拟穴青蟹PDI保守区域的克隆与序列分析

蛋白二硫键异构酶（PDI）是真核生物重要的多功能蛋白，其基因结构在虾蟹类尚未报道．从拟穴青蟹Scyllapa。ramamosain（Estampador，1949）脑组织中分离纯化总RNA，经逆转录得到cDNA第一条链，并以之为模板利用RACE（rapid—amplificationofcDNAends）技术，扩增出一条950bp的cDNA．将所得cDNA克隆到质粒载体pTZS7R／T，转化大肠杆菌DH5a细胞并对筛选的阳性克隆测序．通过与目前数据库中序列的比较，在此cDNA编码蛋白中发现其中i01个氨基酸与其他物种已知蛋白二硫键异构酶（PDI）中的PDI_a_PDI_a＇_C保守区域相似率在64％～79％之间．确定此cDNA编码拟穴青蟹PDI_a_PDI_a＇_C保守区域．

一种基于表达序列标签(EST)的新型目标分子标记技术——保守区域扩增多态性(CoRAP)

CoRAP分子标记技术是一种基于表达序列标签的目标分子标记新技术,具有操作简单、重复性高和特异性强等优点。该分子标记的原理是:根据表达序列标签来设计1个固定引物,根据大多数内含子内部的一段保守序列设计另1个随机引物,在退火温度为52℃的常规3步法PCR程序下,扩增产生偏向表达序列标签附近区域的显性或共显性标记。该分子标记可以作为SRAP、TRAP标记有效补充的目标分子标记新技术,在生物多样性分析、遗传图谱构建、重要性状基因标记、QTL定位及分子标记辅助育种等方面均有较大的应用潜力。

杆状病毒Ac78 C末端保守区域的功能初步分析

杆状病毒模式种苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒（Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus，AcMNPV）的orf78（即Ac78）是最近被发现的杆状病毒核心基因，在杆状病毒的生活周期中具有重要功能．氨基酸序列分析表明，Ac78的C末端105～108位氨基酸区域在GroupINPVs旁系同源物中高度保守．为研究该保守区域在Ac78功能中的作用，利用Bac—to-Bac杆状病毒表达载体系统成功构建了缺失该保守区域，并且携带绿色荧光蛋白基因和多角体蛋白基因的Ac78截短补回型重组病毒（vAe78：del105．108）．荧光显微镜分析和病毒生长曲线测定结果表明，在vAc78：del105．108转染的Sf9细胞中，感染性的芽生型病毒粒子（buddedvirion，BV）产生量与Ac78全长补回型重组病毒（vAc78：HA）基本一致；电镜观察发现，在vAc78：del105．108转染的细胞中，呈现与vAc78：HA的现象一致的典型的杆状病毒感染特征，多粒包埋型病毒粒子（multiple nucleocapsid—enveloped occlusion-derived virion，M—ODV）以及包埋有M-ODV的包涵体均能正常形成；免疫荧光实验表明，在vAc78：del105．108感染的Sf9细胞中，从病毒感染细胞24h时开始，Ac78专一定位于感染细胞的内核膜附近，与vAc78：HA的现象一致．上述结果表明，Ac78的C末端105-108位氨基酸保守区域对于BV和M—ODV的有效产生以及Ac78的亚细胞定位非必需．

硫酯蛋白家族保守区域分析

硫酯蛋白家族(thioester-containing proteins,TEPs)广泛分布于动物界,在动物非特异性免疫反应中发挥了重要的作用,然而其家族成员多,分子进化关系复杂.本研究从基因数据库中挑取已收录TEPs家族各成员的氨基酸全序列,包括α2-巨球蛋白、补体3、补体4、murinoglobulins、卵巨球蛋白、妊娠区带蛋白,α-1-抑制因子等.多重序列比对分析TEPs家族各成员间功能位点和保守区域的变化,构建系统进化树分析TEPs家族分子进化.TEPs家族除保守的GC*EQ**硫酯键区域及两侧的脯氨酸残基,还有7个完全保守的氨基酸残基及G*****Q*T,FPETW,QTD,KPTVK等保守区域.上述分析结果可为深入研究TEPs家族分子进化及动物非特异性免疫进化提供参考.

压杆非保守稳定问题的边界区域单元法

本文利用作者在文[1]中提出的边界区域单元法,求解非保守力作用下的压杆稳定问题,建立了求解Beck杆Leipholz杆临界荷载的统一计算程序,并给出了不同边界条件下的临界荷载。

基于流行性感冒病毒保守区域的通用流行性感冒疫苗的研究进展

流行性感冒(流感)疫情频频暴发,严重危害人类健康和公共卫生。虽然接种流感疫苗能够起到有效的预防作用,但由于流感病毒易变异,使得流感疫苗只对疫苗株或与疫苗株高度相近的病毒株具有保护效果。因此,研制一种可抵御不同型或亚型流感病毒的通用疫苗成为流感疫苗研究的热点。现就基于流感病毒保守区域的通用流感疫苗的研究进展作一综述。

