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转反义PG基因番茄果实细胞结构变化的研究 被引量:11
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作者 李曜东 顾淑荣 +2 位作者 魏玉凝 周馥 赵敬芳 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2002年第3期348-353,共6页
经细胞学观察发现 ,转反义PG基因番茄果实在不同成熟期及存放前后 ,其果皮外面几层细胞的厚度都比未转基因的厚 1~ 5 μm ,细胞结构、细胞质和细胞核等的状态都有明显区别。尤以贮存后更为明显 ,未转基因果实的果皮细胞结构解体、细胞... 经细胞学观察发现 ,转反义PG基因番茄果实在不同成熟期及存放前后 ,其果皮外面几层细胞的厚度都比未转基因的厚 1~ 5 μm ,细胞结构、细胞质和细胞核等的状态都有明显区别。尤以贮存后更为明显 ,未转基因果实的果皮细胞结构解体、细胞质凝聚、细胞核变的模糊程度都比转基因的严重。经外源乙烯处理后 ,转基因和未转基因果实的细胞结构也有相似的变化。结果表明 :反义PG基因的转入降低了PG活性 ,并且减弱了外源乙烯的作用 ,延缓了果实的衰老 ,提高了耐贮性能 。 展开更多
关键词 转反义pg基因番茄 果实细胞结构 转基因番茄 乙烯
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PG与番茄果实成熟的关系 被引量:14
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作者 李曜东 魏玉凝 顾淑荣 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2004年第1期79-83,共5页
系统比较了转多聚半乳糖醛酸酶(PG)反义基因和对照番茄果实成熟过程中绿熟、转色、粉顶、粉红、全红5个时期的PG活性和与其相关的生理、生化组分的动态变化。实验表明,转基因果与对照果相比,PG活性始终处于较低水平,PG活性强烈被抑制是... 系统比较了转多聚半乳糖醛酸酶(PG)反义基因和对照番茄果实成熟过程中绿熟、转色、粉顶、粉红、全红5个时期的PG活性和与其相关的生理、生化组分的动态变化。实验表明,转基因果与对照果相比,PG活性始终处于较低水平,PG活性强烈被抑制是在全红期;果实的硬度、贮藏寿命指数都高于对照果;番茄红素合成积累进程被延缓;可溶性果胶含量、电解质外渗百分率均低于对照果。外源乙烯刺激引起对照果PG活性剧增,而转基因果表现钝化。讨论了PG活性与果实成熟、耐贮性及软化的关系,及对外源乙烯刺激的敏感性。首次明确提出PG活性在对照果中极大地表达,在转基因果中强烈被抑制是在全红期 ,而不是在整个成熟期;PG活性在果实软化中起直接和重要作用;PG活性的高低与番茄红素的合成与积累有关。 展开更多
关键词 多聚半乳糖醛酸酶活性 反义pg基因 成熟 番茄 贮藏寿命指数
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牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)对破骨细胞EphA2基因表达的调控 被引量:6
3
作者 高爱超 于海燕 +4 位作者 李娜 侯玉帛 戚欣 于小琳 于维先 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期268-271,275,共5页
目的:研究小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7在破骨分化过程中,Pg-LPS对破骨细胞EphA2表达的影响。方法:用终浓度10mg/L的Pg-LPS刺激RAW264.7细胞后,分别在1、3、5d,应用RT-PCR检测破骨细胞中EphA2基因和破骨细胞相关基因(破骨细胞内基质金属... 目的:研究小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7在破骨分化过程中,Pg-LPS对破骨细胞EphA2表达的影响。方法:用终浓度10mg/L的Pg-LPS刺激RAW264.7细胞后,分别在1、3、5d,应用RT-PCR检测破骨细胞中EphA2基因和破骨细胞相关基因(破骨细胞内基质金属蛋白酶(MMP9)、ACP5、c-fos、组织蛋白酶K(CtsK)、NFATc1)的表达,并且通过酒石酸抗酸性磷酸酶(TRAP)染色观察实验组和对照组破骨细胞的分化成熟情况。结果:RT-PCR检测10mg/L的Pg-LPS在第3天和5天,实验组比对照组EphA2基因表达分别增高2.4倍和1.2倍,两组之间存在显著差异(P<0.01);同时也能够促进破骨相关基因c-fos、NFATc1、CtsK、ACP5、MMP9的表达,实验组与对照组相比差异有显著性;TRAP染色结果显示:实验组比对照组的TRAP阳性多核细胞数目明显增多。结论:10mg/L的Pg-LPS对小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7,在破骨分化的中期和晚期均能够促进EphA2基因的表达,但是在破骨分化早期对EphA2基因的表达无明显作用。 展开更多
