PDGF-C、PDGF-D在大鼠肾间质纤维化过程中的作用

目的探讨血小板源性生长因子-C(PDGF-C)、血小板源性生长因子-D(PDGF-D)在大鼠肾间质纤维化模型中的表达及意义。方法将28只SD大鼠按照单侧输尿管梗阻(UUO)的方法建模,分别于造模后的3 d、1周、2周、3周分别将7只大鼠处死,取出两侧肾脏(未行手术侧的肾脏设为对照组)制作石蜡切片在光镜下观察。应用免疫组化(SABC)法检测模型大鼠肾组织中PDGF-C、PDGF-D的表达情况。结果对照组中PDGFC在肾小动脉的血管平滑肌细胞和肾小管上皮细胞中少量表达,PDGF-D主要在血管平滑肌细胞和肾小球系膜细胞表达。而模型组肾脏中PDGF-C、PDGF-D的表达显著上调,与对照组相比差异有统计学意义(P均<0.05),且肾间质及肾小管中PDGF-C、PDGF-D的表达强度与肾间质纤维化程度呈正相关(r=0.73,P<0.05;r=0.67,P<0.05)。结论 PDGF-C、PDGF-D均参与肾间质纤维化过程,并可能发挥着重要作用。

大鼠PDGF-C基因真核表达载体的构建与鉴定

目的构建并鉴定大鼠血小板衍生生长因子C(PDGF-C)基因的真核表达载体。方法根据GenBank数据库提供的基因序列,设计合成大鼠PDGF-C基因CDS扩增引物,RT-PCR法获得目的基因,T载体连接测序后,构建pEGFP-N1-PDGF-C真核表达载体,双酶切鉴定。结果 RT-PCR扩增大鼠PDGF-C基因片段为1053bp,与预期大小相符;测序结果表明该目的基因序列与GenBank公布序列一致;构建的重组质粒pEGFP-N1-PDGF-C双酶切鉴定正确。结论成功构建了大鼠PDGF-C基因的真核表达载体。

PDGF-C和PDGF-D对心血管系统疾病影响的研究进展

心血管系统是发育过程中最早形成的器官之一,对其他器官和组织的形成和功能起着至关重要的作用。心血管系统的功能和稳态受到许多重要分子的精细调控,大量的研究表明血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)及其受体是心血管系统的重要调节因子。尽管PDGF-C和PDGF-D是PDGF家族中相对较新的成员,但它们作为血管生成和生存因子在心血管系统中的重要作用已得到充分证明。本文就PDGF-C和PDGF-D对心血管系统疾病的影响作一综述。

PDGF家族新成员——PDGF-C

血小板源性生长因子是正常组织生长和维持的重要生长因子,其过度表达与多种疾病有关。PDGF-C是最近发现的PDGF家族新成员,在多种正常和病理组织中表达,可能参与多种疾病的发病机制。

雷珠单抗联合视网膜激光光凝对新生血管性青光眼患者房水中VEGF及PDGF-C水平的影响

目的研究雷珠单抗联合视网膜激光光凝对新生血管性青光眼患者房水中VEGF(血管内皮生长因子)、PDGF-C(血小板衍生因子)水平的影响。方法选取2018年2月至2019年4月本院收治的新生血管性青光眼患者96例,依据随机数表法分为两组,各48例。对照组采用视网膜激光光凝术治疗法,观察组在对照组基础上联合雷珠单抗。对比分析两组患者的临床疗效、VEGF、PDGF-C水平以及术后并发症情况。结果观察组总有效率为93.75%(45/48),高于对照组79.17%(38/48),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组患者VEGF、PDGF-C水平均降低,观察组VEGF、PDGF-C水平分别为(245.06±31.38)pg/ml、(15.68±0.89)pg/ml,均低于对照组(725.96±42.16)pg/ml、(22.45±1.08)pg/ml,差异均有统计学意义(均P<0.05);观察组并发症发生率为8.33%(4/48),低于对照组31.25%(15/48),差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用雷珠单抗联合视网膜激光光凝治疗方式对新生血管性青光眼患者可有效降低VEGF与PDGF-C水平,也相应减少并发症发生率,具有显著效果。

