氧化苦参碱PEGs脂质体的制备工艺研究

目的:制备氧化苦参碱PEGs脂质体,优化其工艺以获得较高的包封率。方法:分别采用薄膜法、逆相蒸发法、pH梯度法和(NH4)2SO4梯度法制备氧化苦参碱PEGs脂质体,以包封率为指标,筛选最佳制备方法,考察工艺因素对脂质体包封率的影响,并以正交试验设计优化工艺参数。结果:采用(NH4)2SO4梯度法制备氧化苦参碱PEGs脂质体的包封率最高,平均可达57.24%;并确定最佳工艺条件为:药-脂比1:5,磷脂-胆固醇比3.3:1,孵育温度60℃,孵育时间1.5h,(NH4)2SO4浓度0.2M;采用薄膜法制备空白脂质体、透析法获得(NH4)2SO4梯度。结论:(NH4)2SO4梯度法制备氧化苦参碱PEGs脂质体,对包封率影响因素由大到小依次为:(NH4)2SO4浓度、药-脂比、孵育时间和孵育温度;经筛选的处方工艺重复性好,操作性强,得到的包封率较为稳定。

PEG化脂质体多柔比星在动物体内的药动学及组织分布

比较研究了PEG化脂质体多柔比星(阿霉素)受试制剂与进口同类参比制剂静注后,在动物体内的药动学及组织分布。采用HPLC法测定Beagle犬的血药浓度和荷瘤(Walker256)Wistar大鼠各组织药物浓度。结果显示,Beagle犬静注1mg/kg受试制剂及参比制剂后,药动学参数分别为t1/2β23.0和23.5h,表观分布容积0.060和0.062L/kg,AUC0-∞500.29和531.57μg·ml-1·h,多柔比星在犬体内的药代动力学过程均符合二室模型的特征。荷瘤(Walker256)Wistar大鼠静注5mg/kg受试制剂及参比制剂后,脾中含量最高,其次为肿瘤、小肠、肝,皮肤中含量最低。统计学分析显示,两制剂在犬体内主要药动学参数及大鼠组织肝、心、脾、肾、小肠、皮肤和肿瘤内的分布,无显著性差异(P>0.05)。

PEG脂质体增强藻蓝蛋白亚基对乳腺癌细胞光毒性的研究(英文)

藻蓝蛋白亚基(PCS)是一种低毒并具良好荧光活性的光敏剂.为了增加PCS对乳腺癌细胞的PDT疗效,制备了聚乙二醇修饰的藻蓝蛋白亚基脂质体(PEG-PCS-lip).该脂质体的平均粒径为(136.3±7.6)nm,包封率达到52.1%.在浓度为100mg/L时,PEG-PCS-lip组在MCF-7细胞中的转染率在5h达到(29.1±1.2)%,是PCS-lip组的1.5倍,PCS组的3.1倍.PEG-PCS-lip光动力作用半致死剂量对MCF-7及MA-782细胞分别为(65.4±2.47)mg/L及(70.5±2.95)mg/L.用100mg/L的PEG-PCS-lip进行PDT处理后凋亡率达到了28.5%.与PCS相比,PEG-PCS-lip在血液和肿瘤中比在其他组织中聚集的浓度更高、时间更久,并在注射10h后达到峰值.PCS-PEG-lip-PDT处理组(每千克体重静脉给药10mg,照射剂量为150J/cm2)的肿瘤生长率下降至8.4%,而同时对照组肿瘤大小约增加了两倍.HE组织切片染色和透射电镜观察发现PEG-PCS-lip-PDT组的肿瘤细胞经历了凋亡和坏死.这些数据都表明,相比于PCS和PCS-lip,PEG脂质体能够增强PCS在肿瘤细胞聚集的靶向性,提高PDT疗效.

PEG修饰水飞蓟素脂质体的制备及体外释放研究

目的:合成一种PEG硬脂酸单酯,应用Box-Behnken设计优化PEG修饰水飞蓟素脂质体的处方和工艺。方法:采用IR、1H-NMR法表征PEG硬脂酸单酯的结构,采用改进的薄膜分散法制备修饰脂质体,血浆透析法比较脂质体与修饰脂质体的体外释放曲线。结果:水飞蓟素修饰脂质体最佳处方含大豆磷脂∶胆固醇∶PEG硬脂酸单酯∶水飞蓟素为20∶4.8∶0.9∶1(w/w),修饰脂质体的平均粒径为100.9nm,包封率为91.2%,体外释放动力学符合Weibull方程。结论:PEG修饰水飞蓟素脂质体体外释放缓慢,注射给药体内能达到长循环作用。

