柔肝灵颗粒对肝纤维化大鼠血清MMP-2及PDGF-BB影响的实验研究

目的:研究柔肝灵颗粒对四氯化碳(CC14)肝纤维化大鼠模型血清MMP-2和PDGF-BB含量的变化。方法:用40%四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型,应用不同剂量柔肝灵颗粒进行干预,用大黄虫丸作为对照组。通过酶联免疫法检测血清中MMP-2和PDGF-BB的含量变化。结果:柔肝灵颗粒大剂量和中剂量组在降低肝纤维化大鼠血清指标MMP-2及PDGF-BB胶原含量方面,其效果优于大黄虫丸组(P<0.05)。结论:四氯化碳(CCL4)所致肝纤维化大鼠模型血清MMP-2及PDGF-BB含量显著增高,柔肝灵颗粒能减轻其含量。

新开发实验动物——高原鼠兔

实验动物科学是生命科学的基础和条件。随着医学科学和其它生命科学的飞速发展,对实验动物品种的需求也越来越多。发达国家非常重视实验动物新品种的开发。我国有丰富的动物资源,现有各种兽类427种,约占世界兽类总种数的10％。但将野生动物培育和开发为实验动物方面尚属空白。

宫内感染致早产鼠脑瘫动物模型制备及其鉴定的实验研究

目的:探索宫内感染致早产鼠脑性瘫痪动物模型的制备方法,并对脑瘫动物模型进行鉴定。方法:脑瘫动物模型的制备:给予16只孕16、17天的实验组大鼠脂多糖每次350μg/kg,连续2天腹腔注射,8只对照组孕鼠腹腔注射同剂量的生理盐水。观察两组孕鼠的分娩时间及新生仔鼠出生体重。孕22天前分娩的仔鼠为早产鼠。将实验组中提前分娩的母鼠和对照组母鼠处死后,取子宫和胎盘HE染色观察。模型鉴定:①神经行为学检测:30日龄早产鼠16只,足月产鼠30只,分别进行随意运动障碍、姿势异常、肌张力异常、不自主动作、情感行为能力及倾斜板试验,记录各项评分并进行统计学处理;②病理学检测:30日龄早产鼠16只,足月产鼠16只,断头取脑,光镜与电镜下观察脑组织变化。结果:①实验组有6只大鼠提前分娩,共获活早产仔鼠26只;对照组均为足月分娩,产仔鼠74只。早产仔鼠出生后颜色青紫、活动少、体重低;②子宫及胎盘病理检测可见提前分娩母鼠子宫壁及胎盘内血管充血、水肿,并见大量中性粒细胞浸润;③16只30日龄早产鼠中,10只经鉴定为脑瘫鼠。④脑瘫大鼠随意运动障碍,姿势、肌张力异常,病理结果显示脑损伤部位在白质,系胶质细胞、髓鞘的损伤。结论:①孕鼠腹腔注射LPS可诱发早产;②LPS致宫内感染可成功制备早产鼠脑瘫动物模型;

一种新的近交系实验动物遗传监测方法及小鼠性别相关RAPD标记的发现

我们用21个10 bp的随机短引物对来自昆明、成都、上海、北京四个地方的BALB/c小鼠以及C57BL小鼠、昆明种小白鼠进行了随机扩增多态DNA(RAPD)分析,发现13个引物的扩增产物在BALB/c小鼠和C 57 BL小鼠中有差异,8个引物的扩增产物在BALB/c小鼠和昆明种小白鼠之间不同.在四个地方的BALB/c小鼠中,成都、上海、北京的BALB/c小鼠其遗传背景均一,而来自昆明的BALB/c小鼠中,有2只的4个引物的扩增产物不同于其它的BALB/c小鼠,表明这两只BALB/c小鼠可能曾发生过某种程度的遗传改变或污染。实验结果显示RAPD方法是一种有效的近交系实验动物遗传监测手段。实验中一个有趣的结果是,在OPG 2、OPE 4、OPE 9的扩增产物中,发现了严格的性别依赖的PAPD标记。OPE 9扩增产物中,凡雄性个体都有一条0.88 kb的标记.OPG 2、OPE 4则在所有的雄性个体中多扩增出一条约1.2 kb的带。通过交叉PCR扩增和斑点杂交证明OPG 2、OPE 4 得到的雄性特异性RAPD标记虽分子大小一致,但不具同源性。这些性别相关RAPD标记的染色体定位和性质分析正在进一步进行中.

