PERT-ELISA法用于细胞逆转录病毒检测的再研究

目的进一步分析PERT-ELISA法在细胞逆转录病毒检测应用中的意义。方法分析不同细胞培养液及其添加成分对PERT-ELISA法检测结果的影响及检测方法的精密性和检测用试剂的稳定性,将该方法用于不同来源细胞的逆转录酶活性的检测,并通过共培养法对我国金黄地鼠肾细胞中逆转录酶活性是否具有感染性进行初步分析。结果不同细胞培养液及其添加成分逆转录酶活性检测均为阴性,不会影响样本的检测结果。PERT-ELISA法具有良好的试验间精密性及重现性,检测用试剂在保存条件下,至少在1年内可保持稳定。近250株细胞的检测结果显示,含有逆转录病毒颗粒的细胞,无论是否具有感染性,均为逆转录酶活性阳性;除部分人淋巴瘤来源的细胞外,大部分人源细胞为逆转录酶活性阴性;8种91株猴肾来源的细胞包括74株Vero细胞均为逆转录酶活性阴性;而鼠源细胞则大部分为阳性,其中20株CHO来源的细胞均为阳性;3株猪源细胞及1株猫源细胞为阳性,而2株水貂细胞、2株牛源细胞及1株犬源细胞均为阴性。被检测的15株组织工程产品用人源细胞逆转录酶活性均为阴性,而我国不同地区来源的金黄地鼠肾细胞上清中,逆转录酶活性均为阳性。金黄地鼠肾细胞与人2BS细胞共培养后连续传代7次,细胞上清中逆转录酶活性仍为阳性,但随着传代次数的增加呈下降趋势。结论PERT-ELISA法可用于细胞逆转录病毒的检测,但对于阳性细胞,还需要进一步分析其与逆转录病毒或逆转录病毒样颗粒的相关性及是否具有感染性。

非小细胞肺癌患者围术期血清MMP-9水平动态变化的临床研究

目的本研究通过监测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者围术期血清基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)的水平,研究其动态变化规律。方法应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测法,分别监测非小细胞肺癌及肺良性病患者术前、术后1、7、14、21及28d血清MMP-9的浓度,非小细胞肺癌患者21例,肺良性病患者12例,30例健康志愿者确定血清MMP-9正常水平。结果(1)NSCLC患者术前血清MMP-9浓度(82.84ng/mL)显著高于肺良性疾病患者术前(58.98ng/mL)及健康人血清水平(42.94ng/mL)(P=0.000);(2)手术切除肿瘤后,术后第1天非小细胞肺癌患者的血清MMP-9水平(265.87ng/mL)达峰值,比术前水平(82.84ng/mL)明显升高(P=0.000),此后下降。结论非小细胞肺癌患者血清MMP-9的术前水平显著高于肺良性病患者及健康人。围术期血清MMP-9水平均显著升高。