PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体-TK对裸鼠移植性肝癌细胞靶向杀伤作用研究

目的研究PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK对人肝癌细胞系SMMC-7721裸鼠移植瘤模型的靶向性治疗作用。方法建立人原发性肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分成肿瘤对照组、纯自杀基因组、PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK组3组。对照组不作任何处理,实验组于瘤体内分别直接注射纯自杀基因、PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK,同时于裸鼠腹腔内注射GCV,观察不同时段皮下肿瘤的生长情况并做病理学检查,免疫组化法检测肿瘤微血管密度(MVD)以及血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达量,原位末端标记(TUNEL)法检测细胞原位凋亡。同时,用RT-PCR检测肿瘤鼠心,肝,肾的自杀基因表达情况。结果裸鼠皮下成瘤率100%;研究PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK组的肿瘤体积、血清AFP含量、肿瘤MVD和VEGF表达强度均明显低于对照组、纯自杀基因组(P<0.05),细胞凋亡指数都明显高于后两组(P<0.05),可见较多的凋亡细胞。RT-PCR测示肿瘤鼠心,肝,肾未见自杀基因表达,而肿瘤细胞则出现自杀基因表达。结论PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体-TK可显著抑制肿瘤的生长,并对肿瘤治疗具有靶向性,是一种较为理想的肝脏肿瘤靶向给药系统,有望成为治疗原发性肝癌的新型生物制剂之一。

pEGFP-AFP-TK重组真核表达载体的构建及在PEG-PEI/Fe_3O_4纳米磁流体介导下转染肝癌细胞

目的:构建甲胎蛋白(AFP)启动子介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)重组真核表达载体,并检测其在AFP阳性肝癌细胞株的特异性表达。方法:PCR扩增AFP基因启动子、HSV-TK基因,将上述片段插入EGFP-N1载体的多克隆位点,构建pEGFP-AFP-TK重组表达载体,通过包裹PEG-PEI/Fe3O4纳米磁流体,经其介导,转染AFP阳性肝癌细胞株HepG2和AFP阴性肝癌细胞株SMMC7721,利用增强型绿色荧光蛋白及Western blotting法检测目的基因在2种细胞系中的表达。结果与结论:肝癌特异性真核表达载体pEGFP-AFP-TK构建成功。利用增强型绿色荧光蛋白及Western blotting法可以检测到嵌合AFP启动子的pEGFP-AFP-TK重组真核表达载体能够特异性在AFP阳性的肝癌细胞株表达,而在AFP阴性的肝癌细胞株中基本不表达。

载TK基因PEG-PEI Fe_3O_4纳米磁流体体外肿瘤细胞抑制的研究

目的:研究载TK基因PEG-PEIFe3O4纳米磁流体体外肿瘤细胞抑制特性。方法:以RT-PCR方法鉴定其在各细胞系中mRNA水平上的表达状况。采用MTT法研究载TK基因纳米颗粒体外抑制肿瘤细胞的生长作用。结果:PEG-PEIFe3O4纳米磁流体能有效的转染pAFP-TK进入AFP阳性的HepG2细胞,并在细胞内得以正常表达。MTT法显示,AFP阳性的细胞在转染pAFP-TK后对GCV的敏感性大大提高,细胞存活率明显下降。结论:PEG-PEIFe3O4纳米磁流体能高效转染pAFP-TK质粒进入细胞,并在AFP阳性肝癌细胞中获得特异性表达,加用GCV后,还可高效杀伤AFP阳性肝癌细胞。

