基于树状PAMAM修饰的PDMS微流控芯片分离检测两种蛋白质

为提高聚二甲基硅氧烷(PDMS)微流体芯片的亲水性,抑制其对蛋白质的吸附,利用树状PAMAM通过物理涂覆的手段对其微通道的表面进行了修饰。对修饰后PDMS微流控芯片的亲水性和电渗流进行了考察,同时利用修饰后芯片对溶菌酶,核糖核酸酶A两种蛋白质进行了分离检测。结果表明,修饰后的PDMS微流控芯片微通道表面形成了一层均匀、稳定的亲水性涂层,有效抑制了对蛋白质的吸附,成功地对溶菌酶和核糖核酸酶A实现了分离,柱效分别达到6.93×10^(4) plates/m和7.92×10^(4) plates/m,同时修饰后的芯片具有良好的重现性和较长的使用寿命。

聚二甲基硅氧烷(PDMS)/玻璃微流控芯片电泳快速分离血清高密度脂蛋白亚类及临床应用研究

经梯度密度超速离心,高密度脂蛋白(HDL)分为HDL2和HDL3两亚型。HDL2抑制低密度脂蛋白(LDL)氧化功能受损是冠心病(CHD)发生发展的关键因素。因此,通过对HDL亚类进行分离,从而达到预测和诊断CHD的目的。本研究建立了用PDMS/玻璃微流控芯片快速电泳分离HDL亚类的方法。选择N-十二烷基-β-D-麦芽糖苷(DDM)、十二烷基硫酸钠(SDS)和羟丙基纤维素(HPC)共同修饰脂蛋白和泳道表面。在以含0.3 mmol/L SDS的50 mmol/L 3-(N-吗啉代)丙磺酸(MOPS)(pH 8.0)为样品缓冲液,含0.6%HPC的50 mmol/L MOPS(pH 8.0)为分离缓冲液,分离电压为260 V/cm的优化条件下,HDL2和HDL3在4 min内得到基线分离,二者的出峰时间和峰面积的相对标准差(RSD)分别是2.0%和2.7%,2.0%和2.9%,具有较好的重复性。临床标本研究发现,正常人血清标本可分离出HDL2和HDL3双峰,而CHD患者的HDL2峰面积显著减小,甚至消失。PDMS/玻璃微流控芯片分离HDL亚类是一种简单、快速、高效的用于分析CHD危险因子的方法。

聚二甲基硅氧烷微流控芯片电泳的临床应用研究

目的探讨聚二甲基硅氧烷(PDMS)微流控芯片电泳技术的临床应用价值。方法利用模塑法制作PDMS微流控芯片,选择二胺基二苯甲烷(DDM)与羟丙基纤维素(HPC)对PDMS进行修饰,有效消除蛋白在芯片壁面上的吸附。PDMS微流控芯片电泳分离DNA标准品、PCR多重产物及血清脂蛋白。结果 10、20、50、100、200bp的DNA片段得到了很好的基线分离及良好重现性,峰面积的相对标准偏差分别为4.8%、6.3%、5.9%、3.5%、3.4%。线粒体疾病患者的多重PCR产物片段165、266、378、881bp在4min内实现了基线分离。血清低密度脂蛋白亚型、小而密低密度脂蛋白(sdLDL)实现了快速检测,冠心病组血清sdLDL检出率与健康体检组差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PDMS微流控芯片电泳具有简单、快速、高效、低耗等特点,适合临床常规分析。