关键词 pg-LPS 破骨细胞 EphA2基因
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根癌农杆菌介导反义PG基因对桃的遗传转化 被引量:3
4
作者 张亚林 李唯 +1 位作者 张伟 徐培华 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期55-59,共5页
以白粉桃茎段为材料,通过根癌农杆菌介导用反义多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因对桃进行了遗传转化.将预培养3d的受体材料经根癌农杆菌菌液(D600=0.4)浸染10min后共培养60h,转移至分化培养基MS+1.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA+50mg... 以白粉桃茎段为材料,通过根癌农杆菌介导用反义多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因对桃进行了遗传转化.将预培养3d的受体材料经根癌农杆菌菌液(D600=0.4)浸染10min后共培养60h,转移至分化培养基MS+1.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1NAA+50mg·L-1卡那霉素+250mg·L-1头孢氨苄青霉素上诱导产生不定芽,将抗卡那霉素的不定芽先后在含有50mg·L-1卡那霉素的生长、增殖和生根培养基上继续选择,获得了完整植株,经PCR检测初步证明反义PG基因已导入桃中. 展开更多
关键词 根癌农杆菌 反义pg基因 遗传转化
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果实表达PGIPs的基因克隆及功能研究进展 被引量:1
5
作者 周阿涛 刘迪秋 +3 位作者 葛锋 陈朝银 饶健 丁为群 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期14-18,共5页
多聚半乳糖醛酸酶(PGs)是病原真菌早期侵染植物的一个重要致病因子。多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIPs)作为植物防御蛋白,能特异性抑制真菌分泌的多聚半乳糖醛酸酶,并通过延长寡聚半乳糖醛酸(OGs)的稳定期激活植物防御反应。综述PGIPs在... 多聚半乳糖醛酸酶(PGs)是病原真菌早期侵染植物的一个重要致病因子。多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIPs)作为植物防御蛋白,能特异性抑制真菌分泌的多聚半乳糖醛酸酶,并通过延长寡聚半乳糖醛酸(OGs)的稳定期激活植物防御反应。综述PGIPs在植物细胞中的定位,PGIPs与PGs之间的作用方式,PGIPs基因的分离与克隆,以及PGIPs对果实感病的影响,并对PGIPs的研究前景进行展望。 展开更多
关键词 果实 pgIPs pgS 基因 克隆 抑制
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微生物聚谷氨酸(γ-PGA)合成酶及合成机理的研究进展 被引量:4
6
作者 郑重 吴剑光 +1 位作者 邱乐泉 钟卫鸿 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期52-56,64,共6页
γ-PGA是一种可降解的、水溶性的,对人体无毒的生物高分子。目前发现多种微生物能合成γ-PGA,包括芽孢杆菌、古生菌和一种真核生物。γ-PGA合成基因可分为capB、capC、capA、capE和pgsB、pgsC、pgsA和pgsE,其表达产物组成的γ-PGA合成... γ-PGA是一种可降解的、水溶性的,对人体无毒的生物高分子。目前发现多种微生物能合成γ-PGA,包括芽孢杆菌、古生菌和一种真核生物。γ-PGA合成基因可分为capB、capC、capA、capE和pgsB、pgsC、pgsA和pgsE,其表达产物组成的γ-PGA合成酶复合体与细胞膜结合,并消耗ATP及底物谷氨酸进而合成γ-PGA,其中CapB-CapC(或者PgsB-PgsC)主要负责γ-PGA的聚合作用,而CapA-CapE(或者PgsA-PgsE)则作用于γ-PGA的转运。ComP-ComA、DegS-DegU、DegQ、SwrA和pgsB上游的非编码区则对pgsB、C、A和E的表达起重要影响。 展开更多
关键词 γ-pgA合成酶 合成基因 合成机制 基因调节
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白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p^(53)基因表达的影响 被引量:8
7
