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PF-127水凝胶联合骨髓间充质干细胞外泌体来源miR-132诱导成骨分化修复牙槽骨缺损
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作者 邱静怡 袁京 《河北医学》 CAS 2024年第5期731-737,共7页
目的:探究PF-127水凝胶联合骨髓间充质干细胞外泌体来源miR-132诱导成骨分化对牙槽骨缺损的修复作用。方法:培养骨髓间充质干细胞,(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),并转染anti-miR-132、anti-miR-NC质粒。制备BMSCs来源外泌体(bone... 目的:探究PF-127水凝胶联合骨髓间充质干细胞外泌体来源miR-132诱导成骨分化对牙槽骨缺损的修复作用。方法:培养骨髓间充质干细胞,(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),并转染anti-miR-132、anti-miR-NC质粒。制备BMSCs来源外泌体(bone mesenchymal stem cells-exosomes,BMSCs-exo),蛋白质印迹法鉴定表达标志物。制备PF-127水凝胶和BMSCs-Exo复合物,PKH67标记法检测BMSCs的摄取;茜素红染色检测BMSCs的成骨能力;逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测细胞中miR-132表达和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)mRNA表达。建立牙槽骨缺损大鼠模型,将大鼠随机分为PF-127水凝胶组、PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-NC组和PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-132组。微型计算机断层扫描(Micro-computed tomography,micro-CT)评估牙槽骨缺损情况;蛋白质印迹法检测牙槽骨组织中ALP、OCN、Runx2蛋白表达。结果:anti-miR-132组BMSCs中miR-132表达明显低于anti-miR-NC组(P<0.05),提示anti-miR-132成功转染至BMSCs中。BMSCs-exo-anti-miR-NC组和BMSCs-exo-anti-miR-132组中外泌体标志物CD9和CD63显著表达。和BMSCs-exo-anti-miR-NC组相比,BMSCs-exo-anti-miR-132组中miR-132表达明显降低(P<0.05)。和PF127水凝胶组相比,BMSC-exo-anti-miR-NC组、PF127水凝胶+BMSC-exo-anti-miR-NC组、PF127水凝胶+BMSC-exo-anti-miR-132组中miR-132表达均明显降低,茜素红染色相对活性、细胞中Runx2、ALP和OCN mRNA表达均明显增加,且PF127水凝胶+BMSC-exo-anti-miR-132组变化最显著(P<0.05)。和Control组相比,PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-NC组和PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-132组BV/TV比值、BMD、Tb.N和Tb.Th及细胞中Runx2、ALP、OCN蛋白表达均明显升高,Tb.Sp明显降低(P<0.05),且PF-127水凝胶+BMSCs-exo-anti-miR-132组变化最显著。结论:PF-127水凝胶联合骨髓间充质干细胞来源外泌体来源干扰miR-132表达可促进骨髓间充质干细胞的成骨分化,从而促进牙槽骨缺损大鼠的修复。 展开更多
关键词 牙槽骨缺损 pf-127水凝胶 骨髓间充质干细胞 外泌体 miR-132 成骨分化
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PF-127-LV-NTFs三维复合支架培养大鼠神经干细胞
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作者 梁国新 梁茵茹 +4 位作者 刘淑贤 陈康振 林勇 秦江霞 吴洪福 《基础医学与临床》 2022年第1期75-81,共7页
