用 PGC/MS 法鉴定环氧乙烷-环氧丙烷三嵌段共聚物

目的用裂解气相色谱／质谱法（ＰＧＣ／ＭＳ）鉴定环氧乙烷－环氧丙烷三嵌段共聚物．方法用裂解气相色谱（ＰＧＣ）法及裂解气相色谱／质谱（ＰＧＣ／ＭＳ）法分别对聚环氧乙烷、聚环氧丙烷和环氧乙烷－环氧丙烷三嵌段共聚物在合适的色谱及质谱条件下进行分析．结果与结论样品在质谱分析的总离子流图１６．１３ｍｉｎ处给出了聚环氧乙烷、聚环氧丙烷中没有的混杂二聚体，它们是这类三嵌段共聚物在高温下裂解产生的特征峰．并推断了这两种混杂二聚体在质谱中的断裂方式．

基于AMPK/PGC1α信号通路探究降脂逐瘀汤对动脉粥样硬化大鼠脂代谢的影响

目的:基于AMPK/PGC1α信号通路探究降脂逐瘀汤对动脉粥样硬化(AS)大鼠脂代谢的影响。方法:高脂饲料喂养及腹腔注射维生素D3诱导建立AS大鼠模型,随机分为模型组、降脂逐瘀汤(3.75 g/kg)低剂量组、降脂逐瘀汤(7.5 g/kg)中剂量组、降脂逐瘀汤(15 g/kg)高剂量组、降脂逐瘀汤(15 g/kg)高剂量+盐酸多索啡(AMPK抑制剂,0.2 mg/kg)组,每组12只,另取12只正常SD大鼠喂养普通饮食及腹腔注射生理盐水作为对照组。经降脂逐瘀汤和盐酸多索啡分组干预处理各组大鼠后,检测大鼠甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;HE染色检测大鼠主动脉组织病理变化;油红O染色检测各组大鼠主动脉和肝脏脂质沉积;酶标仪测定大鼠血清炎症因子IL-8、IL-1β、IL-18水平;免疫印迹法检测大鼠主动脉组织AMPK/PGC1α通路蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组大鼠主动脉组织发生严重病理损伤,主动脉和肝脏组织中有大量脂质沉积,肝脏脂肪变性严重,血清LDL-C、TC、TG、IL-8、IL-1β、IL-18水平显著升高(P<0.05),血清HDL-C水平、主动脉组织p-AMPK/AMPK与PGC1α蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组相比,降脂逐瘀汤各剂量组大鼠主动脉组织病理损伤、主动脉脂质沉积和肝脏脂肪变性症状均减轻,血清LDL-C、TC、TG、IL-8、IL-1β、IL-18水平均降低(P<0.05),血清HDL-C水平、主动脉组织p-AMPK/AMPK与PGC1α蛋白表达均升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05);与降脂逐瘀汤高剂量组相比,降脂逐瘀汤高剂量+盐酸多索啡组大鼠主动脉组织病理损伤、主动脉脂质沉积和肝脏脂肪变性症状加重,血清LDL-C、TC、TG、IL-8、IL-1β、IL-18水平升高(P<0.05),血清HDL-C水平、主动脉组织p-AMPK/AMPK与PGC1α蛋白表达降低(P<0.05)。结论:降脂逐瘀汤可通过激活AMPK/PGC1α信号抵抗炎症发生发展,减轻大鼠主动脉组织病理损伤、主动脉脂质沉积和肝脏脂肪变性症状,改善AS大鼠脂代谢。

