性乙型肝炎(慢性乙型肝炎组)、30例乙型肝炎后肝硬化(肝硬化组)、30例肝癌(肝癌组)患者及30例健康对照(健康对照组)外周血CD8+T细胞表面的PD-1、Tim-3的表达量,并结合乙型肝炎病毒DNA载量、乙型肝炎e抗原和谷丙转氨酶等指标作综合分析。结果 CD8+T细胞PD-1、Tim-3的表达量在各组间表达量差异有统计学意义(P<0.05)。PD-1、Tim-3慢性乙型肝炎组高于其他3组(P<0.05,P<0.01);CD8+T细胞PD-1表达量与谷丙转氨酶含量(r=0.516,P<0.01)、乙型肝炎病毒DNA载量(r=0.582,P<0.01)均呈正相关;CD8+T细胞Tim-3的表达量与乙型肝炎病毒DNA载量也呈正相关(r=0.556,P<0.01);CD8+T细胞PD-1与Tim-3的表达量也呈正相关(r=0.506,P<0.01)。结论乙型肝炎病毒感染患者外周血CD8+T细胞PD-1、Tim-3的高表达与其免疫功能紊乱和慢性化病变发生发展密切相关,为临床抗病毒治疗及疗效观察提供新思路。

哮喘患者外周血CD8^+ CD25^+ Foxp3^+ Treg细胞检测及其临床意义

目的:通过检测哮喘患者外周血CD8^+ CD25^+ Foxp3^+ Treg(CD8^+ Treg)细胞比例,探讨其在哮喘发生发展过程中的作用。方法:选择哮喘患者50例,其中轻中度哮喘25例,重度哮喘25例,并选择与患者年龄、性别匹配的25例健康者作为对照组。流式细胞仪分析CD8^+ Treg细胞比例;RT-PCR检测外周血单个核细胞Foxp3 mRNA的表达;Luminex200检测血清IL-33、IL-1β和转化生长因子β1(TGF-β1)浓度。肺功能测试仪测定第1秒用力呼气容积(FEV1)、呼气峰流速(PEF)。结果:重度哮喘组和轻中度哮喘组CD8^+ Treg比例分别为[2.32(1.24~3.63)%]和[4.13(2.05~5.41)%],两组均低于对照组[6.48(5.21~6.92)%],且重度哮喘组降低更显著(P<0.05)。与对照组相比,重度哮喘组及轻中度哮喘组血清IL-33浓度均明显升高,且重度哮喘组升高更明显(P<0.05);与对照组及轻中度哮喘组相比,重度哮喘组TGF-β1和IL-1β明显升高(P<0.05);哮喘患者CD8^+ Treg细胞比例与FEV1(r=0.411,P=0.003)、PEF(r=0.441,P=0.001)呈正相关。ROC曲线分析显示,CD8^+ Treg诊断哮喘具有较高的特异性和敏感性。结论:哮喘患者外周血CD8^+ Treg细胞比例降低,在疾病发生发展过程中发挥重要作用。