目的观察Pluronic F-127(PF-127)水凝胶负载编码慢病毒LINGO-1 shRNA(LV)及神经营养因子混合物(NTFs)(PF-127-LV-NTFs)三维复合支架对大鼠神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法构建慢病毒(LV)后以不同感染复数(MOI)感染NSCs,用RT-qPCR... 目的观察Pluronic F-127(PF-127)水凝胶负载编码慢病毒LINGO-1 shRNA(LV)及神经营养因子混合物(NTFs)(PF-127-LV-NTFs)三维复合支架对大鼠神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响。方法构建慢病毒(LV)后以不同感染复数(MOI)感染NSCs,用RT-qPCR及Western blot检测NSCs中LINGO-1的表达;按照一定比例将脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养素-3(NT-3)、血小板衍生生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、神经胶质细胞来源的神经营养因子(GDNF)配制成NTFcocktail(NTFs),PF-127水凝胶负载LV和NTFcocktail并分组培养NSCs;用CCK-8法检测NSCs的细胞活力,LIVE/DEAD染色检测NSCs的存活率,免疫荧光染色检测NSCs增殖和分化情况。结果LV感染NSCs的最适MOI=5;PF-127对NSCs的细胞活力没有影响;PF-127+LV+NTFs组NSCs存活、增殖及神经元分化比例较高(P<0.01)。结论PF-127-LV-NTFs三维复合支架有利于大鼠NSCs的增殖和神经元的定向分化。 展开更多
关键词 神经干细胞 LINGO-1 shRNA pf-127水凝胶 神经元分化
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Pluronic F127丙烯酰衍生物的凝聚性质及其水凝胶 被引量:1
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作者 平其能 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期151-154,共4页
采用丙烯酰氯对高分子表面活性剂—聚氧乙烯——聚氧丙烯嵌段共聚物Pluronic F127进行了化学结构修饰,得到反应活性衍生物。研究了该衍生物在水性溶液中形成不可逆水凝胶的条件,应用光子相关光谱和粘度测定技术研究了该衍生物在不同温... 采用丙烯酰氯对高分子表面活性剂—聚氧乙烯——聚氧丙烯嵌段共聚物Pluronic F127进行了化学结构修饰,得到反应活性衍生物。研究了该衍生物在水性溶液中形成不可逆水凝胶的条件,应用光子相关光谱和粘度测定技术研究了该衍生物在不同温度下以及不同溶剂中的凝聚性质。结果表明:溶液中凝聚微粒的大小与其浓度有关,且随温度升高而减小。但一旦发生交联,微粒相互结合成凝胶,扩散系数显著下降。衍生物的水溶液和乙醇-水(30:70)混合溶剂的增比粘度在各种温度均与浓度呈线性关系,在较低温度下,两种溶液的粘度有明显差异。 展开更多
关键词 PluronicF127 丙烯酰衍生物 凝聚性
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SDF-1α复合Pluronic F-127的构建及其对BMSCs的体外生物效应研究 被引量:1
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作者 田甜 程继光 周健 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第8期1096-1099,共4页
目的构建装载基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)的Pluronic F-127新型复合材料,并研究其对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外生物效应。方法构建装载不同浓度SDF-1α(200、50 ng/ml)的Pluronic F-127复合水凝胶,采用Transwell小室进行复合水... 目的构建装载基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)的Pluronic F-127新型复合材料,并研究其对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的体外生物效应。方法构建装载不同浓度SDF-1α(200、50 ng/ml)的Pluronic F-127复合水凝胶,采用Transwell小室进行复合水凝胶对BMSCs的体外趋化实验。将BMSCs与复合材料均匀混合,加成骨细胞诱导液进行培养,并对其行碱性磷酸酶(AKP)活性测定及茜素红染色,由结果可观察到BMSCs的成骨诱导分化情况,并用MTT法检测复合培养后细胞的活性状况。结果趋化实验结果显示,含SDF-1α浓度为200 ng/ml的复合水凝胶对BMSCs的募集效果显著(P<0.05)。MTT法证实了Pluronic F-127对细胞增殖不产生影响(P>0.05)。BMSCs-复合材料、单纯BMSCs在成骨诱导培养条件下,两组细胞的AKP表达量均明显增高,并且都高于非成骨诱导组(P<0.05),同时诱导组镜下可见明显的钙结节形成。结论成功构建装载SDF-1α的Pluronic F-127新型复合材料,其在体外对BMSCs有明显的趋化作用,在细胞材料复合培养的三维支架中,BMSCs能够存活并被成功诱导分化为成骨细胞。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子-1Α PLURONIC F-127水凝胶 骨髓间充质干细胞 成骨诱导分化