miR-669a-5p通过AMPK/PGC1α信号通路改善心力衰竭小鼠心肌细胞能量代谢

目的探讨主动脉弓缩窄(transverse aortic constriction,TAC)诱导的小鼠衰竭心肌中miR-669a-5p的表达变化,并进一步研究miR-669a-5p对心力衰竭小鼠的作用及可能机制。方法将24只小鼠按随机数字表法分为假手术组(Sham组,n=8)和手术组(n=16,建立TAC心力衰竭模型)。TAC术后第4周将手术组随机分为模型组(TAC组,n=8)及miR-669a-5p agomir组(Agomir组,n=8),Sham组、TAC组及Agomir组连续4周尾静脉分别注射生理盐水、agomir阴性对照试剂及agomir试剂,2次/周。第8周行超声心动图评估各组小鼠心功能;HE、天狼星红及WGA免疫荧光染色观察小鼠心肌组织病理学变化。RT-qPCR检测小鼠心肌组织miR-669a-5p及氧化磷酸化相关基因(ND1、ND2、NDUFA4、ATP5O)的表达。ATP检测试剂盒检测各组心肌组织ATP浓度。Western blot检测心肌组织p-AMPK、AMPK、PGC-1α蛋白表达水平变化。结果与Sham组比较,TAC组小鼠心肌miR-669a-5p表达显著减少(P<0.05)。超声检测结果显示:Agomir组小鼠心脏射血能力、收缩与舒张功能较TAC组明显改善(P<0.05)。组织切片染色显示:与TAC组比较,Agomir组可见心肌细胞排列紊乱、心肌纤维化及心肌细胞横截面积等有明显改善(P<0.05)。与TAC组比较,Agomir组ATP水平较TAC组明显升高(P<0.05),且ND1、ND2、NDUFA4、ATP5O基因相对表达量均显著升高(P<0.05)。Agomir组小鼠心肌组织p-AMPK/AMPK、PGC1α蛋白水平表达较TAC组显著增加(P<0.05)。结论miR-669a-5p可以显著改善主动脉弓缩窄诱导的心力衰竭小鼠心功能及心室重构,其机制可能是通过调控AMPK/PGC1α信号通路进而改善小鼠心肌细胞能量代谢。

白藜芦醇通过AMPK/PPARα/PGC1α影响酒精依赖致肝损伤机制研究

目的 观察白藜芦醇(Resveratrol, RES)对酒精依赖大鼠肝组织损伤以及AMP依赖的蛋白激酶(adenosine 5-monophosphate-activated protein, AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptorα,PPARα)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α(peroxisome proliferator activated receptor gamma coactivator 1 alpha, PGC1α)信号通路的影响,讨论RES治疗酒精依赖致肝损伤的修复机制,为临床应用RES提供科学依据。方法 将SPF级雄性大鼠采用随机数字表法设立空白对照组、酒精依赖模型组,采用双瓶自由饮建立20%的酒精依赖模型;酒精依赖模型组制备成功后随机分为酒精依赖模型组、RES高、中、低剂量治疗组,继续给与双瓶自由饮,RES按照100、50、25 mg/(kg·d)剂量灌胃14 d。建模期间检测大鼠体重、饮酒量和饮水量,RES治疗后蛋白免疫印迹法检测大鼠肝组织AMPK、磷酸化AMP依赖的蛋白激酶(phosphorylation-adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinas, p-AMPK)、PPARα和PGC1α蛋白表达。结果 蛋白免疫印迹法结果显示:与空白对照组比较,酒精依赖模型组p-AMPK(t=6.61,P<0.05)、PPARα(t=3.08,P<0.05)和PGC1α(t=7.09,P<0.05)表达水平显著下调;与酒精依赖模型组比较,RES高剂量治疗组p-AMPK(F=8.60,P<0.05)、PPARα(F=4.38,P<0.05)和PGC1α(F=11.33,P<0.05)显著上调。结论 结果显示RES可能通过调控AMPK/PPARα/PGC1α信号发挥保护作用。

PGC介导的TMEM182基因敲除性腺嵌合体鸡的制备

为深入研究TMEM182基因在鸡体内的功能和表现,试验采用原始生殖细胞介导法,利用CRISPR/Cas9介导的HMEJ基因编辑技术,对体外培养的原始生殖细胞TMEM182基因进行敲除,以期产生TMEM182基因缺陷性腺嵌合体鸡。选择3个sgRNA靶向TMEM182基因的第二外显子,利用T7E1进行基因打靶效率检测。对体外培养的PGCs进行外源基因mCherry定点插入,引起TMEM182基因插入突变,通过流式分选获得mCherry+PGCs。将mCherry+PGCs注射到发育至2.5 d的受体鸡胚,观察外源PGCs的性腺整合情况。结果显示:TMEM182-sgRNA1的打靶效率最高;通过将sgRNA1与模板质粒共转染PGCs,得到能稳定表达红色荧光的mCherry+PGCs;孵化第6天,在受体鸡胚性腺能明显观察到发出红色荧光的PGCs,最终孵化出10只小鸡。研究表明:利用CRISPR/Cas9技术对鸡PGCs进行基因编辑,制备性腺嵌合体鸡是一种高效、稳定的制备基因编辑鸡的方法。

