C-kit和PDGFRβ在食管癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的:有研究表明STI-571能抑制Bcr-Abl、C-kit、血小板衍生生长因子受体β(Platelet-derivedgrouthfactorreceptor-beta,PDGFR!)的酪氨酸激酶,从而抑制细胞的分化增殖和促进细胞凋亡,本研究旨在检测与STI-571相关的酪氨酸激酶受体在食管癌中的表达情况。方法:应用免疫组化的方法,检测50例食管癌组织、癌旁组织和正常组织中与STI-571相关的酪氨酸激酶受体C-kit和PDGFRβ的表达。结果:C-kit在癌组织、癌旁组织、正常组织中的强表达率较低,分别为4%、4%、12%,表达的差异无统计学意义。PDGFRβ在癌组织、癌旁组织、正常组织中的强表达率分别为68%、28%、28%,表达的差异有统计学意义。应用Logistic回归的方法,发现C-kit或PDGFRβ在癌组织、癌旁组织、正常组织中的强表达率与患者的性别、年龄、肿物的分化程度、肿物的浸润深度、肿物的部位、淋巴结转移情况和分期无相关。结论:食管癌组织中PDGFRβ的强表达率较高,且明显高于癌旁组织和正常组织。食管正常组织中C-kit的强表达率较低,癌组织和癌旁组织中C-kit的强表达率更低。

结直肠癌组织中PDGFRα和PDGFRβ的表达及意义

背景与目的:血小板衍生生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor-alpha,PDGFRα)和血小板衍生生长因子受体β(platelet-derived growth factor receptor-beta,PDGFRβ)在肿瘤浸润、转移过程中起重要作用,但其与结直肠癌的关系研究甚少。本研究检测结直肠癌组织中PDGFRα和PDGFRβ的表达,并对其与结直肠癌患者临床病理特征和预后的关系进行探讨。方法:采用免疫组化SABC法检测122例结直肠癌组织与17例正常结直肠组织中PDGFRα和PDGFRβ的表达,并分析二者表达与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。结果:结直肠癌组织中PDGFRα高表达率为68.8%,PDGFRβ高表达率为65.6%,正常结直肠组织中均无高表达。结直肠癌组织中PDGFRα与PDGFRβ表达呈正相关(r=0.416,P<0.001);PDGFRα的表达与原发灶分期、淋巴结转移、远处转移及Dukes’分期正相关。PDGFRβ高表达率在Dukes’C和Dukes'D中较Dukes'A和Dukes'B为高(73.8%vs.56.1%,P=0.040)。PDGFRα高表达患者3年总生存率及3年无进展生存率显著低于低表达者(61.5%vs.72.1%,43.2%vs.72.8%,P<0.05);PDGFRα阳性表达者3年无进展生存率也显著低于阴性表达者(47.3%vs.72.1%,P<0.05)。多因素分析显示,PDGFRα和PDGFRβ的表达不是独立的预后因素。结论:结直肠癌组织中存在PDGFRα和PDGFRβ高表达,PDGFRα和PDGFRβ表达与结直肠癌进展相关。PDGFRα和PDGFRβ的表达不是独立的预后因素。

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺组织中TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ的表达

为探究TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ对小鼠乳腺组织纤维化的作用,本研究采用奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌(S.aureus)感染小鼠乳腺后,分别于感染后1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d采集小鼠乳腺组织,应用免疫组化染色检测TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ在小鼠乳腺组织细胞中的表达与分布,应用荧光定量PCR和western blot方法检测小鼠乳腺组织中TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβm RNA转录水平和这些蛋白的相对表达水平。结果显示,小鼠感染S.aureus前期(1 d^5 d) TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ主要在其炎性细胞和乳腺上皮细胞中表达,TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβm RNA转录水平和蛋白表达极显著高于对照组(p<0.001),感染S.aureus后期(7 d^21 d),细胞外基质较多,TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ在小鼠乳腺成纤维细胞和乳腺上皮细胞中均有表达,TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ的表达极显著高于对照组(p<0.001)。研究表明,S.aureus感染小鼠后,能够促进乳腺组织中TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ的表达,从而促进小鼠乳腺纤维化。本研究为深入探究生长因子受体在乳腺纤维化的分子作用机制奠定了基础。