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两种可注射Pluronic F-127水凝胶复合物修复兔软骨缺损的效果差异 被引量:1
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作者 樊薰勤 张明勇 +2 位作者 戴能 王喆敏 刘拴 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第16期2506-2512,共7页
背景:预实验显示,SOX9基因转染的骨髓间充质干细胞可在PluronicF-127水凝胶内良好的生长与增殖,促进细胞外基质的分泌,增加软骨基质的表达。目的:利用慢病毒基因诱导方式将SOX9基因转导至骨髓间充质干细胞中,将其与可注射Pluronic F-12... 背景:预实验显示,SOX9基因转染的骨髓间充质干细胞可在PluronicF-127水凝胶内良好的生长与增殖,促进细胞外基质的分泌,增加软骨基质的表达。目的:利用慢病毒基因诱导方式将SOX9基因转导至骨髓间充质干细胞中,将其与可注射Pluronic F-127水凝胶复合,观察Pluronic F-127水凝胶复合物修复软骨缺损的效果。方法:利用慢病毒基因诱导方式将SOX9基因转导至骨髓间充质干细胞中,转染48 h后与Pluronic F-127水凝胶复合。取60只新西兰大白兔(武汉科技大学实验动物中心提供),建立右侧膝关节股骨髁软骨缺损模型,随机分3组处理:模型组缺损部位未植入任何材料,对照组植入未转染的骨髓间充质干细胞与Pluronic F-127水凝胶复合物,实验组植入SOX9基因转染的骨髓间充质干细胞与PluronicF-127水凝胶复合物。术后4,12周取缺损部位组织,分别进行Micro-CT三维重建、苏木精-伊红染色、番红O染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色与Wakitani软组织损伤修复组织学评分。实验获得武汉科技大学伦理委员会批准。结果与结论:①术后12周Micro-CT三维重建显示,模型组缺损区域未见明显的修复,中央仍有较大的凹陷;对照组可见明显的修复,中央凹陷区域明显减小,可见较多的再生骨小梁结构;实验组缺损部位基本完成修复;②术后12周苏木精-伊红染色显示,模型组缺损区仍未见骨小梁结构,细胞分布紊乱,未见软骨陷窝;对照组可见较多的骨组织重建,缺损区域主要由软骨样组织与纤维组织填充;实验组骨组织重建较充分,缺损区域主要由软骨样细胞与软骨样细胞外基质填充,细胞呈柱状排列,与周围软骨相似;③术后12周番红O染色与Ⅱ型胶原免疫组织化学染色显示,模型组可见少量糖胺多糖表达,未见Ⅱ型胶原表达;对照组可见较多的糖胺多糖与Ⅱ型胶原表达,实验组糖胺多糖与Ⅱ型胶原表达最多;④实验组Wakitani软组织损伤修复组织学评分高于对照组与模型组(P<0.05);⑤结果表明,负载SOX9基因转染骨髓间充质干细胞的Pluronic F-127水凝胶复合物可促进软骨缺损的修复。 展开更多
关键词 Pluronic F-127水凝胶 SOX9基因 软骨缺损 Ⅱ型胶原 骨髓间充质干细胞 水凝胶复合物 糖胺多糖
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SDF-1α复合Pluronic F-127对兔上颌窦底提升术成骨影响的实验研究 被引量:2
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作者 曾嘉芙 吴涛 +1 位作者 郑文龙 周健 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2016年第5期339-345,共7页
