用酵母双杂交系统筛选与PEN-2蛋白胞内端相互作用的蛋白

γ-分泌酶复合体对β-淀粉蛋白前体蛋白(Beta-amyloid precursor protein,βAPP)的水解是生成β-淀粉蛋白(Aβ)的关键步骤,在阿尔茨海默氏症(Alzhei mer′s disease,AD)的病理发生中起着重要作用.PEN-2蛋白(Presenilin enhancerprotein 2)是γ-分泌酶的一个重要组分,在γ-分泌酶的组装和成熟中扮演重要的角色.此外,PEN-2还具有促进神经细胞存活和防止细胞凋亡的作用.为了进一步研究PEN-2的生理功能,以PEN-2为诱饵蛋白用酵母双杂交系统筛选与之有相互作用的蛋白,发现PCBP4和GRK5肽段可结合PEN-2,并在酵母体系用β-半乳糖苷酶报告基因验证了它们的相互作用.这些结果表明PCBP4和GRK5可能影响PEN-2的正常生理功能,并且有可能在阿尔茨海默氏症的形成中起着一定的作用.

重组Pen-2乳杆菌的抗感染作用及其对小鼠免疫功能的影响

[目的]在实验室成功构建了含有对虾抗菌肽基因Pen-2的重组乳杆菌L.casei 393/pen的基础上,研究重组乳杆菌L.casei393/pen经口服小鼠后的抗感染和免疫促进作用。[方法]将昆明系小鼠和balb/c系小鼠随机分为生理盐水组、乳杆菌L.casei 393组和重组乳杆菌L.casei 393/pen组,口服灌胃小鼠。每隔7 d测量小鼠体重,28 d后检测小鼠的免疫器官指数和细胞因子IL-6的浓度,并用金黄色葡萄球菌对其进行腹腔注射攻毒。[结果]灌胃28 d后,重组乳杆菌L.casei 393/pen组的体重、免疫器官指数和细胞因子IL-6浓度均明显高于其他2个试验组;用金黄色葡萄球菌攻毒后,重组乳杆菌L.casei 393/pen组的死亡率比乳杆菌L.casei 393低50%,比生理盐水组低83.3%。[结论]重组乳杆菌L.casei 393/pen经口服小鼠后,具有显著的抗金黄色葡萄球菌感染和较好的免疫促进作用。

白桦脂醇对老年痴呆模型大鼠海马神经元APH-1及PEN-2表达的影响

[目的]探讨白桦脂醇在老年痴呆大鼠中的干预作用及可能机制,为探索老年痴呆治疗提供新的可能。[方法]选用健康成年SD大鼠,随机分为对照组、模型组、白桦脂醇低剂量组和高剂量组,每组12只,连续灌胃给药3个月后进行相关指标检测,采用Morris水迷宫实验观测大鼠空间学习记忆能力,采用双荧光素酶报告基因系统检测γ分泌酶活性,采用实时定量-聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测中前咽缺陷蛋白-1(APH-1)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、早老蛋白增强子-2(PEN-2)和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)表达水平。[结果]水迷宫检测结果发现白桦脂醇能明显改善模型大鼠认知功能障碍;双荧光素酶报告基因系统检测结果显示白桦脂醇可以抑制γ分泌酶活性;RT-PCR法和Western Blot法检测结果显示白桦脂醇可以抑制PEN-2和CREB表达,但对APH-1和HIF-1表达无明显影响。[结论]白桦脂醇可以显著改善老年痴呆模型大鼠的行为学,提高学习记忆能力和空间认知能力,显著降低老年痴呆模型大鼠PEN-2相关基因及蛋白的作用,但对APH-1相关基因及蛋白则无明显影响。

早老素增强子-2在APP／PS1双转基因小鼠脑内的分布及表达

目的研究γ-分泌酶组件早老素增强子-2(presenilin enhancer-2,Pen-2)在APP/PS1双转基因小鼠脑内的表达及分布,以进一步明确Pen-2与阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的关系。方法对APP/PS1双转基因小鼠交配后产下的子代进行基因分型,用免疫组化方法检测Pen-2和老年斑在APP/PS1双转基因AD模型小鼠和同窝野生型正常小鼠脑内的分布和表达情况。结果 Pen-2广泛分布于APP/PS1双转基因小鼠脑内各区域,包括大脑皮质、海马、基底核、小脑、嗅脑、脑室脉络丛等,而老年斑则选择性地出现在大脑皮质、海马、嗅脑等区域,并且Pen-2的分布范围广于老年斑的分布。AD模型小鼠大脑新皮质内Pen-2阳性神经元的着色程度(2.09±0.33)显著高于正常小鼠(1.29±0.31,P<0.05),且AD模型小鼠大脑新皮质内Pen-2免疫阳性物质主要分布于细胞膜和细胞质,而正常小鼠大脑新皮质内的Pen-2阳性神经元仅细胞膜周围染色较深,而细胞质染色极浅甚至不着色。结论 Pen-2在AD模型小鼠和正常小鼠脑内的表达存在差异,这种差异可能与老年斑的形成和AD的发生相关。