虎金方调节SIRT1/PGC1α信号通路改善代谢相关脂肪性肝病小鼠的脂质代谢研究

目的基于沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)通路探讨虎金方对代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)小鼠的作用及机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为6组:正常组、模型组、水飞蓟宾组(48 mg·kg^(-1))及虎金方高(21.24 g·kg^(-1))、中(10.62 g·kg^(-1))、低(5.31 g·kg^(-1))剂量组。通过给予高脂饲料连续饲喂10周复制MAFLD小鼠模型。从第11周开始,正常组和模型组给予蒸馏水灌胃,其余各组按上述剂量灌胃给药(10 mL·kg^(-1)),每日1次,连续给药4周。采用HE及油红O染色法观察肝脏组织病理变化;生化试剂盒检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平;RT-PCR及Western Blot法检测肝脏组织SIRT1、PGC1α、核呼吸因子1(NRF1)、线粒体转录因子A(TFAM)mRNA及蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠的体质量、肝质量及肝脏系数显著升高(P<0.01);NAS病理评分、脂滴面积占比显著升高(P<0.01);血清TC、TG、LDL-C、ALT、AST水平显著升高(P<0.01),HDL-C水平显著下降(P<0.01);肝脏组织中SIRT1、PGC1α、NRF1、TFAM mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠的体质量、肝质量均显著降低(P<0.01),水飞蓟宾组和虎金方中、高剂量组小鼠的肝脏系数显著降低(P<0.05,P<0.01);各给药组小鼠的NAS病理评分、脂滴面积占比及血清TG、LDL-C、ALT、AST水平显著降低(P<0.05,P<0.01),水飞蓟宾组和虎金方低、高剂量组血清HDL-C水平显著升高(P<0.01),水飞蓟宾组和虎金方高剂量组血清TC水平显著降低(P<0.05,P<0.01);各给药组小鼠肝脏组织中SIRT1、TFAM mRNA表达水平显著升高(P<0.01),水飞蓟宾组和虎金方中、高剂量组小鼠肝脏组织中PGC1α、NRF1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01);水飞蓟宾组和虎金方高剂量组小鼠肝脏组织中SIRT1蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01),水飞蓟宾组和虎金方中、高剂量组小鼠肝脏组织中PGC1α、NRF1、TFAM蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论虎金方可能通过调控SIRT1/PGC1α通路来影响肝脏线粒体的生物发生,减少线粒体氧化应激,促进肝脏脂质代谢,减轻脂质沉积,从而发挥缓解MAFLD的作用。

PGC1α通过抑制膀胱癌细胞侵袭抑制膀胱癌的进展

目的探究过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活剂1α(PGC1α)在膀胱癌中的表达模式及其对膀胱癌细胞侵袭性的影响。方法通过对比分析膀胱癌患者和对照组人群(非膀胱癌患者)血清中PGC1α基因的表达水平差异及PGC1α的表达水平与膀胱癌临床分期和病理分级之间的关系;利用膀胱癌细胞系T24进行PGC1α的过表达实验,分析其对T24细胞增殖、克隆形成及侵袭能力的影响,并通过Western blot实验检测上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达。结果膀胱癌患者血清中PGC1α的表达水平显著低于对照组人群,且高表达PGC1α的患者病理分期和病理分级较低;表达PGC1α后,T24细胞的增殖、克隆形成和侵袭能力显著减弱。此外,过表达PGC1α导致与EMT相关的蛋白SNAIL1、N-cadherin和Vimentin的表达下调,E-cadherin的表达上调。结论(1)PGC1α表达水平降低是膀胱癌发生的重要因素,并且与更高的临床分期和病理分级有关;(2)PGC1α可以通过调节EMT相关蛋白抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭。

具身视阈下PGC短视频创作的意义表达——基于“内容为王”的消费语境

随着大数据分析、智能算法等新网络技术的快速发展,基于新媒体领域的短视频已经具有了自己的独特属性和文化传播消费市场,PGC短视频创作与消费是各个短视频传播平台产生粘性用户和长尾效应的专业追求。在文化消费“内容为王”的语境下,将具身认知理论与PGC短视频的创作相结合,是PGC短视频媒体文本话语构建和意义表达的方法论,也是视频化、现场感的话语在“观看”与“凝视”的语法表达中构建的必然,更是产生相应价值认同的体现。