目的 :通过制备基质细胞衍生因子(SDF1-α)的Pluronic F-127复合凝胶材料,观察这种复合材料在体外对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的矿化及成血管作用和复合凝胶材料在兔上颌窦外提升术中的成骨及成血管效果。方法:将兔骨髓间充质干细胞、5... 目的 :通过制备基质细胞衍生因子(SDF1-α)的Pluronic F-127复合凝胶材料,观察这种复合材料在体外对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的矿化及成血管作用和复合凝胶材料在兔上颌窦外提升术中的成骨及成血管效果。方法:将兔骨髓间充质干细胞、50ng/ml SDF1-α和质量百分比浓度0.1%的Pluronic F-127复合培养,MTT法检测其细胞毒性,碱性磷酸酶活性测定及茜素红染色。将18只新西兰大白兔双侧进行上颌窦外提升术,双侧植入不同的复合材料(共3种)并进行对照。材料分别为:β-磷酸三钙(β-TCP),生理盐水及SDF-1α复合Pluronic F-127凝胶。于术后4、8、12周处死,X线片观察双侧上颌窦骨质形成情况,行HE染色、CD31+、CD34+、BMP-2及VEGF免疫组织化学染色观察成骨及成血管作用,并进行统计学分析。结果:体外实验采用MTT法证实了0.1%w/w Pluronic F-127无细胞毒性(P>0.05)。BMSCs-SDF1α复合凝胶碱性磷酸酶染色下,细胞质可见大量碱性磷酸酶染色沉淀,其余3组未见沉淀。BMSCs-SDF1α复合凝胶、BMSCs-单纯凝胶、单纯BMSCs在成骨诱导培养条件下均产生矿化结节,非成骨诱导组未见矿化结节形成。体内实验,X线片结果显示BMSCs-SDF1-α复合凝胶及β-TCP充填侧均有阻射影,生理盐水组未见明显阻射影;HE染色结果显示BMSCs-SDF1-α复合凝胶成骨效果与β-TCP成骨效果明显,生理盐水组未见骨质形成,统计学分析表明BMSCs-SDF1-α复合凝胶成血管作用较β-TCP及生理盐水组明显增加。结论:SDF-1α复合Pluronic F-127凝胶能够成功诱导BMSCs分化为成骨细胞,无细胞毒性,在体外及兔上颌窦内成骨、成血管效果明显。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子SDF1-α Pluronic F-127水凝胶 骨髓间充质干细胞 成骨诱导分化 上颌窦外提升术
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壳聚糖导管复合辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶修复大鼠外周神经缺损的研究 被引量:3
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作者 郭琦 刘灿 +4 位作者 海宝 马腾 王红 宋纯理 徐迎胜 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第5期1-9,共9页
目的探讨壳聚糖导管复合辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶作为无细胞人工神经支架修复坐骨神经缺损的可行性。方法制备壳聚糖导管和辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶,通过体视显微镜、扫描电镜、体外降解实验和流变学检测来观察复合材料的性能。选... 目的探讨壳聚糖导管复合辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶作为无细胞人工神经支架修复坐骨神经缺损的可行性。方法制备壳聚糖导管和辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶,通过体视显微镜、扫描电镜、体外降解实验和流变学检测来观察复合材料的性能。选取SPF级SD大鼠40只,分为单纯导管组、导管复合辛伐他汀0mg组、导管复合辛伐他汀0.5 mg组,和导管复合辛伐他汀1 mg组共4组其中前2组为对照组,后2组为辛伐他汀治疗组,每组10只,造成左侧坐骨神经10 mm缺损模型,用壳聚糖导管桥接缺损,其内填充不同浓度的辛伐他汀水凝胶。移植后10周,取再生神经的中间段进行HE染色、透射电镜观察再生神经的形态学改变,并对再生神经的轴突数量、髓鞘厚度、G-ratio等进行统计学分析;免疫组化观察再生神经中NF200和S100蛋白的表达和神经营养因子PTN、HGF、GDNF和VEGF的表达。结果壳聚糖导管和辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶是适合神经缺损的无细胞修复材料。植入10周后四组均可见再生神经,但HE染色显示辛伐他汀治疗组的神经干明显较对照组粗;透射电镜显示辛伐他汀治疗组的再生轴突数量显著增多,髓鞘显著增厚,G-ratio显示髓鞘化程度亦明显好于对照组;免疫组化显示辛伐他汀治疗组再生神经中标记轴突的NF200和标记雪旺细胞的S100的阳性表达明显增强,且内源性神经营养因子PTN、HGF、VEGF和GDNF呈现高表达。结论壳聚糖导管复合辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶明显促进神经缺损组织学的重建,可用于修复坐骨神经缺损。 展开更多
关键词 外周神经损伤 辛伐他汀 壳聚糖导管 泊洛沙姆407水凝胶 外周神经再生