作者 李洁 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期215-216,共2页
目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p53基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞p53基因表达的影响。结果经白花蛇... 目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p53基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞p53基因表达的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞p53基因表达水平明显上调。结论白花蛇舌草抗肿瘤作用机制可能与p53基因表达增多有关。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 肺癌细胞pg P53 基因
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白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响 被引量:5
8
作者 李洁 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期974-975,共2页
目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞bcl-2基因表达的影响。结果经白... 目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞bcl-2基因表达的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞bcl-2基因表达明显降低。结论白花蛇舌草抗肿瘤作用机制可能与bcl-2基因表达减少有关。 展开更多
关键词 白花蛇舌草 肺癌细胞pg BCL-2
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桃2个endo-PG基因序列SNPs的遗传多样性及其与果实黏离核性状的关联分析 被引量:5
9
作者 麻国升 王力荣 +4 位作者 曹珂 朱更瑞 方伟超 陈昌文 王新卫 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期345-352,共8页
【目的】解析桃果实黏离核性状的分子机制。【方法】以不同黏离核性状的45份桃野生资源、地方品种和育成品种为试材,采用第2代测序技术鉴定2个通过连锁分析得到的、串联重复的endo-PG基因在45份种质中的SNPs(single nucleotide polymorp... 【目的】解析桃果实黏离核性状的分子机制。【方法】以不同黏离核性状的45份桃野生资源、地方品种和育成品种为试材,采用第2代测序技术鉴定2个通过连锁分析得到的、串联重复的endo-PG基因在45份种质中的SNPs(single nucleotide polymorphisms)信息;继而采用GLM(Generalized Linear Models)和MLM(Mixed Linear Models)模型进行关联分析,鉴定与黏离核性状关联的SNPs。【结果】在ppa006839m和ppa006857m这2个endo-PG基因内共鉴定到98个SNPs,平均1 SNPs/59 bp。在少数位点上,离核和黏核种质的SNPs多态性存在差异,但整体多样性水平差异不显著,暗示这2个endo-PG基因倾向于中性进化。根据98个SNPs位点信息构建的系统发育树能够反映这些种质的进化关系,即光核桃、甘肃桃最为原始,山桃其次,普通桃最为进化。GLM关联分析结果表明,在ppa006839m基因的内含子3区存在一个与黏离核性状显著关联的位点,对表型变异的解释率为21.1%,但经Bonferroni多重检验校正后,该位点并无统计学意义。而MLM模型的关联分析并没有检测到显著关联位点。【结论】研究结果虽然没能解释果实黏离核的分子机制,但暗示ppa006839m可能与该性状存在更为紧密的联系。同时,研究结果也为果实黏离核性状的分子标记辅助育种奠定基础。 展开更多
关键词 遗传多态性 endo-pg基因 黏离核 关联分析
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莲雾PG基因家族全基因组鉴定及表达分析 被引量:4
10
作者 陈迪飞 魏秀清 +2 位作者 许玲 许家辉 曾黎辉 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期548-563,共16页