磁性纳米颗粒Fe_3O_4@PEI介导靶向自杀基因联合磁流体热疗对肝癌移植瘤的抑制作用

目的:探讨磁性纳米颗粒Fe_3O_4@PEI介导靶向自杀基因联合磁流体热疗对肝癌移植瘤的特异性杀伤作用。方法:亚克隆基因重组法构建靶向肝癌的自杀基因p[HRE]AFP-HSVTK和肿瘤细胞成像报告基因载体p[HRE]AFP-Luc,并用限制性内切酶凝胶电泳法检测重组质粒是否构建成功。共沉淀法制备Fe_3O_4纳米粒并以聚乙烯亚胺(PEI)修饰后得到磁性纳米颗粒Fe_3O_4@PEI,将其作为肿瘤基因治疗的载体和磁流体热疗的介质,并利用透射电镜、粒径仪、傅里叶转换红外光谱等对Fe_3O_4@PEI进行表征鉴定。利用小动物活体成像仪检测Fe_3O_4@PEI系统运送报告基因p[HRE]AFP-Luc至荷瘤裸鼠后的生物发光信号。p[HRE]AFP-HSVTK/Fe_3O_4@PEI作用于肝癌细胞后,以MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测凋亡细胞比例,动物实验验证体内肿瘤生长速度及瘤体质量抑制效果,并用透射电镜分析肿瘤组织的亚细胞结构。结果:成功构建磁性纳米颗粒Fe_3O_4@PEI以及重组载体p[HRE]AFP-HSVTK和p[HRE]AFP-Luc,经尾静脉注射Fe_3O_4@PEI运送的p[HRE]AFP-Luc后,活体成像系统显示仅能在裸鼠肿瘤组织检测到明显的成像信号,其主要器官病理组织分析无明显病理损伤。在体外肿瘤细胞杀伤试验中,联合治疗组细胞增殖抑制率分别高于磁流体热疗组和基因治疗组([76.02±7.33)%vs (42.31±4.28)%、(47.76±4.81)%,均P<0.05],联合治疗组瘤细胞的凋亡率高于单独热疗组和基因治疗组([34.05±3.41)%vs (14.41±1.55)%、(11.64±1.20)%,均P<0.01]。体内治疗实验显示,联合治疗组移植瘤体积增长明显减慢甚至下降,瘤块质量显著小于其他单独治疗组(P<0.05);瘤块细胞亚结构出现明显的凋亡形态。结论:自杀基因p[HRE]AFP-HSVTK对肝癌细胞具有选择性杀伤作用,Fe_3O_4@PEI可以作为有效的基因治疗载体和磁流体热疗的介质,其介导的肝癌靶向治疗联合磁流体热疗能特异地抑制肝癌移植瘤。

载TK基因PEG-PEI Fe_3O_4纳米磁流体的制备及其相关性质

目的:制备载pAFP-TK基因PEG-PEIFe3O4纳米磁流体并探讨其相关特性。方法:用化学共沉淀法制备PEG-PEIFe3O4纳米磁流体,将pAFP-TK自杀基因表达质粒包裹,形成载TK基因的PEG-PEIFe3O4纳米磁流体。结果:粒径分析仪及原子力显微镜检测载TK基因PEG-PEIFe3O4纳米磁流体平均粒径202.6nm,分布均匀,无黏附团聚。琼脂糖凝胶电泳分析PEG-PEIFe3O4纳米磁流体与DNA比例达10∶1时,结合率最高,达93.56%。PEG-PEIFe3O4纳米磁流体中的DNA在37℃、DNaseI及血清存在下消化数小时后,仍然保持结构的完整。结论:载pAFP-TK基因表达质粒的PEG-PEIFe3O4纳米磁流体与DNA有较高的结合率,可以有效地保护质粒DNA等特性。

医用纳米级Fe_3O_4磁流体的急性毒理学实验研究

目的 检测医用纳米级Fe3 O4磁流体的急性毒性 ,为进一步研究其长期毒性以及载附药物的临床试验打下基础。方法 按不同浓度不同容积分别通过口服法、静脉注射法及腹腔注射法给予小鼠医用纳米级Fe3 O4磁流体 ,观察小鼠的急性毒性反应和主要脏器的病理学改变。结果 小鼠口服半数致死剂量LD50 >2 10 4 8mg/kg ,最大无毒性剂量ED0 为 32 0 10mg/kg ;静脉注射LD50 >4 38 5 0mg/kg ,ED0 为 16 0 0 5mg/kg ;腹腔注射LD50 >15 78 6mg/kg ,ED0 为 32 0 10mg/kg。主要脏器未见明显病理改变。 结论 医用纳米级Fe3 O4磁流体在动物体内的急性毒性很低 ,可以考虑作为药物载体。