螺内酯对实验大鼠肝组织TGFβ1、PDGF-BB及α-SMA表达的影响

目的 探讨螺内酯预防肝纤维化的作用机制。方法 SD大鼠 90只 ,随机分为 3组。正常对照组 (8只 ) :正常饮食 ,皮下注射花生油 ;模型组 (42只 ) :复合因素制成肝纤维化模型 ;螺内酯预防组 (40只 ) :造模方法同模型组 ,螺内酯 10 0mg·kg- 1·d- 1灌胃。分别于第 2周、4周、6周、8周末随机处死 8只大鼠 ,取肝组织用免疫组化法检测各组肝组织内转化生长因子 β1(TGFβ1)、血小板衍生生长因子 (PDGF BB)及α 平滑肌动蛋白 (α SMA)含量。结果 螺内酯预防组TGFβ1、PDGF BB及α SMA在肝组织中的表达均较模型组明显减少 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。 结论 螺内酯可通过降低TGFβ1、PDGF

大鼠急性心肌缺血动物实验模型的改进

目的改进大鼠急性心肌缺血动物实验模型时,提高手术的成功率和动物成活率。方法比较传统方法与改进方法动物试验的成功率。结果传统方法成功率只有60%,改进方法成功率达到90%以上。结论改进后的方法能大大降低手术难度,减少实验费用,优于传统方法。

昆明小鼠焦虑与抑郁动物模型相关性研究:明暗箱实验与悬尾实验

目的探讨明暗箱实验(light/dark box,LDB)和悬尾实验(tail suspension test,TST)作为动物模型评价昆明小鼠焦虑与抑郁情绪的相关性。方法成年♂昆明小鼠先后放入明暗穿梭箱和悬尾箱,摄像系统分别记录5 min和6 min内的行为变化,实验间隔1周,实验参数如下:LDB首次由明区进入暗区潜伏期(LDB_Latence)、明区停留时间百分率(LDB_Ltime%)、明区水平运动百分率(LDB_Lcross%)、明区垂直运动百分率(LDB_Lrear%),TST首次出现不动状态潜伏期(TST_Latence)、不动状态百分率(TST_Immobil-ity%);采用因子分析、聚类分析、相关分析、一致性检验和生存分析等多种统计方法进行数据处理。结果①因子分析和聚类分析提示,LDB参数反映焦虑情绪,TST参数反映抑郁情绪。②相关分析提示,LDB与TST参数组内具有较好相关性,而组间相关性较差;ICC和Kappa统计参数提示,LDB与TST评价焦虑与抑郁情绪一致性较差。③生存分析提示,LDB与TST半数生存期差异无统计学意义。结论LDB与TST相关参数各自独立反映了焦虑与抑郁情绪,但两者评价结果的相关性和一致性较差;在解决"特质焦虑与状态焦虑动物模型相关性"及"焦虑与抑郁动物模型相关性"科学问题时,可以考虑建立新型动物模型及综合评价方法或者筛选特质种属实验动物;而在进行药物效应评价时,可以考虑将多种动物模型联合组成"行为组学",根据不同结构维度进行"模式识别"评价。

大鼠实验性脾虚证动物模型糖原和琥珀酸脱氢酶的组织化学研究

为了研究脾虚证时组织化学的变化及四君子汤对其的影响,选用Wistar大鼠,以利血平复制脾虚证动物模型,实验设正常对照组、脾虚组、脾虚治疗组,每组15只,于第7d、第14d分别扑杀各组动物,取肝脏、十二指肠、胃和肌肉组织,分别应用PAS法和Lojda法染色,组织学半定量法观察糖原和琥珀酸脱氢酶的变化。实验结果表明:第7d时,脾虚组和脾虚治疗组肝脏和肌肉组织中的糖原含量显著低于对照组(P<0.01),各组织中琥珀酸脱氢酶含量则显著高于对照组(P<0.01);第14d时,脾虚组糖原含量反而显著高于对照组和脾虚治疗组(P<0.05～0.01),琥珀酸脱氢酶含量仍明显高于对照组和脾虚治疗组(P<0.050.01)。说明脾虚证的病理变化过程与机体糖原和琥珀酸脱氢酶等的组织化学变化有一定的联系,健脾益气方剂四君子汤对脾虚证模型大鼠的组织学变化有较好的调节作用。

