柠檬酸镧对人肺癌PG细胞、人胃癌BGC-823细胞的作用

采用噻唑蓝 (MTT)测定、3H TdR参入、流式细胞术、荧光偏振技术和软琼脂培养 ,观察了柠檬酸镧 (LaCit)对人肺癌细胞 (PG)、人胃癌细胞 (BGC 82 3 )的增殖、DNA合成、细胞周期、细胞膜脂流动性、软琼脂生长的影响。LaCit的浓度为 0 0 5 ,0 1,0 5 ,1mmol·L- 1 时可抑制肺癌细胞PG的增殖 :浓度为 0 5 ,1mmol·L- 1 时可抑制肺癌细胞PG ,DNA的合成 ,其G1 期细胞比例增加 ,S期细胞比例减少 ,细胞膜脂流动性降低 ,在软琼脂中的生长能力降低。而同样浓度的LaCit对胃癌细胞BGC 82 3除可降低其细胞膜脂流动性外 ,未见其他影响。

大黄素抑制人高转移巨细胞肺癌PG细胞的肿瘤转移相关性质

目的:研究大黄素对人高转移巨细胞肺癌PG细胞转移相关性质的影响。方法:MTT法检测大黄素对多种恶性肿瘤细胞的增殖抑制作用;BoydenChamber法检测大黄素对PG细胞侵袭能力的影响;明胶酶谱法(Zymography)检测大黄素对PG细胞Ⅳ型胶原酶分泌的影响;流式细胞术检测大黄素对PG细胞周期的影响Westernblot法检测大黄素作用后PG细胞周期相关蛋白的表达。结果:大黄素可抑制来源于不同组织多种肿瘤细胞的增殖,其IC50值在15～70μmol/L。40μmol/L和80μmol/L大黄素处理PG细胞24h,可使细胞侵袭能力分别降低到对照组的76.9%和57.4%,同时可使细胞MMP2和MMP9的分泌量显著下降,大黄素对PG细胞同基底膜的粘附能力没有明显影响。20μmol/L和40μmol/L大黄素作用于PG细胞24h后,可使细胞周期明显阻滞于G2/M期,伴随着S期的相应减少,进一步分析周期相关蛋白的表达,大黄素作用后可使PG细胞cyclinB1蛋白表达明显下降,而对p34cdc2的表达没有明显影响。结论:大黄素能抑制肿瘤细胞转移相关性质,提示其具有抗转移潜能。

小檗碱对高转移性人巨细胞肺癌PG细胞黏附特性的影响

目的研究小檗碱对高转移性人巨细胞肺癌PG细胞黏附特性的影响,以探讨其抑制肿瘤侵袭转移的可能机制。方法小檗碱(5、10μg/ml)处理PG细胞24小时,采用MTT法观察PG细胞与PG细胞的黏附(同质黏附),PG细胞与细胞外基质(FN和Martrigel)的黏附;用虎红染色法观察PG细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的黏附。通过SABC免疫细胞化学法及图像分析软件,半定量PG细胞E-cadherin、CD44的表达;RT-PCR法检测PG细胞E-cadherinmRNA和CD44mRNA的表达。结果小檗碱(10μg/ml)可促进PG细胞的同质黏附(P<0.05);小檗碱(5、10μg/ml)可抑制PG细胞与FN和Mar-trigel的黏附(P<0.01),并可抑制PG细胞与HUVEC的黏附(P<0.05,P<0.01)。经小檗碱(10μg/ml)作用的PG细胞,E-cadherinm及其mRNA表达明显增高(P<0.01),而CD44及其mRNA的表达明显减少(P<0.05)。结论小檗碱通过促进PG细胞E-cadherin的表达而促进PG细胞间的同质黏附,抑制PG细胞CD44的表达而抑制其与细胞外基质及血管内皮细胞的黏附,这可能是小檗碱抗肿瘤转移的机制之一。

大豆胰蛋白酶抑制剂抑制肺癌PG细胞生长及诱导细胞调亡的研究

目的研究大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTI)在体外对人肺癌PG细胞生长抑制作用和对细胞周期的影响。方法采用MTT法检测SBTI对人肺癌PG细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测SBTI对人肺癌PG细胞周期的影响;电子显微镜观察SBTI对细胞调亡的作用。结果 SBTI对人肺癌PG细胞的生长有明显抑制作用;SBTI可以将人肺癌PG细胞阻滞于S期;SBTI可以促使人肺癌PG细胞出现明显的染色质浓缩和凋亡小体,诱导人肺癌PG细胞的凋亡。结论大豆胰蛋白酶抑制剂能抑制人肺癌PG细胞生长、诱导人肺癌PG细胞调亡的作用,其作用的机制为阻滞人肺癌PG细胞于S期,促使人肺癌PG细胞出现明显的染色质浓缩和凋亡小体,实验为大豆胰蛋白酶抑制剂抗肿瘤效应提供了实验依据。