PDGF-C在人脑胶质瘤的表达及意义

目的:研究血小板源性生长因子-C(PDGF-C)在人脑胶质瘤中的表达并探讨与胶质瘤微血管形成及其临床病理特征间的关系。方法:采用免疫组织化学S-P法,检测有完整临床资料的60例胶质瘤和6例脑外伤颅脑减压术后正常脑组织中PDGF-C的表达,用统计学方法分析其表达与胶质瘤病理分级的关系。结果:PDGF-C表达定位于细胞浆。正常脑组织标本中低表达,低表达率为16.7%(1/6),在胶质瘤组织标本中表达率为71.7%(43/60),其中Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为56%(14/25)、78.3%(18/23)、91.7%(11/12),不同胶质瘤之间表达有显著性差异(P<0.05),其表达与胶质瘤病理分级呈正相关(r=0.458,P<0.01)。结论:PDGF-C在人脑胶质瘤中呈高表达,随肿瘤级别的增高而表达增强,且与病理分级呈正相关关系,提示其在胶质瘤发生、发展中发挥重要作用。

PDGF-C在退行性视网膜病变模型中的神经保护作用

目的探讨血小板源性生长因子-C(PDGF-C)在视网膜变性小鼠模型的神经保护作用。方法检测在体外条件下PDGF-C的作用。使用的动物模型包括Pde6b^(rd1)小鼠和MNU诱导的视网膜光感受器细胞损伤模型。两种模型均分为两组,在视网膜下分别注射AAV-PDGF-C-Ires-ZsGreen和AAV-Ires-ZsGreen,然后通过切片HE染色观察视网膜光感受器细胞层厚度的变化来检测PDGF-C的神经保护作用。结果在Pde6b^(rd1)小鼠的视网膜下注射AAV-PDGF-C-Ires-ZsGreen,外核层与全层视网膜厚度比为(0.575 918±0.14),较对照组A(0.335 821±0.11)明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。本实验在MNU诱导的视网膜光感受器细胞损伤模型中,注射AAV-PDGF-C-Ires-Zs Green的实验组B(0.239 712±0.030 9)中外核层厚度较对照组B(0.193 552±0.022 4)增厚,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PDGF-C在光感受器细胞损伤的动物模型中具有较强的神经保护作用。

PDGF-C和CD_(105)在脑胶质瘤中表达的相关性研究

目的研究血小板源性生长因子-C(PDGF-C)和CD105(endoglin)在人脑胶质瘤中的表达,并探讨它们与胶质瘤微血管形成及其临床病理特征间的关系。方法采用免疫组织化学S-P法,检测有完整临床资料的60例胶质瘤和6例脑外伤颅脑减压术后正常脑组织中PDGF-C和CD105的表达。结果 PDGF-C表达定位于细胞质,正常脑组织标本中低表达,在胶质瘤组织标本中表达率为71.7%(43/60);CD105表达定位于细胞膜,在正常脑组织标本中不表达,在胶质瘤组织标本中其阳性表达率为66.7%(40/60),PDGF-C与CD105-MVD在胶质瘤中的表达呈正相关。结论 PDGF-C和CD105-MVD与胶质瘤恶性程度呈密切正相关,提示二者在胶质瘤发生、发展中起协同作用。

PDGF-α受体反义寡核苷酸对增殖性玻璃体视网膜病变的影响

目的:研究PDGF-α受体反义寡核苷酸对实验性增殖性玻璃体视网膜病变(PVR)的防治作用。方法:选择PDGFR-αASODN/lip2000比值1∶1、1∶2.5、1∶5制备复合物转染至HRPE细胞中24 h后注射入家兔玻璃体腔。PVR模型健康成年有色家兔24只随机分为人视网膜色素上皮(HRPE)细胞稀释液组(A组)、1.0与2.0μmol/LPDGFR-αASODN脂质体转染的RPE细胞稀释液组(B组和C组),每组8只眼。间接眼底镜观察PVR程度;组织病理学观察眼底改变;免疫组织化学染色观察PDGFA浓度。结果:当PDGFR-αASODN/lip2000比值为1∶2.5时,HRPE细胞最佳转染效率。B组和C组PVR程度、组织病理学改变、免疫组织化学染色PDGFA浓度低于A组,C组比B组更低。结论:PDGF-α受体反义寡核苷酸能够抑制实验性增殖性玻璃体视网膜病变的发生发展。

