PEG-PE载药胶束的体内分布与毒性研究

目的:研究PEG-PE载药胶束静脉给药后在动物体内的分布与毒性。方法:采用一步自组装法制备载阿霉素的单一PEG-PE胶束或加入卵磷脂(HSPC)的混合胶束(M-Doxs);用BALB/c小鼠考察PEG-PE载药胶束的体内分布以及对动物生化指标及脏器的影响。结果:制备了3种不同粒径的载药胶束:M1-Dox[PEG-PE/HSPC=1∶0,(14.5±1.2)nm]、M2-Dox[PEG-PE/HSPC=1∶0.5,(22.4±0.9)nm]与M3-Dox[PEG-PE/HSPC=1∶1,(34.2±1.3)nm]。加入HSPC后胶束的形貌由球形逐渐变为棒状结构。M-Doxs在肝、肺、肾及肿瘤中的分布呈粒径依赖性。在22.5 mg.kg-1剂量下,M1-Dox与M3-Dox组的动物生存期明显延长。M-Doxs可显著降低对动物的全身毒性。结论:粒子的大小与形貌可改变M-Doxs在体内的分布,减轻药物的全身毒性。通过对纳米载药系统的物理化学性质进行修饰,可改变其在体内的行为。

重组人内皮抑素PEG-PE胶束的制备及抑瘤效应研究

目的:内皮抑素是强效的血管内皮细胞生长抑制剂,但其低溶解度限制了临床应用,通过采用聚乙二醇衍生化磷脂酰乙醇胺(PEG-PE)制备包载重组人内皮抑素的胶束,以期寻找内皮抑素的新药物载体。方法:研究PEG-PE内皮抑素胶束的理化性质,观察PEG-PE内皮抑素胶束对体外肿瘤细胞生长的作用及对鸡胚绒毛尿囊体内血管生长的影响。结果:制备的PEG-PE-内皮抑素胶束的粒径为(48.32±8.29)nm,Zeta电位为+3.2 mV。包封率为75%,该胶束可以抑制MCF-7肿瘤细胞的生长和增殖,内皮抑素浓度50μg.mL-1时抑制率为31.4%,对鸡胚绒毛尿囊血管新生也有明显的抑制作用。结论:同单独用内皮抑素比较,用PEG-PE胶束作为药物载体运送内皮抑素直接抑制肿瘤细胞生长和抑制新生血管形成的效果更明显。

隐丹参酮PEG-PE纳米胶束的制备、细胞摄取及诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的研究

目的制备隐丹参酮PEG-PE纳米胶束,并进行体外评价、细胞摄取及诱导乳腺癌细胞凋亡研究。方法采用薄膜水化法制备隐丹参酮PEG-PE纳米胶束,从体外释药、细胞摄取和细胞凋亡等方面对该药物载体进行系统评价。结果隐丹参酮PEG-PE纳米胶束粒径为(16.5±1.1)nm,Zeta电势为-(21.6±0.8)mV,包封率为(85.4±4.9)%,载药量为(5.4±0.3)%。TEM电镜可直观显示隐丹参酮PEG-PE纳米胶束呈形态规则的圆球形结构;采用芘测定法表明PEG-PE纳米胶束的临界胶束浓度(CMC)约为6.1μg·mL^-1;细胞摄取试验结果表明,PEG-PE纳米胶束可以增强药物细胞摄取量,细胞外残留量减少;MTT肿瘤细胞毒性试验结果显示,隐丹参酮PEG-PE纳米胶束对乳腺癌MDAMB-231细胞的增殖抑制率明显优于隐丹参酮。隐丹参酮PEG-PE纳米胶束可以明显促进肿瘤细胞凋亡,提高促凋亡Caspase 3活性和促凋亡蛋白Bax的表达,减少抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,这些结果与游离隐丹参酮的结果比较,差异具有统计学意义。结论隐丹参酮PEG-PE纳米胶束粒径小,释药缓慢,可很大程度地提高隐丹参酮在肿瘤细胞内的摄取量,增强药物的诱导乳腺癌细胞凋亡作用。

