PDGF-BB/PDGFR-β与肿瘤发生发展的研究进展

血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)是一类重要的促血管生成因子,是多种细胞的促有丝分裂剂和趋化因子,血小板衍生生长因子受体(platelet-derived growth factor receptor,PDGFR)是络氨酸蛋白激酶家族成员,能促进细胞的趋化增殖,PDGF和PDGFR在肿瘤发生发展中起着重要作用,以PDGF/PDGFR为靶点作为肿瘤靶向治疗的研究也有了较大的进展。

三七总皂苷调节PDGF-BB/PDGFR-β的表达促进大鼠浅表Ⅱ°烧伤创面愈合

目的观察三七总皂苷(PNS)对大鼠浅表Ⅱ°烧伤创面的治疗作用及对PDGF-BB/PDGFR-β表达的影响,探讨PNS治疗浅表Ⅱ°烧伤的作用机制。方法复制大鼠浅表Ⅱ°烧伤模型,模型复制成功的大鼠用PNS治疗,分别于给药后第0、7、14、21天活体取材,应用免疫组化(IHC),Western blot和RT-PCR检测烧伤皮肤组织中PDGF-BB/PDGFR-β蛋白和mRNA的表达变化。此外,在不同时间点宏观监测皮肤组织恢复情况。结果 HE染色提示,模型复制是成功的。宏观监测数据显示,和模型组相比,PNS高剂量组大鼠脱痂、长毛时间均见缩短,创面愈合率提高(P <0.05)。免疫组化,WB和RT-PCR结果显示,PNS高剂量组的PDGFBB/PDGFR-β的蛋白和mRNA表达在第7天急剧增加,至第14天持续维持在较高水平,第21天接近正常组水平;而模型组表达高峰出现在烧伤后第21天,PDGF-BB/PDGFR-β表达升高是一个缓慢的过程。结论 PNS能明显促进大鼠浅表Ⅱ°烧伤模型皮肤创面的愈合,其机制可能与其上调皮肤组织中的PDGF-BB/PDGFR-β的蛋白和mRNA表达密切相关。

华蟾素胶囊联合CHOP化疗方案对恶性淋巴瘤患者疗效及对TNF-α、PDGF-BB的影响

目的观察华蟾素胶囊联合CHOP(环磷酰胺Cyclophosvnamide,阿霉素Doxorubicin,长春新碱Vincristine,泼尼松Prednisone)化疗方案对恶性淋巴瘤患者疗效及对血清TNF-α、PDGF-BB的影响。方法以入院病例号为编号,根据随机数字表,将96例恶性淋巴瘤患者随机分成两组,每组48例。对照组按照常规治疗方法,给予2周期CHOP化疗方案;观察组患者于化疗前1周开始服用华蟾素胶囊治疗,每次2粒,每天3次。比较临床治疗效果、安全性及血清TNF-α、PDGF-BB的变化。结果观察组和对照组总有效率分别为64.6%(31/48)和50.0%(24/48),前者优于后者(P<0.05);治疗后,2组血清TNF-α、PDGF-BB水平均较治疗前降低(P<0.05);观察组TNF-α、PDGF-BB水平分别为(24.6±5.7)ng/L、(44.5±3.9)ng/L,低于对照组水平(P<0.05);观察组KPS评分和TESS评分分别为(84.6±5.5)分和(4.5±1.9)分,均优于对照组(63.5±3.1)分和(6.2±1.6)分,差异有统计学意义(P<0.05)。结论华蟾素胶囊联合CHOP化疗可有效改善恶性淋巴瘤患者症状,稳定病情,安全性高,可通过调节血清TNF-α、PDGF-BB的水平发挥作用,具有临床价值。