【目的】鉴定并分析莲雾[Syzygium samarangense(Bl.)Merr.et Perry]多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)基因家族,为莲雾裂果相关调控分子机制的探究提供参考。【方法】利用生物信息学方法对莲雾PG基因家族进行鉴定和分析,并基于... 【目的】鉴定并分析莲雾[Syzygium samarangense(Bl.)Merr.et Perry]多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)基因家族,为莲雾裂果相关调控分子机制的探究提供参考。【方法】利用生物信息学方法对莲雾PG基因家族进行鉴定和分析,并基于转录组和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)验证分析SsPGs在不同组织器官中以及外源脱落酸(abscisic acid,ABA)喷施果实后在果皮中的表达情况。【结果】莲雾全基因组共鉴出25个SsPGs成员,随机分布在10条染色体上,并出现了基因串联重复现象。系统发育分析表明,莲雾、拟南芥、番茄、苹果、葡萄和枣的PG蛋白分为7类(Group A~G);除了Group G的SsPG1外,其余SsPGs都具有PG基因家族高度保守结构域,在进化过程中主要受纯化选择作用的影响。基因结构分析显示,SsPGs基因家族的蛋白基序出现明显的区组性序列同源性和保守性,且所有基因都含有内含子;表达模式分析显示,SsPG12、SsPG13和SsPG24在根中特异性表达,SsPG25在根和果肉中特异性表达,SsPG2和SsPG4在根、茎、叶、花、子房和果肉中高表达,SsPG22在果肉和叶子中高表达,SsPG18在子房中低表达;这说明SsPGs可能与营养和生殖生长有关,参与激素信号、光合作用以及抗病等不同信号转导途径。果皮喷施外源ABA后,PG活性显著提高,随着果实成熟达到最大值,随后下降。qRT-PCR表明,外源ABA处理后,果皮中SsPG2和SsPG4的表达均有所上调,且SsPG4的相对表达量在SsPGs基因家族中最高。【结论】SsPGs在莲雾营养和生殖生长过程中可能具有不同的功能,参与不同的信号转导途径,其中SsPG2、SsPG4、SsPG18和SsPG22在莲雾PG活性的变化和果实开裂中可能起重要作用。 展开更多
关键词 莲雾 pg基因家族 生物信息学 基因鉴定 表达分析
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1-MCP和低温处理对采后桃endo-PG家族基因表达的影响 被引量:9
11
作者 姜航 张斌斌 +3 位作者 宋志忠 郭绍雷 马瑞娟 俞明亮 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期521-530,共10页
【目的】探寻endo-PG家族基因中与果实软化相关的主要功能基因对不同肉质桃在不同贮藏方式中软化的响应,从分子水平上为桃贮藏保鲜提供理论依据。【方法】以软溶质‘霞晖5号’、硬溶质‘紫金红3号’、不溶质‘金童7号’和SH类型‘霞脆’... 【目的】探寻endo-PG家族基因中与果实软化相关的主要功能基因对不同肉质桃在不同贮藏方式中软化的响应,从分子水平上为桃贮藏保鲜提供理论依据。【方法】以软溶质‘霞晖5号’、硬溶质‘紫金红3号’、不溶质‘金童7号’和SH类型‘霞脆’4种肉质桃为试材,分别研究常温(25℃)、常温+1-MCP和低温(4℃)处理过程中果实硬度的变化,并分析13个endo-PG家族基因在货架期的表达差异。【结果】1-MCP显著抑制‘霞晖5号’和‘金童7号’贮藏前期果实硬度下降,而对‘霞脆’和‘紫金红3号’效果不明显。低温下的‘紫金红3号’‘霞脆’和‘金童7号’果实硬度在整个试验贮藏期保持稳定,但‘霞晖5号’果肉在低温贮藏的第2天便迅速软化。通过qRT-PCR对endo-PG家族中筛选出的13个基因的表达量进行分析,Prupe.4G261900仅在‘霞晖5号’果实中高量表达。1-MCP、低温处理抑制Prupe.4G261900在‘霞晖5号’贮藏前2 d和4 d的表达,1-MCP抑制Prupe.7G269200、Prupe.7G005500和Prupe.3G081700在不溶质桃中的表达,对‘霞脆’果实相关基因的表达无显著影响。低温处理的‘金童7号’和‘霞脆’4个基因的表达量均较低。未检测到以上基因在‘紫金红3号’果实中的表达。【结论】1-MCP可能主要通过调控Prupe.4G261900的表达来延缓软溶质和不溶质果实货架期前期硬度的降低。低温可能通过抑制软溶质和不溶质果实Prupe.7G005500的前期表达,进而缓解果实贮藏中的软化。 展开更多
关键词 软化 endo-pg 1-MCP 基因表达
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控制桃粘/离核PG基因的BAC克隆筛选与序列分析 被引量:1
12
作者 孟君仁 牛良 +5 位作者 邓丽 潘磊 鲁振华 崔国朝 王志强 曾文芳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第20期4396-4404,共9页