胰岛素笔应用能力对2型糖尿病患者血糖控制效果的影响

目的探讨胰岛素笔应用能力对2型糖尿病患者血糖控制效果的影响。方法采用一般资料调查表和胰岛素笔应用能力调查问卷,调查苏州地区130例2型DM患者胰岛素笔应用能力现状及其血糖控制情况。结果胰岛素笔应用能力中的胰岛素精确注射维度对2型糖尿病患者空腹血糖的影响具有统计学意义(P<0.05);胰岛素笔注射相关并发症的发生情况(P<0.05)和血(尿)糖监测依从性(P<0.05)两维度对餐后2h的血糖影响具有统计学意义;胰岛素笔注射相关并发症的发生情况(P<0.01)和血(尿)糖监测依从性(P<0.05)两维度对糖化血红蛋白(HbA1c)的影响具有统计学意义。结论胰岛素笔应用能力可影响2型DM的血糖控制效果,应加强相应的管理。

2型糖尿病患者胰岛素笔注射技能的影响因素分析

目的:探讨影响2型糖尿病患者胰岛素笔注射技能的因素。方法:选取60例2型糖尿病患者,采用问卷调查法收集患者一般资料、糖化血红蛋白值、出院时及出院3个月后的胰岛素笔注射技能得分、患者胰岛素注射意愿及疼痛评分,行单因素分析后使用多元线性回归对相关影响因素进行分析。结果:患者出院3个月后胰岛素笔注射技能得分较出院当日提高(P<0.01);2型糖尿病患者的胰岛素使用意愿、出院时胰岛素笔注射技能是影响2型糖尿病患者出院3个月后的注射技能。结论:2型糖尿病患者的胰岛素笔注射意愿及出院时胰岛素笔注射技能是影响患者出院后胰岛素笔注射技能的因素。糖尿病专科护士在为患者制定并实施技能教育时应充分考虑这些因素。

对称四甲基六元瓜环与2-戊基苯并咪唑盐酸盐自组装包合物晶体结构

以对称四甲基六元瓜环(TMeQ[6])为主体,2-戊基苯并咪唑盐酸盐(PB)为客体,在水溶液中自组装形成主客体超分子化合物{PB@TMeQ[6]}.Cl.9(H2O),利用X-射线单晶衍射技术对化合物的晶体结构进行了表征。实验结果表明,主客体之间通过多种非共价键作用形成1∶1的主客体包合物,客体的芳环被瓜环包结于空腔内,烷基置于瓜环端口外侧,包合物结构单元之间与共用水分子通过氢键连接成一维超分子链。

胰岛素泵和胰岛素笔在2型糖尿病中强化降糖疗效的比较

目的 比较胰岛素泵和胰岛素笔在2型糖尿病强化降糖中疗效的差异。方法 将2型糖尿病病人随机分成 两组,胰岛素泵组的病人采用胰岛素泵降糖治疗,胰岛素笔组的病人采用胰岛素笔降糖治疗。监测两组病人治疗 前后全天血糖谱的变化,观察并比较血糖达标所需要的时间、胰岛素用量、低血糖发生率等情况。结果 胰岛素泵 组与胰岛素笔组相比,在血糖达标所需的时间、胰岛素用量及低血糖发生率等方面有极显著性差异(P<0.01)。结 论 胰岛素泵和胰岛素笔对2型糖尿病患者强化降糖治疗均有效,且胰岛素泵降糖效果优于胰岛素笔。

Hβ分子筛催化合成5,5-二甲基-2,4-二异丙基-1,3-二氧噁烷及其他噁烷类化合物

以异丁醛和2,2,4-三甲基-1,3-戊二醇(TMPD)为原料,合成了标题化合物(青叶噁烷),考察了不同分子筛的催化性能,筛选出催化活性最佳的Hβ沸石分子筛为催化剂;并考察了催化剂用量、反应时间、醛醇比、带水剂等因素对该反应的影响,以及催化剂的循环使用性。结果表明,在最优化的反应条件下,30.0 mmol异丁醛,10.0 mmol TMPD,以甲苯为带水剂,催化剂用量为0.20 g,在溶剂的回流温度下反应2.0 h,产物收率达95.1%。Hβ沸石分子筛还具有很好的循环使用性,在重复使用6次后仍保持高的活性。此外,还考察了以Hβ沸石分子筛为催化剂,TMPD与其他醛酮的缩合反应,同样取得很好的催化效果,相应的噁烷类化合物的收率在90%以上。

