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氨基PEG化试剂的合成及其修饰能力的测定
被引量:
5
1
作者
常远
唐微
+1 位作者
郑仲承
刘新垣
《生物化学杂志》
CSCD
1996年第4期496-500,共5页
分别用氰脲酰氯法及N-羟基丁二酰亚胺活性酯法合成了蛋白质的氨基PEG化试剂mPEGcc和mPEG-GS,并研究了它们对蛋白质的修饰作用。在合成过程中,通过分析反应体系中微量水分的存在对mPEGcc合成效率的影响,及溶...
分别用氰脲酰氯法及N-羟基丁二酰亚胺活性酯法合成了蛋白质的氨基PEG化试剂mPEGcc和mPEG-GS,并研究了它们对蛋白质的修饰作用。在合成过程中,通过分析反应体系中微量水分的存在对mPEGcc合成效率的影响,及溶剂中小分子可活化杂质成分对mPEG-GS合成产物质量的影响,发现去水剂的存在,可使mPEGce产率提高7倍;二氧六环优于DMF,且二氧六环的预处理也很重要。同时,为了测定活化PEG修饰蛋白质的效能,首次以BSA为模型蛋白,建立起一种测定活化PEG修饰能力的方法,应用此方法能直观而又准确地比较各种方法活化的PEG对蛋白质的修饰能力,具有普遍的意义。
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关键词
生化试剂
peg
化试剂
合成
修饰能力
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职称材料
新方法活化聚乙二醇修饰细胞因子类药物
被引量:
5
2
作者
何明磊
熊玉春
魏东芝
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2005年第3期158-161,共4页
文章提供一种活化聚乙二醇的新方法。其主要步骤是先把聚乙二醇两端的两个羟基转化为羧基,然后在活化两个羧基的同时,用含有氨基的试剂将其中的一个活化端封闭,从而造成单端活化的状态,使之适合对蛋白质等物质进行修饰反应。使用该方法...
文章提供一种活化聚乙二醇的新方法。其主要步骤是先把聚乙二醇两端的两个羟基转化为羧基,然后在活化两个羧基的同时,用含有氨基的试剂将其中的一个活化端封闭,从而造成单端活化的状态,使之适合对蛋白质等物质进行修饰反应。使用该方法活化的分子质量为10ku的聚乙二醇修饰了重组人白细胞介素2,分子质量为12ku的聚乙二醇修饰了重组人干扰素α2b,取得了较好的修饰效果。
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关键词
聚乙二醇
活化
细胞因子
修饰
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职称材料
天花粉蛋白结构改造对引产活性的影响
被引量:
3
3
作者
何贤辉
孙荭
+3 位作者
曾耀英
徐丽慧
邵鹏柱
谭兆祥
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
2000年第4期11-15,共5页
目的 :研究结构改造对天花粉蛋白 (TCS)引产活性的影响。方法 :利用定点突变将TCS第 2 19位的天冬酰胺残基改变为半胱氨酸残基 (Q2 19C)以供定点聚乙二醇 (PEG)修饰 ,测定修饰产物的致核糖体失活活性及小鼠中期引产活性。结果 :PEG修饰...
目的 :研究结构改造对天花粉蛋白 (TCS)引产活性的影响。方法 :利用定点突变将TCS第 2 19位的天冬酰胺残基改变为半胱氨酸残基 (Q2 19C)以供定点聚乙二醇 (PEG)修饰 ,测定修饰产物的致核糖体失活活性及小鼠中期引产活性。结果 :PEG修饰使TCS的致核糖体失活活性约降低90 % ;相对分子质量为 50 0 0的PEG修饰对引产活性无明显影响 ,而相对分子质量为 2 0 0 0 0的PEG修饰却明显增强引产活性 ;此外 ,PEG修饰使TCS的体内半衰期大为延长。结论 :PEG定点修饰TCS可加强其引产活性 ,原因可能是较长的体内半衰期延长了药物作用的时间。
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关键词
天花粉蛋白
修饰
引产活性
结构改造
引产药物
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职称材料
葡激酶聚乙二醇修饰及活性鉴定研究
被引量:
2
4
作者
白垒
徐彦颖
+1 位作者
汪德强
周建中
《重庆医科大学学报》
CSCD
北大核心
2017年第7期893-897,共5页
目的:通过对葡激酶(staphylokinase,SAK)基因序列进行定点突变,表达突变蛋白,并对其进行聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)修饰。通过分子筛分离得到较高纯度修饰蛋白,在体内外鉴定其溶栓活性。方法:根据SAK晶体结构及抗原位点选择突...