比较不同中药方剂对兔动脉内膜损伤后血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:比较化痰祛瘀、益气养阴、疏肝理气3种不同方剂对兔动脉内膜损伤后血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响。方法:将46只新西兰兔随机分为正常组、模型组、氟伐他汀对照组、化痰祛瘀组、益气养阴组、疏肝理气组,正常组6只,其余每组各8只。通过高脂饲料配合腹主动脉内膜剥脱术建立兔动脉内膜损伤模型。取腹主动脉下段,电镜观察血管平滑肌细胞形态;应用RT-PCR法测定原癌基因c-myc和血小板源性生长因子-BB(PDGF)水平;免疫组化法测定胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平。结果:(1)模型组PDGF、c-myc、IGF-1均显著高于空白组(P<0.05)。(2)氟伐他汀组、化痰祛瘀组、益气养阴组、疏肝理气组与模型组相比较PDGF、c-myc、IGF-1显著下降(P<0.05)。(3)化痰祛瘀组、益气养阴组与疏肝理气组比较PDGF、IGF-1显著下降(P<0.05),c-myc差异不显著(P>0.05)。结论:(1)动脉损伤后可致PDGF、c-myc、IGF-1表达增加,提示PDGF、c-myc、IGF-1表达增加在动脉损伤后平滑肌细胞增殖中起一定作用。(2)化痰祛瘀、益气养阴、疏肝理气3种方剂均能使动脉损伤后PDGF、c-myc、IGF-1表达减少,对动脉损伤后平滑肌细胞增殖有一定抑制作用,化痰祛瘀与益气养阴方效果更显著。

转染PDGF和c-myc反义寡核苷酸抑制移植血管狭窄研究

目的:探讨血管移植后联合应用血小板源生长因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)和原癌基因c-myc反义寡核苷酸(Antisense oligodeoxynucleotides,AODN)抑制血管平滑肌(Vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖和防止移植血管狭窄的作用。方法:选48只新西兰雄性白兔,随机分为对照组、PDGF-AODN组、c-myc-AODN组和PDGF-AODN+c-myc-AODN组,每组12只;将同一只兔的左、右髂外动脉(各1.0 cm)对换移植,移植血管用PDGF-AODN和c-myc-AODN液浸泡,血管吻合口用AODN液浸泡过的缝线吻合;取移植血管制片显微镜下观察内膜增生情况,计算机图像分析测量其内膜厚度、内膜面积和移植血管狭窄率,并分别用原位杂交组织化学和免疫组织化学染色计数PDGF和c-myc阳性细胞数。结果:PDGF-AODN+c-myc-AODN组的移植血管内膜厚度、内膜面积、管腔狭窄程度和PDGF阳性细胞及c-myc阳性细胞数均显著低于对照组(P<0.01),而且亦明显低于单独转染PDGF-AODN组或c-myc-AODN组(P<0.05),PDGF-AODN组和c-myc-AODN组间差异无显著意义(P>0.05)。结论:联合应用PDGF-AODN和c-myc-AODN能有效抑制VSMC增殖,阻止内膜增生,防止移植血管狭窄,为利用反义核酸技术联合调控多个基因防止移植器官内血管狭窄奠定了基础。

调肝导浊中药对体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞C-myc,PDGF-R表达的影响

运用体外培养技术 ,培养大鼠主动脉SMC ,以加高脂血清和加中药等不同培养基进行分组培养 ,取细胞进行指标检测。结果表明 :调肝导浊中药可抑制SMC原癌基因C -myc及PDGF -R的表达。提示该中药可有效阻断SMC增殖的关键环节 ,从而阻止As发生发展。