脂多糖保守表位模拟肽的筛选与鉴定

用针对脂多糖保守表位的单抗 2B4对噬菌体随机 12肽库进行亲和筛选 ,通过噬菌体ELISA实验及脂多糖(LPS)竞争抑制实验鉴定阳性克隆 .经三轮筛选后 ,与抗体结合的噬菌体得到明显富集 ,噬菌体ELISA结果显示 ,阳性率达 80 % .将其中 12个阳性噬菌体克隆做鼠伤寒杆菌和大肠杆菌LPS竞争抑制实验 ,抑制作用非常明显 ,有良好的剂量依赖关系 ,证明这 12个克隆与LPS具相似表位 .DNA测序并推导噬菌体展示肽的氨基酸序列为 ,GPPQWFFSQPQL (5 / 12 ,41 7% ) ,LPQYFWNTATTA (3/ 12 ,2 5 % ) ,FPQNHWNVPWAT (2 / 12 ,16 6 % ) ,HSQSFWNAPLAM和AHPWTHGYFPPL (1/ 12 ,8 3 % ) .实验结果表明 ,用 2B4抗体筛选到的噬菌体短肽克隆可模拟保守表位 ,即脂多糖的模拟肽 (位 ) .

论区域高校社会服务观念转变

区域高校必须及时转变社会服务观念以适应社会发展的要求。区域高校社会服务观念的转变,首先要进一步深化对社会服务的认识:区域高校开展社会服务,是高等教育发展的必然趋势,是区域社会经济发展的客观要求,是区域高校自身生存和发展的需要;其次,破除社会服务的观念性障碍,封闭保守思想,盲目自大思想,畏难情绪和等、靠、要思想。

12城市玩具零售年中调查报告 百姓消费趋保守 产品要实惠

2008年时已过半,中国玩具零售业"期中考试"成绩如何?近日,本刊与全国各区域中心城市有一定代表性的商场合作,组织了今年第二季度零售调查。调查表明,国内经济高通胀对消费的影响逐渐显现。百姓消费心理趋向保守,上半年玩具零售情况差强人意。不少商家调整了销售策略,在同种类别的玩具中,中高档品牌配搭,畅销玩具排行榜上不再是名牌的天下,显得更加多元化。本次调查得到北京、上海、广州、南京、杭州、武汉、沈阳、深圳、大连、桂林、东莞、中山12个城市共18家商场的大力支持。

保守场的充要条件及向量场的唯一性

本文指出一些文献中向量场唯一性命题的不严格之处，通过讨论线复连域保守场的充要条件，得到严格的唯一性命题。

旋度处处为零的矢量场必是保守场

矢量场的旋度是否处处为零,这是判断该矢量场是否是保守场的较为简单易行的方法,若矢量场的旋度处处为零,则该矢量场必是保守场。但是,《大学物理》1985年第2期发表了《矢量的旋度处处为零一定是保守场吗?》一文,该文通过对二个例子的分析:例一是一无穷长直线电荷在空间产生的静电场,其场强为(以直线电荷为Z轴)

中华人民共和国国务院令第646号——中华人民共和国保守国家秘密法实施条例

第一章 总则 第一条根据《中华人民共和国保守国家秘密法》（以下简称保密法）的规定，制定本条例。第二条国家保密行政管理部门主管全国的保密工作。县级以上地方各级保密行政管理部门在上级保密行政管理部门指导下，主管本行政区域的保密工作。

斑茅NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆与分析

根据已知NBS-LRR抗病基因[含有核苷酸结合位点(NBS)和富亮氨酸重复(LRR)的胞内受体蛋白基因]NBS结构域蛋白质的保守序列,设计简并引物,对斑茅基因组进行体外扩增,获得了对应区段的DNA片段,回收、克隆这些特异片段,测序分析,共获得8个片段序列。序列分析发现其中7个编号分别为RGA-Q1、RGA-Q2、RGA-Q3、RGA-Q4、RGA-Q5、RGA-Q6和RGA-Q7的片段推导的氨基酸序列均具有典型的NBS结构域,即P-loop(GGVGKTT)、Kinase-2a(VLDDVW)、Kinase-3a(GSR/KILVTTR)及疏水结构域HD(hydrophobic domain)。它们在NCBI上的登录号为EU685828、EU685829、EU685830、EU685831、EU685832、EU685833和EU685834。这些抗病基因同源片段(RGA)与已经克隆的N、L6、RPS2和Mi等11个抗病基因在氨基酸水平上的同源性为2.3%～39.8%,可进一步用作斑茅抗病候选基因的分子筛选及遗传图谱的构建。

