丙酮酸脱氢酶复合物缺陷Leigh综合征2例临床及PDHA1基因分析

目的探讨PDHA1基因突变所致丙酮酸脱氢酶复合物E1α亚单位缺陷Leigh综合征的临床特点及诊断和治疗。方法回顾分析2例因发育落后就诊,磁共振扫描提示Leigh综合征,并经生化代谢及基因检测确诊患儿的临床资料。结果 2例男性患儿分别于1岁1个月、4个月就诊,发育落后,肌张力障碍,肌力低下;头颅磁共振检查发现双侧基底节区对称性损害;血清丙酮酸、乳酸明显增高,血氨基酸及酯酰肉碱谱无异常。基因分析发现2例患儿X染色体PDHA1基因分别存在c.615C>G、c.605A>G错义突变,均为未报道的新突变,证实为丙酮酸脱氢酶复合物E1α亚单位缺陷所致Leigh综合征。结论 PDHA1基因突变患儿临床表现复杂多样,对于不明原因的发育落后儿童,应注意线粒体病的可能,基因检测有助于诊断、治疗及遗传咨询。

PDHA1基因突变致少年型Leigh综合征1例并文献复习

Leigh综合征（Leigh syndrome,LS）又称亚急性坏死性脑脊髓病,是一种严重的进行性神经系统变性病,绝大部分于儿童期发病,线粒体基因或核基因突变均可发病,目前国内外已报道了60多种致病基因。Leigh综合征根据发病年龄分为3型：新生儿型、经典婴幼儿型和少年型。

血管内皮细胞PDHA1基因特异性敲除鼠构建及其表型功能鉴定

背景:PDHA1基因是有氧呼吸链中不可或缺的基因,血管内皮细胞的能量代谢与很多疾病有关。构建血管内皮细胞PDHA1基因敲除鼠,有助于研究能量代谢在血管内皮细胞相关疾病中的作用。目的:繁育血管内皮细胞PDHA1基因特异性敲除小鼠并进行表型鉴定。方法:将PDHA1^((iΔEC/iΔEC))小鼠与PDHA1^((iΔEC/-))小鼠进行合笼繁育,获得更多的PDHA1^((iΔEC/iΔEC))小鼠进行后续实验。利用PCR和琼脂糖凝胶电泳进行基因鉴定,然后利用RT-PCR和Western blot检测敲除PDHA1后与能量代谢相关基因的mRNA及蛋白表达,利用VE-Cadherin与PDHA1双重免疫荧光判断PDHA1基因条件性敲除后PDHA1蛋白表达变化。结果与结论:利用琼脂糖凝胶电泳实验成功检测出子代小鼠基因型,包括PDHA1^((iΔEC/iΔEC))15只和PDHA1^((iΔEC/-))2只小鼠;RT-PCR和Western Blot检测发现PDHA1在转录水平和翻译水平都发生了下降,参与糖酵解途径的HK2蛋白及mRNA表达上升,参与有氧磷酸化途径方向IDH蛋白及mRNA表达下降;VE-cadherin和PDHA1双重免疫荧光共染色检测到PDHA1的表达下降。

PDHA1基因新发变异致丙酮酸脱氢酶E1-α亚单位缺陷女性患儿遗传学分析

目的对1例临床拟诊丙酮酸脱氢酶E1-α亚单位缺乏症(PHD)患儿及家系成员进行临床及基因突变分析,为早期诊断及遗传咨询提供依据。方法对就诊于柳州市妇幼保健院的1例PHD患儿的临床特点及基因检测进行回顾分析。以“丙酮酸脱氢酶复合物”“丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症”“PDHA1基因”“Pyruvate dehydrogenase complex”“Pyruvate dehydrogenase complex deficiency”“PDHA1”为关键词查阅在线人类孟德尔遗传数据库、PubMed数据库、中国知网及万方数据库从建库至2020年6月相关文献,对中国人PHD病例进行汇总分析。结果先证者女性,以运动发育落后为主要临床表现,实验室检查血乳酸5.62 mmol/L(参考值0.5~2.2 mmol/L),丙酮酸430μmol/L(参考值30~100μmol/L),血氨66μmol/L(参考值0~54μmol/L),头颅MRI检查提示双侧基底节区异常信号,伴脑萎缩、脑室增宽,符合Leigh综合征影像学改变。患儿PDHA1基因检出未报道变异位点c.508C>T(p.R170X),变异位点导致蛋白质合成提前终止,经致病性预测分析软件及ACMG变异分类为1类致病变异,父母双方未检测到相应的变异位点。共检索到中国人PHD病例15例,相关文献18篇,包括本次报道1例共16例,其中男性14例,女性2例。多数患者以神经肌肉系统疾病为首发症状,实验室检查提示乳酸、丙酮酸增高,影像学检查可见基底节区信号改变。中国人PDHA1基因检测共发现14种变异类型,以R378C和R126C突变为主。结论通过临床表现结合PDHA1基因诊断确诊1例丙酮酸脱氢酶E1-α亚单位缺乏症女性患儿,新变异位点的发现丰富了PDHA1基因突变谱。

