培元固表汤对小鼠免疫功能的影响

【目的】观察培元固表汤对小鼠免疫功能的影响。【方法】选用BALB/c小鼠,设培元固表汤高、中、低剂量组,香菇多糖组,模型组和空白组,以腹腔注射20 mg/kg环磷酰胺复制免疫低下小鼠模型。采用碳粒廓清试验观察各组对小鼠非特异免疫的调节作用,乳酸脱氢酶测定法观察各组对小鼠自然杀伤(NK)细胞活性的影响,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测刀豆蛋白A(ConA)诱导条件下免疫抑制小鼠淋巴细胞的转化率。【结果】香菇多糖组、培元固表汤高剂量组均能增强正常小鼠的碳粒廓清能力,香菇多糖组、培元固表汤高、中剂量组均能显著提高正常小鼠吞噬指数,香菇多糖组、培元固表汤高剂量组均能使免疫抑制小鼠碳粒廓清指数和吞噬指数显著升高;培元固表汤高、中、低剂量组均能使免疫抑制小鼠NK细胞活性显著增强,香菇多糖组、培元固表汤高、中剂量组均能促使小鼠淋巴细胞转化率显著升高(均P<0.05)。【结论】培元固表汤能增强正常小鼠和免疫低下小鼠的碳粒廓清能力,提高NK细胞活性及促进淋巴细胞转化,具有一定的免疫增强作用。

基于指纹图谱和网络药理学的补肾培元汤质量标志物(Q-Marker)预测分析

目的:基于指纹图谱和网络药理学,预测补肾培元汤潜在的质量标志物成分。方法:运用高效液相色谱法建立10批补肾培元汤指纹图谱,指认并归属其共有峰,进行相似度评价和聚类分析,评价不同批次样品间质量差别,基于化学成分有效性,可测性和网络药理学对其潜在的质量标志物预测分析。结果:指纹图谱共确认43个共有峰,指认12个共有峰,包括绿原酸、芦丁、山柰酚、苦杏仁苷、京尼平苷酸、大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素、京尼平龙胆双糖苷、积雪草苷、槲皮素、毛蕊异黄酮,并且其相似度均大于0.9,样品可聚为2类,通过网络药理学预测可知,12个成分能通过RELA、MMP3和GSK3B等多个靶点调控癌症,肾病,粥样硬化等多条通路。结论:预测绿原酸、芦丁、山柰酚、苦杏仁苷、京尼平苷酸、大黄酚、大黄酸、芦荟大黄素、京尼平龙胆双糖苷、积雪草苷、槲皮素、毛蕊异黄酮12个化学成分可作为潜在的质量标志物,以期为补肾培元汤质量控制及后续的研究提供参考。

基于代谢组学和网络药理学探讨五色培元固本方改善慢性肾病-蛋白质能量消耗综合征的作用机制

目的 探讨五色培元固本方治疗慢性肾病-蛋白质能量消耗综合征(chronic kidney disease-protein energy wasting,CKD-PEW)的潜在作用机制。方法 采用5/6肾切术搭配低蛋白饮食建立大鼠CKD-PEW模型,通过广泛靶向代谢组学技术对大鼠血清进行代谢组学分析,得到差异代谢物及对应靶点;通过网络药理学预测五色培元固本方改善CKD-PEW的化学成分、靶点及信号通路。整合分析代谢组学及网络药理学共有靶点,并通过共有靶点构建“成分-靶点-代谢物-通路”关系网络图,揭示五色培元固本方治疗CKD-PEW的主要化学成分和代谢机制。结果 血清代谢组学发现在空白组和模型组间存在123种差异代谢物,模型组与阳性对照开同组以及五色培元固本低、中、高剂量组比较,分别存在50,37,62和114种差异代谢物,经Metabo Analysis进行代谢通路分析富集在代谢通路上的潜在生物标志物,空白组和模型组间存在25种生物标志物,模型组与阳性对照开同组、五色培元固本低、中、高剂量组间分别存在2,2,5和24种生物标志物;空白组和模型组间富集到21条通路及194个靶点,模型组与阳性对照开同组、五色培元固本低、中、高剂量组间分别富集到2条通路14个靶点、2条通路14个靶点、5条通路38个靶点、24条通路52个靶点。网络药理学分析五色培元固本方与CKD-PEW疾病得到65种活性成分及123个关键靶点。代谢组学及网络药理学整合分析模型组与药物高剂量组间得到髓过氧化物酶、尿苷二磷酸葡萄糖醛基转移酶1A1、酪氨酸酶、氧磷酶14个共同靶点,结果表明这4个靶点可能受到五色培元固本方中β-谷甾醇、槲皮素、柚皮素以及红景天苷4种成分调控,从而干预2-羟基丁酸、对苯二酚、2-苯乙酰胺、多巴醌4种生物标志物,最终影响苯丙氨酸代谢、丙酸代谢、酪氨酸代谢3条代谢通路,达到治疗CKD-PEW的目的。结论 CKD-PEW病因与多靶点、多途径有关,表明五色培元固本方能够通过多成分、多靶点及多代谢通路改善CKD-PEW的作用机制,也为临床治疗CKD-PEW提供了研究基础。

基于网络药理学探讨固表防感汤发挥免疫调节的分子机制

目的:基于网络药理学探讨固表防感汤发挥免疫调节的作用机制。方法:在TCMSP平台中检索黄芪、大枣的活性成分及其可能的作用靶点,在OMIM及GeneCards中设置关键词检索免疫调节的关键靶点,将两者检索所得靶点取交集得到固表防感汤的免疫调节靶点,将交集靶点导入STRING数据库中进行蛋白质-蛋白质相互作用网络分析,使用Metascape数据库对交集靶点进行基因本体(GO)功能、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,通过Cytoscape3.9软件分析得到药物成分-疾病靶点-通路网络图。结果:固表防感汤中进行免疫调节的主要关键活性成分为槲皮素、β-胡萝卜素、β-谷甾醇、山柰酚等,其作用于人类V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A、肿瘤坏死因子、白细胞介素-6、白细胞介素-10等相关靶点。GO功能富集分析结果显示,固表防感汤在生物过程上通过脂多糖类合成反应、细胞迁移正向调控、造血相关及细胞凋亡等通路来发挥免疫调节作用;分子功能则体现在细胞因子受体结合、激酶结合及活性调节、血红素结合、蛋白域结合等方面。细胞组分主要分布在脂筏、囊泡腔、转录调节复合物、细胞质膜外侧、线粒体外膜等。KEGG通路富集分析结果显示,其通过代谢相关、免疫细胞、细胞因子、肿瘤相关方面的信号通路等多条信号通路发挥免疫调节作用。结论:固表防感汤中多种活性成分通过代谢相关、免疫细胞、细胞因子、肿瘤相关方面的多条信号通路发挥免疫调节作用,为该方在临床上的进一步使用提供了理论基础。