卵巢浆液性癌组织中C-kit、PDGFRβ的表达及意义

采用免疫组化法检测10例正常卵巢、18例良性卵巢浆液性囊腺瘤、16例交界卵巢浆液性囊腺瘤、42例卵巢浆液性囊腺癌组织中的C-kit、PDGFRβ蛋白。结果显示,C-kit在卵巢浆液性囊腺癌、交界性卵巢浆液性囊腺瘤、良性卵巢浆液性囊腺瘤中阳性表达率分别为61.9%、43.8%、11.1%,正常卵巢组织为阴性,前两者与后者相比,P均<0.05;C-kit在卵巢浆液性癌中的表达与其组织学分级、FIGO分期有关,P均<0.05。PDGFRβ在卵巢浆液性囊腺癌、正常卵巢组织、良性卵巢浆液性囊腺瘤、交界性卵巢浆液性囊腺瘤中的阳性表达率分别为83.3%、70.0%、77.8%、81.3%,四者相比,P均>0.05;PDGFRβ蛋白在低分化与高分化卵巢浆液性囊腺癌中的表达相比,P<0.05。认为C-kit和PDGFRβ在卵巢浆液性癌的发生、发展过程中有一定作用。

PDGFRα和PDGFRβ在食管鳞癌中的表达及临床病理学意义

目的观察血小板衍生生长因子受体-α(platelet-derived growth factor receptor-α,PDGFRα)和血小板衍生生长因子受体-β(platelet-derived growth factor receptor-β,PDGFRβ)在食管鳞癌组织中的表达,探讨其在食管鳞癌发生中的表达以及与临床病理特征及患者预后的相关性。方法采用免疫组化EnVision法检测PDGFRα及PDGFRβ蛋白在131例食管鳞癌组织中的表达,分析二者的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、T分期、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、微血管密度、间质是否活化、CD68、复发、化疗、放疗情况和生存率的关系。结果 PDGFRα和PDGFRβ主要在食管鳞癌间质的成纤维细胞和炎症细胞中表达。PDGFRα在食管鳞癌活化的间质组织中的表达率明显高于未活化间质组织(P<0.05)。PDGFRβ在低分化的食管鳞癌组织中阳性表达率明显高于高分化和中分化组织(P<0.05);在进展期(T2-4)组织中的表达率明显高于早期鳞癌组织(P<0.01);在活化的间质组织中的阳性表达率明显高于未活化间质组织(P<0.05)。PDGFRα(P<0.01)和PDGFRβ(P<0.05)呈阳性的食管鳞癌患者生存率分别低于阴性者。PDGFRα和PDGFRβ蛋白在食管鳞癌组织中的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、微血管密度、CD68、复发、化疗和放疗情况均无相关。结论 PDGFRα和PDGFRβ与食管鳞癌间质的活化、肿瘤分化程度和进展以及患者的生存率密切相关。因此,PDGFRα与PDGFRβ在食管鳞癌中的表达对评价患者的预后有一定参考价值。

EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体的构建及其转染COS-7细胞条件的优化

目的构建EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体,并优化PEI介导基因转染COS-7细胞的条件。方法PCR扩增EGFP和PDGFRβ基因,依次连接至pcDNA3.1(+)质粒中,构建融合基因表达载体H-E-P-pcDNA3.1(+),经PEI介导转染COS-7细胞,并对转染条件进行优化。结果融合基因表达载体经酶切及测序证明构建正确。经PEI介导转染COS-7细胞的最佳条件为:DNA浓度2μg/ml,N/P比值15.5,在无血清条件下转染。此条件适用于滚瓶培养细胞的转染。结论已成功构建了EGFP-PDGFRβ融合基因表达载体,并优化了经PEI介导转染COS-7细胞的条件。