三七皂甙对冠脉支架植入术后Ps、PDGF-BB、bFGF水平的影响

目的:观察三七皂甙对冠脉支架植入术后患者血清中P-选择素(Ps)、BB型血小板源性生长因子(PDGF—BB)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)浓度的影响。方法:44例冠脉支架植入术成功的患者,随机分为西药常规治疗(对照组)22例和西药常规加路路通(三七皂甙)治疗(试验)组22例,对患者术前及术后1d、术后1个月分别采肘静脉血4ml测血清中Ps、PDGF—BB、bFGF浓度水平。结果:试验组术后1个月较术后1dPs、PDGF—BB、bFGF明显改变,具有显著性差异(P<0.05),术后1个月试验组与对照组比较Ps、PDGF—BB、bFGF均具有显著性差异(P<0.05)。结论:三七皂甙可明显降低冠脉支架植入术后患者血清中Ps、PDGF—BB、bFGF浓度水平,减少血小板激活及促血管平滑肌细胞增生的生长因子释放,从而减轻再狭窄的发生。

pN0期非小细胞肺癌组织中PDGF-B和PDGFR-α的表达及与淋巴结微转移的关系

目的:探究pN0期非小细胞肺癌组织中血管源性生长因子B(platelet-derived growth factor B,PDGF-B)和血小板源性生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor-α,PDGFR-α)的表达及与淋巴结微转移的关系。方法:选取河北北方学院附属第一医院2013年1月至2014年12月术后经常规病理检查证实为pN0期的非小细胞肺癌患者106例为研究组,同时选取手术治疗的非肺癌病例48例作为对照组,比较两组PDGF-B和PDGFR-α的表达水平,观察分析不同临床病理参数下及是否伴有微转移患者PDGF-B和PDGFR-α阳性率,并使用此项指标对患者进行微转移诊断,观察其诊断特异度及灵敏度。结果:不同性别、年龄、肿瘤分型、肿瘤直径、组织学分析及是否伴有吸烟史患者PDGF-B和PDGFR-α阳性率无显著差异(P>0.05);对照组PDGF-B和PDGFR-α的表达水平显著低于研究组。研究组II-III期PDGF-B、PDGFR-α阳性率显著高于I期患者,伴有微转移患者PDGF-B和PDGFR-α阳性率显著高于无微转移患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PDGF-B及PDGFR-α的表达对pN0期非小细胞肺癌患者微转移的判定具有重要意义,其过表达可能预示患者伴有微转移,能为术后患者治疗方案的制定提供一定依据。

PDGF-BB和Notch1在卵巢癌中的表达

探讨PDGF-BB及Notch 1在卵巢癌发生发展中的作用及与临床病理特征的关系,采用免疫组化SP法检测PDGF-BB及Notch1在卵巢癌组织中的表达情况。在60例卵巢癌组织中,PDGF-BB阳性染色主要位于细胞浆中。60%(36/60)高表达,40%(24/60)低表达。Notch1阳性染色主要位于细胞膜中,细胞核、细胞浆亦有表达。63%(38/60)高表达,37%(22/60)低表达。在10例正常卵巢组织中,PDGF-BB部分染色显示高表达10%(1/10),其余均为低表达。Notch1部分染色显示高表达20%(2/10),其余均为低表达。说明在卵巢癌组织中,PDGF-BB的阳性表达率明显高于正常卵巢组织,提示PDGF-BB的表达与卵巢癌的发生有明确的关系;同时PDGF-BB表达水平与卵巢癌的分期、病理分级及淋巴结转移相关。Notch1的阳性表达率明显高于正常卵巢组织,提示Notch1的表达与卵巢癌的发生有明确的关系;同时Notch1表达水平与卵巢癌的分期、病理分级及淋巴结转移相关。相关性分析发现卵巢癌中PDGF-BB表达与Notch1的表达呈正相关(P<0.05)。

