PFKP和CD133在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨PFKP和CD133在胃癌组织中的表达及相关性,并分析两者表达与胃癌临床病理特征和预后的关系。方法检索癌症基因组图谱(TCGA)数据库中PFKP和CD133的表达情况及与预后的关系。收集2018年1月至2018年6月112例胃癌患者的癌组织和癌旁组织石蜡切片标本。采用免疫组化En Vision法检测上述组织中PFKP和CD133的表达;分析两者表达的相关性,及与临床病理特征和无进展生存期(PFS)的关系;Western blotting检测进一步确认胃癌组织中PFKP和CD133的表达水平。结果 TCGA数据库中,PFKP与CD133在415例胃癌组织中的表达水平均显著高于34例正常组织(P<0.01)。不同PFKP和CD133表达患者总生存时间的差异无统计学意义(P<0.05)。免疫组化检测显示,胃癌组织中PFKP和CD133的阳性表达率分别为81.2%(91/112)和67.9%(76/112),高于癌旁组织的34.8%(39/112)和27.7%(31/112),差异有统计学意义(P均<0.001)。Western blotting检测显示,胃癌组织中PFKP和CD133的表达水平显著高于癌旁组织(PFKP:0.212±0.034vs.0.069±0.01,P=0.001;CD133:1.182±0.107vs.0.403±0.035,P=0.000);胃癌组织中PFKP与CD133的表达呈正相关(r=0.547,P<0.001)。胃癌组织中PFKP表达与肿瘤直径、分化程度和Lauren分型有关(P<0.05);CD133表达与Lauren分型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.01)。全组中位PFS为31.0个月,其中PFKP阳性表达患者的中位PFS为31.0个月,阴性表达者为40.0个月,两者比较差异无统计学意义(P=0.511);CD133阳性表达患者的中位PFS为29.5个月,阴性表达者中位PFS未达到,两者比较差异无统计学意义(P=0.191)。结论胃癌组织中PFKP和CD133表达水平上升,两者表达呈正相关,PFKP可能在胃癌干细胞生物学行为中具有一定作用。

敲低PFKP联合肉碱棕榈酰基转移酶抑制剂etomoxir协同对肾透明细胞癌细胞Caki-1的抗肿瘤作用

目的:研究敲低P型磷酸果糖激酶(phosphofructokinase,PFKP)联合肉碱棕榈酰基转移酶抑制剂etomoxir对肾透明细胞癌Caki-1细胞的影响,并进一步探究其作用机制。方法:利用Western blot验证对照及PFKP shRNA敲低肾透明细胞癌细胞中PFKP的敲低效率,分别检测对照组(shCtrl)、PFKP敲低组、etomoxir组(shCtrl+etomoxir)、PFKP敲低联合etomoxir组的增殖曲线。使用Annexin-V/PI染色并用流式细胞检测对照组、PFKP敲低组、etomoxir组、PFKP敲低联合etomoxir组的细胞死亡,研究PFKP敲低联合etomoxir对细胞存活的影响。分别检测对照组、PFKP敲低组、etomoxir组、PFKP敲低联合etomoxir组的ATP水平与脂肪酸变化。结果:Western blot结果验证了PFKP的敲低效率。流式细胞检测显示,对照组、PFKP敲低组、etomoxir组、PFKP敲低联合etomoxir组的平均细胞死亡率分别为1.1、1.9、13.9、31.3%。PFKP敲低联合etomoxir组Caki-1细胞的死亡率显著高于单纯PFKP敲低与etomoxir组(P<0.05)。PFKP敲低联合etomoxir组Caki-1细胞的ATP水平显著低于单纯PFKP敲低与etomoxir组(P<0.05)。Etomoxir的加入抑制了PFKP敲低引起的游离脂肪酸下降(P<0.05)。结论:PFKP敲低联合etomoxir对Caki-1细胞呈现协同的细胞毒抗肿瘤作用。