载有槲皮素的PEG-PE胶束对乳腺癌细胞耐药性的逆转效应

目的探索载有槲皮素的PEG-PE聚合物胶束(M-Q)能否在体外逆转耐阿霉素人乳腺癌细胞(MCF-7 ADRr)的耐药性。方法将PEG-PE聚合物与槲皮素混合制备脂膜,加0.9%氯化钠注射液形成胶束,用动态光散射粒径仪表征其尺寸分布,并将其和阿霉素与MCF-7 ADRr细胞共孵育72 h,用MTS方法检测对肿瘤细胞的杀伤率。结果PEG-PE聚合物胶束能有效运载槲皮素,其包封率高达74%以上,平均粒径为11.11 nm左右,与游离槲皮素相比,M-Q能在体外更大程度地逆转MCF-7 ADRr细胞对于阿霉素的耐药性(P<0.05),且PEG-PE胶束自身对靶细胞无明显杀伤作用。结论载有槲皮素的PEG-PE胶束在逆转肿瘤耐药性方面具有应用潜能。

葛根素PEG-PE纳米胶束的制备及降低红细胞溶血的初步研究

目的采集葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate ehydrogenase deficiency,G6PD)缺陷的动物模型血液,评价葛根素PEG-PE纳米胶束降低红细胞溶血的作用。方法 1%乙酰苯肼皮下注射大鼠制备G6PD缺陷的动物模型,取其红细胞制成混悬液,比较评价葛根素和葛根素PEG-PE纳米胶束的溶血作用、红细胞脆性及红细胞膜流动性。结果葛根素出现了明显的红细胞溶血,且随着浓度变化和孵育时间延长具有增加的趋势,溶血率高达38%,而葛根素PEG-PE纳米胶束未见明显溶血;另外,红细胞脆性实验结果表明,葛根素PEG-PE纳米胶束对红细胞膜的作用非常轻微,H50%为(42.1±1.1)%,显著小于葛根素的该数值(53.1±1.2)%,红细胞膜流动性结果表明,葛根素PEG-PE纳米胶束对红细胞膜的流动性影响非常轻微。结论葛根素PEG-PE纳米胶束良好的血液相容性,为该药物的体内研究和进一步新型药物制剂开发奠定基础。

川芎嗪PEG-PE纳米胶束的体外评价、细胞摄取及抗心肌细胞凋亡研究

目的制备川芎嗪PEG-PE纳米胶束,并评价该纳米胶束的细胞摄取和抗心肌细胞凋亡效果。方法采用薄膜水化法制备川芎嗪PEG-PE纳米胶束,并进行表征。采用体外释药、细胞摄取和细胞凋亡试验对该载药系统进行评价。结果川芎嗪PEG-PE纳米胶束粒径为(15.8±0.9)nm,Zeta电势为-(20.5±0.4)mV,载药量为(5.7±0.3)%,包封率为(87.2±5.4)%。电镜结果表明川芎嗪PEG-PE纳米胶束呈形态规则的圆球型结构;采用芘测定法测定PEG-PE纳米胶束的临界胶束浓度约为5.3μg·mL-1;细胞摄取试验结果表明,PEG-PE纳米胶束可以增强药物的细胞摄取量,细胞外残留量减少;川芎嗪PEG-PE纳米胶束在10%胎牛血清DMEM培养基稳定性良好,采用异丙肾上腺素诱导心肌细胞凋亡,Hoechst染色提示凋亡心肌细胞出现了大量形态学改变,而川芎嗪PEG-PE纳米胶束可以明显减少凋亡细胞和促凋亡Caspase-3活性、抑制促凋亡蛋白Bax表达,提高抗凋亡蛋白Bcl-2表达,均显著优于川芎嗪(P<0.01)。结论川芎嗪PEG-PE纳米胶束具有粒径小,载药量高,释药缓慢等优势,可很大程度上提高川芎嗪的心肌细胞摄取量,增强药物的抗心肌细胞凋亡作用。