全反式维甲酸对球囊损伤大鼠胸主动脉内皮后内膜增生及PDGF-BB表达的影响

目的 研究全反式维甲酸 (all transretinoicacid ,ATRA)对球囊损伤大鼠胸主动脉内皮后内膜增生及血小板衍生生长因子B(BDGF BB)表达的影响。方法 球囊剥脱大鼠胸主动脉内皮 ,并随机将大鼠分为手术组、ATRA治疗组及对照组 ,各组大鼠均于术前 4d灌胃 ,分别在术后 2、7、14和 18d处死大鼠并摘除胸主动脉。通过组织学检查和免疫组化技术检测内膜增生情况、PDGF BB的表达及ATRA[30mg/ (kg·d) ]灌胃对它们的影响。结果 (1)对照组及内皮损伤后 2d均无血管内膜增厚 ,7d内膜开始增生 ,2 8d血管平滑肌细胞 (VSMCs)的增殖减弱 ,但细胞外基质增加 ,内膜继续增生 ;(2 )PDGF BB的表达于术后 2d开始升高 ,至 14d达高峰 ;(3)使用ATRA后内膜增生程度及PDGF BB的表达明显降低。结论 ATRA可有效地抑制血管损伤后内膜增生 ,其机制可能是通过抑制PDGF BB表达 。

夏枯草总三萜对PDGF-BB干预的肝星状细胞中TGF-β_1/Smad通路调控作用

目的:观察夏枯草总三萜(TTP)对血小板衍生因子(PDGF-BB)干预的肝星状细胞(HSCT6)中TGF-β1/Smad通路调控以及其抑制HSC增殖的作用。方法:用不同浓度的TTP(10、30、100、300、1 000μg/mL)及PI3K抑制剂(LY294002,10μmol/L)对PDGF-BB刺激的HSC-T6进行处理,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;RT-PCR和Western blot法检测HSC-T6中TGF-β1信号转导通路下游中介分子smad2、smad3、smad7表达。结果:TTP给药组可抑制PDGF诱导的HSC-T6增殖,下调smad2、smad3表达,升高smad7表达。结论:TTP对PDGF-BB刺激的HSC-T6增殖具有较好的抑制作用,其机制可能与阻断TGF-β1/Smad信号通路传导有关。

PDGF-BB引起系膜细胞内游离钙浓度变化的机制探讨

目的 研究血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)引起的肾小球系膜细胞内游离钙浓度变化及其离子流动机制。方法以体外培养的系膜细胞为研究对象,激光共聚焦显微术结合Fura-3染色法动态测定细胞内游离钙浓度。结果 PDGF-BB可浓度依赖性地引起肾小球系膜细胞内游离钙浓度的升高,细胞内钙库释放抑制剂TMB-8、无钙缓冲液和钙通道阻滞剂硝苯地平均可抑制PDGF-BB引起的细胞内钙浓度变化,但其抑制作用发挥的时间和程度均有显著不同。结论 PDGF-BB引起肾小球系膜细胞内游离钙浓度的升高在初期是通过细胞内钙释放与细胞外钙内流共同参与,而在其后的维持升高阶段主要是通过细胞外钙内流,特别是通过电压依赖式钙通道内流引起。

PDGFR-β在大鼠闭合性脑损伤中的表达

目的 观察液压冲击脑损伤后血小板衍生生长因子受体(PDGFR-β)的表达变化。方法 复制大鼠闭合性脑损伤模型,应用免疫组化和图像分析技术观察并分析大鼠脑损伤后不同时间PDGFR-β的表达情况。结果 脑损伤后1h即见PDGFR-β的表达上调,于4d达到高峰,14d时接近但仍高于对照组。结论 液压冲击脑损伤后PDGFR-β表达上调及其变化,与脑损伤后经过时间有关。

