三七总皂苷调控HIF-1α/PDHK1通路介导的CD4^(+)T细胞有氧氧化促进Treg分化的机制

目的观察三七总皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)调控HIF-1α/PDHK1通路介导的有氧氧化,探讨其对促进Naive CD4^(+)T细胞向Treg细胞分化的机制。方法磁珠分选C57BL/6小鼠脾脏Naive CD4^(+)T细胞,诱导其向Treg细胞分化并进行体外培养,将Naive CD4^(+)T细胞分为PNS处理组(5、10、20μg·mL^(-1))、PNS联合HIF-1α抑制剂(PX-478)组,并设置对照组,采用流式细胞术检测Treg细胞分化比例,Western blotting检测HIF-1α、PDHK1蛋白表达,实时荧光定量PCR检测HIF-1α、PDHK1、FOXP3 mRNA的表达,酶联免疫吸附实验检测细胞培养上清液中IL-10的水平。结果PNS可显著增加Treg细胞比例,并增加其IL-10的分泌水平,使细胞中FOXP3 mRNA的表达增加;同时抑制HIF-1α、PDHK1蛋白及mRNA的表达。10μmol·L^(-1)的PX-478处理细胞后再以10μg·mL^(-1)的PNS干预细胞,其对PDHK1、FOXP3的表达及Treg细胞的分化比例的调控作用与单独使用10μmol·L^(-1)的PX-478处理细胞无明显差异。结论PNS通过HIF-1α抑制PDHK1的表达而增强Naive CD4^(+)T细胞的有氧氧化,促进其向Treg细胞分化。