纳米Fe_3O_4磁流体的制备及其影响因素研究

通过液相共沉淀法制备了Fe3O4水基磁流体,选择油酸作为表面活性剂,获得油酸包覆的Fe3O4纳米粉,将其分散于有机溶剂中,制备了纳米Fe3O4有机基磁流体。采用X-Ray衍射分析仪和粒径分布仪分析了生成物的结构和粒径分布;用FT-IR和高分辨透射电镜表征了生成物的成分和形貌。结果表明:制得的立方晶体纳米Fe3O4平均粒径为16.3 nm,FT-IR图谱中1 593、1 736和2 926 cm-1等处的吸收峰很强烈,这充分说明该纳米粒子被油酸很好地包覆;选择油酸作为表面活性剂,起到表面改性和萃取出纳米粒子的作用;制得的油酸包覆纳米Fe3O4粒子能够稳定分散于有机溶剂中。

纳米Fe_3O_4磁流体的制备及其性能研究

研究了化学共沉淀法制备Fe3O4纳米磁性液体的工艺过程,采用简易的方法对所制得的磁流体进行了检测和表征.对制备磁流体过程中的影响因素作了简单的分析并采用六因素四水平的正交实验对各因素进行了优化,得到了较佳的制备工艺.反应过程中保持pH值一直处于9～10之间,铁盐浓度为0.1mol/L,其中Fe2+/Fe3+为1:1,表面活性剂PEG4000的加入量为0.77g(即mFe3O4/m PEG4000=1:1),机械搅拌速率为1000r/min,采用机械搅拌和超声搅拌交替进行,反应温度为60℃并在此温度下保温陈化30min.XRD分析表明产物微粒达到34.5nm,采用TEM对磁流体悬浮液进行分析发现悬浮颗粒的粒径在20～40nm之间.

硅油基铁磁流体基体材料纳米Fe_3O_4微粒的研制

纳米Fe3O4微粒是硅油基铁磁流体的基体材料,其粒径的大小直接影响铁磁流体的磁性能和稳定性。为了研制出满足要求的Fe3O4微粒,文章探讨了化学共沉淀法制备纳米Fe3O4微粒过程中,主要工艺参数的变化对Fe3O4微粒形成和粒径的影响,根据铁磁流体的稳定性和饱和磁矩的不同,确定了制备Fe3O4微粒的适宜粒径及工艺条件。

纳米Fe3O4油基磁流体制备及性质研究

用共沉淀法制备磁流体的磁核一纳米Fe3O4，液体石蜡作基液和混合表面活性剂作分散介质而成功地制备出满足制备磁性药物微球需要的油基磁流体。研究了纳米Fe3O4、液体石蜡用量，表面活性剂的种类和组成比以及不同温度对磁流体性质的影响。并用XRD、TEM、旋转粘度计、磁天平等对磁流体的物相、粘度、磁性以及稳定性等进行了表征。

双层包覆纳米Fe_3O_4颗粒水基磁流体的制备及表征

采用化学共沉淀法制备了纳米Fe_3O_4颗粒,以油酸钠和十二烷基苯磺酸钠先后进行两次包覆,制备出了稳定性较高的水基磁流体;用XRD、IR、TEM、VSM等研究了Fe_3O_4纳米颗粒的结晶情况、表面官能团的变化、粒径大小和磁性能,并对影响制备磁流体的因素进行了讨论。结果表明:双层包覆纳米Fe_3O_4颗粒水基磁流体的稳定性显著提高,其比饱和磁化强度达到了47.06Am^2·kg^(-1)。