PDGF-D/PDGFR-β在胃癌中的表达及与血管形成的关系

为了探讨PDGF-D及其受体PDGFR-β在胃癌组织中的表达及其与血管生成的关系.采用免疫组织化学法检测88例胃癌手术切除标本中癌组织、癌旁组织及正常胃粘膜中PDGF-D/PDGFR-β的表达,采用CD34标记的微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD).分析PDGF-D/PDGFR-β的表达与胃癌临床病例特征及MVD的关系.研究发现胃癌组织中的PDGF-D/PDGFR-β的表达及MVD显著高于癌旁组织及正常胃粘膜(P<0.05).PDGF-D/PDGFR-β的表达及MVD的值与胃癌的TNM分期、浸润深度及局部淋巴结转移有关(P<0.05);MVD还与胃癌的直径有关(P<0.05),PDGF-D/PDGFR-β两者的表达呈正相关性(r=0.647,P<0.05).PDGF-D/PDGFR-β阳性组的MVD平均值高于PDGF-D/PDGFR-β阴性组(P<0.05).结果提示,PDGF-D及其受体PDGFR-β在胃癌组织中呈特异性的高表达,并与胃癌的MVD有关,可能参与胃癌的血管形成,在胃癌的进展过程中起着重要作用.

肺炎支原体感染大鼠肺组织中PDGF-BB变化的免疫组织化学研究

为探讨血小板源性生长因子 - BB(PDGF- BB)在肺炎支原体反复肺感染导致肺间质纤维化的发病机制中的作用 ,作者于 2 4周内给大鼠反复 9次吸入肺炎支原体复制慢性肺感染模型。随后用 PDGF- BB单克隆抗体按 SABC法行免疫组织化学染色和定量图像分析 ,以观察肺组织 PDGF- BB蛋白质水平表达的变化。结果显示 :(1)感染组动物 (n=4)支气管肺泡灌洗液肺炎支原体 - PCR检测均为阳性 ,而对照组 (n=4)和感染加红霉素治疗组动物 (n=4)均为阴性 (P<0 .0 5 ) ;三组动物的支气管和肺组织常规细菌培养结果均为阴性 ;感染组动物透射电镜检查见肺泡间隔增宽 ,其中有较多胶原纤维堆积 ,其余两组则未见明显异常。 (2 )感染组动物肺间质结缔组织内、支气管壁和小血管壁内可见较强的 PDGF- BB阳性染色 ,其积分光密度为 37.90± 10 .14(n=4) ,显著高于对照组者 (7.5 4± 1.98,n=4,P<0 .0 5 )和感染加红霉素治疗组者 (10 .90± 3.30 ,n=4,P<0 .0 5 )。提示肺炎支原体反复肺感染的 PDGF- BB蛋白质水平表达增加 。

重组人IL-10抑制TNF-α和PDGF-BB所致大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的 :观察重组人白介素 1 0 (rhIL - 1 0 )对SD大鼠血管平滑肌细胞及血管损伤后新生内膜增殖的影响。方法 :培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞 ,采用MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态 ,应用流式细胞术测定细胞周期。利用大鼠血管损伤模型 ,观察rhIL - 1 0对新生内膜增殖的影响。结果 :与对照组相比 ,rhIL - 1 0单独应用对血管平滑肌细胞生长没有影响 (P >0 0 5)。rhIL - 1 0可抑制在TNF -α和血小板源性生长因子分别刺激下的血管平滑肌细胞的生长 (P <0 0 5)。流式细胞术测定的结果显示rhIL - 1 0分别可以使TNF -α和PDGF -BB作用下的VSMC大部分处于G0 /G1 期 ,与对照组相比有明显差异 (P <0 0 1 )。大鼠颈动脉损伤后 ,rhIL - 1 0治疗组的动脉血管新生内膜 /中层面积比低于对照组约 45 % (P <0 0 1 )。结论 :抗炎细胞因子rhIL - 1 0可抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖。

50例胃肠道间质瘤患者c-kit及PDGFR-a基因检测及突变分析

目的研究分析胃肠道间质瘤(GIST)中c-kit基因及PDGFRα基因突变特点与规律。方法用PCR扩增和基因测序的方法检测50例胃肠道间质瘤组织中c-kit基因第9、11、13外显子和PDGFRΑ基因第12、18外显子的序列。结果在50例成功检测序列的GIST中共检测到c-kit基因突变32例,PDGFRα基因的突变共检测到2例。结论①大部分的GIST存在c-kit基因的突变,在无c-kit基因突变的GIST中有一部分存在PDGFRα基因的突变。②c-kit基因突变主要集中在第11号外显子。突变的方式频率由高到低依次为点突变、缺失突变和串联重复插入。③胃GIST中c-kit exon11突变率较小肠、结直肠及胃肠道外GIST的突变率高。