泛酸及其下游脂肪酸氧化代谢在鸡ESCs向PGCs分化过程中的作用

本文旨在探究差异代谢物泛酸(PA)和脂肪酸氧化(FAO)在鸡胚胎干细胞(ESCs)向原始生殖细胞(PGCs)分化过程中的作用,为从代谢角度解析PGCs形成机制提供新的理论基础。采用BMP4诱导体系,基于课题组前期对泛酸及其抑制剂(PZ)和脂肪酸氧化激活剂(BMS)/抑制剂(Per)的最适添加浓度,设置5个分组:Control组、PA+BMS组、PA+Per组、PZ+BMS组、PZ+Per组。通过观察细胞形态、qRT-PCR检测PGCs特异标记基因、间接免疫荧光和流式细胞分选等探究泛酸代谢及其下游的脂肪酸氧化在ESCs向PGCs分化过程中的作用。细胞形态观察结果显示,诱导至第6天,PZ+BMS组的类胚体数目显著升高(P<0.01),PA+Per组显著减少(P<0.05);qRT-PCR结果显示,CVH和C-KIT在PZ+BMS诱导组中的表达量极显著升高(P<0.01),而在PA+Per组中的表达量则显著降低(P<0.01);间接免疫荧光和流式细胞分选结果显示,PZ+BMS组DDX4阳性细胞率显著高于对照组(P<0.05),而PA+Per组DDX4阳性细胞率极显著低于对照组(P<0.01)。以上结果表明,抑制泛酸代谢并激活脂肪酸代谢能够促进PGCs的形成,该研究为利用代谢物完善PGCs的体外诱导培养体系提供新见解。

基于DFB激光器的振动传感系统改进PGC解调算法

相位生成载波(Phase Generated Carrier,PGC)解调算法是目前光纤干涉传感领域中重要的解调算法。针对目前PGC解调算法中光强扰动和调制深度影响信号解调准确度的问题,提出了一种改进的PGC解调算法(PGC-Ameliorated),并搭建了基于分布反馈(Distributed Feedback,DFB)激光器的振动传感系统进行实验验证。实验结果表明,当被测振动信号的频率为800Hz时,该算法信噪比为57dB,优于微分交叉相乘(Differential and Cross Multiplying,DCM)算法和反正切(Arctan)算法近20dB。在不同光强下,该算法解调信号幅值波动范围在±0.02rad;在不同调制深度下,该算法总谐波失真最小为0.61%,信纳比最大为25.9dB,相比于DCM算法和Arctan算法具有更低的总谐波失真和更高的信纳比。

PGC模式知识付费在线课程平台用户评论特征分析

[目的/意义]确定PGC模式的知识付费在线课程平台中用户付费意愿的影响因素,促进PGC模式的知识付费平台高质量发展。[方法/过程]爬取并筛选腾讯课堂中用户课程评论信息,利用LDA主题模型对提取的数据进行文本聚类分析,确定影响因素。通过好评和中差评的对比,突出用户对在线课程关注的重点。[结果/结论]从教学层面、声音层面、内容层面、功能层面和沟通层面确定正面影响因素和负面影响因素。并基于正面影响因素和负面影响因素的对比,将影响PGC模式的知识付费在线课程平台中用户的付费意愿因素按重要程度划分为四个梯度,并从主讲人、课程、以及学习者三个方面提出五点的建议。

媒介物质性促数字出版PGC蜕变

媒介技术的进步带来了数字出版的繁荣,PGC(专业内容生成)模式成为数字出版中常见的生产模式之一。从媒介物质性角度来看,PGC模式并非简单的生产内容,而是通过“物”连接内容生产者和消费者,从而实现生态化转型。基于此,现分析了基于媒介物质性的数字出版PGC模式媒介时间性以及媒介空间性的生态化转型,并从构建PGC模式的多维生态结构、建设PGC模式的定制化场景以及升级PGC模式的人才支撑与流程方面,提出了基于媒介物质性的数字出版PGC模式应用策略,以应对快速变化的数字环境,提高数字出版的互动性和沉浸感,从而满足现代读者的需求。