杀鼠迷小麦毒饵实验室、不同现场灭鼠效果及对非靶动物的毒性实验观察

目的了解0.0375%杀鼠迷小麦毒饵在实验室、不同现场的灭鼠效果及对非靶动物的毒性,为今后灭鼠工作提供科学依据。方法用群饲有选择给饵法测定毒饵的适口性及实验室灭鼠效果,用100格粉板法测定鼠密度,计算灭鼠率。用单笼饲养无选择给饵法测定杀鼠迷毒饵对家兔、鸡的毒性,并测定猫、犬对杀鼠迷毒饵二次中毒情况。结果摄食系数为0.73,实验室灭鼠率为100%;农村、食堂、饭店、食品超市、食品加工厂的现场灭鼠率分别为97.61%、97.43%、97.71%、100%和100%,现场总灭鼠率为98.02%,现场总校正灭鼠率为98.17%;连续给药3 d,家兔、鸡的死亡率分别为40%和20%;连续给药5 d,家兔、鸡的死亡率分别为100%和80%;给家猫连续3 d喂食中毒的小白鼠,犬连续2 d喂食中毒的褐家鼠,均未见中毒反应。结论0.0375%杀鼠迷适口性好,实验室及不同现场灭鼠效果显著,对非靶动物有一定的毒性,但危害不大,是一种比较安全的灭鼠剂。

大鼠C6脑胶质瘤动物实验模型的建立

目的 为脑胶质瘤的基础理论、临床治疗和药效学研究提供简便、经济、实用的大鼠C6脑胶质瘤动物实验模型。方法 采用自制大鼠脑固定架 ,固定后 ,于脑靶点接种C6胶质瘤细胞。观察动物行为状态和生存期 ,并对脑肿瘤进行形态学 ,细胞学和分子生物学相关指标的检测。结果 接种C6胶质瘤细胞后 ,动物进食量减少 ,体重下降 ,有的动物出现眶周出血 ,眼球突出 ,自身旋转 ,癫痫发作 ,偏瘫等症状 ,大约在 2至 3周内 ,动物大多死亡 ,病理解剖显示颅内肿瘤形成。结论 该方法建立的脑胶质瘤具有与人脑胶质瘤相似的特性 ,肿瘤形成时间短 ,存活期较稳定 ,可供脑胶质瘤基础理论、实验治疗和药效学研究的需要。

动物实验期问抓取大鼠的技巧

实验动物包括大鼠、小鼠、豚鼠、家兔及狗等，抓取和固定时，小鼠挣扎力小，豚鼠及家兔性情温顺，一般不会咬伤实验人员，狗通人性，在实验前受过驯养调教，抓取固定就比较容易。而大鼠在抓取过程中如抓取不当，可能会咬伤实验人员，

消肿散洗剂促进大鼠创面愈合的初步实验研究

目的探讨消肿散洗剂对大鼠创面模型的愈合作用。方法将造模成功的SD大鼠采用随机数表法分为实验组(消肿散洗剂组)、对照组(复方黄柏液涂剂组)和空白组(生理盐水组)。造模后记录第3、7、14、21天的创面愈合率;第3、7、14天检测创面组织血管生成素(AngI、AngII)的表达水平;在第7天检测创面组织炎症因子(IL-1β、IL-6、IL-10)的表达水平。结果造模后第3天三组创面愈合率无统计学意义(P>0.05);第7天、第14天实验组创面愈合率高于对照组与空白组(P<0.05);第21天实验组创面愈合率高于空白组(P<0.05),与对照组愈合率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。造模后第3天实验组和对照组AngI、AngII表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),但高于空白组(P<0.05);第7天实验组和对照组AngI、AngII表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),且高于空白组(P<0.05);第14天实验组和对照组AngI、AngII表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),但高于空白组(P<0.05)。造模后第7天实验组的IL-1β、IL-6的表达水平低于空白组和对照组(P<0.05),而IL-10高于其他2组(P<0.05)。结论消肿散洗剂可协调炎症因子平衡,促进血管生成素的表达,可快速愈合创面。