小檗碱抑制高转移性人巨细胞肺癌PG细胞侵袭和迁移的研究

目的:研究小檗碱对高转移性人巨细胞肺癌PG细胞侵袭和迁移的作用并探讨其作用机制. 方法:小檗碱(5 mg/L、10 mg/L)处理PG细胞24h,采用琼脂糖滴法观察PG细胞的运动能力,用下室加FN的Transwell小室法观察PG细胞的趋化运动能力,用铺Martrigel的Transwell小室观察PG细胞的侵袭能力.通过SABC免疫细胞化学法及图像分析软件,半定量PG细胞MMP-2、TIMP-2的表达;RT-PCR法检测PG细胞MMP-2 mRNA和TIMP-2 mRNA的表达.

高转移的人巨细胞肺癌PG细胞株血行转移的裸鼠模型的初步研究

目的应用高转移的人巨细胞肺癌PG细胞株建立血行转移裸鼠模型,为探索肺癌转移的分子机制提供模型。方法用高转移的人巨细胞肺癌PG细胞株经左心室接种棵鼠,采用MRI观察转移灶形成时间、部位,12周后取转移灶进行体外细胞培养,流式细胞仪检测HLA-ABC蛋白的荧光强度。检测母代细胞、转移灶培养细胞下列指标:生长曲线、克隆形成率、细胞周期分析,并进行比较。结果接种6周时,在MRI下可见裸鼠有转移灶形成。10周时有30%裸鼠形成转移灶。MRI提示转移灶位于脑、胸椎、左肾上腺。母代细胞、转移灶培养细胞在生长曲线、克隆形成率、细胞周期无显著差异。结论高转移的人巨细胞肺癌PG细胞株血行转移的裸鼠模型的建立,为研究肺癌转移提供了新的实验模型。

白花蛇舌草诱导人肺巨细胞癌细胞株PG细胞凋亡的初步研究

目的研究白花蛇舌草诱导人肺巨细胞癌细胞株PG细胞凋亡的作用,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理PG细胞,采用流式细胞仪分析白花蛇舌草对PG细胞在细胞周期各个时相不同DNA含量和细胞凋亡峰的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞在非凋亡细胞二倍体峰(G1)之前出现典型的凋亡细胞峰,不同浓度的含药血清对PG细胞的作用存在明显的量效关系,凋亡率分别为6.86%、9.77%、11.69%。结论诱导肿瘤细胞凋亡可能是白花蛇舌草抗肿瘤作用机理之一。

枸杞多糖对PG细胞株增殖及凋亡的影响

目的 :研究枸杞多糖 (lyciumbarbarumpolysaccharides ,LBP)对癌细胞周期及凋亡的影响。方法 :用加入不同浓度LBP的PRMI - 16 4 0培养基进行PG细胞培养 ,相差显微镜观察PG细胞形态改变及细胞增殖状况 ,流式细胞仪溴化乙锭 (PI)染色法测定PG细胞DNA含量及凋亡细胞比例。结果 :1)小剂量 (5 0～ 2 0 0 μg/ml)LBP促进PG细胞增殖 ,大剂量 (40 0 μg/ml)LBP则抑制PG细胞增值 ;2 )LBP诱导PG细胞凋亡并存在时间和剂量依赖性。结论 :LBP对PG细胞增殖具有双向调节作用 ;LBP可诱导PG细胞凋亡。

茶多酚对肺癌PG细胞生长的调控研究

目的 :探讨茶多酚对人 PG细胞生长的影响。方法 :采用 MTT法体外观察不同浓度茶多酚对 PG细胞的杀伤作用 ;应用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析 ,检测用药后 PG细胞内 Ca2 +浓度、CD44 V6表达和细胞增殖周期分布的变化。结果 :3个浓度的茶多酚对 PG细胞均有杀伤作用 ,呈剂量依赖关系。细胞增殖受到明显抑制 ,使细胞阻滞于 G0 / G1期 ,不能进入 S期及 G2 / M期 ,细胞增殖指数明显下降。细胞内 Ca2 +浓度与对照组相比 ,逐渐上升 ;CD44 V6表达水平则呈逐渐下降。结论 :茶多酚对 PG细胞的生长具有抑制作用 ,其作用机制与改变细胞内 Ca2 +浓度和 CD44