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壳聚糖导管填充辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶促进大鼠坐骨神经缺损后运动功能恢复
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作者 郭琦 刘灿 +4 位作者 海宝 马腾 王红 宋纯理 徐迎胜 《中国微创外科杂志》 CSCD 北大核心 2016年第7期638-644,共7页
目的探讨壳聚糖导管复合辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶对大鼠坐骨神经缺损后运动功能恢复的影响。方法选取成年SD大鼠40只,随机分成壳聚糖导管组、壳聚糖导管复合辛伐他汀0 mg水凝胶组、壳聚糖导管复合辛伐他汀0.5 mg水凝胶组和壳聚糖导... 目的探讨壳聚糖导管复合辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶对大鼠坐骨神经缺损后运动功能恢复的影响。方法选取成年SD大鼠40只,随机分成壳聚糖导管组、壳聚糖导管复合辛伐他汀0 mg水凝胶组、壳聚糖导管复合辛伐他汀0.5 mg水凝胶组和壳聚糖导管复合辛伐他汀1 mg水凝胶组(前2组为对照组,后2组为辛伐他汀治疗组),每组10只,制作左侧坐骨神经10 mm缺损模型,用壳聚糖导管桥接缺损,其内填充不同浓度的辛伐他汀水凝胶。术后4、6、8、10周进行坐骨神经指数检测,术后10周进行神经电生理、荧光金逆行示踪、腓肠肌相对湿重、肌纤维面积百分比和运动终板形态检测,观察神经缺损后运动功能恢复情况。结果术后4、6、8、10周,辛伐他汀治疗组的坐骨神经指数均明显高于对照组(P<0.05);术后10周辛伐他汀治疗组复合肌肉动作电位的峰-峰值、运动神经传导速度、荧光金标记的阳性神经元数量、腓肠肌相对湿重、肌纤维面积百分比和运动终板的恢复均显著优于对照组(P<0.05)。结论壳聚糖导管复合辛伐他汀/泊洛沙姆407水凝胶能够促进外周神经损伤后的功能恢复。 展开更多
关键词 周围神经缺损 辛伐他汀 壳聚糖导管 泊洛沙姆407水凝胶 功能恢复 神经再支配
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温度响应性水凝胶的制备及其对姜黄素的控制释放研究 被引量:1
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作者 魏蕾 焦韵苹 +1 位作者 李娜 李阳 《陕西中医药大学学报》 2022年第1期72-76,共5页
目的姜黄素是一种天然活性分子,其较好的抗炎、抗氧化作用,在伤口修复抗炎领域具有很好的应用前景,但是较差的水分散性限制了它的应用。本研究采用一锅法将N-异丙基丙烯酰胺(N-isopropylacrylamide,NIPAM)、接枝双键的Pluronic F-127(PF... 目的姜黄素是一种天然活性分子,其较好的抗炎、抗氧化作用,在伤口修复抗炎领域具有很好的应用前景,但是较差的水分散性限制了它的应用。本研究采用一锅法将N-异丙基丙烯酰胺(N-isopropylacrylamide,NIPAM)、接枝双键的Pluronic F-127(PF127-DA)、葡聚糖及双丙烯酰胺(Bis-acrylamide,BIS)混合,在过硫酸铵(Ammonium persulfate,APS)引发、四甲基乙二胺(N,N,N′,N′-Tetramethylethylenediamine,TEMED)催化下成胶,通过水凝胶负载姜黄素的方式大大扩大了姜黄素的应用场景。方法利用Pluronic F-127(PF-127)胶束包载姜黄素,聚-(N-异丙基丙烯酰胺)[Poly-(N-isopropylacrylamide),PNIPAM]温度响应释药。结果该水凝胶具有良好的温度响应性能,溶胀性能,均匀的孔结构以及良好的药物缓释性能。结论该新型水凝胶极大地提高了姜黄素的水溶性和达到对姜黄素的控制释放,将在温度响应载药水凝胶领域具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 姜黄素 N-异丙基丙烯酰胺 Pluronic F-127 载药水凝胶
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新型石墨烯海洋防腐蚀涂料 被引量:7
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作者 徐菲桐 《当代化工研究》 2017年第7期52-53,共2页
在石墨烯中加入聚醚(PF-127)制成石墨烯水分散液,将其与水性环氧防腐涂料混合制成水性石墨烯防腐蚀涂料,然后制备水性石墨烯防腐涂层。通过分散性实验、涂层表面形貌、力学性能分析测试、耐海水浸泡及中性盐雾实验证明该新型水性石墨烯... 在石墨烯中加入聚醚(PF-127)制成石墨烯水分散液,将其与水性环氧防腐涂料混合制成水性石墨烯防腐蚀涂料,然后制备水性石墨烯防腐涂层。通过分散性实验、涂层表面形貌、力学性能分析测试、耐海水浸泡及中性盐雾实验证明该新型水性石墨烯防腐蚀涂料具有优异的涂层性能和耐腐蚀性能。 展开更多