【目的】控制桃果实粘/离核性状的多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)基因存在串联重复和大片段的缺失。本研究对粘核桃所处的F-M基因座序列特征进行分析,为开发相关分子标记提供依据。【方法】本研究利用构建的粘核桃单株‘87-7-... 【目的】控制桃果实粘/离核性状的多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)基因存在串联重复和大片段的缺失。本研究对粘核桃所处的F-M基因座序列特征进行分析,为开发相关分子标记提供依据。【方法】本研究利用构建的粘核桃单株‘87-7-1’基因组的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库,通过PCR筛选出含F-M基因座的阳性克隆,利用单分子纳米孔技术进行全长测序,并对BAC克隆中的插入片段进行基因注释、序列比对和生物信息学分析。【结果】利用已有桃品种的基因组重测序数据设计PCR引物,以BAC文库为模板,扩增F-M基因座上/下游稳定共有的序列,获得了扩增产物上/下游条带均为阳性的目标单克隆46-B-10。全长测序结果表明,BAC克隆的插入片段全长为111612 bp,GC含量为37.03%。利用基因同源共线性方法对Prunus_persica_v2.0桃参考基因组和BAC克隆之间的同源信息进行比对分析,确定了同源区域。而与已知的桃参考基因组(测序品种为‘Lovell’,离核)序列进行比对,发现只有5个基因(Prupe.4G261700、Prupe.4G261800、Prupe.4G261900、Prupe.4G262000、Prupe.4G262500)序列能比对到该单克隆全长的区域,而‘87-7-1’在相应位置缺失了4个基因共34 kb,其中包括控制桃粘/离核的EndoPGF(Prupe.4G262200)。【结论】与桃参考基因组测序品种‘Lovell’相比,粘核桃单株‘87-7-1’的F-M基因座缺失了EndoPGF,只有EndoPGM,本研究明确了粘核桃F-M基因座的结构变异情况,为粘/离核性状分子标记的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 粘/离核 pg基因 BAC文库
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甜瓜多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因反义表达载体的构建 被引量:4
13
作者 何勇 尹俊 李连国 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第2期81-85,共5页
本实验用设计好的两条 75bp的长引物进行PCR反应 ,扩增出甜瓜PG1基因的 12 8bp的片段 ,将其克隆到pMD18-T载体中 ,筛选反向克隆 ,然后将其反向构建到植物表达载体 pUC38-ACC的CaMV35S启动子和TMV增强子“Ω”的下游 ,构建成反义表达载体... 本实验用设计好的两条 75bp的长引物进行PCR反应 ,扩增出甜瓜PG1基因的 12 8bp的片段 ,将其克隆到pMD18-T载体中 ,筛选反向克隆 ,然后将其反向构建到植物表达载体 pUC38-ACC的CaMV35S启动子和TMV增强子“Ω”的下游 ,构建成反义表达载体 pUC38-PG。用PCR鉴定重组子 ,并经序列分析证明获得含有反向插入PG基因片段的植物表达载体 ,为用花粉管法将其导入河套蜜瓜 。 展开更多
关键词 甜瓜 多聚半乳糖醛酸酶基因 反义技术 载体构建 基因克隆 河套蜜瓜 耐贮运基因工程
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Discrimination of Goatpoxvirus and Sheeppoxvirus by Digestion of p32 Gene with Hinf I and Sequence Alignment of GpCR Gene
14
作者 YAN Xin-min ZHANG Qiang +2 位作者 WU Guo-hua LI Jian ZHU Hai-xia 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2010年第3期32-34,38,共4页
To discriminate goatpoxvirus (GPV) and sheeppoxvirus (SPV), the p32 genes and G-protein-coupled chemokine receptor (GpCR) genes amplified from three SPV field isolates and two GPV field isolates were sequenced and com... To discriminate goatpoxvirus (GPV) and sheeppoxvirus (SPV), the p32 genes and G-protein-coupled chemokine receptor (GpCR) genes amplified from three SPV field isolates and two GPV field isolates