Exendin-4通过调控Sirt1/PGC1α延缓糖尿病小鼠心肌损伤

目的探讨exendin-4对2型糖尿病小鼠心肌的保护作用及其机制。方法将C57BL/6J小鼠分为正常组(Con)和糖尿病组(DM),Con组小鼠正常饮食,DM组小鼠利用高脂饮食联合链脲佐菌素进行造模,造模成功后的2型糖尿病小鼠分Exendin-4干预(DM+Ex-4)和糖尿病对照组(DM-Con)。DM+Ex-4组小鼠每天给予1 nmol/kg体质量的exendin-4腹腔注射,干预8周。DM-Con组给予等剂量的生理盐水腹腔注射。记录各组小鼠血糖、体质量等生理指标,RT-PCR检测心肌肥大、纤维化指标以及PGC1α、NRF、Cyto C等线粒体功能相关指标,Western blot检测氧化应激指标以及Sirt1/PGC1α通路表达情况,HE病理染色观察心肌结构变化。结果与Con组相比,DM-Con组的血糖、血脂均显著升高(P<0.001),心肌组织ANP、BNP、TGFβ1、Cyto C1、NOX1显著升高(P<0.05),而Sirt1、PGC1α、NRF、SOD1显著降低(P<0.05)。Exendin-4干预后,与DM-Con组相比,DM+Ex-4组小鼠血糖、血脂明显下降(P<0.05),心肌组织ANP、BNP、TGFβ1、Cyto C1、NOX1明显下降(P<0.05),Sirt1、PGC1α、NRF、SOD1表达升高(P<0.05)。结论 Exendin-4通过调控心肌组织Sirt1/PGC1α信号通路,改善线粒体功能,抑制氧化应激,从而缓解糖尿病小鼠心肌损伤。

从Leptin/c⁃Myc/PGC⁃1信号通路调控的能量代谢途径探索黄连⁃吴茱萸配伍抗胃癌的分子生物学机制

目的:基于Leptin/c⁃Myc/PGC⁃1信号通路调控的能量代谢途径探索黄连⁃吴茱萸配伍抗胃癌的分子生物学机制。方法:以不同浓度(0、1、5、10 mg/mL)黄连⁃吴茱萸提取物干预胃癌SGC7901细胞后,采用MTT法检测其对细胞增殖活性的影响;相差显微镜检查细胞形态;用流式细胞术(FCM)检测对细胞凋亡后周期分布的影响;试剂盒检测细胞中线粒体膜电位和ATP含量的变化;采用荧光定量聚合酶链式反应(RT⁃PCR)和Western blot检测细胞中Leptin/c⁃Myc/PGC⁃1的表达量。结果:与空白对照组比较,黄连⁃吴茱萸5、10 mg/mL组SGC7901细胞活力显著降低,G_(0)/G_(1)期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低,细胞中JC⁃1单体形式显著升高,ATP含量显著降低;细胞中c⁃Myc、PGC⁃1 mRNA及蛋白表达显著升高,Leptin mRNA及蛋白表达显著降低。结论:黄连⁃吴茱萸配伍可显著抑制SGC⁃7901细胞增殖,升高细胞中JC⁃1单体形式,降低ATP含量,提示黄连⁃吴茱萸配伍在胃癌细胞增殖中具有抑制作用,这可能与调节Leptin/c⁃Myc/PGC⁃1通路有关。

PGC 法研究空心微珠对高分子材料耐热性的影响

目的研究空心微珠对聚丙烯（ＰＰ）塑料和合成革耐热性的影响．方法利用样品受热裂解后小分子产物相对量随裂解温度变化的Ｆ－ｔ曲线分析表征空心微珠填充的聚丙烯塑料和合成革的耐热性，用裂解气相色谱／质谱（ＰＧＣ／ＭＳ）法鉴定聚丙烯塑料的裂解产物．结果填充量增加则样品的耐热性均提高，填充量可达４０％～６０％，合成革样品在２３０℃时才出现裂解信号；填充前后的聚丙烯塑料与纯聚丙烯的裂解谱图吻合．结论空心微珠填充剂并不改变聚丙烯的裂解机理，只是改变了聚丙烯大分子的分布和聚丙烯的结晶形态，从而提高了聚丙烯塑料的耐热性．

2型糖尿病PGC-1α基因单核苷酸多态性筛查及Gly482Ser变异分析

对120例T2DM和106例NGT研究对象,筛查其PGC1α基因的单核苷酸多态性(SNP)时应用PCRSSCP和DNA测序法。发现了4种SNP,即394Thr→Thr,482Gly→Ser,528Thr→Thr,612Thr→Met。其中,PGC1α基因的482Gly→Ser多态性相关于T2DM的发生。

鸡胚血液中PGCs的分离及原代培养

在鸡胚孵化 4 8、52、54、56、6 0 h的不同时期 ,分离血液中原始生殖细胞 ( PGCs) ,分离前的浓度分别为0 .0 1 1 %、0 .0 0 7%、0 .0 0 6 %、0 .0 0 4 %、0 .0 0 1 % ,分离后的浓度分别为 0 .2 4 %、1 .2 1 %、 1 .0 2 %、0 .6 4%、0 .2 7%。孵化 4 8～ 54h时 ,血液中 PGCs浓度差异不显著 ,但孵化 4 8h的鸡胚血液较少 ,PGCs绝对量较低。孵化 52～ 54h的鸡胚血液量较大 ,获取 PGCs的绝对值较高 ,故分离 PGCs的时间以孵化 52～ 54h为宜。鸡胚血液中 PGCs在未添加任何外源生长因子而含 1 0 % FCS的 TCM-1 99培养基中体外培养 ,能够存活 3～ 4d。