PDGF/PDGFRβ信号通路耦合成骨成血管作用的研究进展

骨的生长发育和修复重建过程中,成血管作用与成骨作用不可或缺,二者耦联是骨形成的关键因素。血小板衍生生长因子受体β属于第三类受体酪氨酸激酶,同相应的血小板衍生生长因子相结合后,通过下游信号级联反应,参与多种细胞和组织的生理活动。近年来随着组织工程与再生医学的广泛研究,不同学者发现该通路可以参与微血管系统和成骨细胞系的活动调节,表明该通路对于成骨成血管的耦合具有重要作用。

GIPC1 promotes tumor growth and migration in gastric cancer via activating PDGFR/PI3K/AKT signaling

The high mortality rate associated with gastric cancer(GC)has resulted in an urgent need to identify novel therapeutic targets for GC.This study aimed to investigate whether GAIP interacting protein,C terminus 1(GIPC1)represents a therapeutic target and its regulating mechanism in GC.GIPC1 expression was elevated in GC tissues,liver metastasis tissues,and lymph node metastases.GIPC1 knockdown or GIPC1 blocking peptide blocked the platelet-derived growth factor receptor(PDGFR)/PI3K/AKT signaling pathway,and inhibited the proliferation and migration of GC cells.Conversely,GIPC1 overexpression markedly activated the PDGFR/PI3K/AKT signaling pathway,and promoted GC cell proliferation and migration.Furthermore,platelet-derived growth factor subunit BB(PDGF-BB)cytokines and the AKT inhibitor attenuated the effect of differential GIPC1 expression.Moreover,GIPC1 silencing decreased tumor growth and migration in BALB/c nude mice,while GIPC1 overexpression had contrasting effects.Taken together,our findings suggest that GIPC1 functions as an oncogene in GC and plays a central role in regulating cell proliferation and migration via the PDGFR/PI3K/AKT signaling pathway.

ST13-PDGFRβ阳性急性髓系白血病1例报告并文献复习

2016年WHO造血与淋巴组织肿瘤分型标准将伴嗜酸性粒细胞增多的髓系/淋系肿瘤中具有PDGFRα、PDGFRβ、FGFR1重排或PCM1-JAK2者作为一个单独亚型定义[1]。嗜酸性粒细胞增多是这组疾病中常见且显著的特征,但在某些病例中缺失。受编码特定酪氨酸激酶基因重排的驱动,激酶结构域被激活,导致细胞信号传导失调,从而促进肿瘤细胞增殖和生存。其对酪氨酸激酶抑制剂(TKI)的敏感性已得到广泛认可。PDGFRβ位于染色体5q32上,该基因编码的蛋白质是血小板源性生长因子家族成员的细胞表面酪氨酸激酶受体,属于Ⅲ型酪氨酸激酶受体家族成员,其在胚胎发育、细胞增殖、存活、分化、趋化和迁移中起着重要的调节作用。目前已发现有40多种PDGFRβ重排对手基因。本文报道首例ST13-PDGFRβ融合基因阳性急性髓系白血病(AML)病例并进行文献复习。

PDGFRβ对人脐静脉血管内皮细胞增殖、凋亡和成管的影响

目的探索PDGFRβ在高糖培养的血管内皮细胞中的表达情况及其对血管内皮细胞增殖、凋亡及成管的影响和机制。方法在体外培养人脐静脉血管内皮细胞,构建高糖模型,转染si-RNA敲减PDGFRβ,将细胞分为Control组、35mM组、si-PDGFRβ+35mM组。qRT-PCR方法检测各组细胞PDGFRβ的mRNA表达情况;CCK8方法检测各组细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测细胞凋亡情况;血管形成实验检测成管能力的变化。结果与Control组相比,35mM组中PDGFRβ的mRNA表达升高(P<0.05)。在35mM组的细胞中敲低PDGFRβ后,细胞的增殖能力有所恢复,凋亡情况有所减少,成管能力降低(P<0.05)。结论PDGFRβ在高糖培养的人脐静脉内皮细胞中高表达,敲减PDGFRβ可以恢复其增殖能力、减轻凋亡情况、降低成管能力。