关键词 防腐蚀 石墨烯 pf-127 水性环氧防腐蚀涂料
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A novel sprayable thermosensitive hydrogel coupled with zinc modified metformin promotes the healing of skin wound 被引量:5
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作者 Zhengwei Liu Wanze Tang +7 位作者 Jiayi Liu Yingying Han Qinnan Yan Yuechao Dong Xiaomei Liu Dazhi Yang Guixing Ma Huiling Cao 《Bioactive Materials》 SCIE CSCD 2023年第2期610-626,共17页
A novel sprayable adhesive is established(ZnMet-PF127)by the combination of a thermosensitive hydrogel(Pluronic F127,PF127)and a coordination complex of zinc and metformin(ZnMet).Here we demonstrate that ZnMet-PF127 p... A novel sprayable adhesive is established(ZnMet-PF127)by the combination of a thermosensitive hydrogel(Pluronic F127,PF127)and a coordination complex of zinc and metformin(ZnMet).Here we demonstrate that ZnMet-PF127 potently promotes the healing of traumatic skin defect and burn skin injury by promoting cell proliferation,angiogenesis,collagen formation.Furthermore,we find that ZnMet could inhibit reactive oxygen species(ROS)production through activation of autophagy,thereby protecting cell from oxidative stress induced damage and promoting healing of skin wound.ZnMet complex exerts better effects on promoting skin wound healing than ZnCl2 or metformin alone.ZnMet complex also displays excellent antibacterial activity against Staphylococcus aureus or Escherichia coli,which could reduce the incidence of skin wound infections.Collectively,we demonstrate that sprayable PF127 could be used as a new drug delivery system for treatment of skin injury.The advantages of this sprayable system are obvious:(1)It is convenient to use;(2)The hydrogel can cover irregular skin defect sites evenly in a liquid state.In combination with this system,we establish a novel sprayable adhesive(ZnMet-PF127)and demonstrate that it is a potential clinical treatment for traumatic skin defect and burn skin injury. 展开更多
关键词 Thermosensitive hydrogel Skin wound ZnMet-PF127 Reactive oxygen species(ROS) AUTOPHAGY