双翅目昆虫线粒体基因组结构特点及其测序通用引物的设计和应用

研究双翅目昆虫线粒体基因组的结构特点,并设计其测序的通用引物,为今后双翅目昆虫线粒体基因组的研究提供参考和依据。利用比较基因组学和生物信息学方法,分析了已经完全测序的26个双翅目昆虫线粒体基因组的结构特点、碱基组成和保守区,并据此设计了双翅目昆虫基因组测序的通用引物。结果表明:双翅目昆虫线粒体基因组长14503～19517bp,其结构保守,含有37个编码基因,包括13个蛋白质编码基因,22个tRNA编码基因和2个rRNA编码基因,此外还包含一段长度差异很大的非编码区(AT富含区)。基因组内基因排列次序稳定,除个别基因外,其余都与黑腹果蝇Drosophila melanogaster基因排列次序一致。基因组的碱基组成不均衡,AT含量在72.59%～85.15%之间,碱基使用存在偏向性,偏好使用AC碱基。全基因组的核苷酸和氨基酸序列保守,共鉴定了11个保守区。在保守区内共设计了26对双翅目线粒体基因组测序通用引物,扩增的目标片段都在1200bp以内。将该套通用引物用于葱蝇Delia antiqua线粒体全基因组测序,结果证明其高效、合用。

油菜菌核病菌抗腐霉利菌株的生理生化特性及抗药机制初步分析

通过室内紫外线和药剂诱导,获得多株高抗腐霉利油菜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorum)突变体。与野生亲本菌株相比,抗性突变株(EC50>800μg/mL)在高糖(>40g/L蔗糖)和高盐(>5g/LNaCl)培养基上生长缓慢,表明对高渗透压比较敏感;菌丝相对电导率较高,显示细胞膜透性增大,胞内电解质渗出较多。试验还发现,在含药培养液中,亲本菌株菌丝内甘油大量合成和积累,增加462.45%,而抗药突变株甘油含量仅稍有增加或有所下降,说明抗腐霉利突变株对外界渗透压的调节能力较低。根据已报道组氨酸激酶(HK)基因序列设计特异引物,经PCR扩增和测序,获得油菜菌核病菌HK基因保守区域序列1605bp。抗、感腐霉利菌株HK基因保守区域在第45位、第81位和第625位碱基不同,但编码的氨基酸一致。因此,油菜菌核病菌对腐霉利的抗性及抗药菌株的高渗敏感性与HK基因保守区域碱基突变无关。

纳豆激酶分子结构与潜在应用价值分析

纳豆激酶因具有较强的溶血能力而著称。目前国内外大量研究人员聚焦于纳豆激酶研究,其开发利用已经获得了长足发展,但同时许多问题与不足也随之暴露出来。一方面是对纳豆激酶的开发利用大多局限于溶栓活性的利用与开发,低估了纳豆激酶应有的整体价值;其次是针对该酶开发和利用的方法过于传统,尚未形成组学大数据和生物信息学技术相结合的探索思维。因此,需要利用更为开阔的研究思路和开发手段来实现纳豆激酶开发利用的最大化。作者从纳豆激酶分子水平和家族分类层次上系统地阐述该酶分子特征,同时对纳豆激酶家族蛋白酶的应用现状进行分析,并对纳豆激酶研发前景进行了展望。

番茄myb基因片段的克隆及在过敏性反应时的表达

以烟草myb1中MYB保守区域编码序列的两个相对特异性序列为引物 ,以表现过敏性反应(hypersensitiveresponse,HR)的番茄苗中提取的RNA为模板 ,通过RT -PCR获取长度为 2 15bp的myb基因片段LeMYB1和LeMYB2 (GenBank核酸序列数据库登录号 :AY1312 30和AY1312 31)。两者只有第 6 3位碱基不同 ,前者序列为A ,而后者为G。Northern杂交分析表明 ,LeMYB相关基因表达时序与番茄苗HR的产生和发展呈密切正相关 ,因而可能在Cf

大肠杆菌与酵母菌基因特定序列信息参量的研究

提出核酸序列的矩阵表示形式,按位点定义了有生物学意义的信息参数M1(l)、M2(l)和M3(l)。着重研究了不同表达水平的大肠杆菌(Escherichiacoli,E.coli)的SD序列(Shine -Dalgarnoregion,SD)以及大肠杆菌(E.coli)和酵母菌(Yeast)基因起始、终止密码子邻近区域核酸序列的碱基关联性与保守性。并求出相应矩阵的本征值 ,给出了信息参量与基因表达水平的关系。发现信息参量体现了原核生物和真核生物翻译起始区域的显著差异 。

转录因子HSF4的生物信息学分析

热休克转录因子4（heat shock transcription factor 4,HSF4）是热休克转录因子HSF家族成员,近年发现HSF4除发挥调控热休克蛋白（heat shock protein,HSP）表达的功能外,亦直接或间接调节许多非热休克基因的表达,参与细胞生长发育及多种生理病理过程。现对9个物种的HSF4蛋白序列进行了多序列对比、进化痕迹分析和蛋白质特定功能区域分析,发现两个保守区域：一个是75-119保守区域,其部分位于文献报道的HSF家族的DNA结合区域,该区域呈现锤子状颈环结构,中部富含亲水氨基酸,提示该颈环结构有嵌入DNA结构内部解开其双链结构起转录调控的作用;另一保守区域在176-230,呈现卷曲螺旋（coil）结构,可能跟HSF4与DNA识别、结合、固定功能相关。对HSF4的生物信息学分析可以为其功能研究奠定理论基础。