PEG修饰大蒜素长循环脂质体的制备及药物动力学研究

目的研制PEG修饰大蒜素长循环脂质体并进行家兔体内药物动力学研究。方法用聚乙二醇-2000单甲醚合成聚乙二醇单甲醚磷脂酰乙醇胺衍生物(PEG-PE),采用Szoka改进逆相蒸发技术,制备PEG修饰大蒜素长循环脂质体(PEG-DATS-LCL),以HPLC法测定大蒜素的包封率及家兔血浆中药物浓度。结果长循环脂质体的平均粒径为12·63μm,包封率为90·77%;长循环脂质体家兔静脉注射给药呈双室模型特征,t1/2β为41·04h,AUC为9·66μg·ml-1·h-1,均显著大于注射液和普通脂质体的t1/2β和AUC。结论本法制得的PEG修饰大蒜素长循环脂质体包封率高,且延长了在血液中的循环时间,可达缓释、长效。

PEG修饰大蒜素长循环脂质体的制备工艺研究

目的：制备PEG修饰大蒜素长循环脂质体。方法：合成聚乙二醇单甲醚磷脂酰乙醇胺衍生物（PEG-PE），采用Szoka改进逆相蒸发技术，制备PEG修饰大蒜素长循环脂质体（PEG-DATS-LCL），均匀设计法筛选优化处方工艺。结果：根据优化工艺制得的长循环脂质体粒子分布较均匀。测得脂质体包封率为90．77％，算术平均粒径为12．63μm，粒径分布在5-30μm范围内占总数目的91．8％。结论：该制备工艺包封率高，稳定性好，粒径大小符合肺靶向要求。

药物载体非PEG空白脂质体的制备及稳定性研究

目的制备药物载体非PEG空白脂质体,并对其稳定性进行研究。方法以高纯度蛋黄卵磷脂、胆固醇为成膜材料,分别采用高压均质法-挤出法和高压均质法-超声法2种方法制备非PEG空白脂质体,并研究挤出法以及超声法对空白脂质体粒径的影响,考察制得的非PEG空白脂质体的物理稳定性。结果高压均质法-挤出法制备的非PEG空白脂质体平均粒径为86.73 nm,多分散系数(polydispersity index,PDI)为0.170;高压均质法-超声法制备的空白脂质体平均粒径为91.68 nm,PDI为0.362。结论与高压均质法-超声法相比,高压均质法-挤出法制备的空白脂质体粒径较小、分布均匀、稳定性好。

盐酸拓扑替康脂质体的体外细胞毒及体内抗肿瘤作用

目的对抗癌药物盐酸拓扑替康普通脂质体(Plain L)及PEG修饰脂质体(PEG L)的体外细胞毒及体内抗肿瘤作用进行研究。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法测定Plain L与PEG L对人卵巢癌细胞A2780和人结肠直肠癌细胞HCT 8的抑制作用;对荷肝癌H22小鼠尾静脉注射给药进行Plain L、PEG L的体内抑瘤试验。结果与游离药物相比,Plain L、PEG L的细胞毒作用增强,对体外培养的人卵巢癌A2780细胞的IC50分别为(9.26±2.14)mg.L-1和(2.36±1.08)mg.L-1,相比于游离药物[IC50=(25.45±1.69)mg.L-1]分别降低了63.6%(P<0.005)和90.7%(P<0.001);对HCT 8细胞,Plain L[IC50=(10.66±1.25)mg.L-1]与PEG L[IC50=(4.50±0.31)mg.L-1]的细胞毒作用也强于游离药物[IC50=(16.72±2.45)mg.L-1],分别是游离药物的1.5倍(P<0.001)和3.6倍(P<0.005)。体内抑瘤实验结果表明,游离药物、Plain L与PEG L体积抑瘤率分别为58.2%、67.6%、83.5%,质量抑瘤率分别为56.3%、69.6%、85.7%;与游离药物相比,Plain L与PEG L的体内抗肿瘤作用明显提高。结论与游离药物相比,脂质体包封提高了盐酸拓扑替康的体外细胞毒作用及体内抗肿瘤效果,而经PEG修饰的脂质体相比于普通脂质体体内、外抗肿瘤效果更强。

聚乙二醇修饰免疫脂质体研究进展

介绍近十多年来聚乙二醇 (PEG)修饰免疫脂质体的研究概况 ,就其在体液中空间稳定的实现、靶向部位聚集、与肿瘤细胞的相互作用和影响因素、治疗的有效性进行综述。

他克莫司长效脂质体的药物动力学研究

目的研究他克莫司长效脂质体在家兔体内的药代动力学特征。方法通过反相高效液相色谱法测定他克莫司家兔血浆中药物浓度，并通过3P97软件处理数据得出其药代动力学参数。结果长循环脂质体家兔静脉注射给药呈双室模型特征，t1/2B为39．643h，AUC为10．241μg／（mL·h），均显著大于注射液和普通脂质体的t1/2B和AUC。结论本法制得的PEG修饰他克莫司长循环脂质体延长了在血液中的循环时间，可达缓释、长效。