乙二醇降解聚2,6-萘二甲酸乙二醇酯

采用乙二醇对聚2,6-萘二甲酸乙二醇酯(PEN)进行降解,表征了醇解产物,探讨了醇解原理。结果表明:醇解后PEN中的酯键断裂,PEN分子内的蟄合羟基变成2,6-萘二甲酸乙二醇酯(BHEN)上分子间缔合羟基和游离羟基;醇解后产物的O与C的原子比由醇解前的0.28增至0.38,醇解产物中C=O和C—O两种O结构的质量比为1∶2.18,C—C、C—O和O—C=O三种C结构的质量比为5.38∶2.22∶1,产物的平均分子量降为200左右;醇解产物主要为BHEN及其低聚物,BHEN单体纯度在90%以上,收率为25.95%。该醇解反应是酯基断裂又聚合,PEN长链变短的过程。

(5R,6S)-2-(4-甲氧基)苯基-6-[(1R)-叔丁基二甲基硅氧乙基]-青霉烯-3-羧酸乙酯的合成

以(3R,4R)-3-[(1R)-叔丁基二甲基硅氧乙基]-乙酰氧基氮杂环丁-2-酮(4AA)为原料,经取代、酰化、Wittig反应,合成了标题化合物,化合物结构经1HNMRI、R、元素分析和质谱表征。

无针注射器和胰岛素笔皮下注射胰岛素控制初诊2型糖尿病患者血糖控制的效果的比较

目的比较采用无针注射器和胰岛素笔皮下注射胰岛素短期强化治疗初诊2型糖尿病(T2DM)患者的效果。方法将62例初诊T2DM患者随机分为无针注射器组(A组)和胰岛素笔组(B组),各31例,均治疗7 d。比较两组患者每次皮下注射胰岛素后疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、注射部位出现红肿、药物残留等不良反应情况,以及治疗7 d后空腹血糖、果糖胺、空腹胰岛素(FINS)、C肽和糖化血红蛋白水平,OGTT试验各时点血糖、胰岛素、C肽水平。结果每次皮下注射胰岛素后,A组VAS评分、低血糖和残留药物发生率低于B组,但红点发生率高于B组。治疗第7天,A组空腹血糖、果糖胺和C肽水平低于B组,FINS水平高于B组;A组OGTT试验各时点血糖及空腹、服糖后30 min、60 min、90 min的C肽水平均低于B组,FINS、服糖后30 min、60 min、90 min的胰岛素水平均高于B组,而120 min胰岛素水平低于B组,血糖的曲线下面积(AUC)、C肽的AUC小于B组,胰岛素的AUC大于B组(均P<0.05)。结论与采用胰岛素笔相比,初诊T2DM患者采用INJEX30无针注射器皮下注射胰岛素可以减轻注射痛感,提高血清胰岛素水平,更有效地控制血糖。

厄贝沙坦联合氨氯地平治疗2型糖尿病合并高血压疗效分析

目的研究厄贝沙坦片联合氨氯地平片治疗2型糖尿病合并高血压的临床疗效。方法对2015年2月-2015年7月收治的76例2型糖尿病合并高血压的患者随机分为观察组和对照组,每组38例。两组患者除给予常规糖尿病治疗方案外,对照组给予氨氯地平片治疗,观察组厄贝沙坦片联用氨氯地平片治疗,连续用药8周,观察治疗前后两组患者DBP、SBP、降压效果及用药安全性。结果两组患者经治疗后SBP和DBP均降低,且观察组总有效率92.11%、DBP（76.44±4.09）mm Hg和SBP（118.49±12.36）mm Hg,明显优于对照组73.68%、（86.33±3.75）mm Hg和（142.28±17.81）mm Hg（P〈0.05）,未发现严重不良反应。结论厄贝沙坦片联合氨氯地平片治疗2型糖尿病合并高血压,降压效果更明显,且安全性较高,值得在临床应用中推广。

催化淀粉样蛋白产生的γ分泌酶的组装

γ分泌酶可引起多种膜蛋白的跨膜剪切作用,尤其可导致淀粉样前体蛋白(APP)的跨膜剪切,产生淀粉样蛋白(Aβ)。Aβ易发生沉积而诱发阿尔茨海默氏病(AD)。γ分泌酶由四种组分PS、Aph-1、NCT及Pen-2构成,由于该酶的相对分子质量巨大以及结构复杂,所以研究进展比较缓慢,其结构与功能至今仍未完全揭示。本文概述了在催化Aβ产生时γ分泌酶组装过程的研究进展,包括各组分之间的调控及组装。

核磁共振氢谱法鉴定油性圆珠笔文书的书写时间

油性圆珠笔文书书写时间的鉴定是司法鉴定工作中的热点.该文采用核磁共振氢谱法（^1H NMR）对所购6种不同型号油性圆珠笔的油墨进行了表征,研究了圆珠笔油墨中的溶剂——苯氧基乙醇在文书老化过程中的变化,并建立了MG-115书写文书的自然老化标准曲线.该标准曲线能够准确鉴定MG-115圆珠笔4个月内的文书书写时间,重现性良好;同时,该文探究了人工老化与自然老化的关系,为文书书写时间的鉴定提供了依据.