血管舒缓素对PDGF诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨了血管舒缓素对血小板趋化生长因子（ＰＤＧＦ）诱导培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法取ＳＤ大鼠胸主动脉平滑肌细胞进行培养，传至５代后，分组观察ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦ＋血管舒缓素组、ＰＤＧＦ＋血管舒缓素＋缓激肽受体拮抗剂组等。干预因素作用于血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ），对３Ｈ胸腺嘧啶（３ＨＴｄＲ）的掺入及原癌基因ｃｍｙｃｍＲＮＡ表达的影响。结果１．ＰＤＧＦ可促进ＶＳＭＣ３ＨＴｄＲ的掺入和ｃｍｙｃｍＲＮＡ表达，这种表达在２小时时达高峰。２．血管舒缓素可抑制ＰＤＧＦ诱导的ＶＳＭＣ３ＨＴｄＲ的掺入和ｃｍｙｃｍＲＮＡ表达，这种抑制作用可被缓激肽受体拮抗剂所阻断。结论血管舒缓素可抑制ＰＤＧＦ诱导的ＶＳＭＣ增殖作用。

联合转染PDGF和c-myc反义寡核苷酸抑制移植血管狭窄研究

目的探讨血管移植后联合应用血小板源性生长因子(PDGF)和原癌基因c-myc反义寡核苷酸(AODN)抑制血管平滑肌(VSMC)增殖和防止移植血管狭窄的作用。方法选48只新西兰雄性白兔,随机分为对照组、PDGF-AODN组、c-myc-AODN组和PDGF-AODN加c-myc-AODN组,每组12只;将同一只兔的左、右髂外动脉(各1.0cm)对换移植,移植血管用PDGF-AODN和c-myc-AODN液浸泡,血管吻合口用AODN液浸泡过的缝线吻合;取移植血管制片显微镜下观察内膜增生情况,计算机图像分析测量其内膜厚度、内膜面积和移植血管狭窄率,并分别用原位杂交组织化学和免疫组织化学染色计数PDGF和c-myc阳性细胞数。结果PDGF-AODN加c-myc-AODN组的移植血管内膜厚度、内膜面积、管腔狭窄程度和PDGF阳性细胞及c-myc阳性细胞数均显著低于对照组(P<0.01),而且亦明显低于单独转染PDGF-AODN组或c-myc-AODN组(P<0.05),PDGF-AODN组和c-myc-AODN组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合应用PDGF-AODN和c-myc-AODN能有效抑制VSMC增殖,阻止内膜增生,防止移植血管狭窄,为利用反义核酸技术联合调控多个基因防止移植器官内血管狭窄提供参考。

血小板源性生长因子C在家兔视网膜静脉阻塞模型的表达研究

目的研究家兔视网膜静脉阻塞(RVO)模型血小板源性生长因子C(PDGF-C)表达、作用及参与RVO新生血管形成的相关机制。方法通过氩激光光凝建立视网膜静脉阻塞家兔模型,观察结束后分别在1周、2周及4周三个时相点处死家兔,采取标本,观察病理改变,免疫组化法观察PDGF-C蛋白表达情况。结果与空白对照组比较,RVO家兔模型视网膜组织中各时相(1周、2周和4周组)PDGF-C蛋白表达均有不同程度的增高,差异有统计学意义([4.833±1.835)pg/m L、(10.500±1.634)pg/m L、(5.167±1.835)pg/m L比(2.167±0.408)pg/m L,P<0.01],其中2周模型组与1周、4周模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),1周模型组与4周模型组比较,P=0.713。结论PDGF-C在家兔视网膜静脉阻塞血管内皮细胞中呈现高表达,预示其可能在RVO发生发展中起重要作用,且其表达程度与视网膜缺血具有一定的时间相关性。

氟伐他汀对兔动脉内膜损伤后血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨氟伐他汀对兔动脉内膜损伤后血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响。方法:将20只新西兰兔随机分为正常组(n=6)、模型组(n=7)、氟伐他汀组(n=7)。通过高脂饲料配合腹主动脉内膜剥脱术建立兔动脉内膜损伤模型。取腹主动脉下段,电镜观察血管平滑肌细胞形态;应用RT-PCR法测定原癌基因c-myc和血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)水平;免疫组化法测定胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平。结果:氟伐他汀组与模型组相比血管平滑肌细胞增殖水平明显减低;PDGF-BB和IGF-1水平显著降低(P<0.05);c-myc和PDGF-BBmRNA表达的相关性分析显示二者呈正相关,模型组相关系数为8.603(P<0.05),氟伐他汀组相关系数为2.467(P<0.05);而IGF-1与c-myc无相关性。结论:氟伐他汀通过抑制PDGF和IGF-1的合成和分泌抑制VSMCs增殖,这种作用部分是通过抑制c-myc表达实现的。