were sequenced and compared with the corresponding sequences deposited in GenBank. Comparison of Hinf I restriction enzyme sites of p32 genes showed that there were two sites located at 391 and 691 bp, respectively, among all the SPV strains, and one site at 688 bp among GPV strains. Cladogram generated by sequence alignment of GpCR genes showed that the SPV and GPV belonged to two different branches. These results indicate that p32. and GpCR genes can be candidates used for discrimination of GPV and SPV. 展开更多
关键词 pg2 gene GpCRgene Goatpoxvirus Sheeppoxvirus DISCRIMINATION
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甜瓜多聚半乳糖醛酸酶反义基因植物表达载体的构建 被引量:6
15
作者 梅眉 陆璐 +1 位作者 赵长增 曾钰婷 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2006年第5期55-59,共5页
选育耐贮运品种是解决甜瓜贮运难题的有效途径之一.用特异引物从含甜瓜多聚半乳糖醛酸酶(PG)cDNA全序列的pCMPG质粒中克隆出PG基因,将该基因连接至pGEM-T Easy载体,获得重组质粒pGEM-PG.先用SacI和XbaI双酶切pGEM-PG,再用SacI和XbaI消化... 选育耐贮运品种是解决甜瓜贮运难题的有效途径之一.用特异引物从含甜瓜多聚半乳糖醛酸酶(PG)cDNA全序列的pCMPG质粒中克隆出PG基因,将该基因连接至pGEM-T Easy载体,获得重组质粒pGEM-PG.先用SacI和XbaI双酶切pGEM-PG,再用SacI和XbaI消化pBI121,得到除去了GUS基因的线状载体.从pGEM-PG质粒上切下的PG1 cDNA片段的粘性末端和pBI121线状载体的粘性末端恰好反向匹配,构建了甜瓜PG1 cDNA反义序列植物表达载体. 展开更多
关键词 甜瓜 pg基因 反义序列 植物表达载体
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甜瓜多聚半乳糖醛酸酶反义基因植物表达载体的构建及其转化烟草的研究 被引量:5
16
作者 黄永红 梅眉 +3 位作者 曾继吾 周碧容 吴元立 易干军 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期492-495,F0003,共5页
用限制性内切酶从目的基因供体质粒pBI-aPG上切下大小约2.3kb的目的基因,将它定向连接在受体质粒pCAMBIA2301载体上,构建成含有GUS基因和NPTⅡ基因的甜瓜多聚半乳糖醛酸酶反义基因植物表达载体pCB-aPG。采用直接转化法将pCB-aPG导入根... 用限制性内切酶从目的基因供体质粒pBI-aPG上切下大小约2.3kb的目的基因,将它定向连接在受体质粒pCAMBIA2301载体上,构建成含有GUS基因和NPTⅡ基因的甜瓜多聚半乳糖醛酸酶反义基因植物表达载体pCB-aPG。采用直接转化法将pCB-aPG导入根癌农杆菌菌株LBA4404,采用该菌株对普通烟草进行了遗传转化研究。在Kanamycin选择压力下获得的烟草转化不定芽和完整植株,经过GUS基因组织化学法检测以及PCR方法鉴定,证实了该反义基因已导入烟草基因组中。此项研究为下一阶段用该反义基因转化甜瓜品种以改良甜瓜果实耐贮运性打下基础。 展开更多
关键词 甜瓜 pg 反义基因 植物表达载体
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青春期牙龈炎牙龈卟啉单胞菌rag位点基因分型与致病力分析 被引量:3
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作者 于淼 李倜 +1 位作者 张玉杰 李智 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2016年第11期659-661,共3页