顺铂前药及双载药聚乙二醇化脂质体的制备、表征与体外抗肿瘤研究

目的合成顺铂前药顺-二氯·反-二(丁二酸氢根)·顺-二氨合铂(Ⅳ)(DSCP)。制备聚乙二醇(PEG)化脂质体,用于共递送DSCP和L-丁硫氨酸-亚砜亚胺(L-BSO),并考察其体外抗肿瘤效果。方法以顺铂为原药,经氧化和酯化反应合成顺铂前药DSCP;CCK-8实验考察不同摩尔比下DSCP溶液剂和L-BSO混合溶液剂的抗肿瘤效果,确定载药脂质体的处方;采用薄膜水化-挤出法制备PEG化双载药脂质体DSCP/L-BSO Lip和对照组DSCP Lip,通过外观、形态、粒径与电位分布、包封率、载药量、稳定性和体外释放对脂质体进行表征;考察不同制剂(DSCP溶液剂、DSCP和L-BSO混合溶液剂、DSCP Lip和DSCP/L-BSO Lip)对小鼠乳腺癌顺铂耐药(4T1/DDP)细胞和4T1细胞存活率的影响,并测定药物处理24 h后细胞内谷胱甘肽(GSH)的浓度,考察脂质体的体外抗肿瘤效果。结果成功合成了DSCP,纯度为98.26%;以1∶12(DSCP∶L-BSO)的药物摩尔比制备DSCP/L-BSO Lip;DSCP Lip和DSCP/L-BSO Lip外观为规则球型,粒径分别为(154.88±2.67)nm和(143.66±1.25)nm,Zeta电位分别为(-42.84±0.07)mV和(-42.10±0.12)mV,DSCP的包封率和载药量分别在71%和1%左右,L-BSO的包封率和载药量分别为(72.78±2.26)%和(6.37±0.19)%,DSCP Lip和DSCP/L-BSO Lip具有良好的血浆稳定性和长期稳定性,在pH 7.4 PBS释放介质中,DSCP释放较快,在4 h释放达80%;对于4T1/DDP细胞和4T1细胞,DSCP和L-BSO表现出较好的协同抗肿瘤效果,与DSCP溶液剂、DSCP和L-BSO混合溶液剂、DSCP Lip相比,DSCP/L-BSO Lip的细胞毒性较强,并具有下调GSH作用。结论制备的DSCP/L-BSO Lip包封率较高,具有较好的体外协同抗肿瘤效果。

siRNA的PEG化脂质体的制备及处方的筛选

目的制备一种递送siRNA的PEG化脂质体,通过改变处方中PEG的比例来优化处方。方法采用前体脂质体的方法制备不同PEG含量的阳离子脂质体;用超速离心法分离脂质体siRNA复合物和游离siRNA;用荧光标记法检测siRNA,求得各处方脂质体对SiRNA的包封率;考察不同处方脂质体在血清中的稳定性;测定不同处方脂质体在A549细胞上的毒性和摄取效率;筛选最终脂质体处方并测定其粒径、电位,观察形状。结果选定5%PEG含量的脂质体为最终的处方,其在50%血清中的稳定性良好,在A549细胞上的摄取效率较高且无细胞毒性,siRNA与其的包封率为72.43%,siRNA形成复合物后的形态电镜结果显示良好。结论选定和制备了具有良好体外理化性质的PEG化脂质体递送siRNA。

奥沙利铂聚乙二醇修饰脂质体的制备及其大鼠体内的药动学

采用逆相蒸发-挤出法制备奥沙利铂聚乙二醇(PEG)修饰脂质体,处方中蛋黄卵磷脂E80-胆固醇-聚乙二醇修饰二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG 2000-DSPE)重量比为100∶25∶34,药脂比为1∶10。所得制品平均粒径为140 nm,包封率97.5%。采用HPLC法测定大鼠血浆中的奥沙利铂,考察奥沙利铂PEG修饰脂质体静注给予大鼠的药动学情况,并与奥沙利铂溶液相比较。结果显示,奥沙利铂PEG修饰脂质体组的cmax和AUC均显著大于溶液组(P<0.05);平均滞留时间(MRT)比溶液组延长了约20倍。说明奥沙利铂PEG修饰脂质体能延长药物在大鼠体内的循环时间。

盐酸米托蒽醌聚乙二醇化脂质体的制备及包封率考察

目的：制备盐酸米托蒽醌聚乙二醇化（PEG化）脂质体,建立包封率测定方法。方法：采用乙醇注入结合高压均质法制备空白PEG化脂质体;以铵根离子梯度法进行主动载药制备盐酸米托蒽醌PEG化脂质体;采用G-25葡聚糖凝胶色谱分离脂质体和游离药物;使用紫外-可见分光光度法测定脂质体的包封率。结果：空白脂质体平均粒径为88.7nm,载药后粒径为95.3nm;在所建立色谱条件下,脂质体与游离米托蒽醌分离良好;盐酸米托蒽醌在0.5~10μg.ml-1范围内线性关系良好（R2=0.9997）,精密度高;脂质体的平均包封率大于96%。结论：乙醇注入-高压均质法结合铵根离子主动载药法适用于制备盐酸米托蒽醌PEG化脂质体;所建立分析方法简单快捷、准确可靠,可用于盐酸米托蒽醌长循环脂质体包封率的测定。