伴有PDGFRβ基因异常的骨髓增生异常/增殖性肿瘤综合征的临床和实验研究

目的 探讨伴有血小板衍生生长因子β（PDGFRβ）基因异常的骨髓增生异常/增殖性肿瘤（MDS/MPN）综合征的临床和实验室特征.方法 按常规方法制备骨髓细胞染色体标本,用RHG显带技术进行核型分析;分别应用PDGFRβ、PDGFRα、FGFR1分离探针,5号、12号全染色体涂抹探针,进行双色荧光原位杂交（D-FISH）和染色体涂抹分析;定量PCR方法检测JAK2 V617F基因.结果 27例患者临床和血液学改变符合MDS/MPN综合征诊断,用D-FISH技术从中筛查出4例患者伴有PDGFRβ基因的重排,其中2例用涂染技术证实为t（5;12）.4例PDGFRβ阳性的MDS/MPN患者均未检测到PDGFRα、FGFR1、JAK2 V617F基因异常.结论 PDGFRβ重排可见于部分MDS/MPN患者.这类疾病应被归入＂伴有PDGFRβ异常的髓系肿瘤＂的范畴,嗜酸粒细胞增高并不是它们的共同临床表现,用FISH技术筛查PDGFRβ基因是一种简便、可靠的检测手段,对于提高诊断水平及指导临床用药具有重要意义.

金黄色葡萄球菌对体外培养的奶牛乳腺成纤维细胞PDGF-BB及其受体PDGFRβ表达的影响

为研究不同浓度的金黄色葡萄球菌对奶牛乳腺成纤维细胞(BMFB)血小板源性细胞生长因子(PDGF-BB)及其受体PDGFRβ表达的影响,采用不同浓度的热灭活金黄色葡萄球菌(0、105、106和108 CFU/mL)作用于BMFB细胞,分别于不同的时间点(6、12、24和48h)采用RT-PCR法检测PDGF-BB及PDGFRβmRNA表达,Western-blot法检测PDGF-BB及PDGFRβ蛋白的表达。结果显示,金黄色葡萄球菌作用于BMFB后,PDGF-BB mRNA表达量的升高呈明显的时效关系和量效关系(P<0.05);PDGF-BB蛋白表达升高呈明显的时效关系(P<0.05)。PDGFRβmRNA的表达量较对照组升高,呈正量效关系和正时效关系,在12h达到峰值后下降,同时mRNA表达量呈负量效关系(P<0.05);PDGFRβ蛋白表达量呈正时效关系(P<0.05)。本研究证实了金黄色葡萄球菌可以上调BMFB PDGF-BB及PDGFRβmRNA和蛋白的表达。