消瘤保肺丸对人肺癌PG细胞上皮细胞钙粘蛋白、α-Catenin、及β-catenin表达水平的影响及意义

目的研究消瘤保肺丸对上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、α-catenin及β-catenin在人肺癌PG细胞株中表达的影响及其意义。方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)检测人肺癌PG细胞E-cadherin、α-catenin及β-catenin在消瘤保肺丸干预作用下的表达情况。随机分为4组即消瘤保肺丸高剂量组、消瘤保肺丸低剂量组、清肺化痰丸组和空白组。结果 E-cadherin与α-catenin、β-catenin在消瘤保肺丸作用下阳性表达率不同,其中E-cadherin在消瘤保肺丸的影响下阳性表达率较低,明显低于清肺化痰丸组和空白(P<0.01);而α-catenin、β-catenin在消瘤保肺丸干预作用下阳性表达率较高,且高于清肺化痰丸组和空白组(P<0.01)。结论消瘤保肺丸对E-cadherin、α-catenin及β-catenin的表达影响显著,提示其对肺癌的侵袭转移有一定抑制作用,从而表明E-cadherin、α-catenin及β-catenin的表达与肺癌的进展和转移密切相关。

半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响

目的:研究半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响。方法:用不同浓度的半枝莲含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞端粒酶活性的影响。结果:经半枝莲含药血清作用的PG细胞端粒酶活性明显下降。结论:下调肿瘤细胞的端粒酶活性,可能是半枝莲抗肿瘤的重要机制之一。

人肺癌PG细胞培养上清液对PBMC凋亡的影响

目的:探讨PG肿瘤上清对外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)的增殖抑制及诱导凋亡方面的影响,并探讨了PG细胞影响PBMC凋亡的作用机制。方法:在PBMC培养体系中分别加入不同条件的PG培养上清。在24、72小时收集PBMC,采用流式细胞术测定其对PBMC细胞周期、凋亡率的影响,另外,通过免疫印迹法、流式细胞术分别测定了Bcl-2、Fas蛋白表达的情况来观察PBMC凋亡相关蛋白的变化。结果:PG肿瘤上清没有抑制PBMC进入细胞周期,在PG上清的作用下,PBMC凋亡率显著增加,并且发现PG上清能够调节PBMC内凋亡相关蛋白Bcl-2、Fas的表达量。结论:PG上清能够调节PBMC凋亡相关蛋白量,进而诱导PBMC凋亡,这可能是导致肿瘤微环境中PBMC数量低下的主要原因。

噻唑蓝法检测半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞增殖的抑制作用

目的观察半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞增殖的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测PG细胞增殖的状况。结果不同浓度的半枝莲含药血清对肺癌细胞PG增殖有抑制作用,且呈明显的时效和量效关系。结论半枝莲含药血清在体外可有效抑制肺癌细胞PG的生长,具有一定的细胞毒作用。

半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响

目的:研究半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法:用不同浓度的半枝莲含药大鼠血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞bcl-2基因表达的影响。结果:经半枝莲含药血清作用的PG细胞bcl-2基因表达明显降低。结论:半枝莲抗肿瘤作用机制可能与bcl-2基因表达减少有关。

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响

目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞端粒酶活性的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞端粒酶活性明显下降。结论下调肿瘤细胞的端粒酶活性,可能是白花蛇舌草抗肿瘤的重要机制之一。

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p^(53)基因表达的影响

目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p53基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞p53基因表达的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞p53基因表达水平明显上调。结论白花蛇舌草抗肿瘤作用机制可能与p53基因表达增多有关。

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响

目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞bcl-2基因表达的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞bcl-2基因表达明显降低。结论白花蛇舌草抗肿瘤作用机制可能与bcl-2基因表达减少有关。

半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞nm23基因表达的影响

目的:研究半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞nm23基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法:用不同浓度的半枝莲含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞nm23基因表达的影响。结果:经半枝莲含药血清作用的PG细胞nm23基因表达水平明显上调。结论:半枝莲抗肿瘤作用机制可能与nm23基因表达水平上调有关。

MTT法检测白头翁对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞增殖的抑制作用

观察中药白头翁对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞增殖的影响。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测PG细胞增殖的状况。结果表明:不同浓度的白头翁含药血清对肺癌细胞PG增殖有抑制作用,且呈明显的时效和量效关系。白头翁含药血清在体外可有效抑制肺癌细胞PG的生长,具有一定的细胞毒性作用。