螺内酯对实验大鼠肝组织TGFβ1、PDGF-BB及α-SMA表达的影响

目的 探讨螺内酯预防肝纤维化的作用机制。方法 SD大鼠 90只 ,随机分为 3组。正常对照组 (8只 ) :正常饮食 ,皮下注射花生油 ;模型组 (42只 ) :复合因素制成肝纤维化模型 ;螺内酯预防组 (40只 ) :造模方法同模型组 ,螺内酯 10 0mg·kg- 1·d- 1灌胃。分别于第 2周、4周、6周、8周末随机处死 8只大鼠 ,取肝组织用免疫组化法检测各组肝组织内转化生长因子 β1(TGFβ1)、血小板衍生生长因子 (PDGF BB)及α 平滑肌动蛋白 (α SMA)含量。结果 螺内酯预防组TGFβ1、PDGF BB及α SMA在肝组织中的表达均较模型组明显减少 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。 结论 螺内酯可通过降低TGFβ1、PDGF

肺腺癌中PDGF-B、PDGFR-α的表达及意义

目的 探讨血小板衍生生长因子(PDGF)及其受体(PDGFR)与肺腺癌发生、发展的关系。方法 采用免疫组化 LSAB法检测PDGF B、PDGFR α在30例肺腺癌原发灶和12例正常支气管黏膜中的表达。结果 PDGF- B主要在肺腺癌细胞 质和(或)细胞核表达,PDGFR -α主要在肺腺癌细胞质表达,少数在细胞核表达;二者均在肺腺癌细胞过度表达(P<0.05),偶 见间质巨噬细胞淡染;PDGFR- α阳性表达率在肺腺癌高分化组明显高于低分化组(P<0.05)。结论 PDGF B/PDGFR- α自 分泌刺激环在肺腺癌的发生、发展中可能起重要作用,PDGFR- α阳性表达与肺腺癌分化程度呈正相关。

PDGFR-αASODN玻璃体内注射对视网膜的毒性作用

目的:探讨PDGFR-αASODN对视网膜的毒性作用。方法:选择健康成年有色家兔24只,随机分为4组,每组6只;4组兔子3组右眼玻璃体分别注射0.1 m L不同浓度的PDGFR-αASODN/lipofectamine TM 2000溶液,另外1组注射0.1 m L平衡盐溶液作为对照组;4组兔子的左眼不注药。于注药后第1、7、14及28天,对4组兔子的右眼行裂隙灯、间接检眼镜、视网膜电图(ERG)检查;第28天,取4组兔子的眼球,对视网膜组织进行光镜HE、免疫组化及透射电镜的观察。结果:裂隙灯、间接检眼镜检查,各组在各个检查时间点均未发现异常。ERG b波振幅,实验组与对照组比较差异无显著性。注药后第28天,光镜下HE和免疫组化检查,各组视网膜组织均未发现任何病理变化。注药后第28天电镜检查,D组视网膜感光细胞:部分膜盘间隙扩张,部分膜盘融合,少数细胞核周围间隙略增大,其细胞核形态略不规则。结论:玻璃体内注射0.1 m L PDGFR-αASODN/lip2000时,PDGFR-αASODN的浓度≤1.5μmol/L是较为安全的。