急性髓系白血病伴嗜酸粒细胞增多和PDGFRβ突变一例

患者，男性，55岁。主因乏力6个月余，逐渐加重伴发热5d就诊。入院查体：体温38．5℃，CT示巨脾（长径19．0cm，厚6．2cm）。

PDGF及PDGFR在大鼠肾间质纤维化过程中的作用

目的探讨PDGF及其受体PDGFR在单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化中的作用。方法24只SD大鼠,采用单侧输尿管梗阻模型,分别于造模后第3、7、14及21天各处死6只大鼠,取双侧肾脏(未手术侧为对照组)分别做光镜和电镜检查,观察其病理改变。并以免疫组织化学法检测肾组织中PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α、PDGFR-β以及α-SMA(活化肌成纤维细胞的标志)和Ⅲ型胶原的表达。结果与对照组相比PDGF-A、PDGF-B、PDGFR-α、PDGFR-β在不同时间点的梗阻肾脏中表达均增强,主要定位于扩张或萎缩的皮质肾小管上皮细胞,肾间质有少量表达。随着梗阻时间的延长,肾间质表达α-SMA的细胞和Ⅲ型胶原逐渐增多,两者呈正相关关系,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。肾间质α-SMA、Ⅲ型胶原的表达与肾小管PDGF-B和PDGFR-β的表达呈正相关,而与PDGF-A和PDGFR-α的表达无明显相关性。结论大鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型中受损的肾小管过度表达PDGF-B、PDGFR-β,可促进肌成纤维细胞的形成和Ⅲ型胶原的沉积,在肾间质纤维化过程中可能起重要作用。

C-Kit和PDGFRα在卵巢上皮性癌肿瘤细胞及肿瘤间质中的表达差异

目的研究C-Kit与PDGFRα在卵巢上皮性癌患者的癌细胞及间质细胞中的表达差异。方法采用免疫组化SP法检测C-Kit、PDGFRα在91例卵巢上皮性肿瘤组织及20例正常卵巢组织中的表达,并分析他们在卵巢上皮性癌的癌细胞及间质细胞中的表达差异。结果 (1)C-Kit在正常卵巢组织及良性卵巢肿瘤组织中表达阳性率分别为10.0%、20.0%,在恶性卵巢肿瘤组织中的表达阳性率为50.7%,明显高于在正常卵巢组织及良性卵巢肿瘤组织中的表达阳性率,差异均有统计学意义(P<0.01)。PDGFRα在正常卵巢组织及良性卵巢肿瘤组织中表达阳性率分别为15.0%、25.0%,在恶性卵巢肿瘤组织中表达阳性率为63.4%,明显高于在正常卵巢组织及良性卵巢肿瘤组织中的表达阳性率,差异均有显著统计学意义(P<0.01)。(2)C-Kit在卵巢上皮性癌的癌细胞中的表达阳性率为50.7%,在间质细胞中表达的阳性率为4.2%,C-Kit在肿瘤间质细胞中的表达明显低于在癌细胞中的表达,差异有统计学意义(P<0.01),而PDGFRα在卵巢上皮性癌的癌细胞中的表达阳性率为63.4%,在间质细胞中表达的阳性率为87.3%,PDGFRα在卵巢上皮性癌间质细胞中的表达明显高于在癌细胞中的表达,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 (1)卵巢上皮性癌中C-Kit与PDGFRα蛋白表达的阳性率明显高于正常卵巢组织及卵巢良性上皮性肿瘤,提示C-Kit与PDGFRα蛋白参与了卵巢上皮性癌的发生。(2)C-Kit在卵巢上皮性癌间质细胞中的表达明显低于在癌细胞中的表达,而PDGFRα在卵巢上皮性癌间质细胞中的表达明显高于在癌细胞中的表达,C-Kit在卵巢癌间质细胞中的低表达可能是格列卫治疗卵巢癌效果不佳的原因之一,提示格列卫可能是通过抑制间质肿瘤或肿瘤间质中的C-Kit激酶的活性而发挥作用的。

TNF-α对培养视网膜微血管内皮细胞与周细胞PDGF-B／PDGFR-β表达的作用

目的:研究TNF-α对内皮细胞与周细胞PDGF-B/PDGFR-β表达的作用。方法:常规剂量100μg/L以及大剂量2450μg/LTNF-α作用于培养的视网膜微血管内皮细胞、周细胞,通过免疫组化、Western Blot、RT-PCR检测PDGF-B/PDGFR-β表达。结果:内皮细胞组大剂量TNF-α组,PDGF-B表达显著下调,8h表达开始出现下调,在12h,PDGF-B的表达量为原来的39%;在人视网膜微血管周细胞组,与对照组相比,常规TNF-α剂量组PDGFR-β表达并未出现显著改变;大剂量TNF-α组,与对照组相比,PDGFR-β表达在12h下调为45%。结论:TNF-α可引起内皮细胞与周细胞PDGF-B/PDGFR-β表达降低。