目的:通过对葡激酶(staphylokinase,SAK)基因序列进行定点突变,表达突变蛋白,并对其进行聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)修饰。通过分子筛分离得到较高纯度修饰蛋白,在体内外鉴定其溶栓活性。方法:根据SAK晶体结构及抗原位点选择突变位点,构建突变质粒,并在大肠杆菌中表达半胱氨酸(cysteine,Cys)突变蛋白S-cys;分离纯化目的蛋白;对目的蛋白在不同条件下进行聚乙二醇修饰,筛选最优修饰条件;分离修饰蛋白与未修饰蛋白,得到较高纯度的修饰蛋白peg-S-cys,通过纤维蛋白平板溶圈实验和动物栓塞模型的构建初步对其生物活性进行验证。结果:原核表达、纯化后得到纯度较高的S-cys突变体蛋白;优化筛选S-cys蛋白的PEG修饰实验参数,得到最佳修饰条件;应用分子筛分离纯化,成功获得纯度较高的peg-S-cys蛋白(纯度大于90%);初步验证peg-S-cys具有溶栓活性。结论:通过对蛋白质基因序列的定点突变,成功实现了蛋白质的聚乙二醇定点修饰,在体外和体内初步验证其活性,为蛋白质改造提供了一种新的方法与思路。
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关键词
蛋白质改造
聚乙二醇修饰
定点突变
活性验证
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职称材料
聚乙二醇活性酯的制备
5
作者
田芳
韩灵翠
陈恬生
《太原工业大学学报》
1995年第2期91-94,共4页
本文研究了制备聚乙二醇活性酯的方法。首先将聚乙二醇(PEG)转化为羧酸,然后活化成为活性酯,该活性酯用于修饰SOD.此方法所用时间短,条件易掌握,与SOD连接效果较好。
关键词
聚乙二醇活性酯
活化
修饰
超氧化物歧化酶
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职称材料
题名
氨基PEG化试剂的合成及其修饰能力的测定
被引量:
5
1
作者
常远
唐微
郑仲承
刘新垣
机构
中国科学院上海生物化学研究所
出处
《生物化学杂志》
CSCD
1996年第4期496-500,共5页
文摘
分别用氰脲酰氯法及N-羟基丁二酰亚胺活性酯法合成了蛋白质的氨基PEG化试剂mPEGcc和mPEG-GS,并研究了它们对蛋白质的修饰作用。在合成过程中,通过分析反应体系中微量水分的存在对mPEGcc合成效率的影响,及溶剂中小分子可活化杂质成分对mPEG-GS合成产物质量的影响,发现去水剂的存在,可使mPEGce产率提高7倍;二氧六环优于DMF,且二氧六环的预处理也很重要。同时,为了测定活化PEG修饰蛋白质的效能,首次以BSA为模型蛋白,建立起一种测定活化PEG修饰能力的方法,应用此方法能直观而又准确地比较各种方法活化的PEG对蛋白质的修饰能力,具有普遍的意义。
关键词
生化试剂
peg
化试剂
合成
修饰能力
Keywords
Synthesis of
peg
ylation reagent,Determination of modifying capability of activated
peg
,Chemical
modification
分类号
TQ421.22 [化学工程]
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职称材料
题名
新方法活化聚乙二醇修饰细胞因子类药物
被引量:
5
2
作者
何明磊
熊玉春
魏东芝
机构
华东理工大学生物反应器国家重点实验室鲁华生物技术研究所
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2005年第3期158-161,共4页
文摘
文章提供一种活化聚乙二醇的新方法。其主要步骤是先把聚乙二醇两端的两个羟基转化为羧基,然后在活化两个羧基的同时,用含有氨基的试剂将其中的一个活化端封闭,从而造成单端活化的状态,使之适合对蛋白质等物质进行修饰反应。使用该方法活化的分子质量为10ku的聚乙二醇修饰了重组人白细胞介素2,分子质量为12ku的聚乙二醇修饰了重组人干扰素α2b,取得了较好的修饰效果。
关键词
聚乙二醇
活化
细胞因子
修饰
Keywords
peg
,
activation
,
cytokines
,
modification
分类号
O633.2 [理学—高分子化学]
Q511 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
天花粉蛋白结构改造对引产活性的影响
被引量:
3
3
作者
何贤辉
孙荭
曾耀英
徐丽慧
邵鹏柱
谭兆祥
机构
暨南大学组织移植与免疫实验中心
香港中文大学生物化学系
香港中文大学生理学系
出处
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
2000年第4期11-15,共5页
基金
国家自然科学基金 (395 70 82 2 )
香港研究基金委员会基金 (CUHK374/ 95M)资助项目