目的:分析不同rag基因型牙龈卟啉单胞菌在青春期牙龈炎中的分布状况。方法:分别选取青春期牙龈炎(GI≥1,PD≥3 mm)64例及牙周健康者(GI=0,PD<3 mm)56例作为研究对象,采用16S r DNA聚合酶链反应(PCR)法检测受试者龈沟液标本中牙龈卟... 目的:分析不同rag基因型牙龈卟啉单胞菌在青春期牙龈炎中的分布状况。方法:分别选取青春期牙龈炎(GI≥1,PD≥3 mm)64例及牙周健康者(GI=0,PD<3 mm)56例作为研究对象,采用16S r DNA聚合酶链反应(PCR)法检测受试者龈沟液标本中牙龈卟啉单胞菌及致病岛rag基因,分析其与临床指标之间的相互关系。结果:病例组病变位点和对照组牙龈卟啉单胞菌阳性检出率分别为65.63%(42/64)、33.93%(19/56)(P<0.05)。牙龈卟啉单胞菌阳性患者(n=37)的rag基因型检出率依次为rag-3(16/37)、rag-1(9/37))、rag-4(7/37)和rag-2(5/37)。结论:青春期牙龈炎患者龈沟液中牙龈卟啉单胞菌存在rag基因多态性,其中rag-1和rag-3基因型牙龈卟啉单胞菌与青春期牙龈炎的发生发展关系密切。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 基因型 rag基因
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樟疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶16和17基因的克隆、测序及其真核表达研究 被引量:9
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作者 巩振辉 吕元红 王晓敏 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第6期1-6,共6页
 研究优化了樟疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶Pcpg16和Pcpg17基因克隆的PCR条件,并对其进行了克隆、测序和遗传转化研究。克隆获得了2个基因,其大小均为996bp;通过构建表达载体和遗传转化获得了2个基因的转基因菌系;这2个基因均能指导合成相应...  研究优化了樟疫霉菌多聚半乳糖醛酸酶Pcpg16和Pcpg17基因克隆的PCR条件,并对其进行了克隆、测序和遗传转化研究。克隆获得了2个基因,其大小均为996bp;通过构建表达载体和遗传转化获得了2个基因的转基因菌系;这2个基因均能指导合成相应的PG酶。与对照Anpg 相比,转化Pcpg17基因的酵母菌所分泌的多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性较弱,而Pcpg16基因指导合成的PG酶无活性。Westernblotting表明,所克隆的2个基因指导合成的PG酶均有不同程度的糖基化。 展开更多
关键词 疫病病原菌 Pcpg基因 基因克隆与测序 基因表达 pg活性
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转基因耐贮藏番茄的选育 被引量:6
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作者 李岩 韩宏义 郑静 《丹东师专学报》 2000年第3期1-2,共2页
利用叶盘法转化 ,以苗龄 10天的子叶为外植体 ,在筛选培养基上 ,经过芽诱导、根诱导获得转基因再生植株 ,再移入土壤进行田间筛选 ,获最能够稳定遗传的转基因耐贮藏番茄新品种。通过回交方法 。
关键词 番茄 转基因 反义ACC酶基因 反义pg酶基因 贮藏 筛选
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马铃薯、番茄内源基因PCR检测引物设计及特异性分析 被引量:3
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作者 才华 栾凤侠 +2 位作者 关学佳 朱巍 白月 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第22期192-195,共4页
对马铃薯UDP-葡萄糖焦磷酸化酶基因(UGPase,U20345)和番茄多聚半乳糖醛酸酶-2a基因(PG-2a,X04583.1)进行序列相似性分析和多序列比对,确定特异片段,设计特异引物,经聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测,引物具有较高的... 对马铃薯UDP-葡萄糖焦磷酸化酶基因(UGPase,U20345)和番茄多聚半乳糖醛酸酶-2a基因(PG-2a,X04583.1)进行序列相似性分析和多序列比对,确定特异片段,设计特异引物,经聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测,引物具有较高的特异性;同时建立利用双重PCR检测马铃薯和番茄混合成分的方法,当马铃薯和番茄DNA混合质量为1.25ng时,仍可对其成分进行可靠的鉴定。新设计的马铃薯和番茄内源基因的引物及建立的双重PCR检测方法具有一定的特异性和灵敏性,适于出入境检验检疫部门对马铃薯和番茄制品进行检测。 展开更多
关键词 马铃薯 番茄 内源基因特异引物 UGPASE pg-2a 双重PCR
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