树舌多糖抑制胃癌MGC-803细胞增生及对PDGFR-β表达的影响

目的研究树舌多糖(ganoderma applanatum polysaccharides,GAPS)对人胃癌MGC-803细胞形态、细胞增生和PDGFR-β表达的影响,探讨树舌多糖抗肿瘤作用机制。方法倒置荧光显微镜观察细胞形态;MTT法检测树舌多糖对胃癌细胞MGC-803增生抑制作用;荧光显微镜和流式细胞仪检测树舌多糖作用后MGC-803细胞的PDGFR-β表达的情况。结果树舌多糖组细胞形状不规则,呈梭形或圆形、细胞间隙增大折光性差,生长状态差。树舌多糖对胃癌MGC-803细胞具有增生抑制作用,且呈时间及浓度依赖性。树舌多糖能下调MGC-803细胞PDGFR-β的表达,荧光显微镜和流式细胞仪检测结果一致,与细胞对照组比较有差异(P<0.05)。结论树舌多糖能抑制胃癌MGC-803细胞的增生,下调PDGFR-β的表达。

多重巢式RT-PCR对骨髓增殖性肿瘤中PDGFRα融合基因的快速检测

本研究旨在探讨多重巢式RT-PCR在骨髓增殖性肿瘤(MPN)中快速检测血小板衍生生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor alpha,PDGFRα)融合基因的应用价值。利用多重巢式RT-PCR方法对146例MPN患者的骨髓或外周血标本进行PDGFRα融合基因的快速检测。结果表明,146例MPN患者的骨髓或外周血标本中,有6例出现PDGFRα融合基因,其阳性率为4.11%,其中4例患者服用酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼治疗,均获疗效。结论:本研究建立的多重巢式RT-PCR方法具有灵敏度高、特异性好、检测快速等优点,可以准确快速确定MPN的分子类型,并为该病提供诊断和治疗的理论依据。

负压封闭引流对糖尿病足肉芽组织PDGFR表达的影响及其临床意义

目的探讨负压封闭引流（VSD）技术对糖尿病足肉芽组织PDGFR表达的影响及其临床意义。方法选择2010年1月~2014年2月在本院住院的糖尿病足2~3级的患者60例。将患者随机分成负压组和对照组,每组30例。负压组患者采用VSD技术治疗,对照组患者采用常规湿性换药的方法治疗。两组患者进行肉芽组织活检并比较两组的PDGFR含量。结果正常皮肤组织、溃疡边缘组织、溃疡组织中的血小板源性生长因子（PDGF）含量差异无统计学意义（P〉0.05）,但溃疡组织中的PDGFR含量明显降低（P〈0.05）。两组治疗前的PDGF亚基及PDGFR亚型含量差异无统计学意义（P〉0.05）;两组治疗后的PDGFR-α、PDGFR-β含量与治疗前比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;负压组治疗后的PDGFR-α、PDGFR-β含量与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 VSD技术能增加局部皮肤的血液循环,增加PDGFR含量,刺激成纤维细胞增生,具有一定的推广应用价值。

PDGF及PDGFR在肾间质纤维化中的研究进展

肾间质纤维化是慢性肾脏疾病发展到后期的病理学特征之一,它涉及一系列相互关联的复杂过程,细胞因子在其中发挥着重要作用。血小板源生长因子(PDGF)是目前已知多肽生长因子中最强的有丝分裂原,参与了多组织器官生理活动与病理损伤过程的重要细胞因子,其过度表达可导致多种疾病的产生,其在肾纤维化中的作用日益受到重视。本文就PDGF及其受体PDGFR的生物学特性及其在肾间质纤维化过程中的作用进行综述。