间充质干细胞修复大鼠子宫切口瘢痕缺陷的实验研究

目的探讨间充质干细胞(MSCs)对大鼠子宫切口瘢痕缺陷(PCSD)的修复效果,并为瘢痕妊娠的治疗提供潜在策略。方法实验在广东省医学实验动物中心进行,实验时间为2023年12月至2024年1月。选取雌性特定病原体自由级Sprague-Dawley(SPF级SD)大鼠120只,7~8周龄,体质量为300~350 g,按照随机数字表法分为3组,每组40只。通过连续两次的剖宫产建立大鼠子宫憩室模型并通过B超和组织学验证。对照组接受0.2 ml的局部生理盐水注射和0.5 ml的尾静脉生理盐水注射;实验组-点位注射组局部注射0.2 ml的MSCs凝胶;实验组-尾静脉注射组通过尾静脉注射0.2 ml MSCs凝胶。对3组子宫切口瘢痕的修复效果进行观察,系统记录大鼠的饮食、饮水和精神状态表现。给药结束后第4周处死并解剖大鼠,对其脏器进行观察。进一步取子宫组织样本进行苏木精-伊红(HE)染色,观测子宫肌层和内膜的厚度,并计算子宫内膜缺陷率、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子-β1(TGF-β1)阳性面积百分比。统计学方法采用t检验、方差分析和χ^(2)检验。结果实验组中正常饮食、饮水、精神状态正常的大鼠比例高于对照组[72.5%(58/80)比52.5%(21/40)、76.3%(61/80)比42.5%(17/40)、70.0%(56/80)比47.5%(19/40)],差异均有统计学意义(χ^(2)=4.74、13.35、6.46,均P<0.05)。HE染色结果显示,点位注射组大鼠子宫内膜腺体增生、少量纤维组织增生、炎症细胞浸润,肌层见巨噬细胞、手术缝线。尾静脉注射组大鼠子宫内膜腺体增生、少量纤维组织增生、炎症细胞浸润,肌层见巨噬细胞、手术缝线。尾静脉注射组与点位注射组的基层厚度、内膜厚度、α-SMA阳性面积百分比均高于对照组[(116.32±4.59)μm比(109.21±5.73)μm比(74.23±6.30)μm、(200.34±7.21)μm比(156.98±6.98)μm比(119.55±7.38)μm、(32.99±1.26)%比(25.93±1.33)%比(20.59±1.48)%],TGF-β1阳性面积百分比、子宫内膜缺陷均低于对照组[(14.11±1.01)%比(17.54±1.08)%比(20.09±1.13)%、35.00%(14/40)比62.50%(25/40)比100.00%(40/40)],差异均有统计学意义(F=650.86、1264.19、836.93、311.99,χ^(2)=37.86,均P<0.05)。结论脐带MSCs能促进子宫憩室的修复,具有良好的安全性,有望为子宫切口后瘢痕形成的治疗提供新的策略。

鼠兔属动物的实验动物化研究进展

鼠兔属(Ochotona)动物被认为是一种具有巨大潜力的新型实验动物。从鼠兔分类及分布、国内外人工饲养和繁育、饲养环境、营养需求、繁殖、微生物和寄生虫以及解剖7个方面进行了梳理和归纳,并对鼠兔未来研究的前景进行了展望。

大小鼠帕金森病行为学评价方法概述及常用动物模型特点分析

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是第二大中老年常见的神经退行性疾病,患病周期长、治疗过程复杂,是当今社会的一个巨大挑战。PD动物模型的行为学变化可以直观地反映出实验动物的成模情况与药物干预后的变化情况。因此选择规范的动物模型以及相适宜的行为学检测方法是进行PD机制研究、抗PD药物研发的基础。本文对国内外关于大小鼠的帕金森行为学实验方法进行归纳,对常用帕金森行为学实验的实验设备、实验方法、评价指标、注意事项进行了系统性总结,同时对目前常用的帕金森模型进行了概述,对模型的造模机制、与帕金森临床特征的吻合情况、优缺点进行了分析,以期为研究者根据研究目的选择适宜的帕金森模型与行为学检测方法。

医学研究生动物实验伦理认知考察:以雄性连体鼠受孕为例

动物实验是医学研究与教育中不可或缺的环节,也是培养其科研伦理意识的实践途径。对410名医学研究生的研究结果显示:56.8%的人称不应开展雄性连体鼠受孕实验,58.1%的人称此实验违背了3R原则,76.3%的人称此类研究需要接受伦理委员会的伦理审批。被调查医学研究生的动物实验伦理认知情况尚好。因此建议医学院校和科研院所要加强动物实验伦理教育,提高医学研究生和科研人员的伦理意识和伦理决策能力,健全伦理审查制度,优化医学科技伦理治理环境。