Fe_3O_4/PANI抗氧化水基磁流体的制备与表征

在无氮气保护条件下，用化学共沉淀法制备了四氧化三铁（Fe3O4）纳米颗粒，并通过表面原位合成法将颗粒用聚苯胺（PANI）包裹，由此获得兼具磁性和导电性能的纳米四氧化三铁／聚苯胺（Fe3O4／PANI）材料。作者称其为Fe3O4／PANI抗氧化水基磁流体。透射电子显微镜（TEM）分析表明，该法制备的Fe3O4／PANI复合粒子的粒径在30-50nm，其分散性能比包裹前的Fe3O4粒子明显改善。红外光谱（FTIR）和X射线衍射（XRD）测试结果发现，Fe3O4粒子及Fe3O4／PANI复合粒子具有不同的物态和晶相结构。对纳米复合粒子的抗氧化性能和磁性能的检测证实，原位合成的Fe3O4／PANI复合粒子不仅能有效防止在空气中被氧化，还可在磁场环境中实现快速富集、定位，为Fe3O4／PANI纳米复合粒子在生物医学领域的应用提供了可能。

水热法制备的Fe_3O_4磁流体

用水热法制备了纳米Fe3O4粒子,通过选用合适的分散剂和采用超声波分散的方法,制备出在重力场和磁场中稳定性好的水基磁流体,由正交实验结果分析出了影响水基Fe3O4磁流体性能的主要因素。最终得到最佳的反应条件:浓NH3H2O(AR)作为pH调节剂,Fe3+/Fe2+的比值R=1.75,水热反应温度t=160℃,反应时间τ=5h。采用XRD、粒度仪和磁天平等对所制备的产物进行了分析表征,确定产物为单一相的Fe3O4,平均粒度为35nm,比表面积为85m2/g,饱和磁化强度为80Am2/kg;所制得的磁流体在320mT的强磁场中无明显的分层现象,在可见光的照射和磁场共同作用下,肉眼可以看到有明亮的光环产生。

多聚磷酸钠改性水基Fe_3O_4磁流体的制备与表征

采用多聚磷酸钠(STPP)对Fe3O4磁性纳米粒子进行表面改性,制备稳定的水基磁流体。通过傅里叶变换红外光谱(FTIR)、热重分析(TG)、透射电镜(TEM)、X射线衍射(XRD)、X射线光电子能谱(XPS)、振动样品磁强计(VSM)及Zeta电位仪对所制备的磁流体进行表征。结果表明,STPP包覆于Fe3O4磁性纳米粒子的表面,当pH>3时,粒子表面带有负电荷;磁性测试结果表明,STPP/Fe3O4磁性纳米粒子具有超顺磁性,其饱和磁化强度为62.3 A.m2.kg-1。

Fe3O4磁流体制备及磁性能研究

采用共沉淀法制备了3种不同粒径的Fe3O4纳米粒子,并分别将其分散在水中制备成磁流体。采用超导量子干涉仪分别测量了不同粒径磁粒子及其磁流体的磁性能。实验结果显示:粉末状Fe3O4粒子的比饱和磁化强度和矫顽力均随粒径的增加而增大;磁流体中的磁粒子比饱和磁化强度也随着粒径的增加而增大,但3种样品的矫顽力均为零,显示出超顺磁性;相同粒径的Fe3O4粒子,在磁流体中的比饱和磁化强度较粉末状态时为低。

水基Fe_3O_4磁流体的制备和磁光特性

以FeSO4·7H2O(AR),Fe(NO3)3·9H2O(AR),NH3·H2O(AR)为原料,用水热法制备纳米Fe3O4粒子;通过选用合适的分散剂来克服磁性颗粒的沉降,采用超声波分散的方法,制备在重力场和磁场中稳定性好的磁流体.研究了影响水基Fe3O4磁流体性能的主要因素,得到最佳条件:Fe(NO3)3·9H2O和FeSO4·7H2O的量比为1.75,水热反应温度为160℃,反应时间为5h,1.5gFe3O4分散于100mL水中所需分散剂的用量为0.75mL.所制备的产物经XRD和粒度仪检测,结果表明:产物为单一相的Fe3O4,水基Fe3O4磁流体体系的粒径在100nm以下.