中国实验动物中鼠管状线虫的分子鉴定和感染调查

目的对鼠管状线虫进行分子鉴定和感染调查,为国家标准的修订提供参考依据。方法 923批5199只SPF动物(包括:1批5只猴,3批25只小型猪,28批55只兔,13批248只地鼠,37批198只豚鼠,93批459只大鼠,742批4179只小鼠,5批25只鸡和1批5只鸭)和145批1389只清洁动物(包括:1批3只兔,4批31只地鼠,16批157只豚鼠,32批268只大鼠和92批930只小鼠)来自全国50个不同的厂家。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术结合形态学鉴定方法,进行鼠管状线虫感染筛查。应用多重PCR和测序技术,鉴定分离的鼠管状线虫ITS(内转录间隔区)、28S rRNA(28S核糖体RNA)、nad1(NADH脱氢酶亚单位1)和cox1(细胞色素C过氧化物酶亚基1)基因,从分子水平上确证鼠管状线虫感染。结果应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,从动物中检出鼠管状线虫的虫卵、幼虫和成虫。根据鼠管状线虫的卵细胞、幼虫、雌雄成虫的大小和形态来鉴定虫种。应用多重PCR测序技术,能从分离的单个鼠管状线虫的虫卵、幼虫和成虫中鉴定出ITS、28S rRNA、nad1和cox1基因,与其他不同种属的寄生虫无交叉反应。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,从5199份SPF和1389份清洁动物样本中分别检出鼠管状线虫阳性样本285份和135份。应用多重PCR和测序技术,鉴定证明这些阳性样本中确实含有鼠管状线虫特异性的DNA。测序结果显示,不同动物分离的鼠管状线虫的ITS、28S rRNA、nad1和cox1部分基因序列核苷酸相似性达100%。SPF和清洁动物的鼠管状线虫感染率分别为5.5%(285/5199)和9.7%(135/1389)。结论应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术联合多重PCR测序技术能够快速精准检测鉴定出鼠管状线虫。鼠管状线虫的人兽共患本质可以视作为公共卫生的一个预警。良好的动物质量控制对保护人类身体健康和保障人民用药安全具有重要作用。本研究对中国SPF和清洁动物的鼠管状线虫进行了分子鉴定和感染调查。

二次免疫诱导大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型的建立

目的 建立一种新的可靠的实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型制备方法,为人类多发性硬化实验研究提供理想模型。方法 用豚鼠全脊髓生理盐水匀浆+完全福氏佐剂制成免疫抗原,主动免疫Wistar大鼠,14 d后用豚鼠全脊髓生理盐水匀浆+不完全福氏佐剂再次免疫。结果第1次免疫后7 d左右,所有大鼠出现食量、活动减少;在第2次免疫后6-15 d,部分大鼠出现肢体无力、瘫痪,脑组织切片HE染色可见炎性细胞浸润和白质丰富区广泛肿胀变性。结论二次免疫诱导Wistar大鼠EAE病情严重,发病率高,病情及病理更接近人类多发性硬化症。本方法操作简单,对非敏感动物制备EAE模型也有较满意的效果。

介绍一种新型的实验动物——高原鼠兔

鼠兔属动物的早期人工饲养开始于Dice对科罗拉多鼠兔(Ochotona priceps saratilis)的试养,室内繁殖未成功,直至1969年Puget从阿富汗喀布尔地区,捕获野生的阿富汗鼠兔(O. rufescens rufescens),并在人工饲养下繁殖成功。日本1974年引进作为基础对其进行实验动物化培育,供医学生物学研究用,目前已成为法、美和日本等国的实验动物。 高原鼠兔(O. curzoniac)的人工饲养始于60年代,由于鼠兔繁殖生物学因素的影响,

高原鼠兔实验动物化研究——雄性高原鼠兔在上海地区的若干繁殖特性观测

对高原鼠兔 (Ochotonacurzoniae)在上海地区的若干繁殖特性观察结果表明 ,鼠兔的精子畸形率为 11.64 % ,影响了其在上海低海拔地区的繁殖 ;非繁殖季节应用外源生殖激素对诱导雄性鼠兔的睾丸发育亦有一定的效果。