供应商来源的实验大鼠和小鼠微生物监测结果分析:以复旦大学实验动物科学部为例

目的对供应商来源的实验大鼠、小鼠进行常规微生物监测,为实验动物设施科学管理提供重要依据,确保相关实验结果的可靠性。方法以复旦大学实验动物科学部为例,在2021年4月到2023年4月间,按照单纯随机抽样原则,对来自7家供应商的大鼠、小鼠进行微生物质量抽检。具体参照国家标准中SPF级实验动物必须排除的微生物指标及其检测方法进行。结果抽检动物的检测总合格率为80.36%。其中SPF级大鼠抽检合格率为52.63%,SPF级近交系小鼠抽检合格率为82.76%,SPF级远交系小鼠抽检合格率为86.67%,SPF级免疫缺陷小鼠抽检合格率为86.36%。检测不合格的细菌学指标集中在金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、肺炎克雷伯杆菌和啮齿杆菌H型,检出率分别为10.76%、3.16%、2.53%和0.63%。不合格的血清学指标为仙台病毒,发生率为2.53%。此外,除国家标准规定SPF级小鼠必须排除的微生物指标外,还在近交系小鼠中检测到阿米巴原虫和肠杆菌属菌株;在免疫缺陷小鼠中检测到产酸性克雷伯杆菌,检出率分别为1.15%、2.30%和4.55%。结论供应商来源的大小鼠动物中存在一定的病原体感染发生率,相关动物设施有必要强化实验动物微生物监测,确保接收和饲养动物的质量,这对提高实验结果准确性和保护实验动物从业人员的职业健康具有重要意义。

柔肝灵颗粒对肝纤维化大鼠血清MMP-2及PDGF-BB影响的实验研究

目的:研究柔肝灵颗粒对四氯化碳(CC14)肝纤维化大鼠模型血清MMP-2和PDGF-BB含量的变化。方法:用40%四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型,应用不同剂量柔肝灵颗粒进行干预,用大黄虫丸作为对照组。通过酶联免疫法检测血清中MMP-2和PDGF-BB的含量变化。结果:柔肝灵颗粒大剂量和中剂量组在降低肝纤维化大鼠血清指标MMP-2及PDGF-BB胶原含量方面,其效果优于大黄虫丸组(P<0.05)。结论:四氯化碳(CCL4)所致肝纤维化大鼠模型血清MMP-2及PDGF-BB含量显著增高,柔肝灵颗粒能减轻其含量。

新开发实验动物——高原鼠兔

实验动物科学是生命科学的基础和条件。随着医学科学和其它生命科学的飞速发展,对实验动物品种的需求也越来越多。发达国家非常重视实验动物新品种的开发。我国有丰富的动物资源,现有各种兽类427种,约占世界兽类总种数的10％。但将野生动物培育和开发为实验动物方面尚属空白。

宫内感染致早产鼠脑瘫动物模型制备及其鉴定的实验研究

目的:探索宫内感染致早产鼠脑性瘫痪动物模型的制备方法,并对脑瘫动物模型进行鉴定。方法:脑瘫动物模型的制备:给予16只孕16、17天的实验组大鼠脂多糖每次350μg/kg,连续2天腹腔注射,8只对照组孕鼠腹腔注射同剂量的生理盐水。观察两组孕鼠的分娩时间及新生仔鼠出生体重。孕22天前分娩的仔鼠为早产鼠。将实验组中提前分娩的母鼠和对照组母鼠处死后,取子宫和胎盘HE染色观察。模型鉴定:①神经行为学检测:30日龄早产鼠16只,足月产鼠30只,分别进行随意运动障碍、姿势异常、肌张力异常、不自主动作、情感行为能力及倾斜板试验,记录各项评分并进行统计学处理;②病理学检测:30日龄早产鼠16只,足月产鼠16只,断头取脑,光镜与电镜下观察脑组织变化。结果:①实验组有6只大鼠提前分娩,共获活早产仔鼠26只;对照组均为足月分娩,产仔鼠74只。早产仔鼠出生后颜色青紫、活动少、体重低;②子宫及胎盘病理检测可见提前分娩母鼠子宫壁及胎盘内血管充血、水肿,并见大量中性粒细胞浸润;③16只30日龄早产鼠中,10只经鉴定为脑瘫鼠。④脑瘫大鼠随意运动障碍,姿势、肌张力异常,病理结果显示脑损伤部位在白质,系胶质细胞、髓鞘的损伤。结论:①孕鼠腹腔注射LPS可诱发早产;②LPS致宫内感染可成功制备早产鼠脑瘫动物模型;

