核仁蛋白PES1在乳腺癌细胞中的表达及siRNA干扰核仁蛋白PES1对乳腺癌细胞周期的影响

目的探讨特异性siRNA干扰核仁蛋白PES1对乳腺癌细胞周期的影响。方法以Western Blot和免疫细胞化学法对PES1的表达和定位进行检测,用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果 PES1在细胞核内高表达,经siRNA干扰后,乳腺癌细胞G2期发生阻滞现象。结论核仁蛋白PES1在调控乳腺癌细胞周期中起着重要作用;siRNA干扰核仁蛋白PES1对乳腺癌细胞周期存在影响。

存活素siRNA表达质粒的构建及其对MCF-7细胞细胞周期和增殖的调控(英文)

背景与目的存活素特异地在肿瘤组织中过表达,许多报道表明抑制它的功能对肿瘤治疗有利。RNA干扰被证明是一项能有效而特异地抑制基因表达的新技术。本研究的目的在于构建存活素基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒,并检测该质粒在乳腺癌细胞中的生物学功能。方法应用含有U6启动子的mU6pro载体构建存活素siRNA质粒,RT-PCR和Westernblot法检测该质粒转染MCF-7细胞后存活素表达的变化,流式细胞仪和MTT法分别检测其对细胞周期和对细胞增殖的影响。结果存活素siRNA质粒明显下调MCF-7细胞中存活素的表达,阻断细胞周期在G1期,显著抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。结论通过RNA干扰,存活素的表达在mRNA和蛋白质水平上被下调。