混合干涉型分布式光纤传感器PGC信号解调设计与实验分析

对一种基于马赫-曾德尔和萨格纳克混合干涉仪原理的分布式光纤泄漏检测系统调制解调技术进行研究,对PGC解调技术进行理论分析。针对所选泄漏分布式光纤传感特点设计了PGC解调硬件电路,并对PGC解调电路进行了测试。实验中待测信号为0~50kHz,载波频率为300kHz,截止频率为50kHz,移相后与待测信号的相关系数达到0.95,谐波失真小于3%,泄漏源位置为7.865km,泄漏检测定位系统绝对定位误差为235 m,相对定位误差为2.35%。本解调定位系统具有稳定性和抗干扰性。

干涉型光纤传感器PGC检测中AGC的研究

干涉型光纤传感器解调信号的幅度受多种因素的影响,干涉信号幅度的波动影响最大.自动增益控制(AGC)通过稳定干涉信号幅度来减少解调信号幅度的起伏.峰峰值型AGC虽曾在补偿偏振态的变化给解调信号带来的幅度起伏上起到过作用,但对干涉波形的不同不加区分,反而导致了解调信号的波动,存在原理上的缺陷.该文对此过程进行了深入理论分析,提出了AGC改进方案,构建了改进型AGC电路,并对改进型AGC进行误差分析,其误差比峰峰值型AGC小很多.

耐力训练对不同AMPKα2基因状态小鼠骨骼肌细胞核蛋白PGC-1α、ERRα表达及PGC-1α/ERRα结合量的影响

目的:探讨耐力训练对不同AMPKα2基因状态小鼠骨骼肌细胞核蛋白PGC-1α、ERRα表达和PGC-1α/ERRα结合量的影响。方法:C57BL/6J野生鼠(WT鼠)、AMPKα2转基因鼠(TG鼠)和AMPKα2基因敲除鼠(KO鼠)各20只,分别分为安静对照组(C组)和耐力训练组(T组)。耐力训练组小鼠进行持续4周、每周一至周六、每天1小时的跑台训练,跑台坡度为0,速度12米/分钟。安静对照组小鼠饲养环境与耐力训练组相同,但不参与训练。完成训练16小时后取鼠小腿三头肌,采用蛋白印迹法测定核内ERRα和PGC-1α蛋白表达量,免疫共沉淀法测定核内PGC-1α/ERRα结合量。结果:1.耐力训练组所有小鼠骨骼肌核蛋白ERRα表达量均高于相应的安静对照组,而不同AMPKα2基因状态组间核蛋白ERRα表达量无明显差异。2.耐力训练组所有小鼠骨骼肌细胞核蛋白PGC-1α表达量均高于相应的安静对照组。TG鼠安静时和运动训练后核蛋白PGC-1α表达与WT鼠相比显著增加。3.与安静组相比,三种基因状态小鼠运动后骨骼肌细胞核内PGC-1α/ERRα蛋白结合量显著提高。与WT鼠相比,TG鼠安静时和运动训练后核内PGC-1α/ERRα结合量显著增加。结论:1.耐力训练显著增加AMPKα2三种基因状态小鼠骨骼肌细胞核内ERRα蛋白表达、PGC-1α蛋白表达和PGC-1α/ERRα结合量。2.与野生鼠相比,AMPKα2转基因鼠安静时和耐力训练后骨骼肌细胞核内PGC-1α蛋白表达和PGC-1α/ERRα结合量显著提高,可能与AMPKα2转基因鼠骨骼肌中AMPKα2蛋白表达量显著增加有关,核蛋白PGC-1α表达量对PGC-1α/ERRα结合量有重要影响。3.与野生鼠相比,安静时和耐力训练后AMPKα2敲除鼠骨骼肌细胞核内ERRα蛋白表达、PGC-1α蛋白表达和PGC-1α/ERRα结合量均无显著差异,提示AMPKα2基因敲除鼠体内可能存在除AMPKα2外的其他信号通路,可代偿AMPKα2缺失的影响。