文摘
目的 :研究结构改造对天花粉蛋白 (TCS)引产活性的影响。方法 :利用定点突变将TCS第 2 19位的天冬酰胺残基改变为半胱氨酸残基 (Q2 19C)以供定点聚乙二醇 (PEG)修饰 ,测定修饰产物的致核糖体失活活性及小鼠中期引产活性。结果 :PEG修饰使TCS的致核糖体失活活性约降低90 % ;相对分子质量为 50 0 0的PEG修饰对引产活性无明显影响 ,而相对分子质量为 2 0 0 0 0的PEG修饰却明显增强引产活性 ;此外 ,PEG修饰使TCS的体内半衰期大为延长。结论 :PEG定点修饰TCS可加强其引产活性 ,原因可能是较长的体内半衰期延长了药物作用的时间。
关键词
天花粉蛋白
修饰
引产活性
结构改造
引产药物
Keywords
trichosanthin
site-directed mutagenesis
peg
modification
abortifacient activity
分类号
R979.22 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
葡激酶聚乙二醇修饰及活性鉴定研究
被引量:
2
4
作者
白垒
徐彦颖
汪德强
周建中
机构
重庆医科大学附属第一医院心血管内科
重庆医科大学感染性疾病分子生物教育部重点实验室
出处
《重庆医科大学学报》
CSCD
北大核心
2017年第7期893-897,共5页
文摘
目的:通过对葡激酶(staphylokinase,SAK)基因序列进行定点突变,表达突变蛋白,并对其进行聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)修饰。通过分子筛分离得到较高纯度修饰蛋白,在体内外鉴定其溶栓活性。方法:根据SAK晶体结构及抗原位点选择突变位点,构建突变质粒,并在大肠杆菌中表达半胱氨酸(cysteine,Cys)突变蛋白S-cys;分离纯化目的蛋白;对目的蛋白在不同条件下进行聚乙二醇修饰,筛选最优修饰条件;分离修饰蛋白与未修饰蛋白,得到较高纯度的修饰蛋白peg-S-cys,通过纤维蛋白平板溶圈实验和动物栓塞模型的构建初步对其生物活性进行验证。结果:原核表达、纯化后得到纯度较高的S-cys突变体蛋白;优化筛选S-cys蛋白的PEG修饰实验参数,得到最佳修饰条件;应用分子筛分离纯化,成功获得纯度较高的peg-S-cys蛋白(纯度大于90%);初步验证peg-S-cys具有溶栓活性。结论:通过对蛋白质基因序列的定点突变,成功实现了蛋白质的聚乙二醇定点修饰,在体外和体内初步验证其活性,为蛋白质改造提供了一种新的方法与思路。
关键词
蛋白质改造
聚乙二醇修饰
定点突变
活性验证
Keywords
protein
modification
polyethylene glycol(
peg
)
modification
site-specific mutagenesis
active verification
分类号
Q816 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
聚乙二醇活性酯的制备
5
作者
田芳
韩灵翠
陈恬生
机构
太原工业大学
出处
《太原工业大学学报》
1995年第2期91-94,共4页
文摘
本文研究了制备聚乙二醇活性酯的方法。首先将聚乙二醇(PEG)转化为羧酸,然后活化成为活性酯,该活性酯用于修饰SOD.此方法所用时间短,条件易掌握,与SOD连接效果较好。
关键词
聚乙二醇活性酯
活化
修饰
超氧化物歧化酶
Keywords
polyethylene glycol(
peg
)
active ester of
peg
activate
modification
superoxide dismutase(SOD)
分类号
TQ464.8 [化学工程—制药化工]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
氨基PEG化试剂的合成及其修饰能力的测定
常远
唐微
郑仲承
刘新垣
《生物化学杂志》
CSCD
1996
5
下载PDF
职称材料
2
新方法活化聚乙二醇修饰细胞因子类药物
何明磊
熊玉春
魏东芝
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2005
5
下载PDF
职称材料
3
天花粉蛋白结构改造对引产活性的影响
何贤辉
孙荭
曾耀英
徐丽慧
邵鹏柱
谭兆祥
《暨南大学学报(自然科学与医学版)》
CAS
CSCD
2000
3
下载PDF
职称材料
4
葡激酶聚乙二醇修饰及活性鉴定研究
白垒
徐彦颖
汪德强
周建中
《重庆医科大学学报》
CSCD
北大核心
2017
2
下载PDF
职称材料
5
聚乙二醇活性酯的制备
田芳
韩灵翠
陈恬生
《太原工业大学学报》
1995
0
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职称材料
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