血小板源性生长因子对肿瘤细胞体外作用的初步研究

目的 本文试图了解PDGF对肿瘤细胞体外生长和胞内传递通路的作用及肿瘤细胞是否表达PDGF受体。方法 应用白血病细胞株Dami作为肿瘤细胞模型 ,观察PDGF对Dami细胞的体外增殖和集落生成的影响 ,并应用Westernblot方法分析对胞内c fos蛋白的作用。亦使用流式细胞术和免疫组化方法分析PDGF受体的表达。结果 Dami细胞表达PDGF受体 ,而且PDGFβ受体水平高于PDGFα受体水平。通过该受体 ,PDGF上调胞内c fos蛋白的表达和促进Dami细胞增殖和集落生成。结论 PDGF可能通过肿瘤细胞表面的PDGF受体 ,激活胞内信息通路 ,刺激细胞的增殖和集落形成。

健脾补肺化痰方干预幼龄哮喘大鼠气道重塑模型中PDGF、ERK1/2/c-jun信号通路的研究

目的:分析在气道模型重塑的幼龄哮喘大鼠模型中,健脾补肺化痰方对大鼠肺功能、肺组织形态学参数及PDGF和ERK1/2/c-jun变化的影响。方法:将40只清洁级幼龄大鼠随机分为正常组、模型组、健脾补肺化痰方组和地塞米松组并建立哮喘气道重塑模型。测定肺功能相关指标并通过肺组织切片HE染色,分析大鼠肺组织形态学变化。使用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Western-blot)测定PDGF、ERK1/2和c-jun表达变化。并采用直线相关法性分析PDGF、ERK1/2和c-jun与大鼠气道形态学参数的相关性。结果:与哮喘模型组比,健脾补肺化痰方组大鼠呼吸症状和支气管炎性细胞浸润较轻,大鼠PEF、FEV0.2、FEV0.2/FVC及肺组织中PDGF、ERK1/2、c-junm RNA表达显著升高(P<0.05)。气道形态学测量结果显示模型组大鼠WAt/Pbm、WAi/Pbm及WAm/Pbm较其他各组显著增加(P<0.05)。PDGF、ERK1/2及c-jun蛋白的表达水平与WAt/Pbm、WAi/Pbm及Wam/Pbm呈正相关关系(P<0.01)。结论:健脾补肺化痰方能够抑制炎症反应,改善肺功能及气道形态学参数,通过PDGF、ERK1/2/c-jun信号转导通路实现对气道重塑的抑制。

测定血小板衍生生长因子活性方法的改进

以BALB/C小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/C3T3)作为靶细胞,经20mmol/L醋酸钠平衡后的CM-Sepharose(CMS)吸附过的胎牛血清作为基础培养血清,应用[3-(4,5-dimethylthi-azolyl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide,MTT]方法测定血小板源生长因子(platelet-derivedgrowthfactor,PDGF)诱导细胞增殖的生物活性.结果表明,该方法具有良好的量效关系,且精确度、重现性均较高.

INCREASED EXPRESSION OF PDGF AND C－MYC GENES IN LUNGS AND PULMONARY ARTERIES OF PULMONARY HYPERTENSIVE RATS INDUCED BY HYPOXI

ＩＮＣＲＥＡＳＥＤＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＯＦＰＤＧＦＡＮＤＣ－ＭＹＣＧＥＮＥＳＩＮＬＵＮＧＳＡＮＤＰＵＬＭＯＮＡＲＹＡＲＴＥＲＩＥＳＯＦＰＵＬＭＯＮＡＲＹＨＹＰＥＲＴＥＮＳＩＶＥＲＡＴＳＩＮＤＵＣＥＤＢＹＨＹＰＯＸＩＡ￥ＣａｉＹｉｎｇｎｉａｎ；（蔡英年...