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Pluronic F-127水凝胶复合骨髓间充质干细胞构建组织工程化脂肪的体外研究 被引量:5
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作者 吴洪福 邓宇斌 +2 位作者 严云发 全大萍 司美君 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1148-1153,共6页
本实验应用Pluronic F-127水凝胶三维培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察其生物相容性,并研究其对BMSCs诱导分化成脂肪细胞的影响。原代培养SD大鼠BMSCs,经诱导分化成脂、成骨和成神经鉴定后,用MTT法检测Pluronic F-127水凝胶对BMSC... 本实验应用Pluronic F-127水凝胶三维培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),观察其生物相容性,并研究其对BMSCs诱导分化成脂肪细胞的影响。原代培养SD大鼠BMSCs,经诱导分化成脂、成骨和成神经鉴定后,用MTT法检测Pluronic F-127水凝胶对BMSCs的细胞毒性;将P4BMSCs均匀混合于水凝胶中,复合BMSCs的水凝胶经成胶后分别用成脂诱导液和完全培养基培养,观察并记录脂滴、脂肪细胞及脂肪组织形成情况,培养2周后油红O染色鉴定。结果表明BMSCs在Pluronic F-127水凝胶中能较好的黏附、生长及增殖。成脂诱导的水凝胶中BMSCs可分化为脂肪细胞,其中少部分聚集成脂肪细胞团,形成脂肪样组织,并经油红O染色鉴定证实。而仅加入完全培养基的水凝胶内BMSCs则未发生分化。提示BMSCs可在Pluronic F-127水凝胶三维支架中培养并被成功诱导分化为脂肪细胞,利用水凝胶负载BMSCs向脂肪细胞诱导分化可望为组织工程化脂肪提供新的思路,Plu-ronic F-127水凝胶可作为BMSCs治疗体外培养的良好支架。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 PluronicF-127水凝胶 成脂诱导分化 组织工程化脂肪
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遴选Pluronic F-127水凝胶载体的最佳浓度及其生物相容性检测
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作者 潘子寅 王志豪 +2 位作者 仲毅 潘枢 史宏灿 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1558-1562,共5页
目的观察Pluronic F-127水凝胶的理化性质,并遴选最佳的浓度,探讨其作为骨髓间充质干细胞(BMSCs)载体的生物相容性.方法制备10%、20%、30%(m/v)的Pluronic F-127水凝胶,分析其成胶性能及溶胀率,在扫描电镜(SEM)下观察不同浓度水凝胶的... 目的观察Pluronic F-127水凝胶的理化性质,并遴选最佳的浓度,探讨其作为骨髓间充质干细胞(BMSCs)载体的生物相容性.方法制备10%、20%、30%(m/v)的Pluronic F-127水凝胶,分析其成胶性能及溶胀率,在扫描电镜(SEM)下观察不同浓度水凝胶的微观形态.不同浓度水凝胶包含BMSCs及转化生长因子(TGF-β1)后共培养7d,经细胞计数试剂盒-8(CCK-8)定期检测不同载体内BMSCs增殖生长状况.筛选出较佳的Pluronic F-127浓度,加入诱导液对BMSCs进行多向诱导分化,分别进行油红-O及茜素红-S染色且根据染色结果评价细胞诱导分化的效果.结果Pluronic F-127水凝胶的成胶时间与其浓度呈负相关,且浓度越高的初始成胶温度较低,更易成胶.Pluronic F-127水凝胶浓度较高,其微观结构较致密,相应的溶胀率较低.CCK-8结果证实20%的水凝胶与10%比较,对BMSCs增殖的抑制作用更大,第5天最为明显,20%组吸光度(A)值(0.302±0.045)显著低于10%组(0.571±0.081,t=5.120,P<0.05),而在凝胶载体中加入TGF-β1则对细胞的增殖有促进作用,第5天20%*组(加入TGF-β1)A值(0.454±0.034)明显高于20%组(0.302±0.045,t=6.088,P<0.05).成脂及成骨诱导后可以看到有脂滴及钙化点成分着色.结论20%浓度的Pluronic F-127可作为支持BMSCs增殖及分化的合适载体,且复合生长因子或诱导液会更有利于细胞进一步生长分化. 展开更多
关键词 PLURONIC F-127水凝胶 骨髓间充质干细胞 组织工程气管 生物相容性
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