丙酮酸脱氢酶复合物缺乏症1家系2例临床及遗传特点

丙酮酸脱氢酶复合物(pyruvate dehydroge-nase complex,PDHC)是一种分布于线粒体基质中的多酶复合体,通过催化丙酮酸的氧化脱羧反应生成乙酰辅酶A,有效连接糖酵解和三羧酸循环[1]。原核生物和真核生物的PDHC含有6种酶,丙酮酸脱羧酶(pyruvate decarboxylase,简称E1)、二氢硫辛酰胺乙酰转移酶(dihydrolipoamide acetyltransferase,简称E2)和二氢硫辛酰胺脱氢酶(dihydrolipoamide dehydrogenase,简称E3)是组成PDHC最关键的3种酶。

丙酮酸脱氢酶E1α亚基基因突变所致Leigh综合征的临床进展

Leigh综合征(Leigh syndrome,LS)是一种罕见的致死性亚急性脑病,是儿童线粒体病的常见表型,核基因及线粒体基因上多种基因位点突变均可导致这一罕见病,其中丙酮酸脱氢酶E1α亚基(PDHA1)基因所致的LS(PDH-LS)约占比10%,主要临床表现为肌无力、共济失调、神经退行性障碍等,但却缺乏特异性。该疾病预后较差,目前尚无特异性治疗方案,早期诊断及干预有助于改善PDH-LS预后,除了传统的药物治疗及改善营养状态外,生酮饮食亦是一种有益的治疗选择,因此早期明确诊断及相关基因型改变具有重大意义。LS临床表现多变且缺乏一致的特异性,为早期诊断治疗带来了挑战。文章讨论了PDH-LS的临床表现,并总结了文献报道的PDH-LS患者的表现及有预警意义的表现,以期提高其早期诊断率和相关的治疗建议,希望能够对此类患者的诊治有所帮助。

丙酮酸脱氢酶E1α缺乏症1例的临床表现与分子诊断

目的分析1例丙酮酸脱氢酶E1α缺乏症患儿PDHA1基因的变异特点及其相应的临床症状,为临床诊断、遗传咨询和产前诊断提供依据。方法对1例丙酮酸脱氢酶E1α缺乏症患儿的临床症状、生化检查及治疗效果进行分析;运用高通量测序技术对患儿及其父母外周血进行基因组DNA检测,运用Sanger测序对患儿姐姐进行阳性位点验证。结果患儿,男,3个月,持续性高乳酸血症,血乳酸9.05~11.04 mmol/L,不会抬头,反应欠灵敏。头颅磁共振成像提示双侧侧脑室略显僵直,胼胝体体部变薄,双侧枕骨发育不对称。3 h脑电图提示睡眠期左侧前中颞区为主尖波、尖慢复合波散发;睡眠期广泛性中-高波幅2.0~3.0 Hz慢波阵发。高通量基因测序结果提示,患儿PDHA1基因c.1243_1257dup15(p.V415-N419dup)半合子变异,结合临床表现确诊为丙酮酸脱氢酶E1α缺乏症。患儿母亲及姐姐未携带该变异,且排除母亲致病位点嵌合体的可能性。最后患儿因治疗无效于1岁3个月死亡。结论 PDHA1基因c.1243-1257dup15重复变异为新发变异,该变异可导致丙酮酸脱氢酶E1α缺乏症;丙酮酸脱氢酶E1α缺乏症的确诊需进行分子诊断。