PDGF-BB诱导兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究

目的探讨血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)诱导兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的最佳干预时间及浓度,并鉴定其向成骨细胞分化的能力。方法体外分离培养新西兰大白兔BMSCs原代细胞,选用3代细胞用于PDGF-BB干预实验。将筛选好的细胞接种于96孔培养板中,分为空白组:加DMEM完全培养基;对照组:BMSCs+DMEM完全培养基;其余各组采用PDGF-BB干预浓度分别为10、25、50、100 ng/mL。分别于干预的24、72、120、168 h用CCK-8法检测每组浓度对细胞的增殖作用,筛选出PDGF-BB对BMSCs干预的最佳时间及浓度。诱导后的细胞用细胞免疫化学法鉴定骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、Runt相关转录因子2(Runx-2)、Ⅰ型胶原(COL-IA1),免疫荧光鉴定OCN。结果在不同的时间点PDGF-BB干预BMSCs的吸光度值改变不同,差异有统计学意义(F=441.351,P<0.01),表明不同浓度PDGF-BB干预BMSCs后,细胞增殖是不同的。25 ng/mL PDGF-BB组与其他5组比较差异均有统计学意义(P<0.01),干预72 h增殖率最高。诱导后的细胞免疫化学染色OCN骨钙素、Runx-2、COL-1均为阳性,OCN骨钙素的免疫荧光表达也是阳性,且阳性率>90%。结论25 ng/mL PDGF-BB组干预BMSCs在72 h是对细胞增殖作用最强,诱导后的细胞可以分化为成熟的成骨细胞,为下一步诱导后细胞移植治疗牵张成骨模型奠定了基础。

肾癌患者围手术期外周静脉血与肾静脉血中PDGF-BB、VEGF的测定及其意义

目的探讨肾癌患者围手术期外周静脉血与肾静脉血中PDGF-BB、VEGF的水平及其与肾癌临床分期、病理分级的关系。方法收集29例肾癌患者术前24h、术后48、96h外周血及其中19例肾癌患者术中肾静脉血，12例肾结石患者术前24h外周血。采用ELISA方法检测标本PDGF-BB、VEGF的水平。结果（1）肾癌组患者术前24h外周血清VEGF和PDGF-BB水平均高于’肾结石组，差异有显著性（P〈0．05）。（2）肾癌组患者术后48h外周血清VEGF和PDGF-BB水平较术前显著下降（P〈0．01），术后96h较术后48h显著上升（P〈0．05）；肾癌肾静脉血清VEGF和PDGF-BB水平高于外周血清（P〈0.05）。（3）临床分期Ⅲ-Ⅳ期肾癌组患者术前24h外周血清VEGF水平显著高于Ⅰ-Ⅱ期（P〈0．05）；病理分级G3显著高于G1～G2（P〈0．05）。（4）肾癌’肾静脉血清VEGF水平与肿瘤直径呈正相关（r=0．45，P=0．01）。结论正在肿瘤增殖的肾癌组织可能是PDGF—BB、VEGF的主要生成源；VEGF水平可作为一种肿瘤标记物，为肿瘤的诊断、疗效评定、监测复发以及评估预后提供信息。

黄芪鸡血藤汤对实验性肝纤维化大鼠TGF-β_1、CTGF及PDGF-BB表达影响

目的:观察黄芪鸡血藤汤对大鼠肝纤维化的预防作用,并探讨该组方预防肝纤维化的作用机制。方法:选用SD大鼠58只,随机分为5组:正常对照组(10只):正常饮食饮水,皮下注射花生油。模型组(12只):按复合因素造模。中药治疗组:分为大、中、小剂量组(每组12只):在造模的同时每日分别给予中药每100g体重2g、1g、0.5g灌胃。8周末,处死大鼠后处理肝脏标本。肝组织用HE染色,光镜下观察各组大鼠组织学改变,并进行比较。免疫组织化学法观察黄芪鸡血藤汤对各组大鼠肝脏TGF-β1、CTGF、PDGF-BB表达的影响。结果:各组大鼠肝脏标本形态学的比较:8周后,中药组大鼠肝脏色泽、质地及表面光滑程度均明显优于模型组。免疫组织化学结果显示:中药各剂量组TGF-β1、CTGF、PDGF-BB在大鼠肝组织中的表达明显低于模型组(P<0.05)。其中大剂量组最低(P<0.01)。结论:黄芪鸡血藤汤能有效地预防实验性大鼠肝纤维化的形成。