阳极支撑型固体氧化物燃料电池的研制

详细介绍了使用流延法及丝网印刷法制备阳极支撑型中温SOFC单电池的工艺过程 ;采用固相反应法制备出Gd2 O3 掺杂CeO2(GDC) ,采用流延法制备阳极 ,采用丝网印刷法制备电解质层及阴极 ,对GDC的相成分进行了测试分析 ;对阳极和电解质烧结后的孔隙密、密度及显微组织进行了表征。试验结果表明 ,采用流延法及丝网印刷法 ,通过选取合适的粉末原料 ,调整并优化制备过程的工艺参数 。

均相催化体系中无机盐添加剂对混合C_8烯烃氢甲酰化反应的影响

研究了无机盐添加剂对混合C8烯烃 (含 6 9%的 2 ,4 ,4 -三甲基 - 1-戊烯和 19%的 2 ,4 ,4-三甲基 - 2 -戊烯 )氢甲酰化反应的影响。结果表明 ,重铬酸钾、重铬酸铵、四水合钼酸铵、铬酸铵的添加对提高混合C8烯烃转化率有明显促进作用 ,并且对促进作用机理进行了初步研究 ,通过对部分添加了无机盐的均相催化体系寿命的考察 ,发现添加无机盐后Rh催化剂循环使用次数提高。

上海市二级医院护士胰岛素笔使用相关知识掌握情况的调查

目的了解上海市二级医院护士对胰岛素笔使用知识掌握的状况及其影响因素。方法采用自行设计的胰岛素笔使用知识调查问卷对3所医院的110名护士进行调查。结果护士对胰岛素笔使用知识总分为(63.37±14.10)分,其中正确拔针方法知晓率仅占18.18%;是否内分泌科、是否接受过培训、职称和医院是护士胰岛素笔使用知识掌握的影响因素。结论护理管理者应加强护士胰岛素笔使用的相关培训,提高护士的专科操作水平和技能。

一类含查尔酮结构的光敏性二胺的合成研究

以醛、酮为原料经羟醛缩合反应合成了具有一类含查尔酮结构的光敏性二胺:1-(3-氨基苯基)-3-(4-氨基苯基)-2-丙烯-1-酮与对-二(间氨基肉桂酰)苯。通过优化实验得到最佳的合成工艺为:醛、酮在温度为0℃下,以乙醇为溶剂,氢氧化钠为催化剂,进行羟醛缩合反应3h。收率可达到86%,经液相色谱分析其纯度分别为99.92%,99.91%,紫外可见最大吸收波长分别为349nm、361nm。所得方法操作简便,收率较高,原料易得。并用元素分析、核磁共振、红外光谱等手段对产物的结构进行了表征。

无针注射甘精胰岛素对血糖控制不佳的2型糖尿病患者血糖波动的影响

目的通过瞬感动态血糖监测,探讨无针注射器和胰岛素笔注射甘精胰岛素对血糖控制不佳的2型糖尿病(T2DM)患者血糖波动的影响。方法采用随机、对照、自身前后交叉的研究设计,共纳入40例腹部皮下注射甘精胰岛素且血糖控制不佳的T2DM患者。随机分为A组(先无针后胰岛素笔,n=20)和B组(先胰岛素笔后无针,n=20)。收集患者临床资料,专科护士对受试者进行注射技术教育,通过使用医院版瞬感血糖监测(FGM)评估患者血糖谱的变化。结果入组患者的空腹血糖(FBG)(9.37±1.84)mmol/L。与传统的胰岛素笔相比,无针注射器注射甘精胰岛素显著降低了24 h平均血糖(MBG)[(9.06±2.13对9.98±2.67)mmol/L,P=0.001]、最高血糖(MaxBG)[(16.69±3.01对17.95±3.48)mmol/L,P=0.001]、血糖>10 mmol/L曲线下面积(AUC)[95.93(21.12,129.02)对142.66(27.88,198.46),P=0.002]、高血糖时间(TAR)(31.10±21.89对39.49±25.93,P=0.003),降低患者MAGE和SDBG,同时显著升高了血糖在目标范围内时间(TIR)(65.94±20.47对58.32±25.00,P=0.001)。两组之间低血糖的风险没有差异。结论空腹血糖控制不佳的T2DM患者使用无针注射器注射甘精胰岛素可有效降低患者的血糖和血糖波动幅度,同时不增加患者发生低血糖的风险。