一种新的近交系实验动物遗传监测方法及小鼠性别相关RAPD标记的发现

我们用21个10 bp的随机短引物对来自昆明、成都、上海、北京四个地方的BALB/c小鼠以及C57BL小鼠、昆明种小白鼠进行了随机扩增多态DNA(RAPD)分析,发现13个引物的扩增产物在BALB/c小鼠和C 57 BL小鼠中有差异,8个引物的扩增产物在BALB/c小鼠和昆明种小白鼠之间不同.在四个地方的BALB/c小鼠中,成都、上海、北京的BALB/c小鼠其遗传背景均一,而来自昆明的BALB/c小鼠中,有2只的4个引物的扩增产物不同于其它的BALB/c小鼠,表明这两只BALB/c小鼠可能曾发生过某种程度的遗传改变或污染。实验结果显示RAPD方法是一种有效的近交系实验动物遗传监测手段。实验中一个有趣的结果是,在OPG 2、OPE 4、OPE 9的扩增产物中,发现了严格的性别依赖的PAPD标记。OPE 9扩增产物中,凡雄性个体都有一条0.88 kb的标记.OPG 2、OPE 4则在所有的雄性个体中多扩增出一条约1.2 kb的带。通过交叉PCR扩增和斑点杂交证明OPG 2、OPE 4 得到的雄性特异性RAPD标记虽分子大小一致,但不具同源性。这些性别相关RAPD标记的染色体定位和性质分析正在进一步进行中.

螺内酯对实验大鼠肝组织TGFβ1、PDGF-BB及α-SMA表达的影响

目的 探讨螺内酯预防肝纤维化的作用机制。方法 SD大鼠 90只 ,随机分为 3组。正常对照组 (8只 ) :正常饮食 ,皮下注射花生油 ;模型组 (42只 ) :复合因素制成肝纤维化模型 ;螺内酯预防组 (40只 ) :造模方法同模型组 ,螺内酯 10 0mg·kg- 1·d- 1灌胃。分别于第 2周、4周、6周、8周末随机处死 8只大鼠 ,取肝组织用免疫组化法检测各组肝组织内转化生长因子 β1(TGFβ1)、血小板衍生生长因子 (PDGF BB)及α 平滑肌动蛋白 (α SMA)含量。结果 螺内酯预防组TGFβ1、PDGF BB及α SMA在肝组织中的表达均较模型组明显减少 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。 结论 螺内酯可通过降低TGFβ1、PDGF

大鼠急性心肌缺血动物实验模型的改进

目的改进大鼠急性心肌缺血动物实验模型时,提高手术的成功率和动物成活率。方法比较传统方法与改进方法动物试验的成功率。结果传统方法成功率只有60%,改进方法成功率达到90%以上。结论改进后的方法能大大降低手术难度,减少实验费用,优于传统方法。

昆明小鼠焦虑与抑郁动物模型相关性研究:明暗箱实验与悬尾实验

目的探讨明暗箱实验(light/dark box,LDB)和悬尾实验(tail suspension test,TST)作为动物模型评价昆明小鼠焦虑与抑郁情绪的相关性。方法成年♂昆明小鼠先后放入明暗穿梭箱和悬尾箱,摄像系统分别记录5 min和6 min内的行为变化,实验间隔1周,实验参数如下:LDB首次由明区进入暗区潜伏期(LDB_Latence)、明区停留时间百分率(LDB_Ltime%)、明区水平运动百分率(LDB_Lcross%)、明区垂直运动百分率(LDB_Lrear%),TST首次出现不动状态潜伏期(TST_Latence)、不动状态百分率(TST_Immobil-ity%);采用因子分析、聚类分析、相关分析、一致性检验和生存分析等多种统计方法进行数据处理。结果①因子分析和聚类分析提示,LDB参数反映焦虑情绪,TST参数反映抑郁情绪。②相关分析提示,LDB与TST参数组内具有较好相关性,而组间相关性较差;ICC和Kappa统计参数提示,LDB与TST评价焦虑与抑郁情绪一致性较差。③生存分析提示,LDB与TST半数生存期差异无统计学意义。结论LDB与TST相关参数各自独立反映了焦虑与抑郁情绪,但两者评价结果的相关性和一致性较差;在解决"特质焦虑与状态焦虑动物模型相关性"及"焦虑与抑郁动物模型相关性"科学问题时,可以考虑建立新型动物模型及综合评价方法或者筛选特质种属实验动物;而在进行药物效应评价时,可以考虑将多种动物模型联合组成"行为组学",根据不同结构维度进行"模式识别"评价。