PEI包覆磁性Fe_3O_4纳米颗粒的制备及性能研究

由于PEI/Fe3O4磁流体具有良好的生物兼容性,因而被广泛应用于生物医药领域。本实验用共沉淀法制备出磁性Fe3O4纳米颗粒,通过一次包覆改性法将PEI(聚乙烯亚胺)包覆在磁性Fe3O4纳米颗粒上。利用X-射线衍射仪(XRD)、透射电子显微镜(TEM)、红外光谱仪(FTIR)、振动样品磁强计(VSM)、热重分析仪(TG)等方法对其进行了表征。结果表明,实验制备出颗粒度为10nm左右的颗粒,PEI较好的吸附在其表面,吸附率为33.6%,颗粒度饱和磁化强度为58.05 emu/g,包覆后有所降低,但较好保持着原有磁性。

Fe_3O_4水基磁流体的制备及其分散性能研究

采用共沉淀法制备了纯Fe3O4纳米粒子,分别用高氯酸、四甲基羟胺和油酸/十二烷基苯磺酸钠为表面活性剂对其进行表面处理后分散在水中,得到了3种水基磁流体,对这3种磁流体的浓度及稳定性进行了测定。实验结果显示:酸性、碱性和中性水基磁流体中Fe3O4的浓度分别为4.8%、5.8%和8.1%,其中中性水基磁流体中粒子的分散性能最佳;经过离心后,3种水基磁流体中的粒子均产生了沉降,且酸性和碱性磁流体中的粒子比中性磁流体中的粒子沉降的多。在此基础上,对影响粒子分散稳定性的机理进行了初步探讨。

聚(丙烯酸-丙烯酸羟乙酯)/Fe_3O_4磁流体的制备及表征

用聚(丙烯酸-丙烯酸羟乙酯)[P(AA-co-HEA)]处理纳米Fe3O4粒子,制备了以配位键结合的分散稳定的磁流体。用凝胶渗透色谱(GPC)和核磁共振谱(NMR)对P(AA-co-HEA)的分子量和共聚物两组分的含量进行了表征,用透射电镜(TEM),红外光谱(FT-IR),紫外-可见光谱(UV-v is)和磁性能测量系统(M PM S)对P(AA-co-HEA)/Fe3O4复合材料进行了表征。结果表明:处理后的Fe3O4粒子粒径为10 nm左右,共聚物中丙烯酸组分通过配位键结合在Fe3O4粒子表面,悬浮液分散稳定并且具有对外磁场快速响应的特点,其复合材料还具有超顺磁性的特性。

水基Fe_3O_4磁流体的制备及其性能研究

最近几年,许多研究集中在兼具液体流动性和固体磁性的双重性质的磁流体的制备上.磁流体中悬浮在液体中的固体颗粒大约10nm左右.为防止粒子团聚必须将粒子进行很好的分离,这种分离由向液体中滴加表面活性剂来完成.所以表面活性剂对形成稳定的磁流体来说是非常重要的.本文中我们找到了有效形成水基磁流体的两种表面活性剂.用化学共沉淀法制备了Fe3O4 纳米粒子,并且用双层表面活性剂对粒子进行包裹.纳米粒子的大小通过XRD及TEM分别进行了表征.本文获得了粒子分散良好的稳定的水基磁流体.主要对磁流体的粘度进行了讨论.结果表明该流体的粘度很小并随外磁场增加而增加,随温度升高而降低.