大鼠实验性脾虚证动物模型糖原和琥珀酸脱氢酶的组织化学研究

为了研究脾虚证时组织化学的变化及四君子汤对其的影响,选用Wistar大鼠,以利血平复制脾虚证动物模型,实验设正常对照组、脾虚组、脾虚治疗组,每组15只,于第7d、第14d分别扑杀各组动物,取肝脏、十二指肠、胃和肌肉组织,分别应用PAS法和Lojda法染色,组织学半定量法观察糖原和琥珀酸脱氢酶的变化。实验结果表明:第7d时,脾虚组和脾虚治疗组肝脏和肌肉组织中的糖原含量显著低于对照组(P<0.01),各组织中琥珀酸脱氢酶含量则显著高于对照组(P<0.01);第14d时,脾虚组糖原含量反而显著高于对照组和脾虚治疗组(P<0.05～0.01),琥珀酸脱氢酶含量仍明显高于对照组和脾虚治疗组(P<0.050.01)。说明脾虚证的病理变化过程与机体糖原和琥珀酸脱氢酶等的组织化学变化有一定的联系,健脾益气方剂四君子汤对脾虚证模型大鼠的组织学变化有较好的调节作用。

杀鼠迷小麦毒饵实验室、不同现场灭鼠效果及对非靶动物的毒性实验观察

目的了解0.0375%杀鼠迷小麦毒饵在实验室、不同现场的灭鼠效果及对非靶动物的毒性,为今后灭鼠工作提供科学依据。方法用群饲有选择给饵法测定毒饵的适口性及实验室灭鼠效果,用100格粉板法测定鼠密度,计算灭鼠率。用单笼饲养无选择给饵法测定杀鼠迷毒饵对家兔、鸡的毒性,并测定猫、犬对杀鼠迷毒饵二次中毒情况。结果摄食系数为0.73,实验室灭鼠率为100%;农村、食堂、饭店、食品超市、食品加工厂的现场灭鼠率分别为97.61%、97.43%、97.71%、100%和100%,现场总灭鼠率为98.02%,现场总校正灭鼠率为98.17%;连续给药3 d,家兔、鸡的死亡率分别为40%和20%;连续给药5 d,家兔、鸡的死亡率分别为100%和80%;给家猫连续3 d喂食中毒的小白鼠,犬连续2 d喂食中毒的褐家鼠,均未见中毒反应。结论0.0375%杀鼠迷适口性好,实验室及不同现场灭鼠效果显著,对非靶动物有一定的毒性,但危害不大,是一种比较安全的灭鼠剂。

大鼠C6脑胶质瘤动物实验模型的建立

目的 为脑胶质瘤的基础理论、临床治疗和药效学研究提供简便、经济、实用的大鼠C6脑胶质瘤动物实验模型。方法 采用自制大鼠脑固定架 ,固定后 ,于脑靶点接种C6胶质瘤细胞。观察动物行为状态和生存期 ,并对脑肿瘤进行形态学 ,细胞学和分子生物学相关指标的检测。结果 接种C6胶质瘤细胞后 ,动物进食量减少 ,体重下降 ,有的动物出现眶周出血 ,眼球突出 ,自身旋转 ,癫痫发作 ,偏瘫等症状 ,大约在 2至 3周内 ,动物大多死亡 ,病理解剖显示颅内肿瘤形成。结论 该方法建立的脑胶质瘤具有与人脑胶质瘤相似的特性 ,肿瘤形成时间短 ,存活期较稳定 ,可供脑胶质瘤基础理论、实验治疗和药效学研究的需要。

动物实验期问抓取大鼠的技巧

实验动物包括大鼠、小鼠、豚鼠、家兔及狗等，抓取和固定时，小鼠挣扎力小，豚鼠及家兔性情温顺，一般不会咬伤实验人员，狗通人性，在实验前受过驯养调教，抓取固定就比较容易。而大鼠在抓取过程中如抓取不当，可能会咬伤实验人员，